PP1195一个新的与纤粘连蛋白相互作用促进肝癌细胞迁移的基因 被引量：4

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作者 刘梅 杨胜利 +3 位作者 杨付叶 朱奕奕 王弢 万大方 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期781-783,共3页

目的:PP1195是新近获得的一个基因,酵母双杂交发现PP1195与纤粘连蛋白(Fibronectin,FN)相互作用。本文旨在说明该基因与FN间的关系及对肝癌细胞浸润和迁移能力的影响。方法:采用体外翻译表达PP1195基因和FN基因产物,体外结合实验观察两... 目的:PP1195是新近获得的一个基因,酵母双杂交发现PP1195与纤粘连蛋白(Fibronectin,FN)相互作用。本文旨在说明该基因与FN间的关系及对肝癌细胞浸润和迁移能力的影响。方法:采用体外翻译表达PP1195基因和FN基因产物,体外结合实验观察两者之间的作用;采用细胞粘附实验观察PP1195基因表达对Hep3B细胞与FN结合能力的影响;采用细胞侵袭重建基底膜和划痕实验观察该基因表达对肝癌细胞浸润和迁移能力的影响。结果:表明PP1195和FN有相互结合作用;诱导PP1195基因表达可显著增加Hep3B细胞与FN的结合能力;以及SMMC7721细胞的浸润和迁移能力。结论:PP1195基因是一个新的与纤粘连蛋白相互作用并能够增加肝癌细胞浸润和迁移能力的基因。 展开更多

关键词 PP1195 纤粘连蛋白 细胞粘附 浸润 迁移

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竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶的纯化、诱导细胞凋亡和抗菌作用 被引量：6

2

作者 张玉洁 陈克平 +1 位作者 李文辉 张云 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2006年第1期33-37,共5页

经过分子筛层析和离子交换层析,我们从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中纯化得到了竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(TSV-LAO)。实验表明,TSV-LAO是一种糖蛋白,其分子由非共价连接的两个相同的亚基组成,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳一个亚基... 经过分子筛层析和离子交换层析,我们从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中纯化得到了竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶(TSV-LAO)。实验表明,TSV-LAO是一种糖蛋白,其分子由非共价连接的两个相同的亚基组成,SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳一个亚基的表观分子量为58 kDa。TSV-LAO酶比活力为1100 U/mg,其分子脱掉糖基化成分后不影响酶活力。TSV-LAO在浓度为1.0μg/mL以上时可以诱导C8166细胞凋亡。TSV-LAO对实验病原微生物具有选择性抗生作用并具有明显的量效关系,对白色念珠菌(ATCC2002)、金黄色葡萄球菌(ATCC2592)和短小芽孢杆菌(CMCCB11207)的最小抑菌浓度分别是0.3,0.4和1.0μg/mL,即使在最高实验浓度10μg/mL,TSV-LAO对其它实验菌株也未显示抑菌作用。 展开更多

关键词 蛇毒 L-氨基酸氧化酶 纯化 生化性质 细胞凋亡 抗生作用

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小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因腺相关病毒载体的构建 被引量：3

3

作者 王锁英 许化溪 +7 位作者 王胜军 黄新祥 王文斌 陈巧林 马斌 眭建 姜旭淦 胡嘉波 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期184-188,F0003,共6页

目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成... 目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,并通过抽提病毒DNA进行PCR扩增鉴定重组病毒的形成,设立eGFP基因为对照。结果:1592bp的小鼠T-bet基因被成功克隆,分析表明,与Genbank中发表的序列相比具有99.8%的同源性。重组质粒Pzac2.1-T-bet的PCR及酶切鉴定表明T-bet基因被定向插入,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞包装成病毒后,经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测,证实已完成对重组病毒的包装。结论:成功构建了小鼠T-bet基因的腺相关病毒载体rAAV-T-bet,为免疫紊乱性疾病的T-bet基因干预治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 T-BET RT-PCR 基因克隆 重组质粒 腺相关病毒载体

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苹果渣液态厌氧发酵制备生物氢气的研究 被引量：3

4

作者 马晓珂 王振斌 +2 位作者 陈克平 王倩倩 王世清 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2011年第6期237-240,共4页

以苹果渣为原料,通过液态厌氧发酵技术制备氢气,经过单因素试验和正交试验研究苹果渣与活性污泥的比例、发酵温度、初始pH、发酵液浓度对苹果渣厌氧发酵产氢效率的影响。结果表明,苹果渣液态厌氧发酵产氢的最优条件:发酵温度为(30±... 以苹果渣为原料,通过液态厌氧发酵技术制备氢气,经过单因素试验和正交试验研究苹果渣与活性污泥的比例、发酵温度、初始pH、发酵液浓度对苹果渣厌氧发酵产氢效率的影响。结果表明,苹果渣液态厌氧发酵产氢的最优条件:发酵温度为(30±2)℃、活性污泥与苹果渣比率为4∶10、初始pH值8.5、发酵液浓度0.125g/mL,该条件下,苹果渣产氢率达到19.29mL/g.TS。 展开更多

关键词 苹果渣 液态发酵 厌氧发酵 生物氢气

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不同来源污泥对玉米秸秆固态厌氧发酵的影响 被引量：3

5

作者 崔凤杰 汪宇研 +4 位作者 李向菲 周宇光 陈华友 孙文敬 黄达明 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期4173-4174,共2页

[目的]研究不同来源污泥对玉米秸秆厌氧发酵产气效率的影响。[方法]以玉米秸秆为原料,在接种量相同的条件下,研究了4种不同来源污泥对玉米秸秆厌氧发酵日产气量和累积产气量的影响。[结果]4种不同来源污泥的累积产气量依次为颗粒状污泥&... [目的]研究不同来源污泥对玉米秸秆厌氧发酵产气效率的影响。[方法]以玉米秸秆为原料,在接种量相同的条件下,研究了4种不同来源污泥对玉米秸秆厌氧发酵日产气量和累积产气量的影响。[结果]4种不同来源污泥的累积产气量依次为颗粒状污泥>河底污泥>浓缩污泥>压滤泥饼。采用颗粒状污泥为接种物的日均产气量和累积产气量最高,分别为3.73 L/kg VS和56.29 L/kg VS。[结论]该研究结果为充分利用秸秆原料,提高能源利用效率,实现能源可持续发展提供了试验基础。 展开更多

关键词 污泥 玉米秸秆 固态厌氧发酵

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论植物生理实验方法和内容的改进 被引量：1

6

作者 马晓珂 刘新 +3 位作者 车永梅 杨德翠 胡彦江 刘洪庆 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第29期9397-9398,共2页

依据植物生理课程特点,改变实验课的准备方式、实验内容和方法、考核方式,让学生参与实验课的全过程,从而开阔学生的思维,提高学生实践动手能力。

关键词 植物生理 实验课 实验方法 实验内容

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Tropic1808基因作用于PC12细胞的表达谱芯片分析

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作者 刘梅 刘炎 +2 位作者 林社裕 丁斐 顾晓松 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期791-795,共5页

为探讨tropic1808基因作用的分子机制,采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对表达tropic1808基因和空载体的PC12细胞株进行转录水平分析.基于获得的基因表达信息,对UCSC、TRANSFAC、NCBI等公共数据库进行检索,观察表达tropic1808基... 为探讨tropic1808基因作用的分子机制,采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对表达tropic1808基因和空载体的PC12细胞株进行转录水平分析.基于获得的基因表达信息,对UCSC、TRANSFAC、NCBI等公共数据库进行检索,观察表达tropic1808基因导致PC12细胞株的基因表达谱变化.在检测的15866个目标基因中,855个基因表达上调,80个有显著比较意义,涉及包括粘附因子、离子通道、信号转导、细胞代谢等基因成员.其中包括多个细胞粘附因子及与细胞分化、神经发生和突触发生的有关基因.推测Tropic1808基因过表达可诱导PC12细胞株中粘附因子基因水平上调及与细胞分化、神经发生和突触发生相关的基因表达上调. 展开更多

关键词 tropic1808 基因芯片 表达谱 PC12细胞

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人肝癌中SLIT2基因表达及启动子甲基化分析

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作者 金洁 游海燕 +5 位作者 余艳军 黄明辉 舒惠群 姚根富 杨胜利 覃文新 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期202-206,共5页

目的研究SLIT2在肝癌组织中表达和沉默的机制。方法32个肝癌病人的癌组织及癌旁肝组织、3例正常肝组织及8个肝癌细胞系样本DNA和RNA抽提后,半定量RT-PCR检测SLIT2的表达。亚硫酸氢钠处理DNA,用MSP和测序法检测SLIT2启动子甲基化状态。结... 目的研究SLIT2在肝癌组织中表达和沉默的机制。方法32个肝癌病人的癌组织及癌旁肝组织、3例正常肝组织及8个肝癌细胞系样本DNA和RNA抽提后,半定量RT-PCR检测SLIT2的表达。亚硫酸氢钠处理DNA,用MSP和测序法检测SLIT2启动子甲基化状态。结果SLIT2启动子在肝癌组织中的甲基化率为84.3%,在相对应的癌旁肝组织中甲基化率为56.3%。肝癌细胞系的甲基化率为75%。而在正常肝组织中无甲基化。SLIT2启动子甲基化与肝癌的临床病理指标无相关性,但和患者的年龄有关。在用甲基化酶抑制剂5-aza-dC处理细胞后,SLIT2表达缺失的肝癌细胞系恢复了mRNA的表达。结论SLIT2启动子甲基化是肝癌发生过程中的早期事件,可能是SLIT2在肝癌中表达沉默的主要机制。 展开更多

关键词 肝癌 SLIT2 DNA甲基化 抑癌基因

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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在家蚕蛋白质组中的应用

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作者 李军 陈克平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第25期7748-7749,共2页

随着家蚕基因组全序列框架图的完成,家蚕蛋白质组学研究也就成了当前家蚕研究的主要方向之一。而双向电泳技术和质谱技术的发展为大规模研究家蚕蛋白质组提供了强有力的平台。近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在蛋白质组学研究... 随着家蚕基因组全序列框架图的完成,家蚕蛋白质组学研究也就成了当前家蚕研究的主要方向之一。而双向电泳技术和质谱技术的发展为大规模研究家蚕蛋白质组提供了强有力的平台。近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在蛋白质组学研究中的应用日益广泛,为此着重对其在家蚕蛋白质组学研究中的应用进行探讨。 展开更多

关键词 家蚕 蛋白质组 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 2-D

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油菜GDSL脂肪酶基因BnGLIP的生物信息学分析 被引量：2

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作者 闫素珍 陈杰 谭小力 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期29-32,共4页

GDSL脂肪酶能催化酯类水解,在植物生理代谢及胁迫抵抗方面发挥着重要作用。通过生物信息学方法对油菜GDSL脂肪酶基因BnGLIP进行分析,分析了其序列特点及理化性质等,并对其生物学功能进行了预测。结果表明,BnGLIP是一个亲水性蛋白,具有... GDSL脂肪酶能催化酯类水解,在植物生理代谢及胁迫抵抗方面发挥着重要作用。通过生物信息学方法对油菜GDSL脂肪酶基因BnGLIP进行分析,分析了其序列特点及理化性质等,并对其生物学功能进行了预测。结果表明,BnGLIP是一个亲水性蛋白,具有跨膜区域同时含有信号肽,有糖基化位点和磷酸化位点,有4个保守结构框,α-螺旋和无规则卷曲是主要二级结构,进化树分析推断BnGLIP可能在油菜抵抗逆境途径中发挥作用。 展开更多

关键词 油菜 BnGLIP 生物信息学

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缺失PRD的人FOXP3单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1

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作者 黄莺 倪爱民 +5 位作者 陈勋 许逊 季宝菊 王胜军 许化溪 邵启祥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期566-568,共3页

目的:制备抗脯氨酸富含区缺失的人FOXP3(△PRD-hFOXP3)的单克隆抗体(mAb),为进一步研究人FOXP3各片段功能奠定基础。方法:以纯化的△PRD-hFOXP3重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,经筛选... 目的:制备抗脯氨酸富含区缺失的人FOXP3(△PRD-hFOXP3)的单克隆抗体(mAb),为进一步研究人FOXP3各片段功能奠定基础。方法:以纯化的△PRD-hFOXP3重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,经筛选及克隆化建立2株分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb杂交瘤细胞株;利用核型分析、间接ELISA及Western blot分别鉴定了杂交瘤的细胞核型、抗体的效价与特异性。结果:筛选到2株可稳定分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb的细胞株,分别命名为1A2和3A11;2株抗体均为IgG1,腹水经ELISA方法测定效价均可达1∶105;Western blot显示这2株杂交瘤分泌的mAb均可与△PRD-hFOXP3蛋白特异性地结合。结论:成功获得2株能稳定分泌特异性抗△PRD-hFOXP3的mAb的杂交瘤细胞株,可用于人FOXP3的进一步研究及相关试剂的研发等。 展开更多

关键词 △PRD-hFOXP3蛋白 杂交瘤细胞株 单克隆抗体

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赤峰地区大型养猪场猪粪锌含量的调查分析

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作者 张岩 顾科隆 +1 位作者 韩成奎 董武 《现代畜牧科技》 2018年第12期13-14,共2页

锌是人体和动物必须微量元素,但大量补锌造成危害。对赤峰市地区12家大型养猪场实施夏、冬两季采集粪便样本,测定样品中锌的含量。测量结果显示Zn含量在冬季样明显高于夏季。在夏季,十二家养猪场中样品Zn含量最高值为4466.6mg/kg,最低值... 锌是人体和动物必须微量元素,但大量补锌造成危害。对赤峰市地区12家大型养猪场实施夏、冬两季采集粪便样本,测定样品中锌的含量。测量结果显示Zn含量在冬季样明显高于夏季。在夏季,十二家养猪场中样品Zn含量最高值为4466.6mg/kg,最低值为620.0mg/kg;在冬季,十二家养猪场中样品Zn含量最高值为6537.2mg/kg,最低值为665.5mg/kg。根据中国农用污泥中污染物控制标准(GB 4284-84),夏季粪便锌含量超标率为58.33%,冬季粪便锌含量超标率为83.33%。猪粪便中过高的Zn会造成农业环境的污染,应当加以足够重视。 展开更多

关键词 猪粪便 锌 农业环境 食品安全

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