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LASS1基因克隆及其在大鼠脑皮层的表达与神经元衰老的相关性初步研究(英文) 被引量：6
1
作者 王宝恒 傅玉才 +4 位作者 史桂芝 许铭炎 耿义群 徐小虎 许锦阶 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期760-768,共9页
长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 3... 长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 350 个氨基酸组成,内含 Lag1 蛋白家族保守的 Lag1p motif 和 TLC 结构域. 从新生、1 月龄、6 月龄、12 月龄和 24月龄大鼠脑顶叶皮质提取总 RNA,用半定量 RT-PCR 及 RNA 印迹方法对 LASS1 在大鼠脑皮质中的表达随年龄变化情况进行分析. 结果表明,出生后 LASS1 表达量随年龄增加而增高,至 6 月龄达高峰,然后随年龄增加而逐渐下降,至 24 月老龄鼠达最低. 衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)对鼠脑皮层染色发现,神经元阳性染色随年龄增长明显增加. 大鼠 LASS1 基因表达在正常衰老过程中发生变化,为进一步研究该基因的作用奠定了基础. 展开更多
关键词 LASS1基因克隆 大鼠 基因表达 神经元衰老
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溶血磷脂酸对上皮细胞整合素β_6表达的影响 被引量：2
2
作者 许铭炎 邓小玲 +3 位作者 陈锡和 杨利和 姚小武 傅玉才 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期488-491,共4页
目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)在体外对整合素β_6(ITGB6)表达的影响,并进一步研究LPA诱导的活化转化生长因子β(TGF-β)在此过程中的作用。方法:原代培养的正常人支气管上皮(NHBE)细胞接种于6孔板中,经LPA诱导,收集细胞,分别利用RT-PCR和... 目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)在体外对整合素β_6(ITGB6)表达的影响,并进一步研究LPA诱导的活化转化生长因子β(TGF-β)在此过程中的作用。方法:原代培养的正常人支气管上皮(NHBE)细胞接种于6孔板中,经LPA诱导,收集细胞,分别利用RT-PCR和流式细胞术检测ITGB6 mRNA及细胞表面蛋白的表达;利用转染有TGF-β应答性纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)启动子片段并融合萤火虫荧光报告基因片段的转化貂肺上皮细胞(TMLC)作为TGF-β活性报告细胞检测活化的TGF-β。结果:(1)10μmol/L LPA诱导2 h后,ITGB6mRNA在上皮细胞中表达显著增加,具有明显的时间依赖性。(2)10μmmol/L LPA诱导4 h后,上皮细胞表面ITGB6蛋白表达明显增加。(3)抗α_vβ_6抗体可阻断LPA诱导的活化TGF-β,但不能阻断LPA诱导的ITGB6 mRNA的表达。结论:(1)LPA可诱导上皮细胞ITGB6 mRNA和细胞表面蛋白的表达。(2)LPA诱导的ITGB6 mRNA表达不依赖LPA诱导的TGF-β活化。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 整合素β6 上皮细胞 转化生长因子Β
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PKC介导凝血酶诱导人肺成纤维细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达 被引量：1
3
作者 袁超 许铭炎 +2 位作者 陈耿臻 傅玉才 邓小玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1250-1254,共5页
目的研究蛋白激酶C(PKC)在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作用。方法分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶(10 nmol/L)刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中MCP-1的蛋白表达... 目的研究蛋白激酶C(PKC)在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作用。方法分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶(10 nmol/L)刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中MCP-1的蛋白表达;提取细胞裂解液中总RNA并逆转录合成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA表达水平。结果广谱型PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和RO-31-8220可抑制凝血酶诱导的HLF-1 MCP-1蛋白释放及mRNA表达,而Ca2+依赖性PKC抑制剂G 6976则没有抑制效果。结论非Ca2+依赖性PKC介导凝血酶诱导HLF-1释放MCP-1。 展开更多
关键词 凝血酶 蛋白激酶C抑制剂 单核细胞趋化蛋白-1 人肺成纤维细胞
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转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6基因表达的影响
4
作者 尹丽琴 许铭炎 +3 位作者 陈锡和 舒申友 傅玉才 邓小玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期394-399,共6页
目的:研究肿瘤相关转录因子YY1对口腔鳞癌细胞整合素β6(integrinβ6,ITGB6)基因表达调控的影响。方法:用生物信息学方法预测分布在ITGB6启动子区域的转录因子YY1潜在的结合位点,构建萤光素酶报告基因质粒,利用双萤光素酶报告基因系统检... 目的:研究肿瘤相关转录因子YY1对口腔鳞癌细胞整合素β6(integrinβ6,ITGB6)基因表达调控的影响。方法:用生物信息学方法预测分布在ITGB6启动子区域的转录因子YY1潜在的结合位点,构建萤光素酶报告基因质粒,利用双萤光素酶报告基因系统检测ITGB6启动子片段的转录活性;利用染色质免疫沉淀技术检测在天然染色质条件下转录因子YY1与ITGB6启动子的结合情况;采用定点突变方法检测YY1结合位点对ITGB6启动子活性的影响;利用RT-PCR方法检测过表达转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA表达水平的影响。结果:ITGB6启动子-421^-150 nt区域存在多个转录因子YY1潜在的结合位点。在口腔鳞癌细胞的天然染色质中,转录因子YY1结合于ITGB6启动子-421^-150 nt区域;定点突变YY1潜在结合位点对口腔鳞癌细胞中ITGB6启动子活性无显著影响。另外,过表达的YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA的表达水平也无影响。结论:转录因子YY1在口腔鳞癌细胞中结合于ITGB6基因启动子-421^-150 nt区域,但对ITGB6基因的基础转录水平无影响。 展开更多
关键词 YY1转录因子 整合素136 口腔肿瘤
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