目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人子宫内膜癌(Humanendometrial cancer,HEC)-1-B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。方法:应用不同浓度的5-Aza-CdR处理HEC-1-B细胞,甲基化特异P...目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人子宫内膜癌(Humanendometrial cancer,HEC)-1-B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。方法:应用不同浓度的5-Aza-CdR处理HEC-1-B细胞,甲基化特异PCR(Methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)法检测处理前后RAS相关域家族1A(RAS association do-main family 1A,RASSF1A)基因甲基化状态,应用RT-PCR方法检测RASSF1A基因mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:HEC-1-B细胞RASSF1A基因启动子区呈高甲基化状态,经过5-Aza-CdR处理后,RASSF1A基因启动子区呈去甲基化状态,其mRNA重新表达,细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。结论:5-Aza-CdR能够逆转RASSF1A基因甲基化状态,调控RASSF1A基因表达,并能有效地抑制HEC-1-B细胞的增殖和诱导细胞调亡。展开更多
目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特...目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。展开更多
文摘目的:探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人子宫内膜癌(Humanendometrial cancer,HEC)-1-B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。方法:应用不同浓度的5-Aza-CdR处理HEC-1-B细胞,甲基化特异PCR(Methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)法检测处理前后RAS相关域家族1A(RAS association do-main family 1A,RASSF1A)基因甲基化状态,应用RT-PCR方法检测RASSF1A基因mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:HEC-1-B细胞RASSF1A基因启动子区呈高甲基化状态,经过5-Aza-CdR处理后,RASSF1A基因启动子区呈去甲基化状态,其mRNA重新表达,细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。结论:5-Aza-CdR能够逆转RASSF1A基因甲基化状态,调控RASSF1A基因表达,并能有效地抑制HEC-1-B细胞的增殖和诱导细胞调亡。
文摘目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导与激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法:根据siRNA(Small interference RNAs,iRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染SKOV3细胞。通过RT-PCR及Western blot检测STAT3基因不同水平的表达,采用MTT实验、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡的变化。结果:目的siRNA实验组细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平均明显下降,细胞增殖能力显著降低,而细胞凋亡率则显著升高。结论:应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低卵巢癌SKOV3细胞STAT3的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡。
