抗病毒中药研究的最新进展 被引量：74

1

作者 张其威 张楚瑜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期116-119,共4页

关键词 抗病毒 中药 研究进展

在线阅读 下载PDF 职称材料

银杏大蚕蛾质型多角体病毒研究初报 被引量：3

2

作者 杨世璋 陈军 +3 位作者 杨琼 林静 孟小林 马永平 《中国森林病虫》 北大核心 2006年第2期43-44,共2页

关键词 银杏大蚕蛾 质型多角体病毒 研究初报 核型多角体病毒 分布范围 经济树种 化学农药 蚕蛾科 鳞翅目 盐肤木

在线阅读 下载PDF 职称材料

核衣壳蛋白VP39结构分析与杆状病毒的进化研究 被引量：1

3

作者 刘德立 江月 +2 位作者 范文韬 杨成丽 齐义鹏 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期376-381,共6页

在测定了BmNPV-Ch(中国株)和HaMNPVvp39基因序列的基础上,推导出相应的氨基酸顺序.并与AcMNPV、OpMNPV、LdMNPV、BmNPV-Ja(日本株)的VP39蛋白的氨基酸顺序进行了比较.分析结果表明:在已知的各种杆状病毒中,VP39蛋白是一个保守性较强的... 在测定了BmNPV-Ch(中国株)和HaMNPVvp39基因序列的基础上,推导出相应的氨基酸顺序.并与AcMNPV、OpMNPV、LdMNPV、BmNPV-Ja(日本株)的VP39蛋白的氨基酸顺序进行了比较.分析结果表明:在已知的各种杆状病毒中,VP39蛋白是一个保守性较强的蛋白质.Bm-NPV-ChVP39蛋白与AcMNPV、OpMNPV、LdMNPV、BmNPV-Ja和HaMNPVVP39蛋白的氨基酸同源性分别是93.7%、58.2%、39.9%、97.1%、92.8%.HaMNPVVP39蛋白与AcMNPV、OpMNPV、LdMNPV、BmNPV-Ja和BmNPV-ChVP39蛋白的氨基酸同源性分别为97.3%、59.0%、40.2%、93.1%、92.8%.通过氨基酸亲水性分析比较,探讨了VP39蛋白结构与杆状病毒进化间的关系. 展开更多

关键词 核衣壳蛋白VP39 结构分析 杆状病毒 分子进化

在线阅读 下载PDF 职称材料

表达barnase基因的重组棉铃虫核型多角体病毒的构建及其杀虫活性研究 被引量：1

4

作者 朱应 齐义鹏 +1 位作者 刘映乐 朱反修 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期169-177,共9页

将含有 barnase基因与杆状病毒多角体基因 ( ph)的重组转座载体 p Fb- Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒 ( Ha NPV)的穿梭载体 Hanpvid转座并提取重组穿梭载体 DNA转染棉铃虫细胞 ,得到重组棉铃虫病毒 r Ha- Bar.其分子杂交证... 将含有 barnase基因与杆状病毒多角体基因 ( ph)的重组转座载体 p Fb- Bar在大肠杆菌中与含有棉铃虫核型多角体病毒 ( Ha NPV)的穿梭载体 Hanpvid转座并提取重组穿梭载体 DNA转染棉铃虫细胞 ,得到重组棉铃虫病毒 r Ha- Bar.其分子杂交证明 ,昆虫细胞中有 r Ha- Bar的 bar基因转录本存在 ,并能表达产生 33k D的多角体蛋白和 1 2 k D的 barnase.在平板上 ,barnase能降解RNA,出现清晰的降解圈 .r Ha- Bar对三龄棉铃虫幼虫的毒力比野生型 Ha NPV的 LD50 减少 2 0 % ,LT50 减少 30 % .用 barnase的拮抗基因 barstar构建了具有 Neo抗性、并能稳定表达 barstar的棉铃虫转化细胞 AM1 - NB.以携带 barnase基因的重组病毒 r Ha- Bar分别感染转化细胞和正常细胞 ,48h子代病毒在转化细胞中的产量比在正常细胞中高 2 3倍 ,72 h高 1 60倍 . 展开更多

关键词 棉铃虫 rHaBar 转座子介导 病毒杀虫剂 杀虫活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

宫颈病变人乳头瘤病毒感染及型别分布的研究 被引量：5

5

作者 巴瑞琪 丁晓华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期838-,840,共2页

关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

用DNA转染法研究小菜蛾颗粒体病毒在草地贪夜蛾细胞内复制 被引量：2

6

作者 孟小林 Suzanne.M.Thiem +1 位作者 Martha.Quentin Chi-juChen 《中国生物防治》 CSCD 1996年第2期66-68,共3页

采用钙一磷沉淀技术将小菜蛾颗粒体病毒DNA转染草地贪夜蛾细胞,经转染120小时后的病变细胞核膨大,核内可见病毒粒子。回收转染5天后的细胞悬液,经破细胞处理,添食感染2龄小菜蛾幼虫,患病幼虫为典型颗粒体病毒病症状,感染率为37.8%。

关键词 小菜蛾 颗粒体病毒 DNA 转染 草地 贪夜蛾细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒基因工程疫苗的研究进展 被引量：3

7

作者 潘兹书 张楚瑜 《预防兽医学进展》 1999年第3期1-4,共4页

关键词 伪狂犬病病毒 基因工程疫苗 疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

小菜蛾颗粒体病毒增效基因的初步研究

8

作者 吕颂雅 孟小林 +2 位作者 徐进平 郜金荣 叶林柏 《中国生物防治》 CSCD 1998年第2期86-87,共2页

小菜蛾颗粒体病毒增效基因的初步研究①吕颂雅孟小林徐进平郜金荣叶林柏（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＳＹＮＥＲＧＩＳＴＩＣＦＡＣＴＯＲＧＥＮＥＯＦＴＨＥＰＬＵＴＥＬＬＡ... 小菜蛾颗粒体病毒增效基因的初步研究①吕颂雅孟小林徐进平郜金荣叶林柏（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＳＹＮＥＲＧＩＳＴＩＣＦＡＣＴＯＲＧＥＮＥＯＦＴＨＥＰＬＵＴＥＬＬＡＸＹＬＯＳＴＥＬＬＡＧＲＡＮＵＬＯ... 展开更多

关键词 小菜蛾 杆状病毒 病毒增效基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

杆状病毒的垂直传播及绿色荧光蛋白在棉铃虫幼虫中的表达 被引量：8

9

作者 刘祖强 杨复华 +2 位作者 齐义鹏 朱应 朱反修 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-8,T001,共9页

用转座 /穿梭系统构建了携带绿色荧光蛋白基因 (gfp)的重组棉铃虫核型多角体病毒rHa FGP ,以其多角体添食感染棉铃虫 3龄幼虫 ,室内饲养 3代 ,各代均可见自然光下发绿色荧光的棉铃虫幼虫 ,其中子代不再重复感染。F0 、F1、F2 代发绿色... 用转座 /穿梭系统构建了携带绿色荧光蛋白基因 (gfp)的重组棉铃虫核型多角体病毒rHa FGP ,以其多角体添食感染棉铃虫 3龄幼虫 ,室内饲养 3代 ,各代均可见自然光下发绿色荧光的棉铃虫幼虫 ,其中子代不再重复感染。F0 、F1、F2 代发绿色荧光的棉铃虫幼虫所占百分比分别为34%、 2 0 %、 8%。提取虫体内的病毒多角体DNA ,以PCR和斑点杂交鉴定表明 ,gfp不仅在亲代棉铃虫体内正常表达 ,而且在子代幼虫中表达 ,HaNPV通过卵实现了垂直传播。 展开更多

关键词 绿色荧光蛋白基因 重组棉铃虫核型多角体病毒 垂直传播 棉铃虫 杆状病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

伪狂犬病毒基因转移载体的快速构建及其瞬时表达 被引量：5

10

作者 罗满林 丁建华 +3 位作者 刘镇明 袁少华 张楚瑜 王家富 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期79-81,共3页

以含有伪狂犬病毒 (pseudorabiesvirus ,PRV)蛋白激酶 (proteinkinase ,PK)基因的重组质粒为基础 ,利用非互补粘性末端经过部分补平后成为粘性末端 ,再进行连接的方法克隆了与载体分子大小相当的报告基因表达盒 用限制性内切酶分析确... 以含有伪狂犬病毒 (pseudorabiesvirus ,PRV)蛋白激酶 (proteinkinase ,PK)基因的重组质粒为基础 ,利用非互补粘性末端经过部分补平后成为粘性末端 ,再进行连接的方法克隆了与载体分子大小相当的报告基因表达盒 用限制性内切酶分析确证了伪狂犬病毒表达载体中报道基因表达盒的插入方向 ,并通过导入细胞后检测外源基因在体外的瞬时表达 。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 瞬时表达 基因工程疫苗 表达载体 猪

在线阅读 下载PDF 职称材料

gfp基因标记的重组杆状病毒对棉铃虫幼虫的侵染历程 被引量：5

11

作者 吕颂雅 杨复华 +1 位作者 刘祖强 齐义鹏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期743-750,共8页

用携带杆状病毒极晚期多角体蛋白基因启动子驱动gfp表达的重组病毒rHa FGP感染棉铃虫三龄幼虫 .在感染后不同时间取样 ,分离不同组织 ,制片 ,置于倒置荧光显微镜下观察基因的表达 .结果发现 ,随着感染时间的推移 ,荧光产生的部位出现更... 用携带杆状病毒极晚期多角体蛋白基因启动子驱动gfp表达的重组病毒rHa FGP感染棉铃虫三龄幼虫 .在感染后不同时间取样 ,分离不同组织 ,制片 ,置于倒置荧光显微镜下观察基因的表达 .结果发现 ,随着感染时间的推移 ,荧光产生的部位出现更替 ,随后荧光强度也发生相应的变化 .从荧光出现的先后初步推断出杆状病毒对昆虫幼虫的侵染路线 :中肠上皮→血淋巴→气管系统→脂肪体 真皮 .在幼虫感染后 12h荧光即出现于中肠细胞中 ,表明此时已有极晚期蛋白表达 .说明利用杆状病毒极晚期基因启动子驱动苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因 (cry)表达 。 展开更多

关键词 重组杆状病毒 绿色荧光蛋白 侵染历程 GFP基因 棉铃虫幼虫

在线阅读 下载PDF 职称材料

粉纹夜蛾颗粒体病毒增效基因3′端2.5kb片段在大肠杆菌中的表达 被引量：14

12

作者 袁哲明 孟小林 刘树生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期155-160,共6页

将粉纹夜蛾Trichoplusiani颗粒体病毒增效基因 3′端 2 5kb片段插入 pQE 31中构建了重组表达载体 pQE/enhancin ,转化大肠杆菌M 15( pREP4 )在IPTG诱导下成功表达出分子量约为96kD的融合蛋白并命名为P96。初步纯化的P96显示了明显的增... 将粉纹夜蛾Trichoplusiani颗粒体病毒增效基因 3′端 2 5kb片段插入 pQE 31中构建了重组表达载体 pQE/enhancin ,转化大肠杆菌M 15( pREP4 )在IPTG诱导下成功表达出分子量约为96kD的融合蛋白并命名为P96。初步纯化的P96显示了明显的增效活性 ,可提高棉铃虫核型多角体病毒对棉铃虫 3龄幼虫感染死亡率 2 7 4 0 %～ 34 50 % ,缩短LT50 1 展开更多

关键词 粉纹夜蛾颗粒体病毒 增效基因 克隆 表达 生物测定

在线阅读 下载PDF 职称材料

杆状病毒早期启动子载体的构建及报道基因的表达 被引量：3

13

作者 邓小昭 朱反修 +2 位作者 刁振宇 高健 齐义鹏 《医学研究生学报》 CAS 2001年第3期200-203,,206,,共5页

目的 :用苜蓿尺蠖核多角体病毒 (Ac NPV)的 IE1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。　方法 :以 Ac NPV p10基因为侧翼序列 ,并将新霉素抗性基因 (neo)插入 IE1基因启动子下游 ,得到转移载体 p Ac PIneo。将它和野生型 Ac NPV DN... 目的 :用苜蓿尺蠖核多角体病毒 (Ac NPV)的 IE1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。　方法 :以 Ac NPV p10基因为侧翼序列 ,并将新霉素抗性基因 (neo)插入 IE1基因启动子下游 ,得到转移载体 p Ac PIneo。将它和野生型 Ac NPV DNA共转染昆虫细胞 Sf9,由于 neo基因的表达 ,通过 G418的选择和富集作用 ,得到重组病毒 v Ac PIneo的纯培养。　结果 :用酶切和 Southern印迹杂交证明 ,neo基因整合于 Ac NPV基因组的 p10基因位相。　结论 :成功地构建了杆状病毒早期启动子载体 。 展开更多

关键词 昆虫杆状病毒 IE1基因 p10基因 转移载体 新霉素抗性基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

昆虫病毒重组增效蛋白的广谱增效活性 被引量：11

14

作者 袁哲明 孟小林 刘树生 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2004年第1期31-33,共3页

室内生物测定表明 ,大肠杆菌表达的粉纹夜蛾颗粒体病毒重组增效蛋白P96可显著或极显著提高棉铃虫核型多角体病毒、苏云金杆菌和阿维菌素对棉铃虫幼虫的致死率 ,分别提高1 6 9.78%、73.90 %和 36 .0 4 % ;对苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒... 室内生物测定表明 ,大肠杆菌表达的粉纹夜蛾颗粒体病毒重组增效蛋白P96可显著或极显著提高棉铃虫核型多角体病毒、苏云金杆菌和阿维菌素对棉铃虫幼虫的致死率 ,分别提高1 6 9.78%、73.90 %和 36 .0 4 % ;对苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒感染甜菜夜蛾幼虫也有明显增效作用。Na2 CO3 溶解的P96对棉铃虫初孵幼虫有一定致死作用。 展开更多

关键词 重组增效蛋白 广谱增效剂 粉纹夜蛾颗粒体病毒 大肠杆菌 苜蓿丫纹夜蛾 棉铃虫 致死作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

α-2b干扰素抑制动脉粥样硬化的实验研究 被引量：1

15

作者 桂乐 曹茂银 +1 位作者 任江华 杨占秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期219-222,T005,共5页

目的 :探讨α - 2b干扰素 (IFNα- 2b)抑制动脉粥样硬化 (AS)的体内机制。方法 :随机将家兔分为空白对照 (NC)组、动脉粥样硬化 (AS)组、病毒感染动脉粥样硬化 (V)组、干扰素治疗非病毒感染动脉粥样硬化 (IFN -Ⅰ )组、干扰素治疗病毒... 目的 :探讨α - 2b干扰素 (IFNα- 2b)抑制动脉粥样硬化 (AS)的体内机制。方法 :随机将家兔分为空白对照 (NC)组、动脉粥样硬化 (AS)组、病毒感染动脉粥样硬化 (V)组、干扰素治疗非病毒感染动脉粥样硬化 (IFN -Ⅰ )组、干扰素治疗病毒感染动脉粥样硬化 (IFN -Ⅱ )组。复制AS模型 ,于第 1、3、5、7周酶法测血清总胆固醇、甘油三脂。 7周后主动脉苏丹Ⅳ染色测AS斑块面积 /总面积 ,HE染色观察主动脉形态学改变。用免疫组化法测胸主动脉中的增殖细胞核抗原 (PCNA)和单纯疱疹病毒Ⅰ型 (HSV -Ⅰ )的表达 ,用原位杂交法测血小板衍生生长因子 β(PDGF - β)的表达程度。 结果 :NC组、IFN -Ⅰ组、IFN -Ⅱ组主动脉粥样硬化斑块面积小于AS组 (P <0 .0 5) ,AS组小于V组 (P <0 .0 5)。NC组、IFN -Ⅰ组、IFN -Ⅱ组PDGF -B的表达低于AS组、V组 (P <0 .0 5)。结论 :病毒可能是AS的始动因素 ,PDGF - β可能是促使血管平滑肌细胞 (VSMC)增生、AS进展的主要因素。IFNα- 2b通过抑制病毒和下调PDGF - βmRNA抑制VSMC的增生 ,可能是其抑制AS的形成及发展的重要机制之一。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 疱疹病毒I型 血小板源生长因子 干扰素alfa-2B

在线阅读 下载PDF 职称材料

昆虫杆状病毒表达系统中阳性重组病毒的筛选 被引量：1

16

作者 朱反修 王福山 齐义鹏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第1期35-39,共5页

近年来，随着杆状病毒表达系统的普遍应用，阳性重组病毒筛选方法也有了很大的改进，从过去的经验性的ｏｃｕ￣＋／ｏｃｕ￣－空斑表型筛选发展到根据颜色差异，药物抗性，抗生素抗性等等筛选重组病毒。同源重组过程也可在大肠杆菌或酵... 近年来，随着杆状病毒表达系统的普遍应用，阳性重组病毒筛选方法也有了很大的改进，从过去的经验性的ｏｃｕ￣＋／ｏｃｕ￣－空斑表型筛选发展到根据颜色差异，药物抗性，抗生素抗性等等筛选重组病毒。同源重组过程也可在大肠杆菌或酵母甚至体外进行，大大提高了重组率，由于重组率是如此之高，有些方法可以免去繁琐的空斑选择，很快得到重组病毒的纯培养。文章对各种筛选方法进行了比较，并指出各自的优缺点。 展开更多

关键词 杆状病毒 外源基因表达 表达系统 重组病毒 筛选

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪瘟病毒石门株NS4A基因的克隆、测序及分析 被引量：1

17

作者 黄茜华 张楚俞 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期5-7,共3页

采用RT-PCR技术，利用一对引物，从感染猪血中成功扩增了猪瘟病毒强毒石门株NS4A基因，片段大小为757bp，与预期大小一致。克隆后经酶切鉴定，自动化测序。序列比较表明，该基因为最保守的基因之一，其中石门株序列与ALD，GPE，HCLV及Br... 采用RT-PCR技术，利用一对引物，从感染猪血中成功扩增了猪瘟病毒强毒石门株NS4A基因，片段大小为757bp，与预期大小一致。克隆后经酶切鉴定，自动化测序。序列比较表明，该基因为最保守的基因之一，其中石门株序列与ALD，GPE，HCLV及Brescia株均有很高的同源性，由其推导的氨基酸的同源性高达100％。仅与Alfort株的同源性消低。对石门株序列与同属的BVDVSD－1株和NADL株序列进行了比较。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 石门株 NS4A基因 克隆 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒vp39基因的克隆及其对S_f9细胞形态的影响

18

作者 刘德立 孙晓洁 +2 位作者 齐义鹏 李小峰 朱应 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期340-343,共4页

最近的研究发现：ＡｃＮＰＶ的ｖｐ３９基因与侵染密切相关［１］．在侵染过程中，ＶＰ３９蛋白与宿主的肌动蛋白结合，使其重排形成缆索（ｃａｂｌｅ）．导致细胞骨架发生变化有利于病毒编码的蛋白酶的水解．最后，子代病毒颗粒大量形... 最近的研究发现：ＡｃＮＰＶ的ｖｐ３９基因与侵染密切相关［１］．在侵染过程中，ＶＰ３９蛋白与宿主的肌动蛋白结合，使其重排形成缆索（ｃａｂｌｅ）．导致细胞骨架发生变化有利于病毒编码的蛋白酶的水解．最后，子代病毒颗粒大量形成，宿主昆虫体全部液化成为脓水．可... 展开更多

关键词 苜蓿银纹夜蛾 核型多角体病毒 基因克隆 细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪瘟病毒石门株NS5A基因的序列测定及同源比较

19

作者 黄茜华 张楚瑜 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期154-157,共4页

根据已发表的猪瘟病毒序列，设计并合成了３对引物，利用ＲＴＰＣＲ技术，从猪瘟病毒石门株感染猪血中成功扩增了各ｃＤＮＡ片段，覆盖整个ＮＳ５Ａ基因，片段大小各为７７４，６８５，９１７ｂｐ。克隆后测序。序列比较结果显示，该... 根据已发表的猪瘟病毒序列，设计并合成了３对引物，利用ＲＴＰＣＲ技术，从猪瘟病毒石门株感染猪血中成功扩增了各ｃＤＮＡ片段，覆盖整个ＮＳ５Ａ基因，片段大小各为７７４，６８５，９１７ｂｐ。克隆后测序。序列比较结果显示，该基因在ＣＳＦＶ中较为保守。与同属的ＢＶＤＶ的序列同源性较低，且氨基酸的同源性低于核苷酸的同源性，推测它参与决定瘟病毒种的特异性。 展开更多

关键词 猪瘟病毒石门株 NS5A基因 序列测定 同源比较

在线阅读 下载PDF 职称材料

同时观察立体病毒结构及核酸的负染色投影法

20

作者 张珈敏 胡远杨 +1 位作者 祖明生 朱丽华 《电子显微学报》 CAS CSCD 1994年第5期360-360,共1页

同时观察立体病毒结构及核酸的负染色投影法张珈敏，胡远杨，祖明生，朱丽华（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）金属投影技术目前仍然是核酸分子观察中最主要的制样方法之一。负染色技术对于颗粒状的生物材料具有分辨率高（可达... 同时观察立体病毒结构及核酸的负染色投影法张珈敏，胡远杨，祖明生，朱丽华（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）金属投影技术目前仍然是核酸分子观察中最主要的制样方法之一。负染色技术对于颗粒状的生物材料具有分辨率高（可达２ｎｍ），简单快速等优点，但在核酸... 展开更多

关键词 立体病毒 结构 核酸 负染色投影法

在线阅读 下载PDF 职称材料