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东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定(英文) 被引量：10
1
作者 杨锐 彭方 +4 位作者 刘辉 曹志贱 李文鑫 毛歆 蒋达和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期19-23,共5页
从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生... 从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 . 展开更多
关键词 胶质瘤细胞 氯离子通道 表达 人脑 膜片钳 GST 抑制作用 东亚钳蝎 毒腺 功能鉴定
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白蚁信息素研究进展 被引量：8
2
作者 邓晓军 张珈敏 +2 位作者 胡建芳 杨娟 胡远扬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期666-672,共7页
采用信息素防治白蚁这种世界性害虫是当前白蚁研究的一大热点。本文从化学和生物两个方面总结了几十年来国内外白蚁信息素及其类似物研究进展。讨论了影响信息素活性的几个因素。并根据最新的研究情况 。
关键词 白蚁 信息素 研究进展 害虫防治
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一种制备GST融合蛋白亲和层析胶的方法 被引量：6
3
作者 彭方 杨锐 李文鑫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期362-362,共1页
关键词 制备 GST融合蛋白 亲和层析胶
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一个东亚钳蝎蝎毒素BmTXKβ基因的克隆及其基因表达调控 被引量：2
4
作者 曹志贱 肖帆 +2 位作者 毛歆 刘辉 李文鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期679-683,共5页
从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号... 从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号肽的基因结构不同 .并且 ,BmTXKβ基因的内含子特征也与其它蝎毒素基因不同 .研究结果从基因水平上证实了BmTXKβ是一个新的蝎毒素样肽 .以BmTXKβcDNA序列为探针与蝎基因组DNASouthern杂交出现 2条特异性杂交带 .杂交结果为蝎毒素基因可能通过DNA重排、多拷贝或多基因家族来调控基因表达提供了证据 . 展开更多
关键词 东亚钳蝎 蝎毒素 BmTXKβ基因 克隆 基因表达调控
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Ⅰ型内含子核酶研究进展 被引量：6
5
作者 李志杰 张翼 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期363-369,共7页
Ⅰ型内含子核酶作为最早被发现的RNA催化剂 ,在过去 2 0年里得到了深入研究 .相关研究成果使人们在RNA的生物学功能、催化特征、结构与折叠特征等方面的认识有了革命性更新 .回顾了Ⅰ型内含子核酶研究的主要进展 ,重点对近年来在Ⅰ型内... Ⅰ型内含子核酶作为最早被发现的RNA催化剂 ,在过去 2 0年里得到了深入研究 .相关研究成果使人们在RNA的生物学功能、催化特征、结构与折叠特征等方面的认识有了革命性更新 .回顾了Ⅰ型内含子核酶研究的主要进展 ,重点对近年来在Ⅰ型内含子核酶的结构和折叠方面所取得的重要成果进行了介绍 。 展开更多
关键词 Ⅰ型内含子核酶 催化 结构 折叠 RNA催化剂
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蝎Na^+通道毒素的结构及功能研究进展 被引量：2
6
作者 朱顺义 曹志贱 李文鑫 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期176-178,共3页
蝎Na+ 通道毒素为低分子量肽类物质 ,由 6 0～ 76个氨基酸残基组成 ,含有 4对二硫键。这类分子为电压门控Na+ 通道功能门控机制的高亲和性配体 ,具有重要的理论价值和应用前景。本文对Na+ 通道毒素的初级和高级结构。
关键词 蝎毒素 结构 功能 Na^+通道 研究进展
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一个新的东亚钳蝎毒素(BmKT_1)全长cDNA的克隆和分析 被引量：3
7
作者 曾宪春 李文鑫 +3 位作者 朱智慧 朱顺义 彭方 毛歆 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期616-619,共4页
首先构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ;根据已知的东亚钳蝎哺乳动物毒素氨基酸序列保守区设计引物 ,并用 PCR从 c DNA文库中扩增出一个 c DNA片段作为筛选 c DNA文库的探针 ;从 c DNA文库中筛选到二个编码同一个新的蝎毒素多肽的 c D... 首先构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ;根据已知的东亚钳蝎哺乳动物毒素氨基酸序列保守区设计引物 ,并用 PCR从 c DNA文库中扩增出一个 c DNA片段作为筛选 c DNA文库的探针 ;从 c DNA文库中筛选到二个编码同一个新的蝎毒素多肽的 c DNA,它们除 3′- UTR外 ,其余序列完全一致 .它们均含有 2 55bp长的开放阅读框 ,编码 85肽的前体毒素 ,包括 1 9个氨基酸残基的信号肽 ,66个残基的成熟毒素 (命名为 Bm KT1) ;Bm KT1氨基酸序列与已知的蝎毒素具有较大的同源性 ,与 Bm KM1,Lqq ,Lqhα IT和 Bm K M10 的同源性分别为 77%、67%、67%和 65% .Bm KT1的 C端不存在末端修饰步骤且具有一个与这些毒素不相同的特征结构 ,即在末端延伸了两个氨基酸残基 - P- S,推测 Bm KT1具有新的活性功能特征 . 展开更多
关键词 东亚钳蝎毒素 药物设计 CDNA文库 克隆 序列分析
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东亚钳蝎毒素BmKT四个同源基因的克隆及基因组织分析
8
作者 罗锋 刘辉 李文鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期365-372,共8页
BmKT是从本室构建的cDNA文库中筛选到的1个α钠通道毒素,根据其全长cDNA序列设计引物,采用PCR法以蝎总基因组DNA为模板,获得4个BmKT的同源基因,分别命名为BmKT′和BmKTa、BmKTb、BmKTb′.序列分析表明:BmKT′和BmKTa基因含有大小分别为5... BmKT是从本室构建的cDNA文库中筛选到的1个α钠通道毒素,根据其全长cDNA序列设计引物,采用PCR法以蝎总基因组DNA为模板,获得4个BmKT的同源基因,分别命名为BmKT′和BmKTa、BmKTb、BmKTb′.序列分析表明:BmKT′和BmKTa基因含有大小分别为509bp和506bp的内含子,位于信号肽编码区内,插入信号肽-4位残基Gly密码子的第一个碱基G之后;而BmKTb和BmKTb′的内含子大小均为418bp.这4个BmKT的同源基因内含子符合GTAG拼接规律,其中BmKT′和BmKTa的内含子A+T含量分别为61.7%和61.9%,低于目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量,大大低于它们第一外显子A+T含量(71.7%),略高于第二外显子A+T含量(55.5%);而BmKTb,BmKTb′的内含子A+T含量分别为75.8%和76.1%,与目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量相似.BmKT′基因的外显子与BmKT基因cDNA所对应氨基酸序列仅在信号肽中-7位有一个氨基残基的差异(BmKT:Leu→BmKTa:Val);而BmKTa基因外显子所推断的氨基酸序列与BmKT前体比较,则在成熟肽的+54位发生了突变(BmKT:Lys→BmKTa:Asn),是与BmKT同源的一个新基因.BmKTb基因和BmKTb′基因所编码的前体肽与BmKT基因对应的前体肽同源性约为65%,显然BmKTb和BmKTb′是不同于BmKT的2个新基因(GenBank登录号:BmKT′,AY786186;BmKTa,AY676142;BmKTb,AY676140;BmKTb′,AY676141). 展开更多
关键词 东亚钳蝎 BmKT' BmKTa BmKTb BmKTb' 基因组织 Na^+通道毒素
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东亚钳蝎中一个中性哺乳动物神经毒素全长cDNA的克隆和分析
9
作者 朱智慧 曾宪春 +2 位作者 王三霞 李文鑫 朱顺义 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期431-434,共4页
构建了东亚钳蝎毒腺cDNA文库 ,根据东亚钳蝎中性哺乳动物神经毒素BmKM4的氨基酸序列设计并合成引物 ,用PCR方法从文库中筛选到BmKM4全长cDNA序列。它由 5′UTR、可读框和 3′UTR组成。与其他东亚钳蝎哺乳动物神经毒素cDNA的相应区域相比... 构建了东亚钳蝎毒腺cDNA文库 ,根据东亚钳蝎中性哺乳动物神经毒素BmKM4的氨基酸序列设计并合成引物 ,用PCR方法从文库中筛选到BmKM4全长cDNA序列。它由 5′UTR、可读框和 3′UTR组成。与其他东亚钳蝎哺乳动物神经毒素cDNA的相应区域相比 ,BmKM4cDNA的 5′UTR高度保守 ,而其 3′UTR则变异较大。AUG的旁侧序列为AAAATGAA ,与绝大多数蝎毒素基因一致。在BmKM4mRNApoly(A)尾上游 17nt处 ,有一典型的腺苷化信号 (AATAAA)。可读框编码 84个氨基酸的毒素前体 ,包括N端 19个氨基酸残基组成的信号肽 ,中间 6 4个氨基酸残基组成的成熟毒素 ,以及C末端的额外碱性氨基酸Arg。椐据一般规律 ,尾端Arg在毒素前体的成熟过程中会被切除。 展开更多
关键词 东亚钳蝎 中性哺乳动物神经素 BmKM4 CDNA 基因克隆 氨基酸序列
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用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌 被引量：2
10
作者 钱娜 赵永芳 《分析测试学报》 CAS CSCD 2000年第3期8-10,共3页
建立了用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌的薄层色谱法。甲基营养菌No.2培养液经二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A -25离子交换剂、Sep -PakC18 Cartridge纯化后 ,可获得纯度92 %以上的吡咯喹啉醌 (PQQ)粉末。在碱性条件下丹磺酰氯 (DNS_Cl)可与... 建立了用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌的薄层色谱法。甲基营养菌No.2培养液经二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A -25离子交换剂、Sep -PakC18 Cartridge纯化后 ,可获得纯度92 %以上的吡咯喹啉醌 (PQQ)粉末。在碱性条件下丹磺酰氯 (DNS_Cl)可与PQQ生成具有特征性的DNS_N_PQQ荧光衍生物 ,将其点样于聚酰胺薄膜上 ,经正庚烷 -正丁醇 -醋酸 (体积比3∶3∶1)系统展开 ,Rf 值为0.73。 展开更多
关键词 吡咯喹啉醌 丹磺酰氯 辅酶 薄层色谱法 鉴定
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