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CPA恒温扩增技术在口岸蚊媒携带登革病毒检测中的应用被引量：3: 1; 作者宋凌浩符丽媛 +2 位作者赵志田狄彪尤其敏《西南林学院学报》 2010年第B06期8-10,13,共4页; CPA恒温扩增技术为检验检疫基层实验室开展筛选检测和监控提供了有效的技术手段,应用登革病毒核酸快速提纯器和登革病毒RT-恒温扩增-防污染核酸快速诊断试剂盒,对苏州口岸捕获的登革媒介进行核酸提取和病毒检测,结果显示:该试剂盒检测... 展开更多; 关键词登革病毒快速检测 CPA 恒温扩增蚊媒; 在线阅读下载PDF 职称材料

交叉引物恒温扩增技术快速检测结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌系统的建立被引量：3: 2; 作者黄文滨陈丽萍 +3 位作者张望肖婷张满娥吴定昌《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第8期734-743,共10页; 目的:建立一种快速检测结核分枝杆菌复合群(MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)的分子交叉引物恒温扩增技术(CPA)检测系统。方法:针对分枝杆菌高度保守的16S rRNA基因序列设计6套CPA引物和3个探针。以含16S rRNA基因序列质粒(浓度为1000拷贝/... 展开更多; 关键词核酸扩增技术分枝杆菌结核分枝杆菌非典型; 在线阅读下载PDF 职称材料

交叉引物恒温扩增法检测甲型H1N1流感病毒及临床应用被引量：10: 3; 作者白志军胡林 +4 位作者李魁彪钟华燕陈艺韵鲁恩洁狄飚《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期208-211,215,共5页; 目的建立交叉引物恒温扩增（Cross Priming Amplification,CPA）技术对甲型H1N1流感病毒进行检测的方法,并对该方法通过临床标本进行评价。方法根据甲型H1N1流感病毒的保守序列设计特异性引物,并在同一温度下实现RNA的逆转录和DNA扩增,... 展开更多; 关键词甲型H1N1流感病毒交叉引物恒温扩增技术临床应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢性肝病和肝癌患者血液中纳米细菌的检测被引量：2: 4; 作者朱明利娄国强 +5 位作者罗英李超丹厉小玉刘寿荣周俊胡林《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期621-625,630,共6页; 目的研究纳米细菌的分离与鉴定方法,了解慢性肝病和肝癌患者血液纳米细菌(NB)感染状况。方法对68例慢性乙型肝炎(CHB)、54例慢性重型乙型肝炎(CSHB)、66例肝硬化(CL)、23例肝癌(HCC)患者采用培养、免疫组化、钙染色,检测血液中纳米细菌... 展开更多; 关键词纳米细菌慢性乙型肝炎肝硬化肝癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

直接多重TaqMan qPCR方法快速鉴定褐飞虱属3种飞虱: 5; 作者罗举杨素文 +3 位作者贝文勇余军伟唐健刘淑华《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期329-336,共8页; 【目的】褐飞虱(Nilaparvata lugens)是水稻重大害虫,灯光诱捕一直是褐飞虱监测的重要方法。然而,褐飞虱的两个同属近似种伪褐飞虱(N.muiri)和拟褐飞虱(N.bakeri)也具有扑灯行为,常被误判为褐飞虱。针对测报灯下褐飞虱属近似种形态鉴定... 展开更多; 关键词褐飞虱伪褐飞虱拟褐飞虱 ITS1 直接多重Taqman qPCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测方法的建立被引量：2: 6; 作者袁旦一金亚南 +4 位作者李玲何谦胡林李晓琪孙志勇《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1905-1913,共9页; 拟建立一种简便、快速、准确的现场快速分子检测方法,为猪圆环病毒2型（PCV2）疾病的生物安全防控提供技术支撑。采用交叉引物恒温扩增技术原理,根据PCV2 Cap基因设计一组交叉扩增引物,用构建的Cap基因重组质粒作为标准DNA模板,对反应... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测气溶胶污染生物安全防控; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CPA恒温扩增技术在口岸蚊媒携带登革病毒检测中的应用被引量：3: 1; 作者宋凌浩符丽媛赵志田狄彪尤其敏; 机构苏州出入境检验检疫局广州市疾控中心杭州优思达生物技术有限公司; 出处《西南林学院学报》 2010年第B06期8-10,13,共4页; 基金江苏出入境检验检疫局资助项目(2009KJ41); 文摘 CPA恒温扩增技术为检验检疫基层实验室开展筛选检测和监控提供了有效的技术手段,应用登革病毒核酸快速提纯器和登革病毒RT-恒温扩增-防污染核酸快速诊断试剂盒,对苏州口岸捕获的登革媒介进行核酸提取和病毒检测,结果显示:该试剂盒检测结果与RT-PCR结果完全一致;2种核酸提取方法效率相当,对试验结果无影响;登革病毒核酸快速诊断试剂盒配合核酸快速提纯器完全适用于检疫现场快速检测。; 关键词登革病毒快速检测 CPA 恒温扩增蚊媒; Keywords dengue fever rapid detection CPA isothermal amplification vector mosquitoes; 分类号 S966.5 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名交叉引物恒温扩增技术快速检测结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌系统的建立被引量：3: 2; 作者黄文滨陈丽萍张望肖婷张满娥吴定昌; 机构福建医科大学附属龙岩第一医院检验科福建省龙岩市第二医院分子生物实验室杭州优思达生物技术有限公司; 出处《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第8期734-743,共10页; 基金福建省检验医学研究会与国家(福建)基因检测技术应用示范中心联合研创课题(2023LHYC029)。; 文摘目的:建立一种快速检测结核分枝杆菌复合群(MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)的分子交叉引物恒温扩增技术(CPA)检测系统。方法:针对分枝杆菌高度保守的16S rRNA基因序列设计6套CPA引物和3个探针。以含16S rRNA基因序列质粒(浓度为1000拷贝/μl)为阳性模板,筛选确立最佳引物探针组合,并对建立的最佳反应体系进行敏感度、特异度和包容性分析。收集福建省龙岩市第二医院2022年2月8日至2023年3月14日具有肺结核症状或体征的125例疑似肺结核患者的标本,采用分枝杆菌核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)和建立的CPA法对收集到的标本进行检测,并对两种方法间的检测结果一致性进行统计分析,采用Kappa值评估。Kappa值≥0.75,说明一致性好。结果:筛选出MTBC/NTM-16S-6引物和MTBC/NTM-16S-LR-FAM-3为分枝杆菌检测系统最佳引物探针组合,检测体系最低检测限为100拷贝/μl,检测时间为40 min,能检出MTBC和临床常见NTM,且与常见呼吸道细菌无交叉反应。与实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法相比,阳性预测值为95.65%(66/69),阴性预测值为85.71%(48/56),符合率为91.20%(114/125),Kappa值为0.82。结论:成功建立了一种基于CPA技术的快速检测MTBC和NTM的检测系统,能够为基层医院结核病疫情防控提供一种新的检测方法。; 关键词核酸扩增技术分枝杆菌结核分枝杆菌非典型; Keywords Nucleic acid amplification techniques Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium,atypical; 分类号 R378.91 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名交叉引物恒温扩增法检测甲型H1N1流感病毒及临床应用被引量：10: 3; 作者白志军胡林李魁彪钟华燕陈艺韵鲁恩洁狄飚; 机构广州市疾病预防控制中心杭州优思达生物技术有限公司; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期208-211,215,共5页; 基金国家科技重大专项(2012ZX10004-213-005) 广州市医药卫生科技项目(20131A011115 +3 种基金 201102A212006) 广州市医学重点学科建设项目(2013-2015-07)联合资助~~; 文摘目的建立交叉引物恒温扩增（Cross Priming Amplification,CPA）技术对甲型H1N1流感病毒进行检测的方法,并对该方法通过临床标本进行评价。方法根据甲型H1N1流感病毒的保守序列设计特异性引物,并在同一温度下实现RNA的逆转录和DNA扩增,该扩增产物可通过全封闭式核酸检测装置进行检测。14份健康人咽拭子标本、7个其他呼吸道病毒和6个虫媒病毒株被用来检测CPA反应的特异性;已知病毒滴度的甲型H1N1毒株进行对照梯度稀释,以测试CPA的敏感性;102份甲型H1N1临床咽拭子标本为检测对象,评估其临床的检测的可行性。结果 CPA反应未出现对健康样本以及其他病毒产生交叉反应;对已知滴度的病毒进行梯度稀释检测,证明CPA的敏感性为10拷贝/μL。对甲型H1N1流感临床病例发病1~3d临床标本新建检测方法的检出率为100%,4~6d临床标本检出率为79.31%,≥7d临床标本检出率为9.09%。讨论CPA具有较高的敏感性、特异性,对设备要求低,适合基层医疗单位对甲型H1N1流感发病早期诊断使用。; 关键词甲型H1N1流感病毒交叉引物恒温扩增技术临床应用; Keywords influenza A virus（H1N1） cross priming amplification （CPA） clinical application; 分类号 R373.1 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢性肝病和肝癌患者血液中纳米细菌的检测被引量：2: 4; 作者朱明利娄国强罗英李超丹厉小玉刘寿荣周俊胡林; 机构杭州市第六人民医院浙江中医药大学附属杭州第六医院开放实验室杭州优思达生物技术有限公司; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期621-625,630,共6页; 基金杭州市医药卫生科技计划重点项目(2003Z007); 文摘目的研究纳米细菌的分离与鉴定方法,了解慢性肝病和肝癌患者血液纳米细菌(NB)感染状况。方法对68例慢性乙型肝炎(CHB)、54例慢性重型乙型肝炎(CSHB)、66例肝硬化(CL)、23例肝癌(HCC)患者采用培养、免疫组化、钙染色,检测血液中纳米细菌,并与40例健康人结果比较。部分培养物用透射电镜观察。结果CHB、CSHB、CL、HCC病人和健康人血清纳米细菌免疫组化阳性率分别为23.91%、36.84%、38.89%、26.09%和7.50%。钙染色分别为29.55%、45.45%、37.14%、18.18%和5.00%,肝病阳性率均高于健康人(P<0.05)。显微镜下,纳米细菌阳性组出现针状、巢装集落或结晶者为82.35%,而阴性者40.00%,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化阳性的培养物透射电镜可见纳米细菌样微生物。结论单克隆抗体免疫组化联合透射电镜、钙染色可用于纳米细菌的检测。部分慢性肝病、肝癌病人存在血液纳米细菌感染,肝病患者血液纳米细菌感染率高于健康人。; 关键词纳米细菌慢性乙型肝炎肝硬化肝癌; Keywords nanobacteria chronic hepatitis B cirrhosis of liver hepatocellular carcinoma; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名直接多重TaqMan qPCR方法快速鉴定褐飞虱属3种飞虱: 5; 作者罗举杨素文贝文勇余军伟唐健刘淑华; 机构中国水稻研究所湖南省邵东市牛马司镇农业综合服务中心广西昭平县植保植检站杭州优思达生物技术有限公司; 出处《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期329-336,共8页; 基金浙江省自然科学基金资助项目(LGN21C140002) 十四五重点研发计划资助项目(2021YFD1401100) +1 种基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(CPSIBRF-CNRRI-202123)。; 文摘【目的】褐飞虱(Nilaparvata lugens)是水稻重大害虫,灯光诱捕一直是褐飞虱监测的重要方法。然而,褐飞虱的两个同属近似种伪褐飞虱(N.muiri)和拟褐飞虱(N.bakeri)也具有扑灯行为,常被误判为褐飞虱。针对测报灯下褐飞虱属近似种形态鉴定费时费力、专业技能要求高,伪褐飞虱和拟褐飞虱常被误判为褐飞虱这一问题,拟建立一种褐飞虱属3种飞虱的快速分类鉴定方法。【方法】以条形码基因ITS1为靶标,筛选褐飞虱属通用引物及物种特异性探针,建立并优化直接多重Taqman qPCR检测体系(Direct Multiplex TaqMan quantitative PCR,dmTqPCR),并分析其特异性、灵敏度及实用性。【结果】本研究建立的3种飞虱dmTqPCR检测方法特异性强,可准确区分褐飞虱、伪褐飞虱和拟褐飞虱;灵敏度高,检出限可达10拷贝/反应;大样本检测结果表明,382个样本从样本获取到结果输出的整个过程可在3 h内完成,检出率及准确率均为100%。【结论】本研究建立的褐飞虱属近似种的dmTqPCR鉴定方法可以用于褐飞虱、伪褐飞虱和拟褐飞虱的快速分类鉴定,有利于灯下褐飞虱的精准测报。; 关键词褐飞虱伪褐飞虱拟褐飞虱 ITS1 直接多重Taqman qPCR; Keywords Nilaparvata lugens Nilaparvata muiri Nilaparvata bakeri ITS1 direct multiple Taqman qPCR; 分类号 S435.112.3 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测方法的建立被引量：2: 6; 作者袁旦一金亚南李玲何谦胡林李晓琪孙志勇; 机构四川纳比生物科技有限公司杭州优思达生物技术有限公司; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1905-1913,共9页; 基金 2015年度勃林格中国猪圆环病毒病研究进步奖项目; 文摘拟建立一种简便、快速、准确的现场快速分子检测方法,为猪圆环病毒2型（PCV2）疾病的生物安全防控提供技术支撑。采用交叉引物恒温扩增技术原理,根据PCV2 Cap基因设计一组交叉扩增引物,用构建的Cap基因重组质粒作为标准DNA模板,对反应体系的引物浓度、Betaine、MgSO4、dNTP、Bst酶、反应温度和时间进行优化,并结合核酸试纸条技术,建立可视化检测PCV2的交叉引物恒温扩增检测方法（PCV2-CPA）。用建立的CPA检测方法、常规PCR和ELISA方法检测经IFA方法标定的127份临床样品,比较这些方法的敏感性、特异性和符合率。结果显示,最佳反应体系为引物F3、B3各0.5μmol·L-1,CPR 1μmol·L-1,DF5F0.7μmol·L-1、DF5B0.9μmol·L-1,Betaine 0.075mol·L-1,MgSO43mol·L-1,dNTPs 0.4mmol·L-1,Bst DNA聚合酶9.6U。建立的检测方法58℃扩增50min,检测限可达7.6拷贝·μL-1,灵敏度是常规PCR的10倍;与PCV1、PRV、CSFV、PRRSV、PEDV、TGEV和RV无交叉反应。三种检测方法的敏感性分别为78.08%～94.52%,特异性为87.03%～92.59%,符合率为84.25%～91.34%,ROC曲线图显示三种检测方法中,CPA检测方法效能最优。建立的猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测方法不需要PCR仪,仅一台水浴锅或金属浴即可完成病毒DNA的扩增,密闭的核酸检测试纸条使结果判定直观、客观,且可有效避免气溶胶污染,可应用于猪圆环病毒2型的现场快速检测。; 关键词猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测气溶胶污染生物安全防控; Keywords porcine circovirus 2 cross primer isothermal amplification detection aerosol pollution biosecurity control; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	CPA恒温扩增技术在口岸蚊媒携带登革病毒检测中的应用	宋凌浩符丽媛赵志田狄彪尤其敏	《西南林学院学报》	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	交叉引物恒温扩增技术快速检测结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌系统的建立	黄文滨陈丽萍张望肖婷张满娥吴定昌	《中国防痨杂志》 CAS CSCD	2023	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	交叉引物恒温扩增法检测甲型H1N1流感病毒及临床应用	白志军胡林李魁彪钟华燕陈艺韵鲁恩洁狄飚	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	10	在线阅读下载PDF 职称材料
4	慢性肝病和肝癌患者血液中纳米细菌的检测	朱明利娄国强罗英李超丹厉小玉刘寿荣周俊胡林	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	直接多重TaqMan qPCR方法快速鉴定褐飞虱属3种飞虱	罗举杨素文贝文勇余军伟唐健刘淑华	《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪圆环病毒2型交叉引物恒温扩增检测方法的建立	袁旦一金亚南李玲何谦胡林李晓琪孙志勇	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料