骨髓间充质干细胞对免疫损伤卵巢的修复作用 被引量：9

1

作者 李威娜 谢琪璇 +5 位作者 秦俊文 黄伟 叶绍恩 罗峰 张春雪 肖銮娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期825-829,共5页

目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨... 目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS。MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制。结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少。结论腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 卵巢 免疫损伤 修复

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Galectin-3在雌性小鼠生殖系统中的表达及脂多糖的影响 被引量：6

2

作者 禹艳红 潘善培 +2 位作者 谢琪璇 关艺青 黄丹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1409-1414,共6页

目的:研究galectin-3在雌性小鼠生殖系统的表达情况,利用小鼠生殖道感染模型研究galectin-3在女性生殖道感染过程中的可能作用。方法:采用RT-PCR的方法初步鉴定小鼠生殖系统各组织中的galectin-3 mRNA的表达水平,通过阴道黏膜注射LPS不... 目的:研究galectin-3在雌性小鼠生殖系统的表达情况,利用小鼠生殖道感染模型研究galectin-3在女性生殖道感染过程中的可能作用。方法:采用RT-PCR的方法初步鉴定小鼠生殖系统各组织中的galectin-3 mRNA的表达水平,通过阴道黏膜注射LPS不完全弗氏佐剂乳液建立小鼠的生殖道感染模型,免疫组化对ga-lectin-3蛋白在雌性小鼠生殖系统的表达进行定位分析。结果:在正常小鼠的子宫、阴道、输卵管及卵巢中都能够检测到galectin-3 mRNA的表达。Galectin-3蛋白主要表达在生殖道黏膜的上皮细胞表面和子宫腺。经LPS刺激后,galectin-3蛋白在阴道、子宫颈及子宫体的表达水平提高(P<0.05),尤其是刺激后24h子宫颈中galectin-3的表达量增加最多(P<0.01)。结论:LPS刺激能增加小鼠生殖道中galectin-3的表达,galectin-3在生殖道抗感染中可能发挥重要的作用。 展开更多

关键词 半乳糖凝集素3 生殖道 脂多糖类

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抗草甘膦转基因大豆对雄鼠睾丸生殖细胞与精子的影响 被引量：2

3

作者 芦春斌 戚青林 +2 位作者 周文 蔡娟 刘标 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期350-354,共5页

以雄性昆明鼠为实验动物,新生小鼠断乳后喂食抗草甘膦转基因大豆饲料,分别在30、60、90、120d取其睾丸和附睾,采用吉姆萨染色(Giemsa)检测小鼠睾丸组织早期精细胞微核率变化,并以荧光素标记的豌豆凝集素(FITC-PSA)检测小鼠附睾精子顶体... 以雄性昆明鼠为实验动物,新生小鼠断乳后喂食抗草甘膦转基因大豆饲料,分别在30、60、90、120d取其睾丸和附睾,采用吉姆萨染色(Giemsa)检测小鼠睾丸组织早期精细胞微核率变化,并以荧光素标记的豌豆凝集素(FITC-PSA)检测小鼠附睾精子顶体完整率及顶体反应率变化。结果表明:与对照组相比,30、60、90、120d喂食抗草甘膦转基因大豆对小鼠睾丸组织早期精细胞微核率均无统计学差异,与之对应,30、60、90、120d喂食抗草甘膦转基因大豆对小鼠精子顶体完整率及反应率也无显著变化。研究表明:转基因大豆饲料30、60、90、120d喂食不会对小鼠睾丸组织染色体结构造成损伤,也未对小鼠精子的顶体形态结构和精子顶体反应能力造成影响。 展开更多

关键词 转基因大豆 小鼠 精子 微核 顶体完整率 顶体反应

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巴斯德毕赤酵母高密度发酵表达rHC MVp的研究

4

作者 余巍 谢琪璇 +4 位作者 潘善培 肖銮娟 熊波 李文星 董志炜 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期162-167,共6页

目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵。方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS -PAGE结果分... 目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵。方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS -PAGE结果分析不同条件、不同诱导时间对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响,并依据优化条件进行高密度发酵。结果:摇瓶培养时,转化子在体积分数1%的甲醇pH 6 0的条件下诱导72h ,A6 0 0 (菌体密度)为4 5 2 ,目的蛋白表达量达到10 2mg/L。2L发酵罐进行了高密度发酵,经体积分数1%甲醇诱导4 8h ,最终A6 0 0 (菌体密度)达到12 4 ,每升发酵液中含目的蛋白5 7 2 1mg。结论:通过条件优化,进行高密度发酵,获得大量的rHCMVp。 展开更多

关键词 重组人巨细胞病毒嵌合肽 巴斯德毕赤酵母 高密度 发酵

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论大学理念与学校潜在培养能力的激发 被引量：1

5

作者 邹飞雁 《当代教育论坛（宏观教育研究）》 2006年第7期42-44,共3页

关键词 大学理念 师资条件 学生数量 硬件设施 基本国情 教学任务 学校培养能力

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小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究 被引量：3

6

作者 董志炜 潘善培 +4 位作者 谢琪璇 肖銮娟 孙彩军 余巍 何柳媚 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期661-667,共7页

　目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系... 　目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。 展开更多

关键词 卵透明带 避孕疫苗 黏膜免疫 DNA疫苗 卵巢功能紊乱

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重组IL-5质粒pVAX1-mIL-5增强卵透明带DNA避孕疫苗黏膜免疫效能 被引量：1

7

作者 柯琼 潘善培 +4 位作者 谢琪璇 肖銮娟 何柳媚 董志炜 高彦茹 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期157-163,171,共8页

目的:探讨利用白细胞介素5作为DNA疫苗佐剂增强黏膜免疫反应,提高卵透明带DNA避孕疫苗抗生育效能的可行性。方法:用pVAX1-m IL-5和卵透明带避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒口服免疫雌性小鼠,共设3组,每组6只。A组单独用50μg pVAX1-... 目的:探讨利用白细胞介素5作为DNA疫苗佐剂增强黏膜免疫反应,提高卵透明带DNA避孕疫苗抗生育效能的可行性。方法:用pVAX1-m IL-5和卵透明带避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒口服免疫雌性小鼠,共设3组,每组6只。A组单独用50μg pVAX1-pZP3α免疫;B组用疫苗加等量的pVAX1-m IL-5质粒为佐剂共免疫;C组为空白对照组。每组动物接受3次免疫(第0、3、6周)。采用ELISA法检测小鼠血清及阴道冲洗液中抗pZP3 IgA抗体。第10周雌雄交配,统计雌鼠怀孕情况;第16周取双侧卵巢作石蜡连续切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:B组全部小鼠血清抗体呈阳性反应,A组只有3只小鼠血清抗体呈阳性反应,且B组小鼠的抗体滴度水平均高于A组小鼠;抗生育率B组小鼠为100%,A组小鼠为50%,C组小鼠为0%,2检验分析结果表明各组间的差异有统计学意义,抗生育效能与交配时抗pZP3 IgA抗体的强度有关;卵巢切片的组织病理学观察结果表明,有抗生育效能的小鼠卵巢组织可观察到各级形态正常的卵泡,无淋巴细胞浸润,与对照组及无抗生育效能的小鼠卵巢结构无差异。结论:利用重组质粒pVAX1-m IL-5与卵透明带DNA疫苗共免疫小鼠,能增强疫苗诱发黏膜免疫反应的能力,提高卵透明带DNA避孕疫苗的抗生育率;没有观察到小鼠卵巢组织结构发生病理学改变。 展开更多

关键词 白细胞介素5 DNA疫苗 卵透明带 佐剂 黏膜免疫

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多重PCR检测转基因水稻的转基因成分 被引量：26

8

作者 魏霜 陈贞 +3 位作者 芦春斌 马骏 白卫滨 吴希阳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期159-162,共4页

以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR... 以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明:建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分,检测过程简便、特异性好。 展开更多

关键词 转基因检测 水稻 七重PCR

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抗草甘膦转基因大豆饲料对雄性小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响 被引量：12

9

作者 芦春斌 张伟 刘标 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期291-294,共4页

以雄性昆明鼠为动物模型,对亲本(F0)和子一代(F1)短期(30 d)及长期(90 d)喂食抗草甘膦转基因大豆饲料后,取其脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果表明:短期喂食实验过程中,在0、2、7、14和30 d取样时,转基因大豆饲料对亲本(F0)实验... 以雄性昆明鼠为动物模型,对亲本(F0)和子一代(F1)短期(30 d)及长期(90 d)喂食抗草甘膦转基因大豆饲料后,取其脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果表明:短期喂食实验过程中,在0、2、7、14和30 d取样时,转基因大豆饲料对亲本(F0)实验的雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均无显著性影响(P>0.05),在长期(90 d)喂食实验过程中,抗草甘膦转基因大豆饲料对亲本(F0)小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖也无显著影响(P>0.05)。同样,在30 d的短期和90 d的长期喂食实验过程中,抗草甘膦转基因大豆饲料对子一代(F1)雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖也均无显著抑制作用(P>0.05)。表明短期(30 d)及长期(90 d)喂食含抗草甘膦转基因大豆饲料对亲本及子一代雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均无显著性影响,且无遗传积累效应。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 饲料 雄性小鼠 MTT 脾细胞增殖

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ITR缺陷对AAV病毒包装与感染力的影响 被引量：6

10

作者 曹佐武 林羿 +1 位作者 程龙球 邹飞雁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期224-230,共7页

腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质... 腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质粒包装病毒的效率明显比ITR完整的质粒低.用这两种AAV病毒感染293细胞、HeLa细胞和小细胞肺癌细胞NCI H446细胞,显示两个ITR完整的AAV病毒感染细胞的能力明显比一个ITR缺失的病毒强.说明ITR缺失对AAV病毒的包装和感染力都有明显的影响.因此,筛选两个ITR完整的AAV载体质粒,并稳定其基因组的结构,对提高病毒生产的产量和增强病毒的感染力都有显著的价值. 展开更多

关键词 腺相关病毒 倒转末端重复序列 病毒包装

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靶向CK1α基因shRNA表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响 被引量：2

11

作者 邹飞雁 姜少杰 +2 位作者 刘晓 李俐娟 刘婉君 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期101-107,共7页

通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase1α,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载... 通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase1α,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载体pGenesil-NK,分别转染A549细胞,用G418筛选出阳性克隆,得到A549-S1、A549-S2、A549-S3及A549-NK细胞株.再通过RT-PCR和W estern b lotting方法,分别检测了CK1α基因的mRNA和蛋白的表达情况.比对A549-NK,A549-S1、A549-S2及A549-S3 mRNA水平的抑制率分别为84.3%、57.9%和61.8%(P<0.001);蛋白质水平的抑制率分别为78.4%、51.3%和59.9%(P<0.001).选择干扰效率较好的A549-S1细胞进行后续实验.细胞计数绘制生长曲线、CCK-8法观察细胞增殖状况和流式细胞仪检测细胞所处周期时相来分析转染CK1α基因shRNA表达载体对A549细胞生长增殖的影响.实验结果显示,A549-S1与A549和A549-NK两对照组的平均值比较,细胞计数抑制率为(37.7±2.2)%(P<0.01);CCK-8抑制率为(26.2±1.5)%(P<0.05);S期减少(75.0±4.0)%(P<0.01);G2/M期减少(45.2±5.4)%(P<0.05).因此,转染CK1α基因shRNA表达载体可导致CK1α基因的沉默,明显抑制A549细胞的生长和增殖. 展开更多

关键词 酪蛋白激酶1 αA549 RNA干扰 细胞增殖

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重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用 被引量：1

12

作者 谢琪璇 史卫卫 +4 位作者 张韫 李文星 张春雪 肖銮娟 潘善培 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期746-750,共5页

目的:观察重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用。方法:正常生育力人精子经过获能后,分别用BSA、孕酮和含不同浓度的重组人ZP3蛋白的培养液共孵育,诱导精子顶体反应,对实验组和对照组的精子的顶体发生状态用考马斯亮蓝... 目的:观察重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用。方法:正常生育力人精子经过获能后,分别用BSA、孕酮和含不同浓度的重组人ZP3蛋白的培养液共孵育,诱导精子顶体反应,对实验组和对照组的精子的顶体发生状态用考马斯亮蓝染色法进行评价。结果:精子与培养液共孵育30 min后,rhZP3组与BSA组之间差异有显著性(P<0.05),顶体反应率随rhZP3质量浓度增加而升高。结论:重组人ZP3蛋白对人精子顶体反应有显著的诱导效应,且在一定范围内与质量浓度成正相关,重组人ZP3蛋白具有发展精子顶体反应试剂盒的潜能。 展开更多

关键词 重组人透明带蛋白 精子 顶体反应

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糖蛋白PAGE分离后的糖基显色法 被引量：7

13

作者 曹佐武 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第5期87-89,共3页

鸡卵清蛋白通过SDS-PAGE分离后,用过碘酸-希夫(PAS)显色法可以使卵清蛋白显红色,而用糖苷酶去除卵清蛋白的糖基可以去除相应的红色。考马斯亮兰染色结果显示,去糖基后的卵清蛋白分子量略有减小。可见,PAS可方便地使糖蛋白呈现红色。

关键词 糖蛋白 过碘酸-希夫(PAS)显色法

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密码子植物化的小鼠ZP3蛋白基因人工合成 被引量：1

14

作者 芦春斌 《种子》 CSCD 北大核心 2009年第5期21-23,共3页

对小鼠ZP 3蛋白基因cDNA序列进行生物信息学分析,并将其核心区分成两部分进行分部合成。设计了多对特异性的重叠引物,采用多步PCR方法合成了植物化的小鼠ZP 3蛋白基因的不同片段。再经重叠PCR技术将这两段DNA连接在一起,构成完整的ZP 3... 对小鼠ZP 3蛋白基因cDNA序列进行生物信息学分析,并将其核心区分成两部分进行分部合成。设计了多对特异性的重叠引物,采用多步PCR方法合成了植物化的小鼠ZP 3蛋白基因的不同片段。再经重叠PCR技术将这两段DNA连接在一起,构成完整的ZP 3基因的编码区。DNA序列测定人工合成的基因为植物化的ZP 3基因。 展开更多

关键词 小鼠ZP3蛋白基因 重叠PCR 合成 植物反应器

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金雀异黄素对SGC-7901胃癌细胞超微结构及极光激酶A基因表达的影响

15

作者 邹飞雁 刘晓 +3 位作者 刘婉君 王秋兰 晏光荣 白顺 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期200-204,共5页

应用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)技术、Real-time PCR及Western blotting方法,分别检测金雀异黄素(genistein)对SGC-7901胃癌细胞超微结构、Aurora-A基因mRNA和蛋白表达的影响。AFM扫描显示,经20μg/mLgenistein处理SGC-... 应用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)技术、Real-time PCR及Western blotting方法,分别检测金雀异黄素(genistein)对SGC-7901胃癌细胞超微结构、Aurora-A基因mRNA和蛋白表达的影响。AFM扫描显示,经20μg/mLgenistein处理SGC-7901胃癌细胞48 h,细胞的超微结构呈现凋亡形态特征改变;Aurora-A表达分析,5μg/mL组、10μg/mL组和20μg/mL组与对照组比较,其mRNA表达量分别下降(31.6±0.02)%、(38.8±0.04)%和(59.9±0.02)%,其中5μg/mL组与10μg/mL组间比较无显著性差异(P>0.05),其余组间比较均有显著性差异(P<0.05);其蛋白表达量分别下降(26.8±0.04)%、(33.0±0.10)%和(48.5±0.09)%,组间比较均有显著性差异(P<0.05)。由此推断金雀异黄素诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的分子机制可能涉及极光激酶A mRNA及蛋白表达下调。 展开更多

关键词 金雀异黄素 SGC-7901胃癌细胞 原子力显微镜 凋亡 极光激酶A

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丝瓜络对实验性高血脂大鼠的降血脂效应

16

作者 李菁 付咏梅 +3 位作者 朱伟杰 张穗梅 严玉霞 颜亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1578-1578,共1页

关键词 丝瓜络 实验 高血脂 大鼠 降血脂效应 中药

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纯氧与空气复苏对缺氧新生大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

17

作者 陈雷 王自能 +1 位作者 禹艳红 李雅兰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期275-279,共5页

【目的】为了比较纯氧与空气复苏对缺氧新生大鼠的复苏效果,探讨新生大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达在缺氧复苏中的作用。【方法】采用SD新生大鼠建立缺氧模型,并分组进行纯氧与空气复苏。实验分为正常对照组(无预缺氧和复氧实验)... 【目的】为了比较纯氧与空气复苏对缺氧新生大鼠的复苏效果,探讨新生大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达在缺氧复苏中的作用。【方法】采用SD新生大鼠建立缺氧模型,并分组进行纯氧与空气复苏。实验分为正常对照组(无预缺氧和复氧实验)、纯氧复苏组(PO组)和空气复苏组(RA组)。取肝组织,HE染色光镜观察肝组织病理变化,TUNEL法测定肝细胞凋亡指数,免疫组化检测肝组织Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。【结果】与正常对照组相比,PO组可见肝细胞肿胀,肝细胞有部分细胞器缺失,肝细胞呈明显的片状坏死,有炎性细胞浸润,肝细胞索排列紊乱。RA组肝细胞索排列基本正常,肝细胞损伤程度,炎细胞浸润及肝细胞肿胀都较PO组轻。PO24h及72h亚组的细胞凋亡指数分别为(11.2±3.2)%和(9.2±1.0)%,RA24h及72h亚组的细胞凋亡指数分别为(9.0±2.9)%和(7.4±1.9)%,均低于相应的PO各亚组(P<0.01)。PO24h及72h亚组Bcl-2蛋白表达(11.55±1.06)%和(10.49±1.03)%,均低于对应的RA各亚组,RA24h及72h亚组Bcl-2蛋白表达分别为(13.06±2.35)%和(11.71±1.69)%。PO24h及72h亚组Bax蛋白表达分别为(4.81±1.13)%和(4.62±0.79)%,均高于对应的RA各亚组,RA24h及72h亚组Bax蛋白表达分别为(4.08±0.31)%和(3.88±0.48)%。PO组与RA组的细胞凋亡指数、Bcl-2及Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax比值差异具有统计学意义(P<0.01),各组内亚组之间差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】纯氧复苏较空气复苏后新生大鼠肝细胞的凋亡更严重。纯氧复苏促进Bax基因的表达上调,空气复苏可使凋亡抑制基因Bcl-2表达上调,暗示纯氧复苏对新生大鼠肝的损伤要重于空气复苏。 展开更多

关键词 细胞凋亡 肝 复苏 缺氧 新生大鼠

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转基因玉米的七重PCR鉴定方法

18

作者 陈贞 芦春斌 +3 位作者 杨梦婕 马骏 白卫斌 吴希阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期161-164,共4页

以玉米内源基因IVR、外源抗除草剂基因(BAR、PAT)、抗虫基因Cry1Ab、筛选基因NPTII、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测的目的片段,分别设计了7对引物,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了玉米转基因成分七重PCR检测体系。结果表... 以玉米内源基因IVR、外源抗除草剂基因(BAR、PAT)、抗虫基因Cry1Ab、筛选基因NPTII、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测的目的片段,分别设计了7对引物,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了玉米转基因成分七重PCR检测体系。结果表明,建立的七重PCR体系用于同时检测内源基因和转基因成分是可行的,检测方法效率高、稳定性好。 展开更多

关键词 玉米 转基因成分 七重PCR检测

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重组质粒pPIC9K-oLHαhCGβCTP的构建及在毕赤酵母中的表达 被引量：4

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作者 王桂玉 刘润梅 +1 位作者 潘善培 李伟雄 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期175-178,共4页

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐ... 将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐＰＩＣ９Ｋ质粒中，用电打孔方法转入巴氏毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ），并获高效表达．表达蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明分子量约为２８ｋＤ．２．５Ｌ发酵罐大量培养，产量可达２．０ｇ／Ｌ． 展开更多

关键词 HCG PCR 部分重叠 巴氏毕赤酵母 基因表达

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