睾丸免疫防御机制与新冠病毒是否损伤男性生殖力的思考

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作者 朱伟杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1340-1344,共5页

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2,SARS-Co V-2;简称"新冠病毒")感染引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19),已严重危害人类身体健康。该病毒是否损害男性生殖力近期受到... 新型冠状病毒(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2,SARS-Co V-2;简称"新冠病毒")感染引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19),已严重危害人类身体健康。该病毒是否损害男性生殖力近期受到研究重视,但目前认识尚在初始阶段。男性生殖的前提是睾丸具有正常结构与功能。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 睾丸 精子 免疫 生殖健康

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骨髓间充质干细胞对免疫损伤卵巢的修复作用 被引量：9

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作者 李威娜 谢琪璇 +5 位作者 秦俊文 黄伟 叶绍恩 罗峰 张春雪 肖銮娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期825-829,共5页

目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨... 目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS。MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制。结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少。结论腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 卵巢 免疫损伤 修复

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丝瓜提取物抗氧化活性的研究 被引量：7

3

作者 潘永勤 李菁 +1 位作者 朱伟杰 贺惠娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2086-2089,共4页

目的:分离提取丝瓜抗氧化活性成分,观察其抗氧化效应。方法:应用溶剂萃取法及葡聚糖凝胶柱层析法分离提取丝瓜抗氧化活性物质,通过测定不同提取物的抗氧化能力,筛选出丝瓜的抗氧化活性成分。结果:由溶剂萃取法获得丝瓜提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ... 目的:分离提取丝瓜抗氧化活性成分,观察其抗氧化效应。方法:应用溶剂萃取法及葡聚糖凝胶柱层析法分离提取丝瓜抗氧化活性物质,通过测定不同提取物的抗氧化能力,筛选出丝瓜的抗氧化活性成分。结果:由溶剂萃取法获得丝瓜提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ,其中提取物Ⅲ抑制DPPH.和OH.自由基效果显著。提取物Ⅲ经柱层析进一步分离,得到A、B、C、D、E 5种组分,其中组分D、E抑制DPPH.和OH.自由基效果最显著,经鉴定提取物符合黄酮类物质特性。结论:丝瓜具有清除自由基的作用,且主要作用物质为黄酮类物质。 展开更多

关键词 丝瓜 抗氧化 黄酮类 自由基

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Galectin-3在雌性小鼠生殖系统中的表达及脂多糖的影响 被引量：6

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作者 禹艳红 潘善培 +2 位作者 谢琪璇 关艺青 黄丹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1409-1414,共6页

目的:研究galectin-3在雌性小鼠生殖系统的表达情况,利用小鼠生殖道感染模型研究galectin-3在女性生殖道感染过程中的可能作用。方法:采用RT-PCR的方法初步鉴定小鼠生殖系统各组织中的galectin-3 mRNA的表达水平,通过阴道黏膜注射LPS不... 目的:研究galectin-3在雌性小鼠生殖系统的表达情况,利用小鼠生殖道感染模型研究galectin-3在女性生殖道感染过程中的可能作用。方法:采用RT-PCR的方法初步鉴定小鼠生殖系统各组织中的galectin-3 mRNA的表达水平,通过阴道黏膜注射LPS不完全弗氏佐剂乳液建立小鼠的生殖道感染模型,免疫组化对ga-lectin-3蛋白在雌性小鼠生殖系统的表达进行定位分析。结果:在正常小鼠的子宫、阴道、输卵管及卵巢中都能够检测到galectin-3 mRNA的表达。Galectin-3蛋白主要表达在生殖道黏膜的上皮细胞表面和子宫腺。经LPS刺激后,galectin-3蛋白在阴道、子宫颈及子宫体的表达水平提高(P<0.05),尤其是刺激后24h子宫颈中galectin-3的表达量增加最多(P<0.01)。结论:LPS刺激能增加小鼠生殖道中galectin-3的表达,galectin-3在生殖道抗感染中可能发挥重要的作用。 展开更多

关键词 半乳糖凝集素3 生殖道 脂多糖类

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小鼠早期胚胎的全胚原位杂交技术 被引量：2

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作者 肖銮娟 谢琪璇 +7 位作者 高桥祐司 秋山泰身 董少男 黄卉卉 罗峰 叶绍恩 张春雪 秦俊文 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期620-623,共4页

目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL... 目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中。结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测。 展开更多

关键词 小鼠 早期胚胎 全胚原位杂交 血管扩张刺激磷蛋白(VASP) 白细胞介素1受体2(IL1R2)

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抗草甘膦转基因大豆对雄鼠睾丸生殖细胞与精子的影响 被引量：2

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作者 芦春斌 戚青林 +2 位作者 周文 蔡娟 刘标 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期350-354,共5页

以雄性昆明鼠为实验动物,新生小鼠断乳后喂食抗草甘膦转基因大豆饲料,分别在30、60、90、120d取其睾丸和附睾,采用吉姆萨染色(Giemsa)检测小鼠睾丸组织早期精细胞微核率变化,并以荧光素标记的豌豆凝集素(FITC-PSA)检测小鼠附睾精子顶体... 以雄性昆明鼠为实验动物,新生小鼠断乳后喂食抗草甘膦转基因大豆饲料,分别在30、60、90、120d取其睾丸和附睾,采用吉姆萨染色(Giemsa)检测小鼠睾丸组织早期精细胞微核率变化,并以荧光素标记的豌豆凝集素(FITC-PSA)检测小鼠附睾精子顶体完整率及顶体反应率变化。结果表明:与对照组相比,30、60、90、120d喂食抗草甘膦转基因大豆对小鼠睾丸组织早期精细胞微核率均无统计学差异,与之对应,30、60、90、120d喂食抗草甘膦转基因大豆对小鼠精子顶体完整率及反应率也无显著变化。研究表明:转基因大豆饲料30、60、90、120d喂食不会对小鼠睾丸组织染色体结构造成损伤,也未对小鼠精子的顶体形态结构和精子顶体反应能力造成影响。 展开更多

关键词 转基因大豆 小鼠 精子 微核 顶体完整率 顶体反应

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巴斯德毕赤酵母高密度发酵表达rHC MVp的研究

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作者 余巍 谢琪璇 +4 位作者 潘善培 肖銮娟 熊波 李文星 董志炜 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期162-167,共6页

目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵。方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS -PAGE结果分... 目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵。方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS -PAGE结果分析不同条件、不同诱导时间对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响,并依据优化条件进行高密度发酵。结果:摇瓶培养时,转化子在体积分数1%的甲醇pH 6 0的条件下诱导72h ,A6 0 0 (菌体密度)为4 5 2 ,目的蛋白表达量达到10 2mg/L。2L发酵罐进行了高密度发酵,经体积分数1%甲醇诱导4 8h ,最终A6 0 0 (菌体密度)达到12 4 ,每升发酵液中含目的蛋白5 7 2 1mg。结论:通过条件优化,进行高密度发酵,获得大量的rHCMVp。 展开更多

关键词 重组人巨细胞病毒嵌合肽 巴斯德毕赤酵母 高密度 发酵

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论大学理念与学校潜在培养能力的激发 被引量：1

8

作者 邹飞雁 《当代教育论坛（宏观教育研究）》 2006年第7期42-44,共3页

关键词 大学理念 师资条件 学生数量 硬件设施 基本国情 教学任务 学校培养能力

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小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究 被引量：3

9

作者 董志炜 潘善培 +4 位作者 谢琪璇 肖銮娟 孙彩军 余巍 何柳媚 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期661-667,共7页

　目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系... 　目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。 展开更多

关键词 卵透明带 避孕疫苗 黏膜免疫 DNA疫苗 卵巢功能紊乱

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重组IL-5质粒pVAX1-mIL-5增强卵透明带DNA避孕疫苗黏膜免疫效能 被引量：1

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作者 柯琼 潘善培 +4 位作者 谢琪璇 肖銮娟 何柳媚 董志炜 高彦茹 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期157-163,171,共8页

目的:探讨利用白细胞介素5作为DNA疫苗佐剂增强黏膜免疫反应,提高卵透明带DNA避孕疫苗抗生育效能的可行性。方法:用pVAX1-m IL-5和卵透明带避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒口服免疫雌性小鼠,共设3组,每组6只。A组单独用50μg pVAX1-... 目的:探讨利用白细胞介素5作为DNA疫苗佐剂增强黏膜免疫反应,提高卵透明带DNA避孕疫苗抗生育效能的可行性。方法:用pVAX1-m IL-5和卵透明带避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒口服免疫雌性小鼠,共设3组,每组6只。A组单独用50μg pVAX1-pZP3α免疫;B组用疫苗加等量的pVAX1-m IL-5质粒为佐剂共免疫;C组为空白对照组。每组动物接受3次免疫(第0、3、6周)。采用ELISA法检测小鼠血清及阴道冲洗液中抗pZP3 IgA抗体。第10周雌雄交配,统计雌鼠怀孕情况;第16周取双侧卵巢作石蜡连续切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:B组全部小鼠血清抗体呈阳性反应,A组只有3只小鼠血清抗体呈阳性反应,且B组小鼠的抗体滴度水平均高于A组小鼠;抗生育率B组小鼠为100%,A组小鼠为50%,C组小鼠为0%,2检验分析结果表明各组间的差异有统计学意义,抗生育效能与交配时抗pZP3 IgA抗体的强度有关;卵巢切片的组织病理学观察结果表明,有抗生育效能的小鼠卵巢组织可观察到各级形态正常的卵泡,无淋巴细胞浸润,与对照组及无抗生育效能的小鼠卵巢结构无差异。结论:利用重组质粒pVAX1-m IL-5与卵透明带DNA疫苗共免疫小鼠,能增强疫苗诱发黏膜免疫反应的能力,提高卵透明带DNA避孕疫苗的抗生育率;没有观察到小鼠卵巢组织结构发生病理学改变。 展开更多

关键词 白细胞介素5 DNA疫苗 卵透明带 佐剂 黏膜免疫

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Fas相关因子1的研究进展 被引量：1

11

作者 董少男 谢琪璇 +2 位作者 秋山泰身 高桥祐司 秦俊文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期565-569,576,共6页

Fas相关因子1（Fas-associated factor 1,FAF1）是一种细胞内蛋白质,在不同细胞中可存在于细胞核、核仁及核周细胞质中。FAF1是一种进化上保守的蛋白质,约74 kD,由650个氨基酸组成,含有多个功能结构域,包括Fas作用结构域（Fas-interacti... Fas相关因子1（Fas-associated factor 1,FAF1）是一种细胞内蛋白质,在不同细胞中可存在于细胞核、核仁及核周细胞质中。FAF1是一种进化上保守的蛋白质,约74 kD,由650个氨基酸组成,含有多个功能结构域,包括Fas作用结构域（Fas-interacting domain,FID）、 展开更多

关键词 Fas相关因子1 表达与功能 信号通路 肿瘤

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多重PCR检测转基因水稻的转基因成分 被引量：26

12

作者 魏霜 陈贞 +3 位作者 芦春斌 马骏 白卫滨 吴希阳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期159-162,共4页

以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR... 以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明:建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分,检测过程简便、特异性好。 展开更多

关键词 转基因检测 水稻 七重PCR

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诺美孕酮促进大鼠子宫内膜异位症细胞凋亡及其作用机制 被引量：5

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作者 郝树芳 周娴颖 +6 位作者 谢淑武 周洁芸 郭湘洁 李钊 桂幼伦 朱伟杰 朱焰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期425-429,共5页

目的探讨诺美孕酮促进实验性大鼠子宫内膜异位症模型细胞凋亡及其作用机制。方法外科手术法建立大鼠子宫内膜异位症模型;HE染色观察异位内膜病理组织学改变;ELISA测定血清中抗子宫内膜抗体(EMAb)水平;West-ern blot检测异位内膜组织中Bc... 目的探讨诺美孕酮促进实验性大鼠子宫内膜异位症模型细胞凋亡及其作用机制。方法外科手术法建立大鼠子宫内膜异位症模型;HE染色观察异位内膜病理组织学改变;ELISA测定血清中抗子宫内膜抗体(EMAb)水平;West-ern blot检测异位内膜组织中Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达情况。结果诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg.kg-1)异位内膜萎缩,间质疏松,腺体数目明显减少,腺腔萎缩;诺美孕酮呈剂量依赖性地降低异位内膜厚度和EMAb的浓度;诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg.kg-1)异位内膜组织中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达升高、Bcl-2蛋白表达降低。结论诺美孕酮(0.5、1.5、15 mg.kg-1)可促进大鼠子宫异位内膜细胞凋亡,其作用机制可能与降低EMAb水平、上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达、激活细胞凋亡的内源性途径启动因子Caspase-9蛋白、激活执行因子Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 诺美孕酮 子宫内膜异位症 细胞凋亡 BCL-2 BAX CASPASE-9 CASPASE-3

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抗草甘膦转基因大豆饲料对雄性小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响 被引量：12

14

作者 芦春斌 张伟 刘标 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期291-294,共4页

以雄性昆明鼠为动物模型,对亲本(F0)和子一代(F1)短期(30 d)及长期(90 d)喂食抗草甘膦转基因大豆饲料后,取其脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果表明:短期喂食实验过程中,在0、2、7、14和30 d取样时,转基因大豆饲料对亲本(F0)实验... 以雄性昆明鼠为动物模型,对亲本(F0)和子一代(F1)短期(30 d)及长期(90 d)喂食抗草甘膦转基因大豆饲料后,取其脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果表明:短期喂食实验过程中,在0、2、7、14和30 d取样时,转基因大豆饲料对亲本(F0)实验的雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均无显著性影响(P>0.05),在长期(90 d)喂食实验过程中,抗草甘膦转基因大豆饲料对亲本(F0)小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖也无显著影响(P>0.05)。同样,在30 d的短期和90 d的长期喂食实验过程中,抗草甘膦转基因大豆饲料对子一代(F1)雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖也均无显著抑制作用(P>0.05)。表明短期(30 d)及长期(90 d)喂食含抗草甘膦转基因大豆饲料对亲本及子一代雄性小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均无显著性影响,且无遗传积累效应。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 饲料 雄性小鼠 MTT 脾细胞增殖

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ITR缺陷对AAV病毒包装与感染力的影响 被引量：6

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作者 曹佐武 林羿 +1 位作者 程龙球 邹飞雁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期224-230,共7页

腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质... 腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质粒包装病毒的效率明显比ITR完整的质粒低.用这两种AAV病毒感染293细胞、HeLa细胞和小细胞肺癌细胞NCI H446细胞,显示两个ITR完整的AAV病毒感染细胞的能力明显比一个ITR缺失的病毒强.说明ITR缺失对AAV病毒的包装和感染力都有明显的影响.因此,筛选两个ITR完整的AAV载体质粒,并稳定其基因组的结构,对提高病毒生产的产量和增强病毒的感染力都有显著的价值. 展开更多

关键词 腺相关病毒 倒转末端重复序列 病毒包装

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维生素D受体蛋白及其mRNA在人输卵管黏膜上皮的表达 被引量：5

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作者 张纯 朱伟杰 徐建平 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期170-175,共6页

目的:探讨人输卵管黏膜上皮维生素D受体(VDR)蛋白及其mRNA的表达。方法:30例输卵管标本取自具有正常妊娠生育史,因子宫肌瘤、子宫腺肌病等行腹式子宫切除术,一并切除输卵管的妇女。输卵管取材包括峡部、壶腹部和伞部,按子宫内膜组织学... 目的:探讨人输卵管黏膜上皮维生素D受体(VDR)蛋白及其mRNA的表达。方法:30例输卵管标本取自具有正常妊娠生育史,因子宫肌瘤、子宫腺肌病等行腹式子宫切除术,一并切除输卵管的妇女。输卵管取材包括峡部、壶腹部和伞部,按子宫内膜组织学分期分为增生早期组6例、增生中晚期组9例、分泌早期组7例、分泌中晚期组8例。应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测人输卵管黏膜上皮VDR的表达。结果:人输卵管黏膜上皮中检测到VDR蛋白及其mRNA表达。VDR蛋白主要表达于输卵管上皮细胞的细胞核中,部分间质平滑肌细胞核内亦有表达。相同时期各不同部位输卵管上皮细胞VDR蛋白表达无明显差别(P>0.05),随月经周期变化,各不同部位输卵管上皮细胞VDR蛋白表达发生改变,在增生早期和分泌中晚期较低,与之比较,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高(P<0.01),至分泌早期达最高值;壶腹部输卵管黏膜上皮组织VDR mRNA表达在增生早期和分泌中晚期较低,在增生中晚期和分泌早期明显增高(P<0.01)。结论:人输卵管黏膜上皮组织存在VDR蛋白及其mRNA表达,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高,且具有周期性变化。 展开更多

关键词 维生素D受体 人输卵管 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应

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靶向CK1α基因shRNA表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 邹飞雁 姜少杰 +2 位作者 刘晓 李俐娟 刘婉君 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期101-107,共7页

通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase1α,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载... 通过RNA干扰实验沉默酪蛋白激酶1α(Casein Kinase1α,CK1α)基因,探讨其对肺癌细胞A549生长增殖的影响.首先构建3个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体pGenesil-CK1α-S1、pGenesil-CK1α-S2、pGen-esil-CK1α-S3和一个无义错配载体pGenesil-NK,分别转染A549细胞,用G418筛选出阳性克隆,得到A549-S1、A549-S2、A549-S3及A549-NK细胞株.再通过RT-PCR和W estern b lotting方法,分别检测了CK1α基因的mRNA和蛋白的表达情况.比对A549-NK,A549-S1、A549-S2及A549-S3 mRNA水平的抑制率分别为84.3%、57.9%和61.8%(P<0.001);蛋白质水平的抑制率分别为78.4%、51.3%和59.9%(P<0.001).选择干扰效率较好的A549-S1细胞进行后续实验.细胞计数绘制生长曲线、CCK-8法观察细胞增殖状况和流式细胞仪检测细胞所处周期时相来分析转染CK1α基因shRNA表达载体对A549细胞生长增殖的影响.实验结果显示,A549-S1与A549和A549-NK两对照组的平均值比较,细胞计数抑制率为(37.7±2.2)%(P<0.01);CCK-8抑制率为(26.2±1.5)%(P<0.05);S期减少(75.0±4.0)%(P<0.01);G2/M期减少(45.2±5.4)%(P<0.05).因此,转染CK1α基因shRNA表达载体可导致CK1α基因的沉默,明显抑制A549细胞的生长和增殖. 展开更多

关键词 酪蛋白激酶1 αA549 RNA干扰 细胞增殖

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小鼠附睾特异性辅脂酶的原核表达及其抗体的制备 被引量：2

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作者 关艺青 禹艳红 +1 位作者 黄丹 潘善培 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期105-110,共6页

目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载... 目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载体通过PCR扩增成熟肽区段序列,重组到pET-21b原核表达载体上,经菌落PCR及测序鉴定后,转化到表达菌株E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达后用Tricine-SDS-PAGE和Western blotting检测重组meClps的表达。包涵体沉淀经浓度为2 mol/L尿素洗涤,Tricine-SDS-PAGE分离、染色、脱色,切下目的条带用生理盐水浸泡、磨碎与弗氏佐剂混合后免疫新西兰大白兔获取免疫血清,Western blotting检测抗体与meClps反应。结果:在原核表达系统成功重组表达meClps,目的蛋白主要以包涵体形式存在,制备了高效价的兔抗meClps抗体。结论:成功建立meClps的原核表达系统和获得兔抗meClps抗体。 展开更多

关键词 附睾 辅脂酶 原核表达 抗体

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广州市农贸市场中转基因大豆的检测 被引量：3

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作者 芦春斌 金庆敏 杨冬宇 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期680-684,共5页

对广州市农贸市场中销售的大豆进行转基因大豆的初步筛查,以检测在广州市场是否有转基因大豆流通和销售,为相关标识和监管提供实验依据。根据转基因大豆内参凝集素Lectin基因及外源基因CaMV35S、NOS及EPSPS基因序列设计4对引物,对收集... 对广州市农贸市场中销售的大豆进行转基因大豆的初步筛查,以检测在广州市场是否有转基因大豆流通和销售,为相关标识和监管提供实验依据。根据转基因大豆内参凝集素Lectin基因及外源基因CaMV35S、NOS及EPSPS基因序列设计4对引物,对收集的大豆样品提取其基因组DNA后进行PCR检测。结果在所收集的14份大豆样品中检测出1份转基因大豆,表明在广州农贸市场中存在转基因大豆,并在市场流通,提醒相关部门需根据国家规定需要加强监管力度。 展开更多

关键词 转基因大豆 检测 聚合酶链式反应

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小鼠骨髓间充质干细胞多潜能性的鉴定 被引量：1

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作者 黄伟 谢琪璇 +3 位作者 秦俊文 李威娜 张春雪 肖銮娟 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期136-140,共5页

目的:鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的多分化潜能的起因。方法:从成年小鼠骨髓股骨、胫骨中分离MSCs,并进行原代培养,分别于0、2、4、6、8、10 d提取总RNA,通过RT-PCR检测多潜能特征基因和相关因子、3个胚层特征基因的mRNA的表达情况... 目的:鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的多分化潜能的起因。方法:从成年小鼠骨髓股骨、胫骨中分离MSCs,并进行原代培养,分别于0、2、4、6、8、10 d提取总RNA,通过RT-PCR检测多潜能特征基因和相关因子、3个胚层特征基因的mRNA的表达情况,以判断MSCs的特性。结果:小鼠MSCs中表达多能性标记基因Oct-4和nanog,并且表达与多能性相关的转录因子Klf4和c-Myc。外胚层的nestin、中胚层的SM22a和内胚层的CYP51标记基因均有表达。结论:贴壁纯化的小鼠MSCs除了具有多能性的干细胞,还可能含有各胚层的原始细胞。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 原代细胞培养 RT-PCR 基因表达

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