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红斑丹毒丝菌nfliC-SpaA重组蛋白的制备及其免疫效果研究
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作者 雷妍丽 严晨光 +6 位作者 金云云 关洋 王孟月 王彦伟 黄玉欣 逄文强 田克恭 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期22-27,共6页
红斑丹毒丝菌血清型较多,目前商品化疫苗主要为活疫苗和灭活疫苗,血清型为1型和2型,尚无商品化亚单位疫苗。该研究旨在研究一种具有广谱免疫效果的重组蛋白。从临床分离株SerF5中获得的spaA基因,经密码子优化和截短后在spaA N端融合鼠... 红斑丹毒丝菌血清型较多,目前商品化疫苗主要为活疫苗和灭活疫苗,血清型为1型和2型,尚无商品化亚单位疫苗。该研究旨在研究一种具有广谱免疫效果的重组蛋白。从临床分离株SerF5中获得的spaA基因,经密码子优化和截短后在spaA N端融合鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛蛋白(nfliC),构建大肠埃希氏菌BL21(DE3)重组表达质粒,通过诱导nfliC-SpaA重组蛋白表达和镍柱亲和层析纯化后,分别在小鼠和仔猪上进行免疫效果试验。结果显示,获得的nfliC-SpaA重组蛋白在大肠埃希氏菌中呈可溶性表达,纯化后重组蛋白具有良好的免疫原性,可在小鼠和仔猪体内产生较高的体液免疫抗体水平,且对1型和2型红斑丹毒丝菌菌株混合攻毒的小鼠和仔猪均可提供完全保护。说明获得的nfliC-SpaA重组蛋白具有良好的免疫效果,为猪丹毒亚单位疫苗的开发提供了技术支持。 展开更多
关键词 红斑丹毒丝菌 重组蛋白 免疫保护 佐剂 亚单位疫苗
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新流二联灭活疫苗免疫后不同毒株抗原检测HI抗体效价比较
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作者 蒋玲艳 彭健波 +1 位作者 张在 王林果 《中国畜禽种业》 2025年第1期93-99,共7页
为了研究鸡新城疫和禽流感疫苗使用流行毒株免疫后,免疫鸡产生的抗体对经典毒株与流行毒株抗原的反应性,将90只肉鸡随机分成A组(1日龄首免)和B组(7日龄首免),用禽流感(H9亚型9.4.2.5a)-新城疫(基因Ⅶ型)二联灭活疫苗免疫鸡群,定期收集血... 为了研究鸡新城疫和禽流感疫苗使用流行毒株免疫后,免疫鸡产生的抗体对经典毒株与流行毒株抗原的反应性,将90只肉鸡随机分成A组(1日龄首免)和B组(7日龄首免),用禽流感(H9亚型9.4.2.5a)-新城疫(基因Ⅶ型)二联灭活疫苗免疫鸡群,定期收集血清,分别用H9 Re-2和9.4.2.5a毒株抗原测定禽流感HI抗体效价,用LaSota抗原和基因Ⅶ型抗原测定新城疫HI抗体效价。结果显示:A组鸡用经典毒株Re-2和流行毒株9.4.2.5a抗原检测的母源抗体效价均较高,1与7日龄9.4.2.5a抗原的HI抗体效价均显著低于Re-2抗原(P<0.05)。28日龄时9.4.2.5a抗原的抗体效价均显著高于Re-2抗原的抗体效价(P<0.05)。B组鸡1和7日龄时Re-2母源抗体效价显著高于9.4.2.5a(P<0.05)。28日龄时9.4.2.5a的抗体效价显著高于Re-2(P<0.05)。7日龄首免疫苗后,2种抗原的抗体效价离散度均表现为先降低后快速升高的趋势,9.4.2.5a的抗体离散度在7~42日龄段均低于Re-2。A组鸡在1~21日龄ND基因Ⅶ型抗原的HI抗体效价均低于LaSota抗原,且7日龄时差异显著(P<0.05)。21日龄时LaSota抗原的抗体阳性率比基因Ⅶ型高约33%,其余日龄无明显差异(P>0.05),且阳性率均在80%以上。B组鸡在7日龄时ND基因Ⅶ型HI抗体效价显著低于LaSota(P<0.05),其余日龄无明显差异(P>0.05)。可见,禽流感灭活疫苗免疫后的抗体效价,与检测抗原相关,免疫后抗体对不同抗原的反应差异显著,选用与疫苗匹配的抗原测定抗体可更好的评价疫苗效果;新城疫灭活疫苗免疫后产生的抗体对基因Ⅶ型和La Sota抗原均有较好的结合反应性,对经典毒株和流行毒株感染均有保护作用。 展开更多
关键词 禽流感 新城疫 抗体 免疫
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我国大规模高生物安全风险车间 防烟排烟设计关键点探讨
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作者 崔磊 王燕芹 +7 位作者 祁建城 姜一峰 赵刚 宋国亮 李晓斌 牛维乐 刘文利 梁磊 《暖通空调》 2023年第3期10-15,共6页
我国已经在大规模高生物安全风险车间的设计和建设领域取得了丰富的工程实践经验,并逐步完成了对发达国家的追跑和并跑,在部分领域处于相对领先状态。但由于消防、生物安全等领域关注点的差异,以及动物、人用产品的不同要求,导致不同领... 我国已经在大规模高生物安全风险车间的设计和建设领域取得了丰富的工程实践经验,并逐步完成了对发达国家的追跑和并跑,在部分领域处于相对领先状态。但由于消防、生物安全等领域关注点的差异,以及动物、人用产品的不同要求,导致不同领域防烟排烟的设计理念存在差异,对大规模高生物安全风险车间建设的进一步提升存在影响。本文通过对国内外生物安全设施(生产车间和实验室)相关规范和标准中对生物安全和消防关切要点的梳理与凝练,结合对实际工程案例的分析和总结,系统性地阐述了我国大规模高生物安全风险车间防烟排烟设计的相关要求,对防火分区划分、排烟系统、70℃防火阀和排烟防火阀设置等关键环节的设计进行重点讨论,并提出了针对性解决方案,为相关国家规范标准的编制(修订)提供建议,为同类项目的实施提供参考。 展开更多
关键词 大规模 高生物安全风险车间 消防 防烟排烟设计 规范
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两种伊维菌素注射液在家兔体内的生物等效性研究 被引量:1
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作者 李朋朋 张聪 +4 位作者 张晓会 周德刚 李召斌 张晓东 刘栓 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第1期43-46,共4页
为评价两种伊维菌素注射液在家兔体内的生物等效性,采用双周期交叉给药方式,将16只健康家兔随机分成2组,按5 mg/kg体重皮下单剂量注射两种伊维菌素注射液,使用HPLC法测定血浆中的伊维菌素,利用3P97药动软件计算主要药动学参数。结果显示... 为评价两种伊维菌素注射液在家兔体内的生物等效性,采用双周期交叉给药方式,将16只健康家兔随机分成2组,按5 mg/kg体重皮下单剂量注射两种伊维菌素注射液,使用HPLC法测定血浆中的伊维菌素,利用3P97药动软件计算主要药动学参数。结果显示,受试制剂和参比制剂的T_(max)分别为(26.45±8.62)h,(22.33±11.72)h;Cmax分别为(182.73±59.27)ng/m L,(166.77±65.25)ng/m L;AUC_(0-t)分别为(21122±9999)ng·h·L^(-1),(19475±7009)ng·h·L^(-1);AUC_(0-∞)分别为(27390±12197)ng·h·L^(-1),(31559±13412)ng·h·L^(-1)。伊维菌素注射液受试制剂与参比制剂的AUC0-t、AUC0-∞、Cmax、Tmax均无显著性差异(P>0.05),双单侧t检验结果显示两种制剂生物等效,可为兽医临床给药方案的制定以及合理用药提供参考。 展开更多
关键词 伊维菌素注射液 生物等效性 家兔
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白羽肉鸡养殖公司(龙头)用药习惯调查及改进建议
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作者 刘承栋 贾贵生 《北方牧业》 2015年第2期24-24,共1页
<正>白羽肉鸡生长速度快,生产效率高,抗病能力低下,需要较好的饲养环境条件和精细化的饲养管理与之匹配。可现实是在不同层次的饲养模式和管理水平下鸡群发病率和死亡率大相径庭,每只肉鸡药费大多在0.8元~2.0元,高的甚至近3.0元,... <正>白羽肉鸡生长速度快,生产效率高,抗病能力低下,需要较好的饲养环境条件和精细化的饲养管理与之匹配。可现实是在不同层次的饲养模式和管理水平下鸡群发病率和死亡率大相径庭,每只肉鸡药费大多在0.8元~2.0元,高的甚至近3.0元,料肉比在1.65~2.0∶1。目前,白羽肉鸡养殖模式多种多样,有个体养殖(社会鸡)、公司+农户(放养)、公司自养、大型集团化经营等,规模、层次、硬件设施。 展开更多
关键词 白羽肉鸡 养殖公司 肉鸡生长速度 饲养环境条件 用药习惯 集团化经营 养殖模式 饲养模式 生产效率
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猫杯状病毒分离鉴定及其VP1基因序列分析 被引量:4
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作者 王洁 丁航天 +5 位作者 廖均乐 钱鹏 刘玉秀 习向锋 张许科 田克恭 《动物医学进展》 北大核心 2021年第8期50-56,共7页
为了解我国猫杯状病毒(FCV)流行情况,于2019年1月~3月从京津地区4家宠物医院收集并检测眼鼻肛拭子297份,FCV、猫疱疹病毒1型和猫泛白细胞减少症病毒阳性率分别为15.49%、30.98%、30.64%。病原学调查结果显示,未免疫的小于1岁幼猫对FCV... 为了解我国猫杯状病毒(FCV)流行情况,于2019年1月~3月从京津地区4家宠物医院收集并检测眼鼻肛拭子297份,FCV、猫疱疹病毒1型和猫泛白细胞减少症病毒阳性率分别为15.49%、30.98%、30.64%。病原学调查结果显示,未免疫的小于1岁幼猫对FCV更易感。将FCV单纯阳性病料接种于F81细胞进行病毒分离,通过间接免疫荧光和测序分析等进行鉴定,分离的5株FCV分别命名为F2019TJ1株、F2019TJ2株、F2019TJ3株、F2019BJ1株和F2019BJ2株。研究显示,FCV对温度敏感,37℃存放4 d病毒含量下降1个滴度。对5株FCV的VP1基因进行测序分析,结果显示5株FCV核苷酸和氨基酸同源性分别为74.3%~87.3%和82.2%~92.2%,归属于2个不同毒株群,F2019BJ1株、F2019BJ2株和F2019TJ1株属于GI株群,与美国的UTCVM-H2株遗传距离较近;F2019TJ2株和F2019TJ3株属于GII株群,与国内的FCV-GD株遗传距离最近。研究结果为了解国内FCV流行及变异特点提供参考依据。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 VP1基因 分子流行病学 分离鉴定 遗传进化分析
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E.tenella初次感染雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及增殖能力变化的动态研究 被引量:2
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作者 黄海斌 张许科 +6 位作者 杨文涛 石少华 杨军 王倩 赵亮 王春凤 杨桂连 《中国兽药杂志》 2014年第10期6-10,共5页
应用流式细胞术( FCM)和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫( E. tenella)后外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E. tenella初次感染雏鸡后7~20 d CD3+CD4+、CD3+CD8+T 淋巴... 应用流式细胞术( FCM)和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫( E. tenella)后外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E. tenella初次感染雏鸡后7~20 d CD3+CD4+、CD3+CD8+T 淋巴细胞比例明显高于对照组雏鸡( P<0.05和P<0.01),并且均于12 d时达到峰值。初次感染后7~20 d雏鸡外周血中CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的比值明显升高,于感染后16 d时达到1.78。 E. tenella初次感染雏鸡后12~20 d外周血淋巴细胞增殖能力明显高于对照组雏鸡( P<0.05),并于16 d达到峰值。试验表明E. tenella初次感染雏鸡能激活淋巴细胞产生增殖反应,CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞在抵抗E. tenella初次感染过程中有重要作用。 展开更多
关键词 柔嫩艾美尔球虫 外周血 CD3+CD4+ CD3+CD8+ 增殖
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2012~2015年河南省部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查 被引量:12
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作者 党占国 庄金山 +2 位作者 晋春霞 孙哲 彭大新 《国外畜牧学(猪与禽)》 2016年第1期44-47,共4页
为了解河南省规模化猪场猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况,本研究应用IDEXX公司的PRV gp I抗体检测试剂盒对2012年1月-2015年8月送检的17个地市包括240个规模化猪场的3 342份血清样本进行PRV gp I(g E)抗体的检测。结果显示,送检样本... 为了解河南省规模化猪场猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况,本研究应用IDEXX公司的PRV gp I抗体检测试剂盒对2012年1月-2015年8月送检的17个地市包括240个规模化猪场的3 342份血清样本进行PRV gp I(g E)抗体的检测。结果显示,送检样本中PRV gp I(g E)抗体阳性率在2012年、2013年、2014年和2015年8月份前分别为40.15%、63.09%、62.20%和70.24%。对不同生长阶段的猪群检测结果分析表明,不同生长阶段猪群PRV野毒抗体阳性率差异显著,后备母猪、母猪和公猪的PRV gp I(g E)的阳性率偏高;不同季度送检的血清PRV野毒抗体阳性率差异不大。送检样本的规模化养猪场使用的猪伪狂犬疫苗均是g E基因缺失的活疫苗,因此,g E抗体阳性的猪场可以判定为PRV野毒感染阳性场。本研究对指导规模化猪场猪伪狂犬病的控制与净化具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 血清学调查 ELISA
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关于猪伪狂犬病的免疫问题
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作者 叶培根 胡群山 《北方牧业》 2013年第12期23-23,共1页
于猪伪狂疫问题1国内PR疫苗毒株大多使用Bartha K61株,仅有华中农大的使用HB98株。
关键词 猪伪狂犬病 免疫 疫苗毒株
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当前猪场免疫失败的原因及应对措施 被引量:6
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作者 郭小参 方剑玉 +6 位作者 虞德屏 杜根成 胡群山 徐祥臣 龚建培 曹辉 张立昌 《养猪》 2013年第1期97-99,共3页
接种疫苗是猪场预防和控制传染病的重要措施,但受疫苗质量、猪群发生免疫抑制性疾病等多方面的影响,猪场免疫失败的现象时有发生,造成猪病不同程度的流行,给猪场带来严重的经济损失。本文对目前猪场免疫失败的原因进行分析,并提出相应... 接种疫苗是猪场预防和控制传染病的重要措施,但受疫苗质量、猪群发生免疫抑制性疾病等多方面的影响,猪场免疫失败的现象时有发生,造成猪病不同程度的流行,给猪场带来严重的经济损失。本文对目前猪场免疫失败的原因进行分析,并提出相应的应对措施,为猪场的免疫预防工作提供参考。 展开更多
关键词 猪场 免疫失败 原因 对策
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猪伪狂犬病毒原阳株gE全基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 郭小参 高晓云 +5 位作者 陈红英 杜根成 方剑玉 虞德屏 徐祥臣 张立昌 《国外畜牧学(猪与禽)》 2014年第3期58-60,共3页
根据GenBank已经公布的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE全基因序列,设计合成了1对引物,利用PCR技术对猪伪狂犬病河南原阳病毒株相关的毒力基因gE进行了扩增,将特异性DNA条带进行回收,回收的PCR产物克隆到pMD?18-T载体中,并转化到大肠杆菌DH5α感... 根据GenBank已经公布的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE全基因序列,设计合成了1对引物,利用PCR技术对猪伪狂犬病河南原阳病毒株相关的毒力基因gE进行了扩增,将特异性DNA条带进行回收,回收的PCR产物克隆到pMD?18-T载体中,并转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞。运用蓝白斑筛选,挑取阳性菌落,提取重组质粒进行PCR、酶切和测序鉴定。测序结果表明,该序列全长为1 862 bp,将该基因核苷酸序列与从GenBank下载读取的马来西亚株(FJ176390)、爱尔兰Nia-1株(FJ605136)、湖北Ea株、韩国株(AY249861)、美国Becker株(AY368490)、广东SH株(EF55242 7)、西班牙株(EU502923)、河南焦作株(EU561349)等的gE基因进行同源性分析比较,得出的核苷酸同源性分别为99.4%、97.9%、99.7%、99.6%、98.0%、99.7%、97.8%、99.0%。通过对其序列进行的测定,有利于进一步从分子水平研究PRV在某些地区的流行、变异规律,也为PRV的诊断和预防奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 GE基因 克隆 序列分析
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A型塞内卡病毒CH-HNXC株的分离鉴定及其致病性研究 被引量:5
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作者 胡东波 李雪锋 +2 位作者 晋春霞 刘栓 孙哲 《动物医学进展》 北大核心 2019年第8期18-23,共6页
自2007年A型塞内卡病毒(SVA)在猪体内被发现以来,给全球养猪业造成了严重的经济损失,SVA感染的典型症状包括猪口鼻部囊泡的形成及破裂,以及蹄部冠状带水疱引起的跛行。用RT-PCR从河南某猪场具有水疱样病变的猪水疱皮或水疱液中检测到了... 自2007年A型塞内卡病毒(SVA)在猪体内被发现以来,给全球养猪业造成了严重的经济损失,SVA感染的典型症状包括猪口鼻部囊泡的形成及破裂,以及蹄部冠状带水疱引起的跛行。用RT-PCR从河南某猪场具有水疱样病变的猪水疱皮或水疱液中检测到了SVA的特异性核酸片段,并通过IBRS-2细胞进行SVA的分离和传代,将分离得到的SVA命名为CH-HNXC,扩增和测定了VP1基因序列后分析发现,分离株CH-HNXC与之前报道的2017年河南和福建分离株位于较近的进化分支中,与加拿大和泰国分离株亲缘关系较远,表明SVA流行和进化中由相近时间点和较近地理位置带来高的同源性;分离株攻毒猪鼻吻部和蹄部可见水疱和溃烂、跛行等,表明本分离株能引起SVA所致的典型临床症状,为SVA在国内的流行提供了新的证据,为进一步研究SVA的致病机制、开发诊断试剂和疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 病毒分离 序列分析 致病性试验
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丁酸梭菌对肉鸡生长性能和体液免疫应答能力的影响 被引量:4
13
作者 蒋玲艳 张在 +2 位作者 于乐 秦张善 王林果 《中国饲料》 北大核心 2023年第2期55-59,共5页
文章旨在研究丁酸梭菌对肉鸡生长性能和体液免疫应答能力的影响,试验将90只1日龄麻黄鸡苗随机分成3组,每组3个重复,每个重复10只,所有鸡于第1和21日龄分别用同种疫苗同样方式进行二次免疫。对照组饲喂基础日粮,丁酸梭菌低剂量组在基础... 文章旨在研究丁酸梭菌对肉鸡生长性能和体液免疫应答能力的影响,试验将90只1日龄麻黄鸡苗随机分成3组,每组3个重复,每个重复10只,所有鸡于第1和21日龄分别用同种疫苗同样方式进行二次免疫。对照组饲喂基础日粮,丁酸梭菌低剂量组在基础日粮中添加2×10^(5)CFU/g丁酸梭菌,高剂量组在基础日粮中添加5×10^(5)CFU/g丁酸梭菌,定期测量免疫器官指数、肠道指数、平均日增重、饲料转化率、新城疫抗体效价和禽流感抗体效价。结果表明,对42日龄内的肉鸡,丁酸梭菌高剂量组肉鸡的肠道指数、日增重和饲料转化率略高于对照组(P>0.05);对42日龄以上的肉鸡,丁酸梭菌高剂量组的日增重和饲料转化率显著高于对照组(P<0.05),但与丁酸梭菌低剂量组相比无显著差异,而丁酸梭菌低剂量组鸡的饲料转化率和禽流感抗体效价最高值显著高于对照组(P<0.05),丁酸梭菌高剂量组鸡的新城疫和禽流感抗体效价低于对照组(P>0.05)。综合考虑,在肉鸡饲料中添加2×10^(5)CFU/g的丁酸梭菌可以改善肠道指数,提高日增重和饲料转化率,并能提高鸡体液免疫应答能力和抗体持续时间。 展开更多
关键词 肉鸡 丁酸梭菌 生长性能 体液免疫 饲料转化率
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猪的病毒性腹泻疾病防控及再认识 被引量:1
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作者 党占国 高进勇 《国外畜牧学(猪与禽)》 2013年第7期61-62,共2页
近两年猪的病毒性腹泻已成为危害养猪业最严重的疾病之一,给很多规模养殖场带来巨大的经济损失。本病在2012年春冬季又在多数养殖密集区域发生,且该腹泻类似于前两年发病症状,一旦发生迅速波及全群,发病猪只表现为拒食,呕吐,拉稀,体温... 近两年猪的病毒性腹泻已成为危害养猪业最严重的疾病之一,给很多规模养殖场带来巨大的经济损失。本病在2012年春冬季又在多数养殖密集区域发生,且该腹泻类似于前两年发病症状,一旦发生迅速波及全群,发病猪只表现为拒食,呕吐,拉稀,体温有时偏高,且危害程度随猪只日龄减小而快速加重。为了更好的协助猪场防控本病发生,笔者就猪的病毒性腹泻的预防和治疗及认识提出个人观点,以供猪场参考。 展开更多
关键词 病毒性腹泻 疾病防控 养猪业 规模养殖场 危害程度 经济损失 发病症状 密集区
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苦参功劳颗粒对人工感染鸡大肠杆菌病的临床疗效研究 被引量:5
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作者 晏磊 高艳艳 +2 位作者 潘贵珍 李召斌 张珍 《安徽农业科学》 CAS 2019年第10期82-85,共4页
[目的]评价苦参功劳颗粒对鸡大肠杆菌病的治疗效果,确定推荐的给药程序。[方法]通过采用标准菌株C83851建立人工感染鸡大肠杆菌病模型,给予高、中、低剂量的苦参功劳颗粒治疗,观察治疗前后的临床症状、增重率,死亡率和治愈率,评价其临... [目的]评价苦参功劳颗粒对鸡大肠杆菌病的治疗效果,确定推荐的给药程序。[方法]通过采用标准菌株C83851建立人工感染鸡大肠杆菌病模型,给予高、中、低剂量的苦参功劳颗粒治疗,观察治疗前后的临床症状、增重率,死亡率和治愈率,评价其临床效果。[结果]苦参功劳颗粒按0.1、0.2、0.4g/kg体重的剂量灌胃给药,连续5d,治愈率分别为67.5%、77.5%和80.0%,体重增重率分别为56.91%、63.56%和61.36%。[结论]苦参功劳颗粒可以有效治疗鸡大肠杆菌病,推荐剂量为0.2g/kg。 展开更多
关键词 苦参功劳颗粒 鸡大肠杆菌病 治疗
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正确认识传染性法氏囊病疫苗免疫 被引量:1
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作者 孙海龙 宫天国 孟凡金 《北方牧业》 2012年第14期21-21,共1页
仅靠免疫接种并不能完全解决传染性法氏囊病的问题。疫苗在传染性法氏囊病的控制中的确是一种很有效的工具,但更为有效的方法必须有一个全面的控制策略。全面的控制策略包括:选择正确的疫苗类型、正确的免疫接种时机.以及强化生物安... 仅靠免疫接种并不能完全解决传染性法氏囊病的问题。疫苗在传染性法氏囊病的控制中的确是一种很有效的工具,但更为有效的方法必须有一个全面的控制策略。全面的控制策略包括:选择正确的疫苗类型、正确的免疫接种时机.以及强化生物安全和科学的饲养管理等。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 疫苗免疫 控制策略 免疫接种 疫苗类型 饲养管理 生物安全 完全解
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非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测方法的建立及初步评价 被引量:2
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作者 郝丽影 孙杰 +7 位作者 王同燕 王彦伟 王磊磊 周倩 谭菲菲 逄文强 邓均华 田克恭 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期30-35,共6页
为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测方法,分别用ASFV重组蛋白p30、p72、pA104R作为包被原建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并进行初步评价。结果显示,ASFV重组蛋白p30、p72及pA104R分别按照25 ng/孔、50 ng/孔、50 ng/孔包被,血清... 为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测方法,分别用ASFV重组蛋白p30、p72、pA104R作为包被原建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并进行初步评价。结果显示,ASFV重组蛋白p30、p72及pA104R分别按照25 ng/孔、50 ng/孔、50 ng/孔包被,血清样品均100倍稀释,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗猪IgG均20000倍稀释作为酶标试剂条件最优。p30-ELISA、p72-ELISA、pA104R-ELISA临界值分别为0.502、0.567、0.550。样品检测S/P值≥临界值判为阳性,否则判为阴性。3种方法分别检测梯度稀释的ASFV阳性血清、ASFV(CD2v缺失)阳性血清,p72-ELISA灵敏度最高,为1∶64、1∶128;3种方法检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒阳性血清各5份,ASFV阴性血清200份,结果均为阴性;3种方法批间、批内重复性变异系数均小于10%。说明建立的方法均可用于ASFV的血清学检测,为非洲猪瘟的防控提供了多样化的检测方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 抗体检测 p30蛋白 p72蛋白 pA104R蛋白 间接酶联免疫吸附试验
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猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及其制备胶体金检测试纸条的应用 被引量:4
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作者 王莹 白晶晶 +6 位作者 李玉芳 钱鹏 曹玉姣 陈凌燕 郝丽影 邓均华 田克恭 《安徽农业科学》 CAS 2021年第15期99-103,共5页
制备猫泛白细胞减少症病毒(FPV)单克隆抗体,研制胶体金检测试纸条。用FPV临床分离株免疫Balb/c小鼠,取血凝抑制(HI)效价最高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,采用HI方法筛选获得2株可稳定分泌FPV单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对其用于胶体金... 制备猫泛白细胞减少症病毒(FPV)单克隆抗体,研制胶体金检测试纸条。用FPV临床分离株免疫Balb/c小鼠,取血凝抑制(HI)效价最高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,采用HI方法筛选获得2株可稳定分泌FPV单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对其用于胶体金检测试纸条进行评价。2株杂交瘤细胞3C3和4A1株,分泌的单克隆抗体重链亚型分别为IgG2b、IgG2a,轻链亚型均为kappa;腹水纯化后单克隆抗体3C3、4A1的HI效价分别为1∶5120、1∶10240。用胶体金标记单克隆抗体4A1,单克隆抗体3C3作为检测线,羊抗鼠二抗作为对照线制备的胶体金检测试纸条,检测FPV病毒液的灵敏度为10^(3.7)TCID_(50)/mL;检测猫源其他病毒如FHV-1、FCV均为阴性;批内和批间重复性检测不同含量的FPV结果一致;检测513份临床样品,与PCR的阳性符合率为76%(71/93),阴性符合率为100%(420/420),总符合率为96%(491/513)。该研究制备的FPV单克隆抗体可用于FPV胶体金检测试纸条的生产,用于FPV的现场快速检测。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 单克隆抗体 胶体金检测试纸条
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猪伪狂犬病病毒gB、gC和gD蛋白的表达及诊断抗原筛选 被引量:2
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作者 潘姣姣 王同燕 +9 位作者 郭玲花 白小飞 汪志艳 孙杰 徐鑫 王玉宙 郝丽影 邓均华 谭菲菲 田克恭 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期12-19,共8页
为研发猪伪狂犬病的免疫学诊断试剂,利用杆状病毒表达系统表达了猪伪狂犬病病毒(PRV)gB、gC和gD蛋白,并对蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;将纯化后的3种蛋白分别制备成不同蛋白类型的疫苗免疫健康仔猪,比较蛋白的免疫原性;将3种蛋... 为研发猪伪狂犬病的免疫学诊断试剂,利用杆状病毒表达系统表达了猪伪狂犬病病毒(PRV)gB、gC和gD蛋白,并对蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;将纯化后的3种蛋白分别制备成不同蛋白类型的疫苗免疫健康仔猪,比较蛋白的免疫原性;将3种蛋白分别作为包被抗原建立间接ELISA方法,检测从不同地区收集的临床血清,与PRV中和试验检测结果进行了比较。结果显示,成功拯救出重组杆状病毒rPRV-gB-His株、rPRV-gC-His株和rPRV-gD-His株,经IFA鉴定,均可与猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应;表达出的蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定,可见大小分别约为120 ku、65 ku和50 ku的蛋白条带;3种蛋白免疫原性比较结果显示gD蛋白疫苗免疫组猪血清中和效价最高(1∶22.4~1∶32.0);3种蛋白建立的间接ELISA方法检测30份临床血清,结果gD蛋白作为包被抗原建立的ELISA方法与PRV中和试验的符合率最高(100.0%)。表明gD蛋白是更好的诊断抗原,可用于PRV抗体检测试剂盒的开发。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gD蛋白 免疫原性 诊断抗原
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农村环境是国民健康“命根子” 关乎“菜篮子”、“米袋子”、“水缸子” 被引量:4
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作者 张立昌 虞德平 +4 位作者 徐祥臣 龚建培 胡群山 曹辉 杜根成 《养猪》 2012年第5期3-3,共1页
《人民日报》6月6日刊登孙秀艳的文章说,6月5日,环境保护部发布《2011中国环境状况公报》,其中指出,虽然我国环境总体质量保持平稳,但农村环境却令人揪心。现在,许多地方的农村正在告别“世外桃源”、远离“鱼米之乡”,成为污水... 《人民日报》6月6日刊登孙秀艳的文章说,6月5日,环境保护部发布《2011中国环境状况公报》,其中指出,虽然我国环境总体质量保持平稳,但农村环境却令人揪心。现在,许多地方的农村正在告别“世外桃源”、远离“鱼米之乡”,成为污水横流、黑烟四散、土壤含毒的污染重灾区。 展开更多
关键词 农村环境 菜篮子 健康 国民 米袋 水缸 环境状况公报 环境保护
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