吴茱萸碱部分通过人白介素1所介导的途径诱导人黑色素瘤A375-S2细胞死亡 被引量：18

1

作者 王澈 王敏伟 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1478-1481,共4页

目的研究吴茱萸碱(evodiamine)诱导人黑色素瘤A375S2细胞死亡的作用机制及其与细胞因子人白介素1(interleukin1,IL1)信号转导途径之间的关系。方法MTT检测法,DNA凝胶电泳法及Westernblot法。结果IL1受体拮抗因子(IL1receptorantagonist,... 目的研究吴茱萸碱(evodiamine)诱导人黑色素瘤A375S2细胞死亡的作用机制及其与细胞因子人白介素1(interleukin1,IL1)信号转导途径之间的关系。方法MTT检测法,DNA凝胶电泳法及Westernblot法。结果IL1受体拮抗因子(IL1receptorantagonist,IL1ra)在24h时能够部分抑制吴茱萸碱诱导的A375S2细胞死亡。吴茱萸碱在诱导A375S2细胞死亡的过程中,Fas配体(Fasligand,FasL)的蛋白表达量升高,激活其下游的caspase8和caspase3,进而引起DNA的损伤并激活p53蛋白,同时Bax/Bcl2的蛋白表达比例被上调。在经过IL1ra预处理后,这些变化均被部分的抑制或逆转。结论吴茱萸碱诱导A375S2细胞死亡的作用是部分通过IL1介导的信号转导途径而实现的。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 人白介素1 A375-S2细胞 FAS CASPASE p53 BAX/BCL-2

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去甲斑蝥素诱导小鼠肺纤维瘤L929细胞凋亡 被引量：25

2

作者 安巍巍 薛莲 +3 位作者 王敏伟 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第1期22-25,共4页

　　　目的:研究去甲斑蝥素 (norcantharidin,NCTD)抑制小鼠肺纤维瘤 (L929)细胞的作用机制。方法:用MTT法测定细胞生长抑制率。采用Hoechst33258染色、DNA凝胶电泳和乳酸脱氢酶 (LDH)活力检测细胞凋亡。用免疫印迹法(Westernblot)分析... 　　　目的:研究去甲斑蝥素 (norcantharidin,NCTD)抑制小鼠肺纤维瘤 (L929)细胞的作用机制。方法:用MTT法测定细胞生长抑制率。采用Hoechst33258染色、DNA凝胶电泳和乳酸脱氢酶 (LDH)活力检测细胞凋亡。用免疫印迹法(Westernblot)分析了细胞外信号调节激酶 (extracellularsignal regulatedkinase, ERK)和磷酸化ERK、c JunN 末端激酶 (C JunN terminalkinase, JNK)和磷酸化JNK蛋白表达的变化。结果:NCTD诱导L929细胞凋亡。JNK抑制剂 (SP600125)与ERK抑制剂(PD98059),可明显抑制NCTD对细胞的杀伤作用。同时磷酸化ERK和磷酸化JNK表达增加。结论:NCTD对L929细胞的细胞毒作用是通过诱导其凋亡而发生的,且呈时间剂量依赖性。这种作用可能与JNK,ERK通路激活有关。 展开更多

关键词 小鼠肺纤维瘤 L929细胞 去甲斑蝥素 凋亡 细胞外信号调节激酶 C-JUN N-末端激酶

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去甲斑蝥素通过半胱氨酸天冬氨酸酶诱导HeLa细胞凋亡 被引量：24

3

作者 安巍巍 王敏伟 +3 位作者 龚显峰 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期417-421,共5页

目的 :研究去甲斑蝥素 (NCTD)通过半胱氨酸天冬氨酸酶 (caspase)途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制。方法 :采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳、乳酸脱氢酶 (LDH)检测及Westernblot检测法。结果 :去甲斑蝥素能显著诱导HeLa细胞发生... 目的 :研究去甲斑蝥素 (NCTD)通过半胱氨酸天冬氨酸酶 (caspase)途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制。方法 :采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳、乳酸脱氢酶 (LDH)检测及Westernblot检测法。结果 :去甲斑蝥素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,caspase -家族、caspase - 3、- 8、- 10抑制剂可以部分地抑制NCTD诱导的细胞死亡。细胞凋亡时caspase - 3、- 8、- 9酶活力升高 ,而且caspase - 3的作用底物 -caspase - 3激活的DNA酶抑制物 (ICAD)蛋白表达下降。结论 :去甲斑蝥素通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多

关键词 去甲斑蝥素 HELA细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶类

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冬凌草甲素通过改变Bax/Bcl-xL表达激活caspase-3诱导A375-S2细胞凋亡 被引量：24

4

作者 张春玲 吴立军 +3 位作者 左海军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期669-672,共4页

目的　研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果　冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体... 目的　研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果　冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase 3的抑制剂能阻止caspase 3的活力升高 ;免疫印迹结果显示冬凌草甲素作用A375 S2细胞 12h改变Bax与Bcl xL蛋白的表达 ;且发现caspase 3的底物PARP蛋白在 12h时被降解。结论　冬凌草甲素 (34 3μmol·L-1)诱导A375 S2细胞凋亡 ,这种作用是通过改变了Bax/Bcl xL的表达比率 ,激活caspase 3而实现的。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 A375-S2细胞 凋亡 Bax/Bcl—xL CASPASE-3

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紫草素诱导A375-S2细胞凋亡的分子机制研究 被引量：41

5

作者 吴振 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期202-205,共4页

目的　研究紫草素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的分子机制。方法　MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Westernblot、流式细胞分析以及caspase活力分析等。结果　10μmol·L-1紫草素可明显地抑制A375 S2细胞的生长,其... 目的　研究紫草素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的分子机制。方法　MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Westernblot、流式细胞分析以及caspase活力分析等。结果　10μmol·L-1紫草素可明显地抑制A375 S2细胞的生长,其半数有效抑制浓度IC50为 (10 9±1 8)μmol·L-1。10μmol·L-1紫草素可诱导A375 S2细胞凋亡,并经历了caspase 9和caspase 3的激活。紫草素促进p53蛋白的积聚,Bax蛋白表达的上调和Bcl xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使细胞凋亡。紫草素可使细胞周期停止在G1 期。结论　紫草素可诱导A375 S2细胞周期停止在G1 期,其诱导细胞凋亡的途径经过p53介导的Bax和caspase 9的激活。 展开更多

关键词 紫草素 人黑色素瘤A375-S2细胞 凋亡 细胞周期 P53

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紫草素诱导HeLa细胞凋亡经过caspase激活的机制 被引量：39

6

作者 吴振 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期540-544,共5页

目的　研究紫草素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　MTT法测定紫草素对HeLa细胞的生长抑制实验 ,荧光染色等观察细胞形态学变化 ;DNA电泳、LDH法研究细胞死亡的途径。免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果　紫草素具有明显的抑制HeL... 目的　研究紫草素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　MTT法测定紫草素对HeLa细胞的生长抑制实验 ,荧光染色等观察细胞形态学变化 ;DNA电泳、LDH法研究细胞死亡的途径。免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果　紫草素具有明显的抑制HeLa细胞生长的作用 ,并呈明显的量效关系和时间依赖性 ,4 0 μmol·L- 1 的紫草素在 2 4h内可诱导细胞凋亡 ,凋亡途经与死亡受体信号途径相似 ,经历了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3和 8(caspase 3和caspase 8)的激活。结论　 4 0 μmol·L- 1 的紫草素可明显地诱导HeLa细胞凋亡 。 展开更多

关键词 紫草素 人宫颈癌HELA细胞 凋亡 CASPASE 抗肿 瘤活性

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冬凌草甲素通过激活caspase诱导HeLa细胞凋亡 被引量：37

7

作者 张春玲 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期521-525,共5页

目的　研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果　冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖... 目的　研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果　冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase家族抑制剂 ,caspase 1和 3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡 ,6 8 7μmol·L-1冬凌草甲素作用HeLa细胞 12h使caspase 3的活力提高 2倍。 结论　适宜浓度以下 ,冬凌草甲素 (6 8 7μmol·L-1)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性 ,大剂量 (137 4 μmol·L-1)时 ,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡 ,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 HELA细胞 凋亡 CASPASE

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吴茱萸碱诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡过程中非caspase调控因素 被引量：23

8

作者 张莹 张起辉 +3 位作者 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期61-64,共4页

目的　研究吴茱萸碱 (evodiamine)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡机制中非caspase调控因素。方法　MTT法 ,WesternBlot免疫印迹法 ,流式细胞术。结果　虽吴茱萸碱对HeLa细胞杀伤作用介于化疗药物放线菌素D (actino mycineD)、顺铂 (cisplatin... 目的　研究吴茱萸碱 (evodiamine)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡机制中非caspase调控因素。方法　MTT法 ,WesternBlot免疫印迹法 ,流式细胞术。结果　虽吴茱萸碱对HeLa细胞杀伤作用介于化疗药物放线菌素D (actino mycineD)、顺铂 (cisplatin)和 5 氟尿嘧啶 (5 fluorouracil,5 Fu)之间 ,但对细胞撤除药物后的继续增殖能力的影响相似。MAP激酶 (MAPK)抑制剂中ERK和p38的抑制剂不影响细胞死亡 ,而JNK抑制剂 (SP6 0 0 12 5 )可协同吴茱萸碱杀死细胞 ,但吴茱萸碱并未影响JNK及磷酸化JNK蛋白表达。吴茱萸碱可将HeLa细胞周期阻滞在G2 /M期 ,发生大量凋亡。结论　对JNK激酶的抑制可协同促进吴茱萸碱对HeLa细胞的杀伤作用 ,而且吴茱萸碱可将细胞周期阻滞在G2 /M期发生凋亡。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 JNK激酶 细胞周期阻滞

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人白细胞介素1β通过caspase途径诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡 被引量：8

9

作者 王澈 王敏伟 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1138-1143,共6页

目的 :对interleukin - 1β(IL - 1β)诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡的信号转导途径进行研究。 方法 :使用倒置显微镜观察细胞形态学变化。通过MTT法测定IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用以及细胞内半胱氨酸蛋白酶 (caspases)与这种... 目的 :对interleukin - 1β(IL - 1β)诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡的信号转导途径进行研究。 方法 :使用倒置显微镜观察细胞形态学变化。通过MTT法测定IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用以及细胞内半胱氨酸蛋白酶 (caspases)与这种作用的关系。利用乳酸脱氢酶 (LDH)测定法对IL - 1β作用后细胞的损伤情况进行分析。琼脂糖凝胶电泳法检测IL - 1β对细胞DNA降解的影响。 结果 :IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性 ,在 10 -9mol/L作用 72h时达到 90 %以上。caspase- 1、- 3、- 8、- 9和caspase - 10的抑制剂能够部分抑制IL -1β早期诱导的细胞凋亡。LDH活力测定显示 ,在IL - 1β诱导的细胞死亡过程中 ,凋亡占主导地位 ,并呈现剂量和时间依赖性。细胞经过 10 -11mol/LIL - 1β处理 72h后 ,出现凋亡典型的DNA梯状条带 ,与上述结果一致。 结论 :IL -1β能够诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡 。 展开更多

关键词 白细胞介素1 黑色素瘤 A375-S2细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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厚朴酚通过改变Bax/Bcl-X_L表达和激活caspase诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡 被引量：15

10

作者 夏明钰 王敏伟 +1 位作者 田代真一 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期318-322,共5页

目的研究厚朴酚诱导HeLa细胞凋亡机制。方法MTT法测定厚朴酚对HeLa和人正常胚肺HEL299细胞的细胞毒作用。通过显微镜,荧光染色观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化。用Western印迹法分析药物对蛋白质表达的影响。结果厚... 目的研究厚朴酚诱导HeLa细胞凋亡机制。方法MTT法测定厚朴酚对HeLa和人正常胚肺HEL299细胞的细胞毒作用。通过显微镜,荧光染色观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化。用Western印迹法分析药物对蛋白质表达的影响。结果厚朴酚明显抑制HeLa细胞的增殖,诱导HeLa细胞调亡。对HEL299细胞的细胞毒作用弱于HeLa细胞。Caspase3,8,9,10及家族抑制剂可明显抑制厚朴酚诱导的凋亡。激动型Fas抗体CH11对厚朴酚诱导的HeLa细胞死亡有协同作用。Western印迹结果显示厚朴酚作用12h后Bax/BclXL表达比率升高,caspase3前体及其底物ICAD和PARP发生降解,磷酸化p53和p53蛋白表达增加。结论厚朴酚(80μmol·L-1)通过改变Bax/BclXL的表达激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多

关键词 厚朴酚 人宫颈癌HELA 凋亡 抗肿瘤活性

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冬凌草甲素增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用 被引量：6

11

作者 刘艳秋 游松 +3 位作者 张春玲 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期209-213,共5页

目的:研究具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的冬凌草甲素,促进巨噬细胞对因凋亡的肿瘤细胞的吞噬作用。方法:DNA凝胶电泳检测UV照射(2·4J/cm2,4min)的人组织淋巴瘤U937细胞凋亡;Giemsa染色,Hoechst33258染色,镜下检测计数吞噬作用。结果:U... 目的:研究具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的冬凌草甲素,促进巨噬细胞对因凋亡的肿瘤细胞的吞噬作用。方法:DNA凝胶电泳检测UV照射(2·4J/cm2,4min)的人组织淋巴瘤U937细胞凋亡;Giemsa染色,Hoechst33258染色,镜下检测计数吞噬作用。结果:UV照射(2·4J/cm2,4min)诱导U937细胞发生凋亡,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带。2·7μmol·L-1的冬凌草甲素具有增强U937分化的巨噬细胞对UV照射诱导凋亡的U937细胞的吞噬作用,并呈时间剂量依赖性,但对非特异性荧光颗粒的吞噬效果较弱。加入抗TNFα和抗IL-1β的抗体,培养12h,吞噬增强作用明显受抑制。冬凌草甲素在人外周血来源的巨噬细胞吞噬凋亡的U937细胞过程中同样发挥增强吞噬的效果。结论:冬凌草甲素可特异地增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用,其吞噬机制是通过诱导巨噬细胞TNFα和IL-1β的释放。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 U937细胞 巨噬细胞 细胞凋亡 吞噬作用

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水飞蓟素和Fas激动性抗体CH11共同作用诱导A375-S2细胞凋亡 被引量：4

12

作者 杨小珂 李林昊 +4 位作者 周蓓 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1242-1245,共4页

目的水飞蓟素和CH11共同作用诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的分子机制。方法结晶紫法测定细胞生长抑制率;细胞凋亡的形态学观察,LDH法测定凋亡与坏死的比率;用免疫印迹法检测凋亡抑制性的去乙酰化酶SIRT1、Bc l-2家族成员(抗凋亡蛋白Bc... 目的水飞蓟素和CH11共同作用诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的分子机制。方法结晶紫法测定细胞生长抑制率;细胞凋亡的形态学观察,LDH法测定凋亡与坏死的比率;用免疫印迹法检测凋亡抑制性的去乙酰化酶SIRT1、Bc l-2家族成员(抗凋亡蛋白Bc l-2,Bc l-xL和促凋亡蛋白Bax)、细胞色素C和Caspase-3的表达。结果水飞蓟素和CH11共同作用能诱导A375-S2细胞发生凋亡;形态学观察可见凋亡小体的形成;免疫印迹法检测发现水飞蓟素和CH11共同作用的A375-S2细胞中Bax蛋白的表达增加,Bc l-2蛋白和Bc l-xL蛋白的表达降低,细胞色素C释放增加,pro-caspase-3表达量明显降低。结论水飞蓟素协同CH11能明显促进A375-S2细胞的凋亡。 展开更多

关键词 水飞蓟素 CH11 协同作用 A375-S2细胞 凋亡

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oridonin部分通过TNFα信号转导途径诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡 被引量：4

13

作者 黄健 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期471-475,共5页

目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24&... 目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24·8±1·2)μmol·L-1和(20·9±1·9)μg·L-1。Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25μmol·L-1oridonin和20μg·L-1TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化。结论Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡。 展开更多

关键词 ofidonin TNFΑ L929细胞 凋亡 CASPASE MAPK

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吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡过程中对ERK激酶的调控 被引量：3

14

作者 张莹 张起辉 +3 位作者 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2175-2179,共5页

目的对比吴茱萸碱与化疗药物对A375-S2细胞的细胞毒活性,并且研究PKC及ERK激酶在吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡中的作用。方法MTT法,Western印迹法。结果虽吴茱萸碱对A375-S2细胞毒作用比化疗药物放线菌素D、顺铂和5-氟尿嘧啶弱,但对药... 目的对比吴茱萸碱与化疗药物对A375-S2细胞的细胞毒活性,并且研究PKC及ERK激酶在吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡中的作用。方法MTT法,Western印迹法。结果虽吴茱萸碱对A375-S2细胞毒作用比化疗药物放线菌素D、顺铂和5-氟尿嘧啶弱,但对药物撤除后细胞继续增殖能力的影响远胜于3种化疗药物。低浓度(10μg/L)佛波酯(PMA)引起的PKC的激活可部分抑制吴茱萸碱引起的细胞死亡,PKC及ERK抑制剂可逆转这种作用,而且吴茱萸碱减少了ERK蛋白表达,并降低了ERK的磷酸化水平。结论吴茱萸碱对A375-S2细胞的细胞毒作用即使在药物撤除后仍对细胞继续增殖能力产生抑制作用。吴茱萸碱可通过减少ERK及磷酸化ERK的蛋白表达而阻断ERK激酶对细胞的保护作用。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 黑色素瘤 A375-S2细胞 有丝分裂素激活蛋白激酶类

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冬凌草甲素增强U937细胞吞噬凋亡小体过程中ERK途径的调节作用 被引量：3

15

作者 刘艳秋 游松 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期110-113,共4页

目的研究冬凌草甲素促进U937人淋巴瘤细胞分化的巨噬细胞吞噬凋亡小体的机制。方法光学显微镜下计数检测吞噬率,PKC活力检测盒测定PKC活力,吖啶橙染色,Hoechst 33258染色及W estern b lot法。结果酪氨酸蛋白激酶(PTK)抑制剂gen iste in... 目的研究冬凌草甲素促进U937人淋巴瘤细胞分化的巨噬细胞吞噬凋亡小体的机制。方法光学显微镜下计数检测吞噬率,PKC活力检测盒测定PKC活力,吖啶橙染色,Hoechst 33258染色及W estern b lot法。结果酪氨酸蛋白激酶(PTK)抑制剂gen iste in和蛋白激酶C(PKC)广泛的抑制剂stauroporine均不同程度地抑制了冬凌草甲素诱导U937分化的巨噬细胞对凋亡小体的吞噬增强效果。2.7μmol.L-1的冬凌草甲素处理U937细胞后,时间依赖性地增加了PKC活力。ERK磷酸化抑制剂PD98059阻断了冬凌草甲素的吞噬增强作用。免疫印迹结果显示冬凌草甲素作用U937细胞后,ERK磷酸化程度增加,而PD98059逆转了ERK磷酸化。结论冬凌草甲素增强U937细胞对凋亡小体的吞噬作用,其吞噬机制是通过激活PTK和PKC激酶,导致下游ERK途径活化,从而增强吞噬过程。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 U937细胞 吞噬 ERK激酶

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水飞蓟素在紫外线照射诱导A375-S2细胞凋亡中发挥抑制作用 被引量：6

16

作者 李林昊 吴立军 +3 位作者 田代真一 小野寺敏 内海文彰 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1873-1878,共6页

目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体。方 法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天 冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl... 目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体。方 法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天 冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl-2,Bcl-xL和Bax)的表达。结果:紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)能显著诱导A375-S2细胞发生凋亡,其作用呈明显时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝 胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;水飞蓟素具有抑制紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)诱导A375-S2细胞凋亡的作 用,水飞蓟素作用于紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)的A375-S2细胞,培养12 h,使紫外线照射诱导的半胱天冬酶 -9、半胱天冬酶-3的活力降低;免疫印记法检测发现水飞蓟素作用的A375-S2细胞(紫外线照射)中Bcl-2蛋 白和Bcl-xL蛋白的表达增加。结论:水飞蓟素明显抑制紫外线照射诱导的A375-S2细胞的凋亡,其抑制凋亡作 用与半胱天冬酶途径和线粒体途径相关。 展开更多

关键词 紫外线 A375-S2细胞 水飞蓟素 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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土槿皮乙酸B不通过Fas途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和M期周期阻滞 被引量：6

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作者 于静华 田代真一 +1 位作者 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1509-1513,共5页

目的初探土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和周期阻滞。方法MTT法测定PAB对MCF-7细胞的生长抑制情况;相差显微镜观察细胞形态变化;荧光显微镜观察经Hoechst33258染色的DNA变化;流式细胞仪检测用PI染色后MCF-7细胞的周期分布;... 目的初探土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和周期阻滞。方法MTT法测定PAB对MCF-7细胞的生长抑制情况;相差显微镜观察细胞形态变化;荧光显微镜观察经Hoechst33258染色的DNA变化;流式细胞仪检测用PI染色后MCF-7细胞的周期分布;免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果PAB时间剂量依赖性的抑制MCF-7细胞生长。4μmol.L-1PAB在24h使DNA皱缩,在36和48h使DNA皱缩的细胞死亡。4μmol.L-1PAB时间依赖性的促进PARP〔poly-(ADP-ribose)polymerase〕的剪切。在36hPAB剂量依赖性的增加cdc2和核内cyclinB1的表达。Fas拮抗性抗体UB2不影响PAB诱导的凋亡,但Fas激动性抗体CH11促进PAB诱导的凋亡。并且UB2不影响PAB诱导的细胞周期阻滞,Fas激动性抗体CH11不影响G1和S期,但促进凋亡特征性的亚二倍体峰生成。结论4μmol.L-1的PAB通过凋亡方式可明显地抑制MCF-7细胞生长,并促进M期阻滞。Fas途径不参与PAB诱导的凋亡和周期阻滞。 展开更多

关键词 土槿皮乙酸B(PAB) 凋亡 M期阻滞 人乳腺癌MCF-7细胞

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土槿皮乙酸B增加活性氧水平诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老的研究 被引量：4

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作者 于静华 张亚宏 +5 位作者 刘春禹 张文艳 田代真一 小野寺敏 于晓方 池岛乔 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第7期63-66,共4页

本研究旨在研究土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老与活性氧的关系。在相差显微镜下观察4μmol/L PAB在36 h诱导细胞凋亡小体的出现;LDH方法显示PAB时间依赖性的增加凋亡比率;SA-β-半乳糖苷酶显示4μmol/L PAB作用3 d后... 本研究旨在研究土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和衰老与活性氧的关系。在相差显微镜下观察4μmol/L PAB在36 h诱导细胞凋亡小体的出现;LDH方法显示PAB时间依赖性的增加凋亡比率;SA-β-半乳糖苷酶显示4μmol/L PAB作用3 d后,去药再作用5 d,96%的细胞蓝染,细胞变大且扁平;流式细胞仪检测用DCFH-DA染色后4μmol/L PAB时间依赖性增加细胞内活性氧水平。所以4μmol/L PAB通过增加细胞内活性氧水平促进细胞凋亡和衰老。 展开更多

关键词 土槿皮乙酸B(PAB) 凋亡 衰老 人乳腺癌MCF-7细胞 活性氧

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儿茶素对tBHP诱导N9细胞DNA损伤的保护作用 被引量：3

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作者 黄晴 吴立军 +3 位作者 路平 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1520-1523,共4页

目的研究儿茶素〔(+)catechin〕对氧化应激引起的鼠小胶质细胞N9DNA损伤的保护作用。方法以叔丁基过氧化氢(tBHP)损伤N9细胞为氧化应激模型,采用MTT法、流式细胞分析法、Cometassay(彗星实验分析)及WesternBlot法。结果儿茶素明显地抑制... 目的研究儿茶素〔(+)catechin〕对氧化应激引起的鼠小胶质细胞N9DNA损伤的保护作用。方法以叔丁基过氧化氢(tBHP)损伤N9细胞为氧化应激模型,采用MTT法、流式细胞分析法、Cometassay(彗星实验分析)及WesternBlot法。结果儿茶素明显地抑制tBHP诱导鼠小胶质细胞死亡,且在低浓度范围内呈剂量依赖性;流式分析结果表明,(+)catechin有效地清除细胞内过量的自由基;经彗星实验验证,tBHP诱导的DNA损伤被(+)catechin显著地抑制。蛋白印迹结果显示poly(ADPribose)polymerase(PARP)的表达量随着(+)catechin给药浓度的增加而增加,而p53的表达无明显改变。结论(+)catechin对氧化应激损伤的N9细胞具有保护作用,其机制可能与降低细胞内自由基(ROS)的含量,增加PARP的表达进而修复受损的DNA有关。 展开更多

关键词 儿茶素 DNA损伤 PARP P53 N9细胞

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