p53蛋白质C端的三维结构及生物功能区

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作者 张彦 刘次全 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期264-270,共7页

利用ｐ５３Ｃ端１１８个氨基酸的ｍＲＮＡ二级结构和ＣｈｏｕＦａｓｍａｎ蛋白质二级结构预测原则，预测ｐ５３蛋白质Ｃ端２８９～３２５为卷曲肽段，３６８～３９３段包括两段螺旋结构：α１３６８～３７３，α２３８１～３８８．其... 利用ｐ５３Ｃ端１１８个氨基酸的ｍＲＮＡ二级结构和ＣｈｏｕＦａｓｍａｎ蛋白质二级结构预测原则，预测ｐ５３蛋白质Ｃ端２８９～３２５为卷曲肽段，３６８～３９３段包括两段螺旋结构：α１３６８～３７３，α２３８１～３８８．其中三段已知的蛋白质二级结构与此ｍＲＮＡ二级结构单元间有准确的对应关系．与四种以多重序列联配为基础的蛋白质二级结构预测方法（准确率均为７３２０％左右）相对照，预测结果基本一致．结合单体聚合区３１个氨基酸晶体结构，在ＳＧＩＩＮＤＩＧＯ２工作站上构建了ｐ５３Ｃ端１０８个残基的三维结构．进一步揭示了ｐ５３Ｃ端诸多生物功能区之间的空间构象关系． 展开更多

关键词 P53蛋白 二级结构 C端 三维结构 生物功能区

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siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响 被引量：7

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作者 朱月春 吕会茹 +1 位作者 李丹怡 童淑芬 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期327-334,共8页

研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载... 研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-U6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-timePCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PD!).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD!的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P<0.05),凋亡细胞数增加2.86倍(P<0.01),SPF增加33.8%(P<0.05),PI增加59.7%(P<0.01),G0/G1期下降27.7%(P<0.01),凋亡相关蛋白P53下降54.7%(P<0.01)、Caspase-3增加2.2倍(P<0.01)和Bcl-2降低21.7%(P>0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase-3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨. 展开更多

关键词 SIRNA干扰 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 人皮肤黑色素瘤 稳转细胞株 细胞周期 P53 Caspase-3

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中国图书馆档案害虫分类地位、名录和分布 被引量：9

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作者 孟正泉 张乃先 陈元晓 《图书馆论坛》 CSSCI 北大核心 1997年第6期41-43,共3页

关键词 图书馆 档案馆 档案害虫 图书害虫 分类地位

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G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人黑色素瘤细胞周期的进程 被引量：4

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作者 唐琼玲 张春华 +4 位作者 胡滔 陈龙 杨银峰 李治纲 朱月春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期933-941,共9页

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在人皮肤黑色素瘤A375细胞中处于高表达与高活性状态,但G6PD在黑色素瘤发生发展过程中的作用及其具体机制尚不明确.本文在前期运用siRNA方法构建G6PD敲减的黑色素瘤A375稳转细胞(A375-G6PDΔ)基础上,构建表达... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在人皮肤黑色素瘤A375细胞中处于高表达与高活性状态,但G6PD在黑色素瘤发生发展过程中的作用及其具体机制尚不明确.本文在前期运用siRNA方法构建G6PD敲减的黑色素瘤A375稳转细胞(A375-G6PDΔ)基础上,构建表达载体pBabe-puro-G6PDWT在A375-G6PDΔ细胞中过表达野生型的G6PD基因,从而构建G6PD表达恢复的稳转细胞(A375-G6PDΔ-G6PDWT).3株细胞A375-WT、A375-G6PDΔ和A375-G6PDΔ-G6PDWT经G6PD酶活性测定、MTT测定、克隆形成实验、流式细胞仪分析细胞周期和Western印迹检测.结果显示,A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞的G6PD蛋白表达量(0.847±0.080)及其活性(0.394±0.029)分别是A375-G6PDΔ的3.28倍(P<0.01)和7.34倍(P<0.01),分别是A375-WT细胞的91.57%和2.12倍(P<0.05).与A375-WT细胞相比,A375-G6PDΔ细胞G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,增殖指数PI降低了25.70%(P<0.05),细胞周期蛋白D1/D2、细胞周期蛋白E表达分别下降37.4%、54.3%(P<0.01)和17.3%;而A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞呈现G1/S期阻滞解除,细胞周期蛋白D1/D2蛋白分别恢复到A375-WT细胞的89.5%和87.6%,细胞周期蛋白E表达未见恢复,呈现生长增殖和克隆形成率的恢复并接近于A375-WT细胞.结果提示,G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人皮肤黑色素瘤A375细胞G1期向S期转换的进程,这为黑色素瘤发病机制的研究提供了新的思路. 展开更多

关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 黑色素瘤 细胞周期 细胞周期蛋白

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金平坚螺的营养成分 被引量：3

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作者 孟正泉 陈元晓 +2 位作者 张闻 张乃光 何自珍 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第2期188-191,共4页

报道了金平坚螺（Ｃａｍａｅｎａｊｉｎｐｉｎｇｅｎｓｉｓ）的营养成分，并与猪肉、牛肉、鸡肉的营养成分进行了比较，表明它的蛋白质含量高，脂肪和糖的含量低，含有丰富的维生素和钙、磷、铁、锌、碘等无机元素。

关键词 金平坚螺 营养成分 开发利用

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云南省危害烟草陆生贝类的调查研究 被引量：2

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作者 张闻 张乃光 +1 位作者 陈元晓 何自珍 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第2期92-96,共5页

对云南省２７个市、县进行了危害烟草的陆生贝类（蜗牛和蛞蝓）的调查研究．获得１纲２亚纲２目８科１５属２１种的标本１５３号．制订出云南省危害烟草陆生贝类的分科检索表，描述了２１种烟草害螺的形态、分布和危害。

关键词 陆生贝类 烟草 分布 综合防治

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人类基因组结构变异 被引量：8

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作者 何永蜀 张闻 杨照青 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期771-778,共8页

基因组结构变异通常是指基因组内大于1kb的DNA片段缺失、插入、重复、倒位、易位以及DNA拷贝数目变化(CNVs)。人类基因组结构变异涉及数千片段不连续的基因组区域,含数百万DNA碱基对,可含数个基因及调控序列,多种基因功能因此缺失或改变... 基因组结构变异通常是指基因组内大于1kb的DNA片段缺失、插入、重复、倒位、易位以及DNA拷贝数目变化(CNVs)。人类基因组结构变异涉及数千片段不连续的基因组区域,含数百万DNA碱基对,可含数个基因及调控序列,多种基因功能因此缺失或改变,导致机体表型变化、疾病易感性改变或发生疾病。对基因组结构变异的研究,有助于用动态的观点全面分析基因组遗传变异得到整合的基因型,理解结构变异的潜在医学作用及机体整体功能的复杂性。文章从人类基因组结构变异的类型、研究方法,对个体表型、疾病及生物进化的影响等方面综合阐述人类基因组结构变异的最新研究进展。 展开更多

关键词 人类基因组 结构变异

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黑色素瘤发生发展中的表观遗传学调控 被引量：1

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作者 胡滔 何永蜀 朱月春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期690-696,共7页

人恶性黑色素瘤(malignant melanoma)是近年来高发病率和高死亡率的肿瘤之一.目前尚缺乏有效的治疗方法.而表观遗传如DNA甲基化(DNA methylation)、组蛋白修饰(histonemodification)、染色质重塑(chromatin remodeling)及RNA干扰(RNA in... 人恶性黑色素瘤(malignant melanoma)是近年来高发病率和高死亡率的肿瘤之一.目前尚缺乏有效的治疗方法.而表观遗传如DNA甲基化(DNA methylation)、组蛋白修饰(histonemodification)、染色质重塑(chromatin remodeling)及RNA干扰(RNA interference,RNAi)等改变在人黑色素瘤的发生、发展和转移中有重要作用.阐明黑色素瘤发生发展的表观遗传学机制已引起了学者的普遍关注.本文综述了人类黑色素瘤发生发展中所特异的表观遗传改变:CpG岛的异常甲基化修饰、组蛋白甲基化和乙酰化修饰、染色质重塑以及microRNA在黑色素瘤发生和转移中的作用,并对应用表观遗传修饰治疗人类黑色素瘤进行了探讨. 展开更多

关键词 表观遗传学 黑色素瘤 DNA甲基化 组蛋白修饰 RNA干扰(RNAI)

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HIV-1融膜肽的编码DNA序列比较

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作者 张闻 明洪 +1 位作者 龙莉 陈元晓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期511-514,共4页

通过分析GenBank中的全部 95个HIV 1完整基因组序列 ,设计融膜肽“探针序列” ,对所获得的 95段融膜肽的编码DNA序列进行了翻译、对准和分析。得到融膜肽及其编码序列的“优势序列”及突变分布。

关键词 HIV-1 融膜肽 编码DNA序列 艾滋病毒

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甲肝病毒减毒株(H_2)RNA的全长RT-PCR扩增

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作者 周翔 谭德勇 +1 位作者 赖建华 昝瑞光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第5期472-475,共4页

通过ＲＴＰＣＲ技术扩增了甲肝病毒减毒株（Ｈ２）全长ＲＮＡ，并对长片段ＲＴＰＣＲ扩增进行了方法学上的探讨．采用抗血清特异沉淀病毒；盐酸胍酸性酚、氯仿一步法分离纯化病毒ＲＮＡ，可得到高质量的ＲＮＡ样品；以此ＲＮＡ为... 通过ＲＴＰＣＲ技术扩增了甲肝病毒减毒株（Ｈ２）全长ＲＮＡ，并对长片段ＲＴＰＣＲ扩增进行了方法学上的探讨．采用抗血清特异沉淀病毒；盐酸胍酸性酚、氯仿一步法分离纯化病毒ＲＮＡ，可得到高质量的ＲＮＡ样品；以此ＲＮＡ为模板，在无ＲＮＡ酶的逆转录酶作用下，合成单链ｃＤＮＡ；继续以此ｃＤＮＡ为模板，利用３２ｍｅｒ寡核苷酸引物，在Ｔａｑ和ＤｅｅｐＶｅｎｔＤＮＡ多聚酶的作用下进行ＰＣＲ扩增。 展开更多

关键词 甲肝病毒 全长RNA RT-PCR扩增

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G6PD缺陷通过Caspase-3和PARP-1诱导人黑色素瘤细胞凋亡 被引量：3

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作者 郝晓培 任娜 +4 位作者 唐琼玲 张春华 胡滔 陈龙 朱月春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1121-1127,共7页

葡糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在许多肿瘤细胞中高表达,但其发生的作用机理目前仍然不明确.以正常人表皮黑色素细胞(HEM)、野生型人黑色素瘤A375细胞(A375-WT)和G6PD缺陷的A375细胞(A375-G6PDΔ)为对象,经real-time PCR、Western印迹和紫外... 葡糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在许多肿瘤细胞中高表达,但其发生的作用机理目前仍然不明确.以正常人表皮黑色素细胞(HEM)、野生型人黑色素瘤A375细胞(A375-WT)和G6PD缺陷的A375细胞(A375-G6PDΔ)为对象,经real-time PCR、Western印迹和紫外分光光度法分析显示,A375-WT细胞的mRNA、G6PD蛋白和G6PD活性分别是HEM细胞的1.89倍(P<0.05)、6.86倍(P<0.01)和2.30倍(P<0.05).Annexin V/PI流式细胞仪和Western印迹测定表明,A375-G6PDΔ的凋亡率是A375-WT的5.10倍(P<0.01),活化半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)增高1.84倍(P<0.01)以及89 kD多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)生成增加2.87倍(P<0.01).分光光度法分析显示,A375-G6PDΔ的NADPH和GSH分别降低了72.30%(P<0.01)和27.39%(P<0.05),并伴有75.43%的H2O2增高(P<0.01).结果提示,G6PD在黑色素瘤细胞中高表达和高活性,而敲减G6PD表达通过caspase-3和PARP-1信号诱发人黑色素瘤细胞凋亡,这为深入揭示黑色素瘤的发生机理提供了新思路。 展开更多

关键词 葡糖-6-磷酸脱氢酶 黑色素瘤 半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3) 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1) 细胞凋亡

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p53蛋白质Gly249和Ser249替换型三维结构的分子动力学研究 被引量：1

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作者 张彦 石秀凡 刘次全 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期382-386,共5页

利用 p5 3蛋白质核心区晶体结构作分子动力学发现 ,除了生化方面的稳定性之外 ,该区还具有分子力学上的高度稳定性 .在此基础上作的R2 49残基替换分子动力学研究显示 ,p5 3蛋白质核心区 2 49位点精氨酸被其他残基替换后能引起 p5 3蛋白... 利用 p5 3蛋白质核心区晶体结构作分子动力学发现 ,除了生化方面的稳定性之外 ,该区还具有分子力学上的高度稳定性 .在此基础上作的R2 49残基替换分子动力学研究显示 ,p5 3蛋白质核心区 2 49位点精氨酸被其他残基替换后能引起 p5 3蛋白质核心区L2、L3结构域间的密切联系趋于松散 ,正常的空间构象发生改变并使整个核心区结构稳定性受到破坏 .这一研究从三维结构变化上 ,直观地解释了R2 49残基替换造成的 p5 3蛋白质免疫和生化特性改变的结构机制 . 展开更多

关键词 P53蛋白质 分子动力学 R249残基替换

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