目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供试验依据。方法:取对...目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供试验依据。方法:取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞株,按2.0×10~6细胞/孔接种24孔板,按照析因试验安排4个试验组:①雷帕霉素组(8×10^(-5)mg/L);②罗格列酮组(50μmol/L);③联合组;④、实验对照组(不做任何处理的常规培养细胞)。各组各浓度分别设3个复孔,实验重复3次。采用MTT比色法观察雷帕霉素和罗格列酮对体外培养的MCF-7细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化。结果:罗格列酮和雷帕霉素均能有效的抑制体外培养的乳腺癌细胞株MCF-7的生长,雷帕霉素的抑制率最大(P<0.05)。联合用药不增加细胞生长抑制率(P<0.05)。结论:体外培养抑制试验证明雷帕霉素、罗格列酮均能有效的抑制乳腺癌细胞株MCF-7的生长。雷帕霉素联合罗格列酮不增加细胞凋亡。雷帕霉素和罗格列酮对MCF-7细胞株的干预作用是通过周期阻滞完成的。展开更多
背景与目的:靶向治疗是乳腺癌等实体瘤治疗的又一有效手段,靶向药物的开发是临床治疗的需要。本文探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和甲基转移酶抑制剂5-脱氧氮杂胞苷(5-aza-2’-de...背景与目的:靶向治疗是乳腺癌等实体瘤治疗的又一有效手段,靶向药物的开发是临床治疗的需要。本文探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和甲基转移酶抑制剂5-脱氧氮杂胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-cdR)对雌激素受体阴性人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供实验依据。方法:取对数生长期生长良好的乳腺癌MCF-7细胞株,按2.0×106细胞/孔接种于24孔板,按析因试验设置4个组:雷帕霉素组(R组)、5-Aza-cdR组(Aza组)、两药联合组和对照组。采用MTT法观察雷帕霉素、5-Aza-cdR对体外培养的MCF-7细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期。结果:与对照组相比,R组和Aza组均有一定的抑制乳腺癌细胞MCF-7细胞体外培养生长的作用(P<0.05),联合组对乳腺癌细胞生长的抑制作用与R组相同(P>0.05)。在干预48h时,R组和联合组即达到有效抑制率。Aza组干预120h达到有效抑制率。Aza组细胞抑制率低于联合组(P<0.05),R组与联合组细胞抑制率差异无显著性(P>0.05)。在72h时间点,R组、Aza组、联合组、对照组的早期凋亡细胞百分率分别为40.9%、22.7%、37.3%、24.1%;晚期凋亡细胞分别为17.8%、43.7%、27%、40.2%;与对照组相比,R组、联合组均能有效地诱导MCF-7早期细胞凋亡(P<0.05)。Aza组早期细胞凋亡率均较R组和联合组低(P<0.05),但晚期细胞凋亡率较R组和联合组高(P<0.05);与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。雷帕霉素4.0×10-5mg/L与5-Aza-cdR25μmol/L干预无明显交互作用(P>0.05)。联用组与R组比较,细胞早期凋亡率下降(P<0.05)。在72h时间点,4组的G0、G1期细胞分别为60.1%、67.3%、66.8%和6%;S期细胞分别为34.2%、17.1%、22.2%和38.5%;G2期细胞分别为5.8%、15.6%、11.1%和55.4%。与对照组比较,R组、Aza组、联合组对乳腺癌MCF-7细胞均有较强的G0、G1期阻滞作用(P<0.05)。与联合组相比联合用药不增强G0、G1期周期阻滞作用(P>0.05)。雷帕霉素4.0×10-5mg/L与5-Aza-cdR25μmol/L干预在细胞G0、G1期无明显的交互作用(P>0.05)。结论:体外培养抑制试验证明,雷帕霉素、5-Aza-cdR均能抑制乳腺癌细胞株MCF-7的生长。两药无交互作用,临床无联合用药价值。雷帕霉素联合5-Aza-cdR不增加细胞凋亡。5-Aza-cdR能干预细胞周期,其可能的机制是诱导细胞成熟分化。联合用药不增强MCF-7细胞的周期阻滞和凋亡。展开更多
背景与目的:肿瘤抑制基因PTEN与过氧化物酶体增长因子活化受体γ基因的表达在人类乳腺癌发生发展中发挥着重要的作用,过氧化物酶体增殖体激活受体PPARγ是一个核受体转录因子,能够上调PTEN的表达。本研究目的是研究人类乳腺癌(human bre...背景与目的:肿瘤抑制基因PTEN与过氧化物酶体增长因子活化受体γ基因的表达在人类乳腺癌发生发展中发挥着重要的作用,过氧化物酶体增殖体激活受体PPARγ是一个核受体转录因子,能够上调PTEN的表达。本研究目的是研究人类乳腺癌(human breast cancer,HBC)组织中PTEN和PPARγ蛋白的表达,为进一步研究临床分期进展与该两种基因在细胞内分布特点以及与ER、PR、HER-2相关性提供基础研究依据。方法:随机选取我院临床证实乳腺癌患者66例临床资料及病理切片,利用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)法检测乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白的表达,调取66例乳腺癌患者临床资料,分析乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白表达与患者临床分期、淋巴结转移率、HER-2、ER、PR表达之间的相关关系。结果:PTEN和PPARγ蛋白在HBC中总阳性率分别为68.2%、63.6%。乳腺癌切片PTEN阳性的病期较晚患者的表达阳性部位主要在:细胞核内占72.86%,胞质表达占27.14%。PPARγ蛋白阳性乳腺癌切片主要表达在核膜,占87.3%。相关分析表明PTEN与PPARγ、ER、PR、HER-2阳性率无显著相关(P均>0.05)。PPARγ与ER、PR、HER-2阳性率无显著相关(P均>0.05)。结论:随着临床分期的进展PTEN、PPARγ阳性率均下降,PTEN表达位置由正常细胞质表达转为细胞核表达。PPARγ由正常核膜表达转为胞质核膜表达。展开更多
文摘目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供试验依据。方法:取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞株,按2.0×10~6细胞/孔接种24孔板,按照析因试验安排4个试验组:①雷帕霉素组(8×10^(-5)mg/L);②罗格列酮组(50μmol/L);③联合组;④、实验对照组(不做任何处理的常规培养细胞)。各组各浓度分别设3个复孔,实验重复3次。采用MTT比色法观察雷帕霉素和罗格列酮对体外培养的MCF-7细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化。结果:罗格列酮和雷帕霉素均能有效的抑制体外培养的乳腺癌细胞株MCF-7的生长,雷帕霉素的抑制率最大(P<0.05)。联合用药不增加细胞生长抑制率(P<0.05)。结论:体外培养抑制试验证明雷帕霉素、罗格列酮均能有效的抑制乳腺癌细胞株MCF-7的生长。雷帕霉素联合罗格列酮不增加细胞凋亡。雷帕霉素和罗格列酮对MCF-7细胞株的干预作用是通过周期阻滞完成的。
文摘背景与目的:靶向治疗是乳腺癌等实体瘤治疗的又一有效手段,靶向药物的开发是临床治疗的需要。本文探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和甲基转移酶抑制剂5-脱氧氮杂胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-cdR)对雌激素受体阴性人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供实验依据。方法:取对数生长期生长良好的乳腺癌MCF-7细胞株,按2.0×106细胞/孔接种于24孔板,按析因试验设置4个组:雷帕霉素组(R组)、5-Aza-cdR组(Aza组)、两药联合组和对照组。采用MTT法观察雷帕霉素、5-Aza-cdR对体外培养的MCF-7细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期。结果:与对照组相比,R组和Aza组均有一定的抑制乳腺癌细胞MCF-7细胞体外培养生长的作用(P<0.05),联合组对乳腺癌细胞生长的抑制作用与R组相同(P>0.05)。在干预48h时,R组和联合组即达到有效抑制率。Aza组干预120h达到有效抑制率。Aza组细胞抑制率低于联合组(P<0.05),R组与联合组细胞抑制率差异无显著性(P>0.05)。在72h时间点,R组、Aza组、联合组、对照组的早期凋亡细胞百分率分别为40.9%、22.7%、37.3%、24.1%;晚期凋亡细胞分别为17.8%、43.7%、27%、40.2%;与对照组相比,R组、联合组均能有效地诱导MCF-7早期细胞凋亡(P<0.05)。Aza组早期细胞凋亡率均较R组和联合组低(P<0.05),但晚期细胞凋亡率较R组和联合组高(P<0.05);与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。雷帕霉素4.0×10-5mg/L与5-Aza-cdR25μmol/L干预无明显交互作用(P>0.05)。联用组与R组比较,细胞早期凋亡率下降(P<0.05)。在72h时间点,4组的G0、G1期细胞分别为60.1%、67.3%、66.8%和6%;S期细胞分别为34.2%、17.1%、22.2%和38.5%;G2期细胞分别为5.8%、15.6%、11.1%和55.4%。与对照组比较,R组、Aza组、联合组对乳腺癌MCF-7细胞均有较强的G0、G1期阻滞作用(P<0.05)。与联合组相比联合用药不增强G0、G1期周期阻滞作用(P>0.05)。雷帕霉素4.0×10-5mg/L与5-Aza-cdR25μmol/L干预在细胞G0、G1期无明显的交互作用(P>0.05)。结论:体外培养抑制试验证明,雷帕霉素、5-Aza-cdR均能抑制乳腺癌细胞株MCF-7的生长。两药无交互作用,临床无联合用药价值。雷帕霉素联合5-Aza-cdR不增加细胞凋亡。5-Aza-cdR能干预细胞周期,其可能的机制是诱导细胞成熟分化。联合用药不增强MCF-7细胞的周期阻滞和凋亡。
文摘背景与目的:肿瘤抑制基因PTEN与过氧化物酶体增长因子活化受体γ基因的表达在人类乳腺癌发生发展中发挥着重要的作用,过氧化物酶体增殖体激活受体PPARγ是一个核受体转录因子,能够上调PTEN的表达。本研究目的是研究人类乳腺癌(human breast cancer,HBC)组织中PTEN和PPARγ蛋白的表达,为进一步研究临床分期进展与该两种基因在细胞内分布特点以及与ER、PR、HER-2相关性提供基础研究依据。方法:随机选取我院临床证实乳腺癌患者66例临床资料及病理切片,利用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)法检测乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白的表达,调取66例乳腺癌患者临床资料,分析乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白表达与患者临床分期、淋巴结转移率、HER-2、ER、PR表达之间的相关关系。结果:PTEN和PPARγ蛋白在HBC中总阳性率分别为68.2%、63.6%。乳腺癌切片PTEN阳性的病期较晚患者的表达阳性部位主要在:细胞核内占72.86%,胞质表达占27.14%。PPARγ蛋白阳性乳腺癌切片主要表达在核膜,占87.3%。相关分析表明PTEN与PPARγ、ER、PR、HER-2阳性率无显著相关(P均>0.05)。PPARγ与ER、PR、HER-2阳性率无显著相关(P均>0.05)。结论:随着临床分期的进展PTEN、PPARγ阳性率均下降,PTEN表达位置由正常细胞质表达转为细胞核表达。PPARγ由正常核膜表达转为胞质核膜表达。
