新疆牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药物敏感实验 被引量：6

1

作者 康立超 田亮 +3 位作者 张晓宇 王平福 薄新文 马勋 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第4期436-440,共5页

为确诊新疆某牦牛场的某疾病的发病病源,控制病情蔓延,对该病病原进行分离培养、小白鼠致病性试验、生化鉴定、PCR鉴定。结果表明:得到6株多杀性巴氏杆菌;这6株分离菌均对庆大霉素、四环素、链霉素、磺胺、土霉素等药物敏感;根据多杀性... 为确诊新疆某牦牛场的某疾病的发病病源,控制病情蔓延,对该病病原进行分离培养、小白鼠致病性试验、生化鉴定、PCR鉴定。结果表明:得到6株多杀性巴氏杆菌;这6株分离菌均对庆大霉素、四环素、链霉素、磺胺、土霉素等药物敏感;根据多杀性巴氏杆菌KMT-1基因扩增了1条457bp的特异性条带,对其进行测序分析,结果表明其与GenBank提交的12条多杀性巴氏杆菌KMT-1基因序列同源性达97%～99%。 展开更多

关键词 牦牛 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 药敏试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊生殖道提取物生物活性物质检测 被引量：2

2

作者 陈琛 王新华 +2 位作者 薄新文 刘志强 任耀军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期156-159,共4页

目的检测绵羊生殖道提取物生物活性物质。方法以健康、新鲜、雌性绵羊生殖器官为实验材料,采用各种生物活性检测方法对绵羊生殖道提取物的活性物质进行了检测。结果绵羊生殖道提取物具有红细胞凝集、胰蛋白酶抑制剂活性、抗菌活性、抗... 目的检测绵羊生殖道提取物生物活性物质。方法以健康、新鲜、雌性绵羊生殖器官为实验材料,采用各种生物活性检测方法对绵羊生殖道提取物的活性物质进行了检测。结果绵羊生殖道提取物具有红细胞凝集、胰蛋白酶抑制剂活性、抗菌活性、抗血浆凝固活性、抗补体活性和低溶血活性,无胰蛋白酶水解活性、局部出血活性。结论首次证实绵羊生殖道存在抗菌活性物质和蛋白酶抑制剂活性物质。 展开更多

关键词 绵羊 生殖系统 检测 活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

新疆奎屯部分地区奶牛球虫感染现状调查 被引量：9

3

作者 蒋业慧 王正荣 +1 位作者 张艳艳 薄新文 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第1期57-62,共6页

为调查奎屯地区奶牛球虫感染与流行现状，试验选取奎屯不同地区的5个规模化奶牛养殖场，对2~3月龄、6月龄、1~2岁、5~6岁的牛直肠采集粪便共290份进行球虫检测。结果发现被检5个规模化奶牛场均存在球虫感染，感染率最高为58.14%；共检出... 为调查奎屯地区奶牛球虫感染与流行现状，试验选取奎屯不同地区的5个规模化奶牛养殖场，对2~3月龄、6月龄、1~2岁、5~6岁的牛直肠采集粪便共290份进行球虫检测。结果发现被检5个规模化奶牛场均存在球虫感染，感染率最高为58.14%；共检出8种艾美耳属球虫，分别是牛艾美耳球虫（Eimeriabovis）（8.62%）、邱氏艾美耳球虫（Eimeriazuernii）（9.31%）、椭圆艾美耳球虫（Eimeria ellipsoidalli）（11.03%）、柱状艾美耳球虫（Eimeria cylindrce）（5.86%）、阿拉巴艾美耳球虫（Eimeria alabamensis）（4.13%）、亚球艾美耳球虫（Eimeria subspherica）（9.31%）、奥博艾美耳球虫（Eimeria auburnensis）（5.17%）、加拿大艾美耳球虫（Eimeria canadensis）（3.44%），且优势虫种为椭圆艾美耳球虫（Eimeria ellipsoidalli）、邱氏艾美耳球虫（Eimeria zuernii）、亚球艾美耳球虫（Eimeriasubspherica）、牛艾美耳球虫（Eimeriabovis）。 展开更多

关键词 奎屯 奶牛 球虫 感染率 感染强度

在线阅读 下载PDF 职称材料

牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH的扩增与生物信息学分析 被引量：2

4

作者 赵文娟 田亮 +2 位作者 薄新文 马勋 康立超 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期139-144,共6页

旨在扩增牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH的编码基因,并预测OmpH蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH在免疫保护中所起的作用。对牦牛多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白OmpH基因进行PCR扩增及序列测定。应用生... 旨在扩增牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH的编码基因,并预测OmpH蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH在免疫保护中所起的作用。对牦牛多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白OmpH基因进行PCR扩增及序列测定。应用生物信息学相关软件和方法,对牦牛多杀性巴氏杆菌OmpH蛋白的二级结构和B细胞抗原表位进行预测。牦牛多杀性巴氏杆菌OmpH基因全长1 478 bp,ORF包含1 002 bp编码333个氨基酸。二级结构以无规卷曲为主,有少量的α-螺旋和延伸带;推测OmpH蛋白有1个细胞黏附位点、2个糖基化位点。 展开更多

关键词 牦牛多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白H 二级结构 B细胞抗原表位 功能预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

人泛素启动子UbB介导Fat-1基因在绵羊成纤维细胞内的表达 被引量：1

5

作者 毛志福 王立民 +1 位作者 张银国 周平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期528-534,共7页

旨在构建不饱和脂肪酸脱氢酶基因Fat-1表达载体,实现人泛素启动子UbB调控外源基因Fat-1在绵羊细胞内表达。PCR扩增得到UbB序列,秀丽隐杆线虫Fat-1基因密码子根据绵羊对同义密码子使用偏好性优化后,由公司合成获得oFat-1基因序列,以及pcD... 旨在构建不饱和脂肪酸脱氢酶基因Fat-1表达载体,实现人泛素启动子UbB调控外源基因Fat-1在绵羊细胞内表达。PCR扩增得到UbB序列,秀丽隐杆线虫Fat-1基因密码子根据绵羊对同义密码子使用偏好性优化后,由公司合成获得oFat-1基因序列,以及pcDNA3.1中的GBHpolyA序列共同插入pCMV-DsRed2-1载体的多克隆位点(MCS),得到重组真核表达载体pUbB-oFat-polyA-CMV-DsRed,载体序列经酶切测序鉴定。线性化的表达载体采用脂质体包裹后转染绵羊成纤维细胞,经G418抗性和红色荧光标记筛选得到阳性细胞,并对阳性细胞进行PCR和反转录PCR鉴定,HPLC检测细胞中不饱和脂肪酸的变化。构建的真核表达载体序列正确,Fat-1基因能够在绵羊成纤维细胞基因组中正常表达,促进细胞ω-6PUFAs向ω-3PUFAs转化,ω-3PUFAs占总量的百分比从11.48%增加到24.41%,ω-6PUFAs的百分比从88.52%下降到75.59%,ω-6PUFAs/ω-3PUFAs比值从7.82±0.18下降到3.10±0.03,差异极显著(P<0.01)。成功构建了UbB启动子介导的Fat-1真核表达载体,筛选得到表达不饱和脂肪酸脱氢酶的绵羊细胞,为进一步制备转基因克隆绵羊奠定了基础。 展开更多

关键词 人泛素启动子UbB Fat-1 表达载体 绵羊成纤维细胞 PUFAS

在线阅读 下载PDF 职称材料

生物信息学对扩展莫尼茨绦虫cDNA文库Cavβ基因分析与B细胞抗原表位预测

6

作者 赵文娟 康立超 +2 位作者 王正荣 薄新文 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期735-742,共8页

【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)电压门控钙通道β亚基(Cavβ)基因,预测蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨Cavβ在寄生虫病治疗中所起的作用。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进... 【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)电压门控钙通道β亚基(Cavβ)基因,预测蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨Cavβ在寄生虫病治疗中所起的作用。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取全长cDNA序列;采用生物信息学方法对其对应的蛋白进行二级结构和B细胞抗原表位的预测。【结果】获得扩展莫尼茨绦虫Cavβ基因,全长946 bp,编码180个氨基酸,理论分子质量为19.788 8 kD,等电点为5.06,属于Cachannel B超家族。二级结构以无规则卷曲为主,结构预测存在4个可能的B细胞抗原表位。【结论】研究对于扩展莫尼茨绦虫Cavβ基因的获得和B细胞抗原表位的预测,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定了基础。 展开更多

关键词 扩展莫尼茨绦虫 Cavβ 二级结构 B细胞抗原表位 功能预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

鹅多杀性巴氏杆菌OmpH的扩增与生物信息学分析

7

作者 赵文娟 康立超 +2 位作者 田亮 薄新文 马勋 《黑龙江农业科学》 2012年第2期16-21,共6页

为扩增鹅多杀性巴氏杆菌OmpH基因,预测OmpH蛋白二级结构和B细胞抗原表位,通过PCR扩增测序及生物信息学分析技术对该基因序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导及蛋白质二级结构的初步预测等,探讨了鹅多杀性巴氏杆菌OmpH基因... 为扩增鹅多杀性巴氏杆菌OmpH基因,预测OmpH蛋白二级结构和B细胞抗原表位,通过PCR扩增测序及生物信息学分析技术对该基因序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导及蛋白质二级结构的初步预测等,探讨了鹅多杀性巴氏杆菌OmpH基因在免疫保护中的作用。结果表明:鹅多杀性巴氏杆菌OmpH基因全长1537bp,ORF包含1056bp编码351个氨基酸;二级结构以无规则卷曲为主,有少量的α-螺旋和延伸带;推测OmpH蛋白有1个细胞黏附位点、3个糖基化位点。该研究为分析鹅多杀性巴氏杆菌外膜蛋白理化特性、制备单克隆抗体和设计表位疫苗等奠定了理论基础。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白H 二级结构 B细胞抗原表位 功能预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用RNA干扰技术抑制捻转血矛线虫H11基因研究

8

作者 张平 何延华 +3 位作者 王新华 薄新文 陈南颍 韩猛立 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期744-752,共9页

【目的】为了检测RNAi沉默H11基因能否模拟H11疫苗免疫效果。【方法】针对H11基因序列设计并合成特异性dsRNA,通过浸泡方式分别将dsRNA导入捻转血矛线虫感染性L3期幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析H11基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,... 【目的】为了检测RNAi沉默H11基因能否模拟H11疫苗免疫效果。【方法】针对H11基因序列设计并合成特异性dsRNA,通过浸泡方式分别将dsRNA导入捻转血矛线虫感染性L3期幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析H11基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,同时,将H11-dsRNA浸泡L3期幼虫24 h后感染绵羊,定期采集绵羊粪便检查虫卵数,第30 d后剖检绵羊皱胃,检查荷虫数的变化。研究H11基因的沉默对捻转血矛线虫减虫率和减卵率的疫苗免疫效果。【结果】实时荧光定量PCR检测表明:试验组中H11基因的相对含量显著低于对照组(P<0.01),在浸泡72 h后,H11-dsRNA组基因的表达量仅为对照组的21.33%。绵羊体内干扰沉默效果显示,试验组H11干扰组虫卵减少率为41.02%,减虫率为39.6%。【结论】研究通过浸泡法导入的dsRNA能有效抑制H11基因的转录,同时H11基因的沉默与幼虫的发育密切相关,为捻转血矛线虫及其它寄生线虫的基因功能研究提供一种新的方法。 展开更多

关键词 捻转血矛线虫 H11基因 RNAI 浸泡

在线阅读 下载PDF 职称材料

犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：5

9

作者 杨井泉 韩猛立 +2 位作者 朱艳平 黄新 薄新文 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1098-1103,共6页

【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但... 【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 反转录巢式PCR lit—PCR NP基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

PolⅡ型启动子K14实现组织特异RNAi 被引量：3

10

作者 代蓉 沈思军 +3 位作者 万鹏程 石国庆 孟庆勇 刘守仁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期757-762,共6页

RNAi(RNA interference,RNAi)是继基因打靶技术后的一种高效的研究基因功能的方法。细胞学实验和小鼠模型的研究结果表明,PolⅡ型启动子可以实现组织特异的RNA干扰,从而为鉴定基因在特定组织中的功能及作用机理提供了一个强有力的研究... RNAi(RNA interference,RNAi)是继基因打靶技术后的一种高效的研究基因功能的方法。细胞学实验和小鼠模型的研究结果表明,PolⅡ型启动子可以实现组织特异的RNA干扰,从而为鉴定基因在特定组织中的功能及作用机理提供了一个强有力的研究方法。为了能将这种方法用于转基因绵羊生产,探讨基因与绵羊毛囊发育的关系及其作用机制等,文章利用PolⅡ型CMV启动子和毛囊组织特异表达的人角蛋白14(K14)基因的启动子驱动eGFP-shRNA融合转录本的生成,从而实现敲低目的基因的表达。体外基因表达沉默效率分析(pEGFP-C1-shRNA和psiCHECK-BMP4双质粒共转染Hela细胞)结果表明,6个干扰序列均能有效地抑制BMP4基因的表达,抑制效率达到60%以上;体内表达沉默分析(只转染pEGFP-K14-shRNA质粒转染小鼠皮肤细胞系JB6-C41)的实验结果与体外分析结果相似,除3#序列外,其余干扰序列对BMP4基因的抑制效率都在60%以上,其中5#序列的效率达到80%以上。siRNA诱导的目标基因沉默中mRNA和蛋白水平的下降显著正相关。结果表明,设计构建的由PolⅡ型启动子K14驱动eGFP-shRNA融合转录本的形成,从而实现RNAi的研究方法是可行的,利用这种方法可以实现在特定细胞中敲低目的基因的表达水平。为在大家畜特别是绵羊中应用RNAi的方法分析目的基因在毛囊发育、对不同类型毛囊生长发育的诱导和调节等作用机理的研究提供一个参考方法。 展开更多

关键词 组织特异 RNAI K14启动子 融合转录本 转基因家畜

在线阅读 下载PDF 职称材料

扩展莫尼茨绦虫烯醇化酶基因的原核表达及抗原性鉴定 被引量：3

11

作者 夏党荣 陈南颖 +3 位作者 马勋 薄新文 何延华 康立超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期241-243,250,共4页

为表达扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)的烯醇化酶(Enolase),本研究采用RT-PCR方法以M.expansa组织总RNA为模板扩增enolase基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中,并转化BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示表... 为表达扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)的烯醇化酶(Enolase),本研究采用RT-PCR方法以M.expansa组织总RNA为模板扩增enolase基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中,并转化BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示表达的重组Enolase约为47 ku。Western blot分析表明,天然蛋白能够被重组表达产物免疫小鼠的血清识别,出现两条免疫印记条带,即天然蛋白以两种形式(约47 ku和40 ku)存在,并具有抗原性,为该蛋白功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 扩展莫尼茨绦虫 烯醇化酶基因 原核表达 抗原性

在线阅读 下载PDF 职称材料

捻转血矛线虫Hc38重组蛋白的表达纯化及抗原性鉴定 被引量：2

12

作者 何延华 王新华 +3 位作者 薄新文 陈南颖 张兴亚 康立超 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期750-754,共5页

【目的】通过表达和纯化捻转血矛线虫新功能基因Hc38最大开放阅读框ORF1,确定完整的Hc38蛋白天然表达形式、分子量大小和免疫学活性鉴定,为研究该基因功能和基因工程应用奠定基础。【方法】参照本实验室在GenBank上登录的捻转血矛线虫Z... 【目的】通过表达和纯化捻转血矛线虫新功能基因Hc38最大开放阅读框ORF1,确定完整的Hc38蛋白天然表达形式、分子量大小和免疫学活性鉴定,为研究该基因功能和基因工程应用奠定基础。【方法】参照本实验室在GenBank上登录的捻转血矛线虫ZJ株的Hc38基因序列(AY594263)设计引物,PCR扩增目的基因并克隆到表达载体中,重组表达载体转化大肠杆菌后IPTG诱导表达,SDS-PAGE和薄层扫描检测分析表达产物,通过亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western bloting和ELISA方法检测其抗原性。【结果】Hc38基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白相对分子量约为68 KD,表达量占菌体蛋白总量的30%,亲和层析柱纯化出目的蛋白,并能被捻转血矛线虫病绵羊阳性血清和重组表达产物免疫小鼠血清识别,具有反应原性。【结论】实现了Hc38基因的原核表达和纯化,验证了Hc38基因在虫体内的表达形式和抗原性。 展开更多

关键词 捻转血矛线虫 Hc38基因 表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛病毒性腹泻病毒结构蛋白基因的克隆及其B细胞抗原表位的预测 被引量：1

13

作者 何延华 黄新 +4 位作者 薄新文 钟发刚 韩猛立 陈南颖 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期310-317,共8页

【目的】以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据,应用生物信息学相关软件和方法,对BVDV结构蛋白(Structural Protein,SP)的二级结构的不同方面及其B细胞表位进行了预测,综合评价了BVDV结构蛋白的抗原特异性细胞表位,并计算出一些潜在的抗... 【目的】以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据,应用生物信息学相关软件和方法,对BVDV结构蛋白(Structural Protein,SP)的二级结构的不同方面及其B细胞表位进行了预测,综合评价了BVDV结构蛋白的抗原特异性细胞表位,并计算出一些潜在的抗原位点。【方法】利用RT-PCR扩增法获得牛病毒性腹泻病毒结构蛋白序列,通过克隆、测序分析结构蛋白基因的基因组序列和蛋白序列,采用DNAStar Protean软件对结构蛋白的二级结构、可塑性、亲水性、表面可及性及抗原指数等参数进行综合分析,并预测其B细胞的抗原表位分布。【结果】P14、gp48和gp53蛋白含有的细胞优势抗原表位较多,有的甚至有可能成为优势抗原表位或对优势抗原表位有协同作用。【结论】与已鉴定的B细胞抗原表位相比,试验所用方法预测的结果有较高的准确度,是一种较为先进的表位研究方法。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 结构蛋白 B细胞表位 二级结构 反向疫苗学

在线阅读 下载PDF 职称材料

牦牛源多杀性巴氏杆菌血清型鉴定及ompH基因序列分析 被引量：1

14

作者 田亮 康立超 +3 位作者 赵文娟 王平福 薄新文 马勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期152-154,共3页

为分析牦牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)分离株与疫苗株的血清型和ompH基因差异,本研究利用PCR方法鉴定其血清型,并克隆、测序ompH全长基因,用DNAMAN、DNAStar对其进行生物信息学分析。结果显示,分离株与疫苗株血清型为B型,标准株血清型... 为分析牦牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)分离株与疫苗株的血清型和ompH基因差异,本研究利用PCR方法鉴定其血清型,并克隆、测序ompH全长基因,用DNAMAN、DNAStar对其进行生物信息学分析。结果显示,分离株与疫苗株血清型为B型,标准株血清型为E型。分离株和疫苗株ompH基因编码氨基酸有2个缺失和2个突变,同源性为99.4%。研究表明ompH基因具有很高的同源性,但氨基酸的缺失和突变可能使抗原表位发生变化,也是导致免疫失败的原因之一。 展开更多

关键词 牦牛 多杀性巴氏杆菌 血清型 ompH基因 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽多杀性巴氏杆菌分离鉴定及药物敏感试验 被引量：8

15

作者 康立超 黄新 +2 位作者 何延华 钟发刚 薄新文 《新疆农垦科技》 2009年第6期24-25,共2页

新疆某鹅场鹅群突然发病大量死亡。通过病原分离,小白鼠致病性试验以及PCR诊断为多杀性巴氏杆菌感染引起的禽霍乱。药敏试验结果对庆大霉素、氧氟沙星、链霉素、氟苯尼考、土霉素等药物敏感。

关键词 禽 多杀性巴氏杆菌 药敏试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

犊牛耐药性大肠杆菌的分离鉴定 被引量：1

16

作者 康立超 黄新 +3 位作者 何延华 吴卫民 钟发刚 薄新文 《新疆农垦科技》 2010年第2期53-54,共2页

近两年，石河子地区某牛场连续出现1月龄犊牛发病死亡，最近一批犊牛发病率为56％，致死率为50％。其临床症状：病初精神沉郁，腹泻下痢。病理变化：小肠粘膜大量出血，其它脏器无明显变化。通过对病死牛采集的病料进行实验室诊断，确... 近两年，石河子地区某牛场连续出现1月龄犊牛发病死亡，最近一批犊牛发病率为56％，致死率为50％。其临床症状：病初精神沉郁，腹泻下痢。病理变化：小肠粘膜大量出血，其它脏器无明显变化。通过对病死牛采集的病料进行实验室诊断，确诊为大肠杆菌感染，现将结果报告如下。 展开更多

关键词 大肠杆菌感染 犊牛 分离鉴定 耐药性 发病死亡 石河子地区 实验室诊断 临床症状

在线阅读 下载PDF 职称材料

牦牛源多杀性巴氏杆菌ompH基因原核表达及抗原性鉴定

17

作者 田亮 康立超 +2 位作者 赵文娟 薄新文 马勋 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期146-149,共4页

【目的】克隆、表达牦牛源多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白基因H(ompH)并鉴定其抗原性。【方法】扩增牦牛源多杀性巴氏杆菌去信号肽的ompH基因,构建原核表达载体pET28a-ompH,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,通过SDS-PAGE鉴定表达目的蛋白... 【目的】克隆、表达牦牛源多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白基因H(ompH)并鉴定其抗原性。【方法】扩增牦牛源多杀性巴氏杆菌去信号肽的ompH基因,构建原核表达载体pET28a-ompH,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,通过SDS-PAGE鉴定表达目的蛋白,利用Western blot检测该蛋白的抗原性。【结果】成功克隆、构建了牦牛源多杀性巴氏杆菌去信号肽的pET28a-ompH原核表达载体。诱导表达蛋白约38 kDa,Western blot检测重组蛋白具有良好的抗原性。【结论】ompH基因的成功表达为重组OmpH蛋白的血清学检测方法的建立、多克隆抗体的制备及疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 牦牛 多杀性巴氏杆菌 ompH基因 原核表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

扩展莫尼茨绦虫蛋白激酶C相互作用蛋白(PICK1)基因的克隆及序列分析

18

作者 赵文娟 康立超 +1 位作者 薄新文 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1307-1312,共6页

【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物... 【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等分析技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较及蛋白质二级结构的初步预测。【结果】获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因蛋白激酶C相互作用蛋白,全长1 527 bp,编码447个氨基酸,CDS预测存在明显的BAR,PDZ结构域。编码蛋白的理论分子质量为50.173 3 ku,等电点为5.22。【结论】获得了扩展莫尼茨绦虫蛋白激酶C相互作用蛋白的全长cDNA序列,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定基础。 展开更多

关键词 扩展莫尼茨绦虫 PICK1 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

羊源肠球菌溶血素产生条件的优化

19

作者 康立超 马勋 +1 位作者 王静梅 薄新文 《动物医学进展》 CSCD 2008年第8期45-48,共4页

为了了解肠球菌产生溶血素的最佳条件,通过在不同培养基、培养时间、酸碱度、温度、20 mL/L浓度接种剂量、血清浓度和红细胞浓度等条件下,观察羊源肠球菌溶血素产生的变化。结果表明,种子液以2%接种THB,在pH 8.5,40℃静置培养12 h^24 h... 为了了解肠球菌产生溶血素的最佳条件,通过在不同培养基、培养时间、酸碱度、温度、20 mL/L浓度接种剂量、血清浓度和红细胞浓度等条件下,观察羊源肠球菌溶血素产生的变化。结果表明,种子液以2%接种THB,在pH 8.5,40℃静置培养12 h^24 h,溶血能力较好。 展开更多

关键词 肠球菌 溶血素 优化

在线阅读 下载PDF 职称材料

RNA干扰及其在寄生线虫研究中的应用

20

作者 陈南颖 何延华 +1 位作者 薄新文 王新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期64-67,共4页

RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)是一种基因沉默技术,它通过特异性降解靶序列的mRNA而引起转录后基因沉默(post transcriptional gene silence,PTGS),该技术现已广泛应用于基因组功能和某些疾病的基因治疗研究。作者就RNAi的产生机... RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)是一种基因沉默技术,它通过特异性降解靶序列的mRNA而引起转录后基因沉默(post transcriptional gene silence,PTGS),该技术现已广泛应用于基因组功能和某些疾病的基因治疗研究。作者就RNAi的产生机制、作用特点、研究策略及其在寄生线虫研究中的应用情况等方面作一阐述。 展开更多

关键词 RNA干扰 寄生线虫 应用

在线阅读 下载PDF 职称材料