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长链非编码RNA AFAP1-AS1促进肿瘤侵袭转移 被引量:3
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作者 曾朝阳 孛昊 +9 位作者 龚朝建 李夏雨 连瑜 荆益州 唐艳艳 陈攀 廖前进 李小玲 熊炜 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1155-1158,共4页
人类基因组计划及其后续的DNA元件百科全书计划(The Encyclopedia of DNA Elements Project,ENCODE)研究成果表明,蛋白质编码基因序列仅占人类基因组序列的1%-3%,人基因组中绝大部分可转录的序列为长链非编码RNA(long non-coding RNA... 人类基因组计划及其后续的DNA元件百科全书计划(The Encyclopedia of DNA Elements Project,ENCODE)研究成果表明,蛋白质编码基因序列仅占人类基因组序列的1%-3%,人基因组中绝大部分可转录的序列为长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNAs)[1].Lnc RNA广泛地存在于各种生物中,且随着生物复杂程度的升高,基因组中lnc RNA序列的比例也相应地增大,提示lnc RNA在生物进化过程中可能有着重要意义[2-4]。 展开更多
关键词 非编码RNA 肿瘤侵袭 人类基因组计划 长链 生物进化过程 Elements 基因序列 蛋白质编码
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circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移 被引量:2
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作者 莫勇真 王裕民 +4 位作者 范春梅 晏其佳 曾朝阳 蒋卫红 熊芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1946-1958,共13页
目的鼻咽癌是一种来源于鼻咽上皮的恶性肿瘤,其临床特征之一是易发生淋巴转移,但是目前鼻咽癌转移的分子机制尚未阐明。circPVT1是由PVT1基因2号外显子反向拼接形成的环状RNA(circRNA),在多种肿瘤中表达上调,本文探讨了circPVT1在鼻咽... 目的鼻咽癌是一种来源于鼻咽上皮的恶性肿瘤,其临床特征之一是易发生淋巴转移,但是目前鼻咽癌转移的分子机制尚未阐明。circPVT1是由PVT1基因2号外显子反向拼接形成的环状RNA(circRNA),在多种肿瘤中表达上调,本文探讨了circPVT1在鼻咽癌侵袭迁移中的作用和分子机制。方法通过RT-qPCR检测circPVT1及其下游miRNA和FSCN1在鼻咽癌细胞的表达情况,Transwell和划痕愈合实验检测circPVT1对鼻咽癌细胞侵袭迁移的影响,RNA pull-down实验检测circPVT1结合的miRNA,双荧光素酶报告实验检测miR-24-3p和let-7a-5p靶向抑制FSCN1 mRNA表达。结果在鼻咽癌细胞中过表达circPVT1可以促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,而敲低circPVT1则可以抑制鼻咽癌细胞的侵袭迁移。进一步研究发现,circPVT1可以通过竞争性吸附miR-24-3p和let-7a-5p,上调FSCN1的表达,从而促进鼻咽癌细胞的侵袭迁移。结论circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,证实circPVT1是鼻咽癌发生发展过程中一个重要驱动因子。 展开更多
关键词 鼻咽癌 circPVT1 侵袭迁移 miR-24-3p let-7a-5p FSCN1
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微RNA的发现及其意义——2024年诺贝尔生理学或医学奖的启示 被引量:3
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作者 李文超 肖骋风 +2 位作者 曾朝阳 熊炜 曲红科 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第12期3061-3072,共12页
2024年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家维克多·安布罗斯(Victor Ambros)和加里·鲁夫昆(Gary Ruvkun),以表彰他们发现微RNA(microRNA,miRNA)及其在转录后对基因表达的调控作用。miRNA的发现,不仅开启了非编码RNA(non-codin... 2024年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家维克多·安布罗斯(Victor Ambros)和加里·鲁夫昆(Gary Ruvkun),以表彰他们发现微RNA(microRNA,miRNA)及其在转录后对基因表达的调控作用。miRNA的发现,不仅开启了非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)这一新的研究领域,也修改了生命科学领域经典的“中心法则”,即遗传信息沿着“DNA转录成mRNA,再翻译成蛋白质,最后发挥生物学功能”这一线性的传递模式,细胞内mRNA与其他ncRNA,如长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、环状RNA(circular RNA,circRNA)等由于竞争性结合miRNAs,从而形成了一个庞大而复杂的基因表达调控网络,即竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ce RNA)调控网络。同时miRNA本身也是由基因组上的基因编码,自身的表达也受其他编码或ncRNA的调控,miRNA与mRNA及其他ncRNA共同精细地调控了细胞的生命活动,并影响着机体的生理或病理功能,miRNA的表达失调与很多疾病的发生发展有着密切的联系,也为疾病诊疗提供了新的分子标记和靶点。本文总结了miRNA的发现过程、发生机制和生物学功能及miRNA与其他ncRNA之间的作用网络,并展望了miRNA的应用前景。 展开更多
关键词 微RNA 竞争性内源RNA 长链非编码RNA 环状RNA
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microRNAs与TP53基因调控网络研究进展 被引量:20
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作者 龚朝建 黄宏斌 +5 位作者 徐柯 梁芳 李小玲 熊炜 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1133-1144,共12页
TP53基因(编码p53蛋白)作为一个重要的抑瘤基因,通过调控一系列信号转导通路广泛参与了多种恶性肿瘤的发生发展,一直是肿瘤分子生物学研究领域的热点.最近的研究发现,microRNAs(miRNAs)参与了TP53的信号通路,它们之间存在着复杂的调控网... TP53基因(编码p53蛋白)作为一个重要的抑瘤基因,通过调控一系列信号转导通路广泛参与了多种恶性肿瘤的发生发展,一直是肿瘤分子生物学研究领域的热点.最近的研究发现,microRNAs(miRNAs)参与了TP53的信号通路,它们之间存在着复杂的调控网络.一方面,p53通过调控一些miRNAs的转录及转录后成熟,促进细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡和衰老,抑制肿瘤发生.另一方面,许多miRNAs,如miR-25、miR-30d、miR-125b和miR-504等可直接调控p53的表达与活性,参与TP53信号通路的调节,还有一些miRNAs则通过调节p53上下游基因,发挥重要的生物学功能.其中,最具有代表性的是miR-34家族,它们受p53直接调控并参与TP53信号通路,通过靶向抑制多个TP53信号通路关键分子的表达,发挥抑瘤作用.此外,它们还可以通过抑制沉默信息调节子,增强p53的活性,反馈调节TP53信号通路.miRNAs与TP53之间调控网络的研究,是对TP53抑瘤机制的重要补充. 展开更多
关键词 TP53基因 MIRNAS 信号通路 肿瘤 转录
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长链非编码RNA HOTAIR在恶性肿瘤中的研究进展 被引量:24
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作者 李雨薇 王裕民 +9 位作者 张雪莹 薛丹 邝彪 潘序雅 荆益州 李小玲 周鸣 熊炜 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期228-235,共8页
长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)与恶性肿瘤的发生发展密切相关.HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)是第一个被发现具有反式调控作用的lnc RNA.目前发现HOTAIR在多种肿瘤中表达上调,且HOTAIR的高表达与不... 长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)与恶性肿瘤的发生发展密切相关.HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)是第一个被发现具有反式调控作用的lnc RNA.目前发现HOTAIR在多种肿瘤中表达上调,且HOTAIR的高表达与不良预后密切相关.研究发现HOTAIR可通过与甲基化酶复合体PRC2共同作用,调控组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化(histone H3 tri-methylated at lysine 27,H3K27me3),从而影响WIF1、PTEN、p21等基因的表达,并通过这些基因调控Wnt、Akt及p53等信号通路,从而在肿瘤的细胞周期、凋亡、血管生成、侵袭与转移等过程中发挥重要功能.进一步研究HOTAIR在肿瘤中的作用机制,对深入了解恶性肿瘤的病因发病学具有重要理论意义,同时,HOTAIR作为分子标记或者潜在的靶点,在恶性肿瘤的早期诊断、疗效判断、预后预测,乃至基因治疗等方面也将具有广阔的临床应用前景. 展开更多
关键词 长链非编码RNA HOTAIR 肿瘤
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LncRNA作为ceRNA调控肿瘤的发生发展 被引量:20
6
作者 连瑜 李夏雨 +5 位作者 唐艳艳 杨丽婷 李小玲 熊炜 李桂源 曾朝阳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第3期219-225,共7页
长链非编码RNA(lncRNA)是长度大于200 bp,不编码蛋白质的内源性RNA分子.近年来的研究表明,lncRNA可以作为一种竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)吸附miRNA,参与靶基因的表达调控,从而在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用.本... 长链非编码RNA(lncRNA)是长度大于200 bp,不编码蛋白质的内源性RNA分子.近年来的研究表明,lncRNA可以作为一种竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)吸附miRNA,参与靶基因的表达调控,从而在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用.本文从lncRNA作为ceRNA发挥生物学功能这一角度,概述了相关lncRNA在肿瘤发生发展中的作用及机制.揭秘lncRNA与miRNA在肿瘤发生中的相互作用,将为肿瘤的诊断和治疗提供新思路. 展开更多
关键词 长链非编码RNA MICRORNA 肿瘤发生
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染色质免疫沉淀-测序:全基因组范围研究蛋白质-DNA相互作用的新技术 被引量:5
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作者 梁芳 徐柯 +5 位作者 龚朝建 李俏 马健 熊炜 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第3期216-227,共12页
染色质免疫沉淀-测序(ChIP-seq)是近年来新兴的将染色质免疫沉淀(ChIP)与深度测序技术相结合,在全基因组范围内分析DNA结合蛋白结合位点、组蛋白修饰、核小体定位和DNA甲基化的高通量技术.在新一代测序(NGS)技术的大力推动下,ChIP-seq... 染色质免疫沉淀-测序(ChIP-seq)是近年来新兴的将染色质免疫沉淀(ChIP)与深度测序技术相结合,在全基因组范围内分析DNA结合蛋白结合位点、组蛋白修饰、核小体定位和DNA甲基化的高通量技术.在新一代测序(NGS)技术的大力推动下,ChIP-seq提供了一种相对于ChIP-chip高分辨率、低噪音、高覆盖率的研究方法.随着测序成本的降低,ChIP-seq逐步成为研究基因调控和表观遗传机制的一种常用手段.本文就该技术的最近研究进展进行综述,并着重介绍ChIP-seq数据分析过程及该技术的实际应用情况. 展开更多
关键词 ChIP—seq 新一代测序技术 基因调控 表观遗传学 数据分析
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肿瘤细胞来源的外泌体与恶性肿瘤的进展及化疗 被引量:13
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作者 刘长红 武明花 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期526-532,共7页
外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡结构,在血液、唾液、尿液等多种体液中均有分布.作为一类重要的细胞间通信分子,外泌体含有多种具有生物活性的成分,可通过多种方式在人体中发挥调节作用.目前在多种类型的细胞中均发现外泌体的存在,而... 外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡结构,在血液、唾液、尿液等多种体液中均有分布.作为一类重要的细胞间通信分子,外泌体含有多种具有生物活性的成分,可通过多种方式在人体中发挥调节作用.目前在多种类型的细胞中均发现外泌体的存在,而肿瘤细胞来源的外泌体由于其本身的特性和功能特点,可通过微环境介导肿瘤细胞的增生、血管形成和免疫耐受,并可通过介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和胞内药物排斥反应等增加肿瘤细胞的化疗抵抗能力.同时,因其含有肿瘤细胞所分泌的特异性成分,因而可通过对外泌体中相关分子改变的检测,对疾病进行诊断和监测,并可为临床个体化用药提供新思路. 展开更多
关键词 外泌体 化疗抵抗 肿瘤微环境 MIRNA 免疫耐受
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lncRNAs参与基因表达调控机制的研究进展 被引量:7
9
作者 杨倩 黄宏斌 +3 位作者 龚朝建 熊炜 曾朝阳 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期91-95,共5页
长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一组内源性、长度超过200 nt、缺少特异完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)、无或很少有蛋白编码功能的RNAs分子。近年来的研究发现,lncRNAs与许多重要的生物学过程相关,如基因... 长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一组内源性、长度超过200 nt、缺少特异完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)、无或很少有蛋白编码功能的RNAs分子。近年来的研究发现,lncRNAs与许多重要的生物学过程相关,如基因组印记、细胞分化、免疫反应等。lncRNAs在表观遗传水平、转录水平和转录后水平等多个层面调节基因的表达,通过介导染色质重塑和组蛋白修饰、干扰转录、调节选择性剪接模式、生成小RNAs、调节蛋白质活性、改变蛋白质定位等方式,参与机体生长、发育、衰老及死亡等重要生命活动的调控。关于lncRNAs参与基因表达调控的机制有待进一步研究,这将有助于深入理解疾病的发病机制,为寻找疾病分子标记物、药物靶点提供新的方向。 展开更多
关键词 lncRNAs 表观遗传调控 转录调控 转录后调控
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一个肝癌相关长链非编码RNA的克隆及序列分析 被引量:5
10
作者 唐珂 魏芳 +15 位作者 孛昊 黄宏斌 张文玲 龚朝建 李夏雨 宋亚莉 廖前进 彭淑平 向娟娟 周鸣 马健 李小玲 熊炜 李勇 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第2期153-162,共10页
最近我们利用新一代测序(next generation sequencing,NGS)技术对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者活检标本及正常对照肝组织样品进行高通量RNA测序(RNA-sequencing,RNA-Seq),在肝癌样品中染色体11q13.1区域检测到几个相邻的... 最近我们利用新一代测序(next generation sequencing,NGS)技术对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者活检标本及正常对照肝组织样品进行高通量RNA测序(RNA-sequencing,RNA-Seq),在肝癌样品中染色体11q13.1区域检测到几个相邻的RNA-Seq信号峰,而在正常对照组织中没有检测到,且该染色体区域目前尚无已知基因登录,提示这几个RNA-Seq峰可能代表一个或多个未知的新基因.以此为线索,证实这几个RNA-Seq峰来自同一个新基因,并克隆了该基因全长序列,在克隆该基因全长序列时,发现该基因编码的RNA存在多种剪接形式,最长的转录本为3 562 bp.将该基因编码的12条代表性RNA转录本序列递交到美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)的GenBank数据库中,GenBank ID号分别为KC136297~KC136308.该基因编码的RNA没有发现明显的开放阅读框(open reading fragment,ORF),提示该基因可能编码长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA).为了探讨该lncRNA基因可能的转录调控机制,我们用生物信息学方法预测了该lncRNA基因潜在启动子区域,发现在其转录起始位点上游-719^-469 bp处有一个潜在的启动子,其中包含7个Sp1、1个STAT5和1个EGR1转录因子结合位点.该lncRNA在肝细胞癌发生发展过程中的作用机制值得进一步深入研究. 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肝细胞癌 染色体11q13 1 基因克隆 生物信息学
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MicroRNAs与非可控性炎症相关肿瘤 被引量:6
11
作者 龚朝建 张姗姗 +8 位作者 唐珂 李夏雨 向波 向娟娟 周鸣 马健 曾朝阳 熊炜 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期639-644,共6页
非可控性炎症与肿瘤之间存在密切的联系,约25%的人类肿瘤是由于非可控性炎症所引起,在几乎所有的肿瘤微环境中存在炎症细胞浸润,炎症细胞及分子影响着肿瘤发生、发展的每一步。MicroRNAs(miRNAs)通过调控一些关键基因及其信号通路,参与... 非可控性炎症与肿瘤之间存在密切的联系,约25%的人类肿瘤是由于非可控性炎症所引起,在几乎所有的肿瘤微环境中存在炎症细胞浸润,炎症细胞及分子影响着肿瘤发生、发展的每一步。MicroRNAs(miRNAs)通过调控一些关键基因及其信号通路,参与了非可控性炎症相关肿瘤起始和进展过程的调控。深入研究miRNAs作用的分子机制,可能为肿瘤的预防、早期诊断及治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 MICRORNAS 非可控性炎症 肿瘤
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肝癌相关基因的分子克隆和可变剪切分析 被引量:4
12
作者 刘艳红 赵艳洁 +2 位作者 房淑娟 李跃辉 李官成 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期869-875,共7页
目的:获取肝癌相关基因(hepatomaassociatedgene,HTA)的mRNA分子全长序列并对其可变剪接进行分析,检测其转录本在各肝癌细胞系中的表达,为进一步研究该基因在肝癌发生、发展中的作用奠定基础。方法:用3'RACE和5'RACE方法扩增HT... 目的:获取肝癌相关基因(hepatomaassociatedgene,HTA)的mRNA分子全长序列并对其可变剪接进行分析,检测其转录本在各肝癌细胞系中的表达,为进一步研究该基因在肝癌发生、发展中的作用奠定基础。方法:用3'RACE和5'RACE方法扩增HTA基因的全长序列并对其序列信息和可变剪接进行扩增和测序分析,用Northern印迹检测该基因转录本在不同肝癌和正常肝细胞系中的表达。结果:HTA基因全长序列为1414bp,经分析该序列包含3个外显子,2个内含子,其中2号内含子在可变剪接中被作为外显子表达。Northern印迹显示HTA基因1.7 kb转录本和1.4 kb转录本均表达于恶性肝癌细胞系,而不表达于正常细胞系。结论:成功获得了HTA基因的全长序列并对其可变剪接进行了分析,2个大小不同的转录本均在肝癌细胞系中特异性表达,作为一个肝癌相关基因值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 肝癌相关基因 全长克隆 可变剪接
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神经系统中富亮氨酸重复序列跨膜蛋白的功能研究进展 被引量:3
13
作者 徐刚 武明花 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第4期314-318,共5页
富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)是一种常见的蛋白质结构域.含有富亮氨酸重复序列的蛋白质简称LRR蛋白.LRR蛋白在真核生物和原核生物的细胞和组织中广泛分布,其定位的特异性以及与之相互作用蛋白质的复杂性,决定了LRR蛋白功... 富亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)是一种常见的蛋白质结构域.含有富亮氨酸重复序列的蛋白质简称LRR蛋白.LRR蛋白在真核生物和原核生物的细胞和组织中广泛分布,其定位的特异性以及与之相互作用蛋白质的复杂性,决定了LRR蛋白功能的多样性.许多LRR蛋白相对特异性表达于神经系统,绝大多数在神经系统中高表达的LRR蛋白属于跨膜蛋白,它们主要作为细胞黏附分子或配体结合蛋白参与突触的形成、神经突起的生长发育、神经递质的转移和释放等神经系统正常生理活动.LRR蛋白的异常表达将会导致神经、精神系统疾病的发生. 展开更多
关键词 富亮氨酸重复序列 跨膜蛋白 神经系统 结构 功能
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天然免疫分子乳铁蛋白抑制鼻咽癌的发生发展 被引量:1
14
作者 黄宏斌 邓敏 +8 位作者 郑瑛 马健 张文玲 周艳宏 廖前进 熊炜 李小玲 曾朝阳 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第4期319-324,共6页
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发病具有明显的区域和人种聚集性,主要高发于中国南方和东南亚一些国家;鼻咽癌发病还具有明显的家族聚集性,有癌家族史的鼻咽癌患者约占10%,而且大部分发生在一级亲属中.明显的区域和人群聚集... 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发病具有明显的区域和人种聚集性,主要高发于中国南方和东南亚一些国家;鼻咽癌发病还具有明显的家族聚集性,有癌家族史的鼻咽癌患者约占10%,而且大部分发生在一级亲属中.明显的区域和人群聚集以及高比例的家族性发病提示遗传因素在鼻咽癌的发病过程中具有重要作用. 展开更多
关键词 鼻咽癌 乳铁蛋白 免疫分子 发病过程 生发 天然 聚集性 中国南方
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人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白的融合表达及其体内靶向性研究(英文) 被引量:1
15
作者 黄建 李跃辉 +4 位作者 郭锋杰 童永清 王甲甲 胡锦跃 李官成 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期979-986,共8页
目的:探讨人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP-SA3)的融合表达、纯化、复性及其体内靶向性。方法:将SA3,EGFP基因,插入pET-25b(+),构建EGFP-SA3/pET-25b(+)原核表达载体,测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导融合蛋白... 目的:探讨人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP-SA3)的融合表达、纯化、复性及其体内靶向性。方法:将SA3,EGFP基因,插入pET-25b(+),构建EGFP-SA3/pET-25b(+)原核表达载体,测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导融合蛋白EGFP-SA3的表达,复性、纯化后经SDS-PAGE鉴定;EGFP-SA3与HepG2细胞经体外孵育后在荧光显微镜下观察单链抗体SA3与肝癌细胞的结合作用;然后通过尾静脉将其注射入荷肝癌裸鼠体内观察EGFP-SA3的体内靶向作用。结果:SA3,EGFP基因分别插入载体pET-25b(+)后,重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)分别行NcoI-XhoI和NcoI-EcoRI双酶切,结果发现在750 bp左右出现一条带,与EGFP基因大小一致,在1.5 kb左右处出现一条带,与EGFP和SA3两个基因片段的总大小一致,DNA测序结果证实融合表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)构建成功;重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示融合蛋白EGFP-SA3分子质量为58 kD,主要以包涵体的形式存在;纯化、复性后,免疫荧光检测结果显示SA3与HepG2细胞能特异性地靶向结合;注射了EGFP-SA3的荷肝癌小鼠的肿瘤部位有绿色荧光发出,显示EGFP-SA3具有良好的肿瘤特异性。结论:融合蛋白EGFP-SA3与HepG2细胞有较强的结合能力,单链抗体SA3有望用于肝癌的分子诊断和靶向治疗。 展开更多
关键词 肝癌 SCFV EGFP 融合蛋白 靶向治疗 原核表达
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CSPG4基因在鼻咽癌中的表达分析 被引量:1
16
作者 宋亚莉 李小玲 +13 位作者 黄丽丽 李俏 孙梦熙 张文玲 石磊 范松青 龚朝建 喻正源 向波 彭淑平 熊炜 阳剑波 曾朝阳 李桂源 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期1997-2000,共4页
目的:研究硫酸软骨素多糖蛋白4(CSPG4)基因在鼻咽癌及对照组织中的表达。方法:采用实时荧光定量PCR测定CSPG4基因在4例正常鼻咽上皮和18例鼻咽癌组织(其中Ⅱ期6例,Ⅲ期5例,Ⅳ期7例)中的表达情况;通过构建包含92例对照和187例鼻咽癌的组... 目的:研究硫酸软骨素多糖蛋白4(CSPG4)基因在鼻咽癌及对照组织中的表达。方法:采用实时荧光定量PCR测定CSPG4基因在4例正常鼻咽上皮和18例鼻咽癌组织(其中Ⅱ期6例,Ⅲ期5例,Ⅳ期7例)中的表达情况;通过构建包含92例对照和187例鼻咽癌的组织芯片,应用免疫组织化学检测CSPG4蛋白的表达和分布。结果:正常鼻咽上皮中CSPG4基因mRNA表达水平较低,在鼻咽癌中CSPG4表达上调且与临床分期呈正相关,差异具有统计学意义(P=0.017)。免疫组织化学结果表明鼻咽癌中CSPG4蛋白表达水平高于对照组,91.98%的鼻咽癌组织中CSPG4为强阳性表达,而对照组的强阳性率为76.09%(P=0.001)结论:CSPG4在鼻咽癌中随着临床进展表达逐渐上调,可能参与了鼻咽癌的发生发展,具体机制及临床应用前景值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 鼻咽癌 硫酸软骨素多糖蛋白4 表达 组织芯片
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全人源鼻咽癌抗独特型抗体I50的原核表达及活性鉴定(英文)
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作者 王甲甲 李亚林 +2 位作者 郭锋杰 周国华 李官成 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期185-191,共7页
目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性。方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50。含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(D... 目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性。方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50。含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(DE3)经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导能够得到有效表达。采用Western印迹鉴定I50蛋白的表达,采用透析复性方法恢复I50蛋白的活性,并用Dot-ELISA法,淋巴细胞增殖实验鉴定其活性。结果:成功的构建了原核表达载体pET25b-I50,并经IPTG诱导获得了I50蛋白,该蛋白以包涵体形式高效表达,经纯化后纯度达90%以上。Western印迹鉴定表达的蛋白相对分子质量约15000,与预期相符。Dot-ELISA法鉴定复性后的蛋白已恢复活性,并能够刺激淋巴细胞的增殖,且呈剂量依赖关系。结论:成功获得了有活性的I50抗独特型抗体,为其应用于鼻咽癌的治疗鉴定了基础。 展开更多
关键词 抗独特型抗体 鼻咽癌 原核表达 DOT-ELISA
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下一代测序在孟德尔型运动障碍中的应用(英文)
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作者 王裕民 潘序雅 +9 位作者 薛丹 李雨薇 张雪莹 邝彪 郑嘉博 邓昊 李小玲 熊炜 曾朝阳 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期197-205,共9页
在过去10年中,下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)得到了十分迅速的发展。与传统测序相比,NGS具有高通量和高灵敏性等优点。孟德尔型运动障碍是一类常见的神经疾病。由于样本较少等原因,通过连锁分析等传统方法寻找新的孟... 在过去10年中,下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)得到了十分迅速的发展。与传统测序相比,NGS具有高通量和高灵敏性等优点。孟德尔型运动障碍是一类常见的神经疾病。由于样本较少等原因,通过连锁分析等传统方法寻找新的孟德尔型运动障碍尤其是罕见疾病的致病基因已经变得越来越困难,而NGS则可作为发现新的致病基因的理想手段。目前NGS已被应用于多种孟德尔型运动障碍的研究。本文将从基因组和转录组的角度对NGS在孟德尔型运动障碍中的最新应用进行综述,并展望NGS在罕见孟德尔型疾病中的应用。 展开更多
关键词 下一代测序 运动障碍 孟德尔型疾病
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低氧诱导因子-1:细胞适应氧供应改变的关键蛋白 被引量:21
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作者 梁楚婷 郭炜骅 +7 位作者 谭理 贺筠博 熊芳 张姗姗 曾朝阳 熊炜 李桂源 郭灿 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1041-1049,共9页
2019年诺贝尔生理学或医学奖授予威廉·凯林(William Kaelin Jr)、彼得·拉特克里夫爵士(Sir Peter Ratcliffe)和格雷格·赛门扎(Gregg Semenza),以表彰他们在细胞感知和适应缺氧机制上做出的重要贡献.低氧诱导因子-1(hypox... 2019年诺贝尔生理学或医学奖授予威廉·凯林(William Kaelin Jr)、彼得·拉特克里夫爵士(Sir Peter Ratcliffe)和格雷格·赛门扎(Gregg Semenza),以表彰他们在细胞感知和适应缺氧机制上做出的重要贡献.低氧诱导因子-1(hypoxiainducible factor-1,HIF-1)在细胞适应氧供应改变中起关键作用,可作为转录因子改变基因表达,通过提高机体携氧能力、增加血液供应、改变代谢方式等途径来适应缺氧环境.而HIF-1的功能也受到各种机制调控:泛素化-蛋白酶体途径降解和转录因子活性抑制.HIF-1与抑癌蛋白(protein von Hippel-Lindau,pVHL)、脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase,PHD)、HIF抑制因子(factor inhibiting HIF,FIH)等构成了严密有序的调节网络.本文总结了3位诺贝尔奖获得者的研究成果,并结合最新的研究进展,系统阐述了HIF-1表达量调节机制和HIF-1介导的细胞适应缺氧环境机制. 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1 缺氧 EPO VEGF VHL PHD FIH
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免疫检查点疗法:战胜癌症的革命性突破——写在2018年诺贝尔生理学或医学奖颁布之际 被引量:11
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作者 蒋贤杰 汪婕 +7 位作者 邓湘赢 李小玲 李夏雨 曾朝阳 熊炜 李桂源 熊芳 郭灿 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1178-1186,共9页
恶性肿瘤是目前全球面临的最大问题之一,在每年引发死亡的各类致死因素中,恶性肿瘤排在首位.中国由于环境恶化以及饮食等方面的原因,患恶性肿瘤人数也正在逐年上升.当前对于肿瘤的治疗方式包括手术切除、放疗、化疗等.但是由于肿... 恶性肿瘤是目前全球面临的最大问题之一,在每年引发死亡的各类致死因素中,恶性肿瘤排在首位.中国由于环境恶化以及饮食等方面的原因,患恶性肿瘤人数也正在逐年上升.当前对于肿瘤的治疗方式包括手术切除、放疗、化疗等.但是由于肿瘤细胞生长迅速、易转移以及对放化疗的抵抗等生物学特性,常规治疗方案很难将肿瘤细胞完全清除,因此经常会出现肿瘤复发的情况. 展开更多
关键词 诺贝尔生理学或医学奖 革命性 检查点 恶性肿瘤 癌症 疗法 免疫 生物学特性
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