钙调素在脑缺血与再灌注时含量和分布的变化 被引量：5

1

作者 唐放鸣 张光毅 +2 位作者 董红燕 赵文君 赵昇皓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期258-261,共4页

本文采用ELISA和免疫胶体金标记电镜技术,研究了蒙古沙土鼠急性脑缺血及再灌注后CaM的含量和分布变化。ELISA测定结果;结扎双侧颈总动脉10分钟后,CaM含量较正常组显著降低(P<0.01),再灌注20分钟,CaM含量较缺血10分钟组显著降低(P<... 本文采用ELISA和免疫胶体金标记电镜技术,研究了蒙古沙土鼠急性脑缺血及再灌注后CaM的含量和分布变化。ELISA测定结果;结扎双侧颈总动脉10分钟后,CaM含量较正常组显著降低(P<0.01),再灌注20分钟,CaM含量较缺血10分钟组显著降低(P<0.01),免疫胶体金电镜观察表明,缺血组和缺血再灌组每个视野胶体金颗粒数明显低于正常组(P<0.01),在缺血神经元突触附近,可见胶体金颗粒明显减少。 展开更多

关键词 脑缺血 灌注法 钙调素

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脑缺血和再灌注时Ca^（2＋）／CaMPKII活性的变化及苄丙咯的影响 被引量：4

2

作者 唐放鸣 张光毅 +1 位作者 赵文君 赵 皓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期139-142,共4页

本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分... 本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分钟，酶活性显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；（２）脑缺血１０分钟再灌注２０分钟，酶活性部分恢复，与缺血１０分钟组相比，酶活性有明显上升（Ｐ＜０．０１），但缺血２０分钟再灌注，其活性不再恢复；（３）缺血前２０分钟腹腔注射苄丙咯，在缺血１０分钟时酶活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０ｌ）。结果提示Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性对缺血非常敏感；苄丙咯对该酶活性有一定保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血 钙调素 蛋白激酶

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老化过程中人晶状体蛋白质的改变 被引量：3

3

作者 赵惠仁 胡书群 +2 位作者 任孝衡 孙林涛 杨建华 《眼科研究》 CSCD 1993年第1期26-30,共5页

用凝胶过滤和SDS-PAGE对不同年龄人透明晶状体水溶性蛋白、尿素溶蛋白及纤维细胞膜内在蛋白进行了分析。随着年龄的增长,HM+α-晶体蛋白的相对含量增加,而β-、γ-晶体蛋白降低。四岁儿童晶状体含有较多的β_1-晶体蛋白,成人晶状体则含... 用凝胶过滤和SDS-PAGE对不同年龄人透明晶状体水溶性蛋白、尿素溶蛋白及纤维细胞膜内在蛋白进行了分析。随着年龄的增长,HM+α-晶体蛋白的相对含量增加,而β-、γ-晶体蛋白降低。四岁儿童晶状体含有较多的β_1-晶体蛋白,成人晶状体则含量明显降低。成人晶状体尿素溶蛋白的主要成分为α-晶体蛋白,而四岁儿童晶状体尿素溶蛋白中α-晶体蛋白及23kDa的β-晶体蛋白成分含量均较高并含有较多的细胞骨架蛋白。细胞膜主要内在蛋白(MIP)的相对含量随年龄的增长而下降,而MP23升高。 展开更多

关键词 晶体蛋白 晶状体 老化 白内障 病理

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大鼠糖性白内障发展过程中钾钠镁锌含量的动态变化 被引量：2

4

作者 任孝衡 赵惠仁 +2 位作者 胡书群 孙林涛 顾以蒍 《眼科研究》 CSCD 1991年第4期203-205,共3页

用Jarrell-Ash 1100 ACP光谱仪,检测了大鼠糖性白内障发展过程中钾、钠、镁、锌含量的动态变化。实验表明,正常对照组大鼠晶体中钠钾比值是0.28～0.30;而在白内障成熟期,晶体中的钠/钾比值上升至3.01。镁、锌在大鼠糖性白内障晶体中的... 用Jarrell-Ash 1100 ACP光谱仪,检测了大鼠糖性白内障发展过程中钾、钠、镁、锌含量的动态变化。实验表明,正常对照组大鼠晶体中钠钾比值是0.28～0.30;而在白内障成熟期,晶体中的钠/钾比值上升至3.01。镁、锌在大鼠糖性白内障晶体中的含量低于正常对照组。 展开更多

关键词 晶状体 糖性白内障 钠 钾 镁 锌 含量 大鼠

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IATPD对淋巴细胞膜酪氨酸蛋白激酶的抑制作用 被引量：1

5

作者 张光毅 冯志民 +3 位作者 魏涌 赵升皓 俞良莉 王礼琛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第3期190-194,共5页

以人工合成的多肽PGAT为底物,鉴定了人外周血淋巴细胞膜TPK。首次发现IATPD对该酶活性有较强的抑制作用,其IC_(50)约为300μmol/L;改变其底物浓度,测定酶活性并应用Lineweaver-Burk双倒数作图法作图,结果表明,IATPD对该酶活性的抑制作用... 以人工合成的多肽PGAT为底物,鉴定了人外周血淋巴细胞膜TPK。首次发现IATPD对该酶活性有较强的抑制作用,其IC_(50)约为300μmol/L;改变其底物浓度,测定酶活性并应用Lineweaver-Burk双倒数作图法作图,结果表明,IATPD对该酶活性的抑制作用与ATP呈竞争性,与PGAT呈非竞争性。 展开更多

关键词 淋巴细胞 IATPD 酪氨酸 蛋白激酶

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人补体C_(5b～9)复合物对大鼠肾系膜细胞一氧化氮生成的影响 被引量：1

6

作者 王迎伟 何球藻 +3 位作者 秦慧莲 汤仁仙 高丰光 张光毅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期262-265,共4页

目的 :探讨人补体C5b～ 9复合物对大鼠肾小球系膜细胞 (MC)合成一氧化氮 (NO)的影响。方法 :首先提取人补体C5b～ 9复合物 ,同时培养出大鼠肾小球MC。然后用C5b～ 9复合物刺激MC ,观察刺激后 6h、2 4h、和 48h培养上清液中NO代谢产物 -... 目的 :探讨人补体C5b～ 9复合物对大鼠肾小球系膜细胞 (MC)合成一氧化氮 (NO)的影响。方法 :首先提取人补体C5b～ 9复合物 ,同时培养出大鼠肾小球MC。然后用C5b～ 9复合物刺激MC ,观察刺激后 6h、2 4h、和 48h培养上清液中NO代谢产物 -硝酸根 (NO-3 )和亚硝酸根 (NO 2 )量的变化 ,并测定刺激后 2 4h、48h时MC内环鸟苷酸 (cGMP)的水平。结果 :用人C5b～ 9复合物刺激大鼠MC后可致培养上清中NO 3 /NO 2 含量增加 ,细胞内cGMP水平上升。NO合成增多能够被NO合酶 (NOS)抑制剂—─ -NG-硝基 -L -精氨酸甲基酯 (L -NAME)所抑制。结论 :人C5b～ 9复合物能够增加大鼠肾MC的NO合成。 展开更多

关键词 补体膜 攻击复合物 肾小球系膜细胞 一氧化氮

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大鼠肾脏和其它组织中磷酸酪氨酸蛋白的研究 被引量：2

7

作者 张明志 张光毅 +1 位作者 王迎伟 赵升皓 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第2期213-218,共6页

本文采用P-tyr-BSA为免疫原免疫家无得抗血清。将纯化的IgG与HRP偶联,建立了P-tyr-Pr的ELISA法,并测定了正常大鼠肾脏等组织中P-tyr-Pr含量,其分布规律如下:上清中P-tyr-Pr含量高者,其颗粒部分则低,反之亦然;其中肾脏上清中含量远比其... 本文采用P-tyr-BSA为免疫原免疫家无得抗血清。将纯化的IgG与HRP偶联,建立了P-tyr-Pr的ELISA法,并测定了正常大鼠肾脏等组织中P-tyr-Pr含量,其分布规律如下:上清中P-tyr-Pr含量高者,其颗粒部分则低,反之亦然;其中肾脏上清中含量远比其它组织(脾、肺、肝等)高。在此基础上,又研究了膜性肾炎大鼠肾脏P-tyr-Pr含量,发现其上清中的含量远远高于正常大鼠肾脏中的含量。 展开更多

关键词 磷酸酪氨酸 蛋白 肾脏

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苄丙咯、尼莫地平和尼卡地平对小鼠脑钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活力的影响 被引量：1

8

作者 唐放鸣 张光毅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期380-383,共4页

体外实验发现,苄丙咯(bepridil.Bep)能显著抑制提纯的鼠脑钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaM—PKⅠ)的活力,其半抑制浓度约为0.3mmol·L^(-1),而尼莫地平(nimodinine,Nim)和尼卡地平(nicardipine;Nic)对该酶活力均无明显影响。实验结果表... 体外实验发现,苄丙咯(bepridil.Bep)能显著抑制提纯的鼠脑钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaM—PKⅠ)的活力,其半抑制浓度约为0.3mmol·L^(-1),而尼莫地平(nimodinine,Nim)和尼卡地平(nicardipine;Nic)对该酶活力均无明显影响。实验结果表明,Bep对CaM—PKⅡ的抑制是通过擂抗CaM而实现的。 展开更多

关键词 苄丙咯 钙调蛋白 蛋白激酶

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牛脑Ca^(2+)/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ的纯化和鉴定 被引量：4

9

作者 张光毅 赵昇皓 +1 位作者 Rajendra K.Sharma Jerry H.Wang 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第4期407-413,共7页

通过一系列层析法,首次从牛脑纯化得到胶凝电泳匀一的Ca^(2+)/CaM PKⅡ。凝胶过滤法测定全酶分子量为550kD,SDS-PAGE法测定亚基分子量为55kD,推测牛脑Ca^(2+)/CaM PK Ⅱ由十个相同的亚基组成。该酶活性绝对依赖于Ca^(2+)和CaM,以63kD PD... 通过一系列层析法,首次从牛脑纯化得到胶凝电泳匀一的Ca^(2+)/CaM PKⅡ。凝胶过滤法测定全酶分子量为550kD,SDS-PAGE法测定亚基分子量为55kD,推测牛脑Ca^(2+)/CaM PK Ⅱ由十个相同的亚基组成。该酶活性绝对依赖于Ca^(2+)和CaM,以63kD PDE同工酶为底物,其AC_(50)分别为0.85μmol/L和0.18μmol/L;以酪蛋白为底物,其AC_(50)分别为0.22μmol/L和0.06μmol/L。牛脑Ca^(2+)/CaM PK Ⅱ旣能催化63kD PDE同工酶等多种蛋白或酶磷酸化,又能进行自身磷酸化。该酶催化63kD PDE同工酶最大磷酸参入量为1mol/mol亚基。磷酸化型63kD PDE同工酶的Ca^(2+)的AC_(50)高于非磷酸化型。 展开更多

关键词 钙调素 蛋白激酶 牛脑 提纯 鉴定

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猪脾脏酪氨酸蛋白激酶的研究

10

作者 张光毅 陆梁 +2 位作者 赵文君 赵升皓 向仁德 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第5期589-594,共6页

采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析和Tyrosine-agarose亲和层析,首次从猪脾脏30000Xg颗粒中部分纯化了酪氨酸蛋白激酶,其比活性约为12000pmol.min^(-1).mg^(-1)。磷酸氨基酸分析表明,该酶能催化合成多肽poly(Glu.Ala.Tyr)_n(6:3:1)... 采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析和Tyrosine-agarose亲和层析,首次从猪脾脏30000Xg颗粒中部分纯化了酪氨酸蛋白激酶,其比活性约为12000pmol.min^(-1).mg^(-1)。磷酸氨基酸分析表明,该酶能催化合成多肽poly(Glu.Ala.Tyr)_n(6:3:1)中的酪氨酸(Tyr)磷酸化,对该多肤废物和ATP的Km值分别约为2mg/mL和15μmol/L。Mn^(2+)对部分纯化的酪氨酸蛋白激酶的最大激活活性高于Mg^(2+),其AC_(50)分别约为1.4mmol/L和8mmol/L;发现红花素能强烈地抑制该酶活性,其IC_(50)约为125μmol/L。 展开更多

关键词 猪 脾脏 酪氨酶 蛋白激酶

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磷酸化和脱磷酸化对牛脑63kD环核苷酸磷酸二酯酶同工酶活性的调节

11

作者 张光毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第4期290-293,298,共5页

本文报道了CaM依赖性磷酸化和脱磷酸化对牛脑63kD PDE同工酶活性的调节作用。实验结果如下:(1)在存在Ca^(2+)和CaM时,提纯的牛脑Ca^(2+)/CaM-PK Ⅱ能催化牛脑63kD PDE同工酶磷酸化。最大磷酸参入量是1mol/mo1亚基;(2)在Ni^(2+)和CaM存在... 本文报道了CaM依赖性磷酸化和脱磷酸化对牛脑63kD PDE同工酶活性的调节作用。实验结果如下:(1)在存在Ca^(2+)和CaM时,提纯的牛脑Ca^(2+)/CaM-PK Ⅱ能催化牛脑63kD PDE同工酶磷酸化。最大磷酸参入量是1mol/mo1亚基;(2)在Ni^(2+)和CaM存在时,提纯的牛脑钙调神经磷酸酶能催化磷酸化型63kDPDE同工酶脱磷酸化;(3)CaH^(2+)对磷酸化型63kD PDE同工酶的半激活浓度(AC_(50))高于非磷酸化型。 展开更多

关键词 PDE 同功酶 牛脑 磷酸化 脱磷酸化

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