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免疫检查点及抑制剂抗肿瘤作用的研究进展 被引量:2
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作者 付强 卢钟琦 +2 位作者 常颖 金铁峰 张美花 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第2期288-293,共6页
近年来,肿瘤免疫治疗备受瞩目,随着研究的深入而迅速发展,产生了多种重要的治疗策略。免疫检查点抑制剂已成为该领域中的核心方法之一,其研究成果受到广泛关注。该文拟对当前已知的几种抗肿瘤免疫检查点及其相关治疗进展进行系统综述,包... 近年来,肿瘤免疫治疗备受瞩目,随着研究的深入而迅速发展,产生了多种重要的治疗策略。免疫检查点抑制剂已成为该领域中的核心方法之一,其研究成果受到广泛关注。该文拟对当前已知的几种抗肿瘤免疫检查点及其相关治疗进展进行系统综述,包括PD-1/PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3、TIGIT和VISTA等关键检查点。通过详细探讨这些检查点的作用机制、现有的临床应用情况以及未来的研究方向,旨在为优化肿瘤免疫治疗策略提供有力参考与指导。 展开更多
关键词 肿瘤 免疫治疗 免疫检查点 抑制剂
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C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)在肝癌中的表达及其对预后的预测价值
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作者 金丽莹 王姝涵 杨洋 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2025年第5期934-941,共8页
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)在肝癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系,并进一步评估其在肝癌预后中的潜在预测价值。方法分别于TIMER、UALCAN、TNMplot及GEO数据库收集资料,采用生物信息学分析C1QTNF3基... 目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)在肝癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系,并进一步评估其在肝癌预后中的潜在预测价值。方法分别于TIMER、UALCAN、TNMplot及GEO数据库收集资料,采用生物信息学分析C1QTNF3基因在泛癌、正常组织与肝癌组织,以及癌组织及其癌旁组织中的表达水平。选取90例肝癌患者的肝癌组织及其癌旁组织标本,收集患者年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤数目等临床资料。计量资料组间比较采用成组t检验或配对t检验;计数资料组间比较采用χ^(2)检验。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验分析C1QTNF3表达水平与肝癌患者生存期的关系。Cox回归模型分析影响肝癌患者预后的危险因素,受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析不同时间点C1QTNF3表达对肝癌患者预后的预测能力。结果生物信息学分析结果显示,C1QTNF3基因在多种恶性肿瘤组织中表达上调,尤其在肝癌组织中(P<0.001);C1QTNF3基因在肝癌组织中的表达量高于正常组织及其癌旁组织(P值均<0.01)。90例肝癌患者免疫组化染色结果显示,C1QTNF3主要表达于细胞质,少量表达于细胞核,且在癌旁组织中主要呈阴性表达,在肝癌组织中呈阳性表达。C1QTNF3蛋白在肝癌组织中的阳性表达率(76.67%vs 33.33%)和强阳性表达率(54.44%vs 5.56%)均显著高于癌旁组织(χ^(2)值分别为34.141、51.217,P值均<0.01)。肿瘤直径≥5 cm、晚期、肝硬化、HBsAg阴性和GGT≥50 U/L肝癌患者的C1QTNF3蛋白强阳性表达率均显著高于肿瘤直径<5 cm、早期、无肝硬化、HBsAg阳性和GGT<50 U/L的肝癌患者(P值均<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,肿瘤直径、复发情况和C1QTNF3表达是肝癌患者预后的影响因素(P值均<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,C1QTNF3表达水平和复发情况是影响肝癌患者生存期的独立危险因素(P值均<0.05)。生存曲线结果显示,所有肝癌患者中,C1QTNF3高表达(强阳性)者相较于低表达者,总生存率和无瘤生存率均更短(χ^(2)值分别为17.010、13.647,P值均<0.001);在肿瘤直径≥5 cm、早/晚期、复发、肝硬化、HBsAg阳性、ALT<40 U/L、ALT≥40 U/L和GGT≥50 U/L的肝癌患者中,C1QTNF3高表达者的总生存率均显著降低(χ^(2)值分别11.086、5.578、5.295、19.159、16.391、13.774、10.119、8.152、12.035,P值均<0.05)。ROC曲线结果显示,C1QTNF3表达在5年时的预测潜力最强,ROC曲线下面积为0.77。结论C1QTNF3在肝癌组织中呈高表达,其表达水平和复发情况与肝癌患者的生存期密切相关,C1QTNF3蛋白高表达患者生存率更低。 展开更多
关键词 肝肿瘤 脂肪因子类 预后
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NVP-BEZ235抑制肝癌细胞HepG2的增殖和迁移及机制研究 被引量:6
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作者 孙洁 孔界男 +2 位作者 刘超 林贞花 任香善 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1164-1171,共8页
目的 探究NVP-BEZ235对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235(0、25、50、100、250、500 nmol·L^-1)处理HepG2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对HepG... 目的 探究NVP-BEZ235对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235(0、25、50、100、250、500 nmol·L^-1)处理HepG2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt^Ser473 、p-S6^Thr389 、p-4E-BP1^Thr37/46 的表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin^Tyr353 表达下调。结论 NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt^Ser473 、p-S6^Thr389 、p-4E-BP1^Thr37/46 的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。 展开更多
关键词 NVP-BEZ235 肝癌 增殖 迁移 Six1/Ezrin 上皮-间质转化
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AZD8055抑制胆管癌细胞HuCCT1的迁移及EMT进程的机制研究 被引量:1
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作者 王雪 毕宇宁 +5 位作者 闫文帝 张鑫 董颖 匡子藤 林贞花 任香善 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1429-1436,共8页
目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055在抑制人胆管癌细胞HuCCT1的迁移及EMT进程中的作用及分子机制。方法MTT法与平板克隆形成实验检测AZD8055对胆管癌细胞增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测AZD8... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055在抑制人胆管癌细胞HuCCT1的迁移及EMT进程中的作用及分子机制。方法MTT法与平板克隆形成实验检测AZD8055对胆管癌细胞增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测AZD8055对HuCCT1细胞迁移能力的影响;Western blot法检测EMT标志相关蛋白、Akt/mTOR信号通路蛋白及DEK蛋白的表达;利用STITCH、GeneMANIA数据库,分析AZD8055、DEK、Akt信号通路相互作用关系;在DEK基因沉默后,检测胆管癌细胞增殖活力、迁移能力及Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达水平的变化。结果AZD8055可抑制胆管癌细胞的增殖及迁移能力,同时抑制Akt/mTOR信号通路相关蛋白、DEK蛋白表达及EMT的进程;沉默DEK基因可明显抑制胆管癌细胞增殖及迁移能力,并降低Akt、S6、4EBP1蛋白的磷酸化水平。结论AZD8055抑制HuCCT1细胞的迁移及EMT进程,其机制与下调DEK,抑制Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 AZD8055 胆管癌 DEK 上皮-间质转化 增殖 迁移 Akt/mTOR信号通路
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血管内皮生长因子促多囊肾大鼠胆管上皮细胞活力及胆管囊性扩张的机制研究 被引量:4
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作者 栾明月 闫文帝 +4 位作者 刘特思 吕游 佐藤保则 朴英实 任香善 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1106-1111,共6页
目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)促进多囊肾(polycystic kidney, PCK)大鼠胆管上皮细胞活力及胆管囊性扩张的机制。方法:免疫组织化学染色法检测正常和PCK大鼠肝组织中VEGF (n=6)和CD31 (n=10)的... 目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)促进多囊肾(polycystic kidney, PCK)大鼠胆管上皮细胞活力及胆管囊性扩张的机制。方法:免疫组织化学染色法检测正常和PCK大鼠肝组织中VEGF (n=6)和CD31 (n=10)的表达情况。RT-qPCR法和酶联免疫吸附实验分别检测胆管上皮细胞和培养上清液中的VEGF表达水平。WST-1比色法检测VEGF对大鼠胆管上皮细胞活力和胆管上皮细胞上清液对内皮细胞活力的影响。细胞迁移实验和管腔形成实验检测胆管上皮细胞上清液对大鼠血管内皮细胞迁移和管腔形成能力的影响。结果:免疫组织化学染色结果表明,VEGF在PCK大鼠的胆管上皮细胞中呈高表达;肝汇管区新生微血管数量明显多于正常大鼠(P<0.01);RT-qPCR法和酶联免疫吸附法检测结果表明,PCK大鼠胆管上皮细胞中VEGF mRNA和蛋白表达显著高于正常大鼠(P<0.01);WST-1结果显示,VEGF可增强PCK大鼠胆管上皮细胞活力(P<0.01);PCK大鼠胆管上皮细胞培养上清液能提高内皮细胞活力(P<0.01);VEGF siRNA和VEGF受体抑制剂可降低胆管上皮细胞活力(P<0.01);细胞迁移实验和管腔形成实验结果表明,PCK大鼠胆管上皮细胞培养上清液可提高内皮细胞迁移能力和管腔形成能力(P<0.01)。结论:PCK大鼠的胆管囊性扩张与胆管上皮细胞过度分泌VEGF存在联系。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 细胞活力 CAROLI病 多囊肾
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PP242诱导多囊肾大鼠胆管上皮细胞自噬和凋亡的机制研究 被引量:1
6
作者 闫文帝 李珍玲 +3 位作者 刘特思 李玉姬 原田宪一 任香善 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1218-1225,共8页
目的探讨mTORC1/2抑制剂PP242诱导多囊肾(polycystic kidney,PCK)大鼠胆管上皮细胞凋亡和自噬、抑制细胞增殖及胆管囊性扩张的分子机制。方法免疫组织化学染色法检测PCK大鼠胆管上皮细胞中p-mTOR和p-Akt的表达;WST-1比色法检测雷帕霉素... 目的探讨mTORC1/2抑制剂PP242诱导多囊肾(polycystic kidney,PCK)大鼠胆管上皮细胞凋亡和自噬、抑制细胞增殖及胆管囊性扩张的分子机制。方法免疫组织化学染色法检测PCK大鼠胆管上皮细胞中p-mTOR和p-Akt的表达;WST-1比色法检测雷帕霉素和PP242对胆管上皮细胞增殖活性的抑制作用,以及LC3、Beclin-1基因沉默和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对细胞增殖的影响;蛋白免疫印迹法检测PP242对PI3K/Akt信号通路相关蛋白、自噬标识蛋白LC3和Beclin-1、cleaved caspase-3表达的影响;流式细胞术和ELISA法检测PP242对细胞凋亡的影响;免疫荧光染色法检测LC3在细胞质中的表达情况;3D细胞培养检测Rictor基因沉默和雷帕霉素联用及雷帕霉素单独应用时对大鼠胆管上皮细胞成球能力的影响。结果 p-mTOR和p-Akt在PCK大鼠胆管上皮细胞中呈过表达,PP242比雷帕霉素抑制胆管上皮细胞增殖效果更为明显,且呈浓度和时间依赖性改变(P <0. 05); PP242明显抑制PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达; PP242可诱导细胞凋亡和自噬,上调cleaved caspase-3、Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。Rictor基因沉默和雷帕霉素联用比雷帕霉素单独应用对大鼠胆管上皮细胞的抑制作用更为明显; LC3、Beclin-1基因沉默和3-MA均可明显减弱PP242对细胞增殖的抑制作用(P <0. 05)。结论 PP242可通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制PCK大鼠胆管上皮细胞的增殖,其机制与细胞凋亡和自噬密切相关。 展开更多
关键词 自噬 凋亡 PI3K/Akt/mTOR信号通路 多囊肾大鼠 PP242 CAROLI病
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染色体结构维持蛋白4在乳腺癌组织中的表达及其临床病理学意义 被引量:2
7
作者 林禹伯 卢柯羽 杨洋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期888-894,共7页
目的:探究染色体结构维持蛋白4(SMC4)在乳腺癌中的表达及其评估患者预后的价值。方法:利用TIMER、GEPIA等数据库数据分析SMC4在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征间的相关性;用免疫组化法检测SMC4蛋白在乳腺癌组织中的表达,并... 目的:探究染色体结构维持蛋白4(SMC4)在乳腺癌中的表达及其评估患者预后的价值。方法:利用TIMER、GEPIA等数据库数据分析SMC4在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征间的相关性;用免疫组化法检测SMC4蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与乳腺癌临床病理特征之间的关系;通过Cox回归模型、Kaplan-Meier生存曲线、GEPIA数据库数据评估SMC4表达与乳腺癌患者生存期之间的关系。结果:生物信息学分析结果显示,SMC4 mRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01),并与临床分期、淋巴结转移及化疗耐药密切相关(均P<0.05)。免疫组化法检测结果显示,在乳腺癌组织中SMC4的阳性及强阳性表达率均显著高于癌旁组织(均P<0.05);SMC4蛋白的高表达与乳腺癌患者年龄、临床分期和淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。SMC4蛋白低表达组的患者累积生存率显著高于SMC4蛋白高表达组,尤其是在HER2阳性乳腺癌患者中(均P<0.05),且SMC4是乳腺癌患者预后的独立危险因素。结论:SMC4在乳腺癌组织中呈高表达,SMC4高表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、临床分期及预后密切相关,可作为乳腺癌诊断与预后评判的潜在标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 染色体结构维持蛋白4 免疫组织化学染色法 预后 生存分析
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GNL3蛋白在胃癌中的表达及其在细胞增殖、侵袭以及迁移中的作用 被引量:1
8
作者 常肖璐 张思齐 +4 位作者 朱莲花 金雪伦 王润子 王姝昊 朴俊杰 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期592-597,共6页
目的探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3(guanine nucleotide binding protein-like 3,GNL3)蛋白在胃癌中的表达,探明GNL3蛋白在胃癌增殖、迁移及侵袭等生物学功能中的作用。方法数据库分析GNL3 mRNA在胃癌组织中的表达情况;采用免疫组化SP法... 目的探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3(guanine nucleotide binding protein-like 3,GNL3)蛋白在胃癌中的表达,探明GNL3蛋白在胃癌增殖、迁移及侵袭等生物学功能中的作用。方法数据库分析GNL3 mRNA在胃癌组织中的表达情况;采用免疫组化SP法检测51例胃癌组织和对应癌旁正常组织中GNL3蛋白表达;χ^(2)检验分析GNL3蛋白表达与胃癌临床病理特征之间的关系;通过转染小发夹RNA(small hairpin RNA,sh-RNA)沉默胃癌细胞中GNL3的表达,并应用Western blot法验证沉默效率。采用CCK-8、平板克隆和EdU实验检测沉默GNL3对胃癌细胞增殖能力的影响。采用细胞划痕和Transwell实验检测沉默GNL3对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果SangerBox和UALCAN数据库检索结果显示,GNL3 mRNA在胃癌组织中的表达显著增加(P均<0.01)。免疫组化结果显示,GNL3蛋白在胃癌组织中的阳性率(96.1%)和高表达率(78.4%)显著高于癌旁组织(74.5%、51.0%,P<0.01),并且GNL3高表达与胃癌淋巴结转移(χ^(2)=4.933,P=0.026)具有相关性。CCK-8、平板克隆以及EdU实验结果显示,沉默GNL3可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖能力。细胞划痕和Transwell实验结果显示,沉默GNL3可抑制胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭能力。结论GNL3蛋白在胃癌组织中高表达,且与胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力密切相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 GNL3 增殖 侵袭 迁移
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NQO1过表达在卵巢黏液性囊腺癌预后评估中的意义 被引量:2
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作者 徐明 杨洋 +3 位作者 车拴龙 朴英实 林贞花 陈丽艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1461-1465,共5页
目的:探讨NAD(P)H醌氧化还原酶1[NAD(P)H-quinone oxidoreductase 1,NQO1]过表达在卵巢黏液性囊腺癌临床预后评估中的意义。方法:应用免疫组化En Vision法检测NQO1蛋白在162例卵巢黏液性囊腺癌组织、35例卵巢黏液性囊腺瘤组织和29例正... 目的:探讨NAD(P)H醌氧化还原酶1[NAD(P)H-quinone oxidoreductase 1,NQO1]过表达在卵巢黏液性囊腺癌临床预后评估中的意义。方法:应用免疫组化En Vision法检测NQO1蛋白在162例卵巢黏液性囊腺癌组织、35例卵巢黏液性囊腺瘤组织和29例正常卵巢上皮组织中的表达,并分析其过表达与卵巢黏液性囊腺癌临床病理学特点之间的关系,通过Kaplan-Meier方法进行生存分析。结果:NQO1蛋白在卵巢黏液性囊腺癌组织中的阳性率及强阳性率分别为85.8%和64.2%,显著高于卵巢黏液性囊腺瘤和正常卵巢上皮组织(P<0.01)。卡方检验结果显示,NQO1蛋白高表达与卵巢黏液性囊腺癌组织学分级和FIGO分期密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,NQO1蛋白高表达的卵巢黏液性囊腺癌患者总生存期和无病生存期均明显低于NQO1蛋白低表达患者。结论:NQO1蛋白在卵巢黏液性囊腺癌组织中呈高表达,可能成为卵巢黏液性囊腺癌预后评估的有效生物学指标。 展开更多
关键词 卵巢黏液性囊腺癌 NAD(P)H醌氧化还原酶1 免疫组化 无病生存期 预后
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BEZ235对体外前列腺癌细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 侯国军 阙慧琳 +1 位作者 孙洁 金铁峰 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期869-873,共5页
目的:探讨PI3K/mTOR双重靶向抑制剂BEZ235对人前列腺癌细胞株的增殖、迁移能力的影响。方法:采用MTT实验分析BEZ235对正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞PC3及DU145增殖能力的影响;划痕试验检测BEZ235对RWPE-1,PC3及DU145细胞迁移... 目的:探讨PI3K/mTOR双重靶向抑制剂BEZ235对人前列腺癌细胞株的增殖、迁移能力的影响。方法:采用MTT实验分析BEZ235对正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞PC3及DU145增殖能力的影响;划痕试验检测BEZ235对RWPE-1,PC3及DU145细胞迁移的影响;Western印迹及免疫荧光染色方法检测BEZ235对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物蛋白表达的影响。结果:BEZ235对PC3和DU145细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),而对RWPE-1作用不明显;BEZ235明显上调PC3和DU145细胞标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物Vimentin的表达(P<0.01)。结论:BEZ235可体外抑制PC3和DU145细胞增殖和迁移,其部分机制可能是通过抑制EMT途径而实现。 展开更多
关键词 BEZ235 前列腺癌 上皮-间质转化
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黄芩素抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路并诱导MGC-803细胞自噬 被引量:19
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作者 乔丹 李英顺 +8 位作者 邢健 孙沛林 王莹 张莹莹 陈丽艳 任香善 林贞花 金京春 朴英实 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期613-618,共6页
目的研究黄芩素(BAI)对胃癌细胞系MGC-803细胞自噬的影响。方法使用(0、 5、 15、 25、 50)μmol/L BAI处理胃癌MGC-803细胞24、 48、 72 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,吖啶橙(AO)染色结合免疫荧光细胞化学染色观察微管相关蛋白1... 目的研究黄芩素(BAI)对胃癌细胞系MGC-803细胞自噬的影响。方法使用(0、 5、 15、 25、 50)μmol/L BAI处理胃癌MGC-803细胞24、 48、 72 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,吖啶橙(AO)染色结合免疫荧光细胞化学染色观察微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62的表达确定MGC-803细胞的自噬情况, Western blot法检测细胞LC3、 P62、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、 p-AKT的蛋白水平。结果与对照组相比, BAI可显著抑制MGC-803细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性;BAI处理的MGC-803细胞内酸性溶酶体显著增加, LC3表达增强;BAI处理后可显著降低PI3K和AKT蛋白的磷酸化, LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加、上调P62蛋白的表达。结论黄芩素抑制PI3K/AKT信号通路诱导MGC-803细胞发生自噬。 展开更多
关键词 黄芩素 胃肿瘤 自噬 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶B(AKT)
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虫草素通过ERK1/2、Ezrin和Akt信号通路抑制胆囊癌细胞SNU-308的增殖和迁移 被引量:11
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作者 刘特思 吕游 +5 位作者 闫文帝 王雪 刘小庆 朴英实 林贞花 任香善 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1434-1442,共9页
目的:探讨虫草素对胆囊癌细胞SNU-308增殖和迁移的影响及其分子机制。方法:MTT法和平板集落形成实验检测不同浓度虫草素对胆囊癌SNU-308细胞活力和集落形成能力的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞凋亡和... 目的:探讨虫草素对胆囊癌细胞SNU-308增殖和迁移的影响及其分子机制。方法:MTT法和平板集落形成实验检测不同浓度虫草素对胆囊癌SNU-308细胞活力和集落形成能力的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白以及Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平;免疫荧光染色法检测细胞内LC3的表达水平;划痕愈合实验和Transwell实验检测虫草素对胆囊癌细胞迁移能力的影响;划痕实验检测Akt抑制剂和ERK1/2抑制剂及Ezrin基因沉默对细胞迁移能力的影响。结果:虫草素可显著抑制胆囊癌细胞的活力和集落形成能力(P<0.05)。流式细胞术结果显示,虫草素可诱导胆囊癌细胞凋亡(P<0.05)。Western blot结果显示,虫草素处理后Bcl-2表达降低,Bax、细胞色素C(Cyto C)、Fas、Fas L和cleaved caspase-3蛋白水平升高,自噬标识蛋白LC3-II/I比例和beclin 1表达上调(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,虫草素处理后SNU-308细胞胞浆中LC3荧光颗粒的数量明显增多。划痕实验和Transwell实验结果显示虫草素可抑制细胞迁移(P<0.05)。虫草素明显抑制Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。Ezrin基因沉默及Akti-1/2和GDC-0994均可抑制胆囊癌细胞的迁移作用(P<0.05)。结论:虫草素通过诱导凋亡和自噬抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与调控ERK1/2,Ezrin和Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 虫草素 胆囊癌 细胞增殖 迁移 AKT信号通路 ERK1/2信号通路
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AZD8055对胆管癌细胞自噬和凋亡的影响 被引量:5
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作者 刘特思 闫文帝 +4 位作者 王雪 吕游 朴英实 林贞花 任香善 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1020-1024,共5页
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055对人胆管癌HuCCT1细胞自噬和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度的AZD8055对HuCCT1细胞活力的抑制作用;吖啶橙染色检测AZD8055处理胆管癌细胞后,细胞自噬小体形成情况;West... 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055对人胆管癌HuCCT1细胞自噬和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度的AZD8055对HuCCT1细胞活力的抑制作用;吖啶橙染色检测AZD8055处理胆管癌细胞后,细胞自噬小体形成情况;Western blot法观察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3以及自噬相关标志蛋白beclin 1、LC3和p62的表达;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果:AZD8055显著抑制胆管癌细胞的活力(P<0.05)。吖啶橙染色后,AZD8055用药组橙红色颗粒增多。Western blot实验显示,AZD8055处理后,与对照组相比自噬标志蛋白beclin 1表达上调,LC3-II/LC3-I比例上调,p62表达下调;cleaved caspase-3表达降低,促凋亡蛋白Bax表达降低,抑凋亡蛋白Bcl-2表达升高(P<0.05)。流式细胞术显示,AZD8055可抑制细胞凋亡。结论:AZD8055可抑制胆管癌细胞的生长,其机制可能与诱导细胞自噬相关。 展开更多
关键词 AZD8055 胆管癌 自噬 细胞凋亡
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虫草素通过激活AMPK和MAPK信号通路抑制脂代谢抑制人胃癌细胞的增殖和迁移 被引量:9
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作者 张鑫 周雪冰 +5 位作者 高铭 吕游 王莹 杨春宇 朴英实 任香善 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期513-521,共9页
目的探讨虫草素对胃癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其分子机制。方法用(0、25、50、100)μmol/L虫草素处理MGC-803细胞、(0、5、25、50)μmol/L虫草素处理HGC-27细胞48 h。采用噻唑蓝(MTT)法和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测细胞增殖... 目的探讨虫草素对胃癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其分子机制。方法用(0、25、50、100)μmol/L虫草素处理MGC-803细胞、(0、5、25、50)μmol/L虫草素处理HGC-27细胞48 h。采用噻唑蓝(MTT)法和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测细胞增殖,集落形成实验检测细胞集落形成能力,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移能力;Hoechst33342染色观察染色质凝集情况,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测胃癌细胞凋亡;Western blot法检测脂代谢相关蛋白固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)、脂肪酸合成酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、上皮间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子Snail、Slug,基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化的AMPK(p-AMPK)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化的JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK),凋亡相关蛋白裂解型胱天蛋白酶9(c-caspase-9)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)蛋白表达。结果虫草素显著抑制胃癌细胞的增殖、集落形成及横向和纵向迁移能力;虫草素处理后癌细胞核凝集、破裂增加、凋亡率增加、c-caspase-3、c-caspase-9、c-PARP表达增加,E-cadherin蛋白表达增加,vimentin、Snail、Slug、SREBF1、FASN、ACC1、MMP2、MMP9蛋白表达明显减少;p-AMPK、p-JNK、p-p38 MAPK水平明显升高。结论虫草素通过活化AMPK、MAPK信号通路抑制脂代谢、EMT过程抑制人胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 虫草素 胃癌 细胞增殖 细胞迁移 固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)
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β拉帕醌联合PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235抑制BGC-823细胞增殖和迁移 被引量:3
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作者 崔雪莲 陈丽艳 +2 位作者 孙洁 王艺璇 林贞花 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期129-135,共7页
目的研究β拉帕醌(β-lapachone)与磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/m TOR)抑制剂NVP-BEZ235联合用药对人胃癌BGC-823细胞增殖与迁移的影响及机制。方法将BGC-823细胞分为空白对照组、1μmol/Lβ-lapachone处理组、50 nmol... 目的研究β拉帕醌(β-lapachone)与磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/m TOR)抑制剂NVP-BEZ235联合用药对人胃癌BGC-823细胞增殖与迁移的影响及机制。方法将BGC-823细胞分为空白对照组、1μmol/Lβ-lapachone处理组、50 nmol/L NVP-BEZ235处理组及1μmol/Lβ-lapachone联合50 nmol/L NVP-BEZ235处理组。采用MTT法和平板克隆形成实验检测BGC-823细胞的增殖能力;Western blot法检测细胞增殖相关蛋白磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白水平;划痕实验及TranswellTM迁移实验检测细胞迁移能力;Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子Snail及β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果与β-lapachone处理组或NVP-BEZ235处理组相比,β-lapachone联合NVP-BEZ235处理组能更显著地抑制细胞的增殖和克隆形成能力,p-AKT、p-NF-κB、p-ERK及cyclin D1的蛋白表达下调最明显;在联合处理组对细胞迁移的抑制更明显,EMT相关标志物E-cadherin表达上调,vimentin、Snail及β-catenin表达下调最明显。结论β-lapachone联合NVP-BEZ235可有效抑制BGC-823胃癌细胞增殖,可能与p-AKT、p-NF-κB、p-ERK和cyclin D1表达降低有关;并通过调控EMT进程,抑制BGC-823细胞的迁移。 展开更多
关键词 β-lapachone NVP—BEZ235 细胞增殖 迁移 上皮-间质转化 BGC-823细胞
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PKLR在胰腺癌中的表达水平及临床病理学意义 被引量:2
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作者 杨士鹏 刘颖 +3 位作者 王馨悦 杨洋 全吉淑 林贞花 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期704-713,共10页
背景与目的:胰腺癌是一种原发于消化系统的恶性肿瘤,发病率男性高于女性,且患者预后差。重组人丙酮酸激酶(pyruvate kinase isozymes R/L,PKLR)属于丙酮酸激酶家族,哺乳动物丙酮酸激酶同工酶有4种:L、R、M1和M2,其与肿瘤的发生、发展密... 背景与目的:胰腺癌是一种原发于消化系统的恶性肿瘤,发病率男性高于女性,且患者预后差。重组人丙酮酸激酶(pyruvate kinase isozymes R/L,PKLR)属于丙酮酸激酶家族,哺乳动物丙酮酸激酶同工酶有4种:L、R、M1和M2,其与肿瘤的发生、发展密切相关。已经有研究发现,PKLR会促进乳腺癌的转移。探究PKLR蛋白在胰腺癌中的临床病理学意义,分析PKLR对胰腺癌生物学行为的影响及分子机制。方法:运用免疫荧光染色检测PKLR蛋白在胰腺癌细胞中的定位;采用免疫组织化学染色EnVision法检测PKLR在胰腺癌组织中的阴性表达率、阳性表达率和强阳性表达率,并分析PKLR与胰腺癌患者临床病理学特征之间的关系;运用小干扰RNA转染技术敲减PKLR表达观察其在胰腺癌细胞中的蛋白表达水平;噻唑蓝实验检测敲低PKLR后细胞增殖活性的变化;平板克隆实验检测敲减PKLR后BxPC-3和MIA PaCa-2细胞菌落形成数量的变化;应用细胞划痕实验检测PKLR对胰腺癌细胞横向迁移能力的影响;transwell实验检测PKLR对胰腺癌细胞纵向迁移能力的影响;蛋白质印迹法(Western blot)检测PKLR对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)相关标志蛋白表达变化的影响。结果:免疫荧光结果显示,PKLR荧光信号定位于BxPC-3和MIA PaCa-2胰腺癌细胞的细胞质中;免疫组织化学染色结果表明,PKLR在胰腺癌组织中的阳性表达率(75.2%)和强阳性表达率(48.6%)显著高于正常胰腺组织(14.3%和7.1%)(P<0.01);且其表达与胰腺癌患者的组织学分级及淋巴结转移密切相关(P<0.05);小干扰RNA转染技术敲减PKLR表达后,PKLR在胰腺癌细胞中的蛋白表达水平明显下调;MTT结果显示,敲减PKLR后,细胞增殖活性明显受到抑制,且呈时间依赖性(P<0.05);平板克隆实验发现,敲减PKLR可显著减少BxPC-3和MIA PaCa-2细胞的集落形成数量;细胞划痕实验和transwell实验检测发现敲减PKLR后胰腺癌细胞的迁移能力明显受到抑制;检测PKLR对EMT标志物的影响发现,下调PKLR表达可明显抑制胰腺癌细胞的增殖及迁移能力,并上调上皮标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物vimentin和snail的表达(P<0.05)。结论:PKLR在胰腺癌的发生、发展过程中扮演着重要的促癌角色,我们将做进一步深入研究。 展开更多
关键词 胰腺癌 PKLR 增殖 迁移 上皮-间质转化
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胃癌中HSDL2过表达与临床病理特征的相关性 被引量:2
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作者 董兵 朴俊杰 +3 位作者 杨洋 朱光 秦云植 林贞花 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-6,共6页
目的探讨羟基类固醇脱氢酶样蛋白2(hydroxysteroid dehydrogenase like 2,HSDL2)在胃癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP两步法检测HSDL2蛋白在90例胃癌和20例正常胃组织中的表达,分析HSDL2蛋白过表达与胃癌临床病... 目的探讨羟基类固醇脱氢酶样蛋白2(hydroxysteroid dehydrogenase like 2,HSDL2)在胃癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP两步法检测HSDL2蛋白在90例胃癌和20例正常胃组织中的表达,分析HSDL2蛋白过表达与胃癌临床病理特征的关系,并采用GEPIA数据库进行生存分析。结果HSDL2蛋白主要定位于胃癌细胞SGC-7901和AGS的细胞质中。UALCAN数据库分析结果显示:胃癌组织中HSDL2 mRNA的表达水平明显高于正常胃组织(P<0.05)。HSDL2蛋白在胃癌组织中过表达,强阳性率为58.9%(53/90),显著高于正常胃组织(5.0%,1/20)(P<0.01)。HSDL2蛋白表达与胃癌分化程度、临床分期及肿瘤直径密切相关(P均<0.05),与患者性别、年龄及淋巴结转移无明显相关性。GEPIA数据库分析结果显示,HSDL2蛋白过表达胃癌患者无瘤生存率低于HSDL2蛋白低表达患者(P<0.05)。结论HSDL2在胃癌组织中明显过表达,其表达水平与胃癌的发生、发展及不良预后密切相关,有望成为胃癌患者预后评估的重要指标。 展开更多
关键词 胃肿瘤 HSDL2 免疫组织化学
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肝细胞癌中NCAPD2的表达及临床意义 被引量:2
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作者 刘颖 徐然 +3 位作者 王姝昊 白丽娜 林贞花 朴红心 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1421-1425,共5页
目的探讨染色体凝缩蛋白复合物Ⅰ的亚基D2(non-SMC condensinⅠcomplex subunit D2,NCAPD2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的临床价值。方法应用UALCAN数据库分析正常肝组织和HCC组织中NCAPD2 mRNA的表达及其与临床病... 目的探讨染色体凝缩蛋白复合物Ⅰ的亚基D2(non-SMC condensinⅠcomplex subunit D2,NCAPD2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的临床价值。方法应用UALCAN数据库分析正常肝组织和HCC组织中NCAPD2 mRNA的表达及其与临床病理学特征的关系;应用免疫组化SP两步法检测正常肝组织和HCC组织中NCAPD2蛋白的表达,并分析其与临床病理学特征之间的相关性;应用GEPIA和Oncolnc数据库分析NCAPD2 mRNA表达与HCC患者生存期的关系;运用GO富集分析和STRING数据库筛查NCAPD2可能参与的生物学功能及蛋白互作关系。结果UALCAN数据库分析结果显示,NCAPD2 mRNA表达在HCC组织中显著增强,其高表达与HCC临床分期、组织学分级和TP53突变呈正相关(P<0.05)。免疫组化结果显示,NCAPD2在低分化癌中的强阳性率(68.0%,17/25)明显高于中分化(34.0%,14/41)和高分化癌(25.0%,1/4)(P<0.05),NCAPD2蛋白在临床分期Ⅲ+Ⅳ期HCC组织中的强阳性率(55.0%,33/60)明显高于Ⅰ+Ⅱ期HCC组织(20.0%,2/10)(P<0.05)。与癌旁组织相比,HCC组织中NCAPD2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),且与HCC组织学分级和临床分期关系密切。生存分析结果显示,NCAPD2高表达组患者的总生存率和无瘤生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。生信分析结果显示,NCAPD2主要参与肿瘤的细胞周期和增殖等生物学功能,并与细胞周期进程相关蛋白相互作用。结论NCAPD2在HCC中异常表达且发挥重要作用,可能作为HCC早期诊断生物标志物及药物治疗新靶点。 展开更多
关键词 肝肿瘤 NCAPD2 免疫组织化学 预后评估
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基于Citespace的可视化分析STING信号通路在乳腺癌进展中的作用 被引量:4
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作者 卢钟琦 付强 +1 位作者 金铁峰 张美花 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期653-658,共6页
目的:探讨2009—2021年间国内外学者关于干扰素基因刺激因子(STING)信号通路在乳腺癌进展中的研究现状、合作情况、研究热点及发展趋势。方法:以Web of Science数据库检索乳腺癌和STING作为关键词的122篇核心合集文献作为研究对象,应用C... 目的:探讨2009—2021年间国内外学者关于干扰素基因刺激因子(STING)信号通路在乳腺癌进展中的研究现状、合作情况、研究热点及发展趋势。方法:以Web of Science数据库检索乳腺癌和STING作为关键词的122篇核心合集文献作为研究对象,应用Citespace可视化分析软件评估STING调控乳腺癌发展中的作用。结果:以2016年为时间节点,乳腺癌与STING相关的研究发文量迅速增加,其中美国发文量最多,丹娜法伯癌症研究院为排名第一的研究机构。DNA断裂过程中产生的微核激活了cGAS-STING信号通路,可有效启动肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤作用。关键词聚类分析和研究热点及发展趋势分析结果也表明,以巨噬细胞为代表的抗肿瘤免疫治疗是乳腺癌与STING相关研究领域的热点问题。结论:STING信号通路中的关键分子将成为乳腺癌防治领域的新免疫靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 干扰素基因刺激因子 信号通路 Web of Science数据库 Citespace软件
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黄芩素抑制胃癌MGC-803细胞增殖和迁移 被引量:12
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作者 孙沛林 朴日龙 +4 位作者 王莹 任香善 陈丽艳 林贞花 朴英实 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期417-422,共6页
目的:探讨黄芩素(BAI)对胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的作用及机制。方法:MGC-803细胞用不同浓度BAI处理后,采用MTT法检测细胞的存活率;平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力;E... 目的:探讨黄芩素(BAI)对胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的作用及机制。方法:MGC-803细胞用不同浓度BAI处理后,采用MTT法检测细胞的存活率;平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力;ELISA检测12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)的浓度;Western blot实验检测血小板型12-脂氧合酶(p12-LOX)、血管内皮生长因子(VEGF)、p-ezrin和上皮-间充质转化(EMT)标志物蛋白的表达。结果:BAI可显著抑制MGC-803细胞的增殖、平板集落形成及迁移(P<0.05或P<0.01),显著下调p12-LOX代谢产物12-HETE的浓度(P<0.05或P<0.01),并显著下调p12-LOX、VEGF、p-ezrin、vimentin和Snail蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01),上调E-cadherin蛋白的表达水平(P<0.01)。结论:BAI可有效抑制胃癌MGC-803细胞的增殖和迁移,其机制与BAI调控p12-LOX、VEGF、p-ezrin及EMT相关蛋白的表达变化有关。 展开更多
关键词 黄芩素 胃癌 细胞增殖 细胞迁移
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