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一种适用于肺脏转基因研究的脂质体运载系统 被引量:2
1
作者 梁剑辉 徐军 钟南山 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期129-132,共4页
目的 :构建并验证一种有肺组织靶向性的脂质体。方法 :①采用反相蒸发法构建脂质体 ,从气管滴入SD大鼠肺内 ,验证沙美特罗对大鼠肺脏摄取脂质体的影响 ;②利用此靶向脂质体将一种可表达绿色荧光蛋白 (GFP)的质粒 (pEGFPC1)通过静脉注射... 目的 :构建并验证一种有肺组织靶向性的脂质体。方法 :①采用反相蒸发法构建脂质体 ,从气管滴入SD大鼠肺内 ,验证沙美特罗对大鼠肺脏摄取脂质体的影响 ;②利用此靶向脂质体将一种可表达绿色荧光蛋白 (GFP)的质粒 (pEGFPC1)通过静脉注射入豚鼠体内 ,观察GFP在豚鼠肺内的表达。结果 :①SD大鼠肺摄取脂质体的量与时间成高度直线正相关 ;滴入后 2、4、8、12、16小时 ,大鼠 (n =6 )肺脏摄取沙美特罗靶向脂质体组的量显著高于摄取非靶向脂质体组和非靶向脂质体与沙美特罗单纯混合组的量 (P <0 0 1) ,两对照组之间在各时间点均没有显著性差异 (P >0 0 5 ) ;②注射pEGFPC1后 2 4、2 8小时发现在豚鼠气道上皮细胞有GFP表达。结论 :利用沙美特罗作为归巢装置能提高脂质体的肺脏靶向性 ,利用此靶向脂质体为载体进行肺脏的转基因研究是可行的。 展开更多
关键词 脂质体 基因治疗 靶向性 绿色荧光蛋白
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腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位表达的机制研究 被引量:1
2
作者 方怡 李冰 +2 位作者 陈娟 刘启才 冉丕鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2382-2385,共4页
目的:研究腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)表达的机制。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,将GCLC基因5’-上游调控序列不同长度的缺失体-萤火虫荧光素酶报道系统转染后分... 目的:研究腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)表达的机制。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,将GCLC基因5’-上游调控序列不同长度的缺失体-萤火虫荧光素酶报道系统转染后分析转录活性的变化;检测AP-1、NF-κB、USF与GCLC基因调控序列的结合活性。结果:GCLC基因5’-上游调控序列报道系统检测结果显示大部分(9/11)缺失体的转录活性抑制,AP-1、NF-κB、USF与GCLC基因的结合活性增强,而对应的功能元件的转录活性降低。结论:腺病毒E1A蛋白通过抑制GCLC基因5’-上游调控序列的转录活性,扩大大鼠肺泡上皮细胞氧化应激时的氧化/抗氧化失衡,其机制可能涉及E1A对辅助转录因子的抑制。 展开更多
关键词 腺病毒E1A蛋白质类 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 肺疾病 慢性阻塞性
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尾加压素Ⅱ促兔肺动脉平滑肌细胞增殖及机理探讨 被引量:6
3
作者 彭公永 何志义 +3 位作者 刘启才 李冰 钟南山 冉丕鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1597-1600,共4页
目的探讨尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,U-Ⅱ)对兔肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用及机理。方法采用植块法培养家兔PASMCs,以MTT测定和[3H]-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入法观察U-Ⅱ对PASMCs增殖的影响,加入不同浓度的几种细胞内信号转导阻断剂... 目的探讨尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,U-Ⅱ)对兔肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用及机理。方法采用植块法培养家兔PASMCs,以MTT测定和[3H]-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入法观察U-Ⅱ对PASMCs增殖的影响,加入不同浓度的几种细胞内信号转导阻断剂,观察对U-Ⅱ效应的影响。结果U-Ⅱ(10-9mol/L-10-7mol/L)浓度依赖地促进PASMCs的A值增加及[3H]-TdR掺入,以10-7mol/LU-Ⅱ的作用最明显,A值和[3H]-TdR掺入量分别较对照组高429%和685%(P<005)。10-10mol/LU-Ⅱ对PASMCs增殖无作用。尼卡地平、W7、H7、PD98059在一定浓度范围内(10-7mol/L-10-5mol/L)均可以浓度依赖地抑制U-Ⅱ诱导的PASMCs的A值增加及[3H]-TdR掺入增加。在浓度为10-5mol/L时,其抑制作用最明显,A值的抑制率分别为423%、196%、232%和105%(P<005),[3H]-TdR掺入量的抑制率分别为466%、98%、217%和147%(P<005)。结论U-Ⅱ具有较强的促PASMCs增殖的作用,其诱导PASMCs增殖是通过Ca2+、CaM、PKC、MAPK来介导的。 展开更多
关键词 尾紧张素类 肺动脉 平滑 血管
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智能控制和建模仿真在机械通气中的应用 被引量:6
4
作者 许继平 钟秋海 +1 位作者 徐远达 钟南山 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期468-473,共6页
机械通气技术对危重医学的发展具有重要的意义。呼吸机不仅作为麻醉及急救的有效手段,而且是危重患者呼吸支持的一种常用的治疗手段。文中就智能控制和建模仿真在机械通气相关医学领域中的应用进行了综述,并对其发展给予了展望。
关键词 机械通气 智能控制 建模仿真
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腺病毒潜伏感染对大鼠肺泡上皮细胞氧化/抗氧化平衡的影响 被引量:3
5
作者 方怡 李冰 +2 位作者 陈娟 刘启才 冉丕鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1205-1211,共7页
目的:研究腺病毒潜伏感染对大鼠肺泡上皮细胞氧化/抗氧化平衡的影响。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,检测氧化剂刺激时GSH、MDA的含量变化和主要抗氧化酶SOD、CAT、GPx、GST以及γ-GCS酶活性的变化。结果:腺病毒E1... 目的:研究腺病毒潜伏感染对大鼠肺泡上皮细胞氧化/抗氧化平衡的影响。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,检测氧化剂刺激时GSH、MDA的含量变化和主要抗氧化酶SOD、CAT、GPx、GST以及γ-GCS酶活性的变化。结果:腺病毒E1A蛋白通过抑制大鼠肺泡上皮细胞内γ-GCS酶的活性,抑制了氧化应激时GSH的合成和GPx及GST酶的活性;腺病毒E1A蛋白下调了细胞在氧化应激后的恢复能力。结论:腺病毒潜伏感染扩大了大鼠肺泡上皮细胞氧化应激时的氧化/抗氧化失衡,而腺病毒E1A蛋白抑制γ-GCS酶的活性是其中的关键环节。 展开更多
关键词 腺病毒潜伏感染 E1A 大鼠 肺泡上皮细胞 肺疾病 阻塞性
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乳酸菌对尘螨致哮喘小鼠的免疫调节及对P38通路的影响 被引量:4
6
作者 于宝丹 李理 徐军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期697-700,共4页
目的:比较乳酸乳球菌及植物乳杆菌对尘螨变应原致哮喘小鼠的免疫调节作用及对P38通路的影响。方法:将实验小鼠分生理盐水组、单纯尘螨致敏激发及尘螨致敏激发同时分别用乳酸乳球菌及植物乳杆菌灌胃组,进行肺泡灌洗并对肺泡灌洗液(BALF)... 目的:比较乳酸乳球菌及植物乳杆菌对尘螨变应原致哮喘小鼠的免疫调节作用及对P38通路的影响。方法:将实验小鼠分生理盐水组、单纯尘螨致敏激发及尘螨致敏激发同时分别用乳酸乳球菌及植物乳杆菌灌胃组,进行肺泡灌洗并对肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及嗜酸性粒细胞(EOS)计数,ELISA法检测经尘螨刺激的脾细胞72小时培养上清的IL4水平,Westernblot法检测脾细胞中P38总蛋白及磷酸化的P38水平。结果:哮喘组BALF细胞总数、EOS计数、脾细胞IL4水平均比生理盐水组明显增高(P<0.05),乳酸乳球菌组较哮喘组上述指标显著减低(P<0.05),而植物乳杆菌组与哮喘组比则无明显差异(P>0.05)。哮喘组与植物乳杆菌组磷酸化P38表达水平较正常对照组显著增高,乳酸乳球菌组与对照组比较基本无变化。结论:乳酸乳球菌可改善尘螨所致的小鼠哮喘反应,其免疫调节可能与P38通路的抑制有关。 展开更多
关键词 乳酸菌 哮喘 免疫调节 P38
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SARS的临床免疫 被引量:8
7
作者 徐军 陈荣昌 钟南山 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期370-371,共2页
关键词 SARS 免疫 非典型肺炎 病原学
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人大细胞肺癌多药耐药株H460/cDDP的建立及其生物学特性 被引量:5
8
作者 王涛 徐军 钟南山 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第3期222-225,共4页
目的 :建立人大细胞肺癌多药耐药株H4 6 0 /cDDP ,并对其生物学特性进行测定。方法 :以人大细胞肺癌细胞株H4 6 0为亲本细胞 ,采用顺铂大剂量间歇诱导法建立多药耐药细胞株H4 6 0 /cDDP。光镜下观察其形态学变化 ;MTT法测定药物敏感性 ... 目的 :建立人大细胞肺癌多药耐药株H4 6 0 /cDDP ,并对其生物学特性进行测定。方法 :以人大细胞肺癌细胞株H4 6 0为亲本细胞 ,采用顺铂大剂量间歇诱导法建立多药耐药细胞株H4 6 0 /cDDP。光镜下观察其形态学变化 ;MTT法测定药物敏感性 ;锥虫蓝拒染实验测定细胞生长曲线、倍增时间 ;进行染色体核型分析 ;裸鼠成瘤实验测定其体内成瘤活性。结果 :历时近 6个月建成人大细胞肺癌多药耐药株H4 6 0 /cDDP ,经鉴定其对顺铂的耐药指数为 10 .2 1,对 5 氟尿嘧啶、多柔比星 (阿霉素 )、依托泊苷 (足叶乙甙 )、甲氨蝶呤有不同程度的交叉耐药。H4 6 0 /cDDP较亲本细胞分裂高峰延迟 ,倍增时间由 2 0 .78小时延长至 36 .4 6小时 ,细胞形态改变 ,染色体变化不突出。经过反复冻存、复苏 ,上述特性保持稳定 ,并具有体内成瘤活性 ,成瘤时间较亲本细胞有所延迟。结论 :新建大细胞肺癌多药耐药株H4 6 0 /cDDP呈中等度耐药 ,多药耐药表型稳定且具有体内成瘤活性 。 展开更多
关键词 肺肿瘤 大细胞肺癌 多药耐药性 顺铂 培养的肿瘤细胞
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纤维支气管镜在肺移植术后管理中的应用 被引量:4
9
作者 刘君 崔飞 +1 位作者 蔡瑞军 何建行 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第12期1543-1545,共3页
目的探讨纤维支气管镜在肺移植术治疗终末期肺气肿病人术后管理中的作用。方法4例肺部疾病终末期患者,单侧肺移植围手术期用纤维支气管镜给予观察以及相关处理,1例术后2个月由于患者左主支气管出现狭窄,给予多次球囊扩张后放置镍钛支架... 目的探讨纤维支气管镜在肺移植术治疗终末期肺气肿病人术后管理中的作用。方法4例肺部疾病终末期患者,单侧肺移植围手术期用纤维支气管镜给予观察以及相关处理,1例术后2个月由于患者左主支气管出现狭窄,给予多次球囊扩张后放置镍钛支架。结果4例患者术后恢复良好,肺功能明显得到改善,基本生活自理。结论纤维支气管镜在肺移植患者术后的监测、治疗具有十分重要的作用。 展开更多
关键词 肺移植 纤维支气管镜 监测
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损伤对上皮细胞及上皮下成纤维细胞内皮素的影响 被引量:3
10
作者 陈兴无 徐军 钟南山 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期509-512,共4页
目的 :观察损伤的气道上皮细胞内皮素 - 1(ET - 1)的合成变化以及气道上皮损伤后对上皮下成纤维细胞ET - 1释放的影响 ,探讨ET - 1与基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)的相互关系在气道重塑中的可能地位。方法 :用ELISA法检测机械划伤和或LP... 目的 :观察损伤的气道上皮细胞内皮素 - 1(ET - 1)的合成变化以及气道上皮损伤后对上皮下成纤维细胞ET - 1释放的影响 ,探讨ET - 1与基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)的相互关系在气道重塑中的可能地位。方法 :用ELISA法检测机械划伤和或LPS刺激离体培养的气道上皮细胞 ,与机械损伤上皮复合培养的上皮下成纤维细胞 ,以及转染MMP - 9真核表达质粒的上皮细胞培养上清中ET - 1水平 ;明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法检测稳定转染ET - 1转换酶 (ECE)反义核酸上皮细胞培养上清MMP - 9酶活性。结果 :(1)气道上皮细胞经机械 +LPS损伤后 ,培养上清ET - 1水平较对照组明显增加 ;(2 )损伤上皮诱导了上皮下成纤维细胞释放ET - 1;(3)转化MMP - 9真核表达质粒的气道上皮ET - 1的释放较对照转化空载体组显著增高 ;(4)酶谱分析显示 ,表达反义内皮素转换酶RNA的气道上皮细胞损伤后MMP - 9的活性水平明显低于对照上皮细胞组。结论 :ET - 1与MMP - 9的相互影响在介导哮喘气道炎症与组织重塑的联系中起着重要的作用。 展开更多
关键词 气道上皮细胞 气道重塑 内皮素缩血管肽 基质金属蛋白酶-9
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中国南方汉族人群Clara细胞蛋白基因38A/G多态性和COPD易感性的关系 被引量:1
11
作者 刘升明 周玉民 +4 位作者 李冰 吴义 黄志宏 汤泰秦 冉丕鑫 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期246-250,共5页
目的:研究C lara细胞蛋白(CC16)基因的38A/G多态性与中国南方汉族人群慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性。方法:在广州城区和韶关农村流行病学调查人群中经严格配对选取COPD患者与非COPD受试者共332例作为研究对象,采用聚合酶链反应-单链... 目的:研究C lara细胞蛋白(CC16)基因的38A/G多态性与中国南方汉族人群慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性。方法:在广州城区和韶关农村流行病学调查人群中经严格配对选取COPD患者与非COPD受试者共332例作为研究对象,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法,检测两组CC16的各种基因型和等位基因频率。结果:COPD与非COPD组CC16基因第1外显子第38位点的基因型频率和等位基因频率分布差异无显著性(AA基因型频率:17.5%vs 17.5%;GG基因型频率:34.9%vs 42.8%;AG基因型频率:47.6%vs 39.7%;等位基因A频率:41.3%vs 37.3%;等位基因G频率:58.7%vs 62.7%)。结论:CC16基因第1外显子38A/G多态性可能与我国南方汉族人群COPD的易感性无关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 基因多态性 Clara细胞蛋白
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脉冲振荡肺功能技术的临床应用 被引量:17
12
作者 郑劲平 《实用医学杂志》 CAS 2001年第8期683-684,共2页
关键词 脉冲振荡肺功能 呼吸阻抗 测定 临床应用
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未来十年哮喘防治展望 被引量:6
13
作者 钟南山 《实用医学杂志》 CAS 2001年第6期471-472,共2页
关键词 哮喘 防治 遗传基因 治疗 预防
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支气管哮喘(一) 哮喘的基因治疗 被引量:1
14
作者 徐军 《实用医学杂志》 CAS 2001年第6期473-474,共2页
关键词 哮喘 基因治疗 腺苷A1受体反义寡核苷酸 免疫DNA
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一种改进的荧光共振能量转移方法分析同质二聚体内蛋白质-蛋白质相互作用(英文) 被引量:1
15
作者 韩福军 罗永峰 徐军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期619-629,共11页
荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer ,FRET)技术日益广泛的应用于检测活细胞中分子内和分子间的相互作用.由于FRET仅发生于相互作用的供体和受体,即供体-受体复合物之间,所以检测的FRET信号必须经标准化处理以去... 荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer ,FRET)技术日益广泛的应用于检测活细胞中分子内和分子间的相互作用.由于FRET仅发生于相互作用的供体和受体,即供体-受体复合物之间,所以检测的FRET信号必须经标准化处理以去除供体受体比例和浓度的影响然后才能够进行FRET的比较研究.由于供体和受体的比例相同,分子内FRET的检测较为简单;而分子间FRET的检测存在更多的不确定因素,导致现有的方法很难精确定量.根据1类特殊的分子间相互作用,同质二聚体的独特特征,推导出供体-受体复合物的含量,进而开发了1种同质二聚体分子间FRET的精确定量的方法,以1种同质二聚体,雌激素受体α(estrogen receptor alpha ,ERα)为供体和受体对,通过和其它的方法比较,证实了该方法用于FRET检测可获得更可靠的结果. 展开更多
关键词 雌激素受体 荧光共振能量转移 标准化 同质二聚体 蛋白质-蛋白质相互作用
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雾化溶液温度对COPD病人的影响
16
作者 梁剑辉 林冠文 +1 位作者 刘纹 钟南山 《实用医学杂志》 CAS 2005年第7期693-695,共3页
目的:测定不同温度下雾化对健康正常人与慢性阻塞性肺疾病(C O PD)病人的肺功能和症状的影响,以指导在广州冬季和寒冷地区的C O PD病人雾化吸入时是否需要加温。方法:测定30例轻中度C O PD住院病人雾化吸入室温和0℃2.5m L可必特(含0.5... 目的:测定不同温度下雾化对健康正常人与慢性阻塞性肺疾病(C O PD)病人的肺功能和症状的影响,以指导在广州冬季和寒冷地区的C O PD病人雾化吸入时是否需要加温。方法:测定30例轻中度C O PD住院病人雾化吸入室温和0℃2.5m L可必特(含0.5%沙丁胺醇0.5m L和0.025%异丙托品2m L)雾化溶液与0.9%生理盐水2.5m L混合液体前后肺功能和症状、体征的改善程度。测定20例健康成年人雾化吸入室温和0℃0.9%生理盐水5m L后肺功能的改变。结果:C O PD病人雾化吸入室温和0℃可必特雾化溶液后FE V1的改善值和临床改善评分差异无显著性;健康成年人雾化吸入室温和0℃0.9%生理盐水后FE V1的改变值差异无显著性。结论:在广州冬季和寒冷地区,对轻中度C O PD病人进行雾化吸入治疗时,不需要对雾化液进行加温。目前临床上的雾化方法已经适宜。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病(COPD) 溶液温度 0.9%生理盐水 0.9%生理盐水 健康成年人 雾化吸入治疗 寒冷地区 雾化溶液 肺功能 住院病人 异丙托品 沙丁胺醇 轻中度 可必特 FEV 显著性 室温 正常人 测定 雾化液 症状 加温 冬季
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机械通气治疗重症支气管哮喘 被引量:12
17
作者 陈荣昌 《实用医学杂志》 CAS 2001年第6期474-476,共3页
关键词 重症支气管哮喘 机械通气 治疗 气管插管 通气模式
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