肿瘤相关巨噬细胞的线粒体调控

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作者 蔡秀娥 苏士成 黎江 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2560-2569,共10页

肿瘤免疫微环境是肿瘤发生发展的重要微生态,肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤免疫微环境中最丰富的免疫细胞,具有高度可塑性和异质性。受各种环境因素的调控,肿瘤相关巨噬细胞可分化为肿瘤促进或肿瘤抑制的不同亚群。这些环境因素复杂多变,但最... 肿瘤免疫微环境是肿瘤发生发展的重要微生态,肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤免疫微环境中最丰富的免疫细胞,具有高度可塑性和异质性。受各种环境因素的调控,肿瘤相关巨噬细胞可分化为肿瘤促进或肿瘤抑制的不同亚群。这些环境因素复杂多变,但最终都是通过影响细胞内部组分、结构和功能的时间以及空间异质性来调控肿瘤相关巨噬细胞。线粒体是重要的细胞器,负责能量产生、物质代谢,也是多种信号传导的中枢。越来越多的研究发现,线粒体可以通过形态改变、代谢重编程、中间代谢产物或线粒体遗传物质等多种机制调控细胞功能。本文综述了线粒体调控巨噬细胞极化、重塑肿瘤免疫微环境的机制,并针对巨噬细胞线粒体相关肿瘤免疫治疗的现状进行了讨论和展望。 展开更多

关键词 肿瘤相关巨噬细胞 线粒体 肿瘤 肿瘤微环境 免疫原性细胞死亡

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肿瘤微环境与免疫治疗研究进展 被引量：14

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作者 陈雪曼 宋尔卫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第8期641-648,共8页

肿瘤的发生和发展包括了一系列复杂的生物学过程,其中与免疫系统的相互抗衡,直接决定了这场健康保卫战的成败.由"种子与土壤"学说展开的肿瘤微环境的研究,为解开肿瘤形成与侵袭转移之谜提供了新视角,为肿瘤免疫治疗的临床应... 肿瘤的发生和发展包括了一系列复杂的生物学过程,其中与免疫系统的相互抗衡,直接决定了这场健康保卫战的成败.由"种子与土壤"学说展开的肿瘤微环境的研究,为解开肿瘤形成与侵袭转移之谜提供了新视角,为肿瘤免疫治疗的临床应用提供了理论依据.本文综述了肿瘤微环境的主要成分及其介导的免疫耐受,及肿瘤免疫治疗的研究现状. 展开更多

关键词 肿瘤微环境 免疫耐受 免疫治疗

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外泌体lncRNA CIAT1促进膀胱癌集体侵袭的机制

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作者 刘志聪 刘戴胤 +2 位作者 龙钧天 成炽杏 黄健 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第9期1299-1308,共10页

目的探讨膀胱癌源性外泌体长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CIAT1在肿瘤集体侵袭中的作用及其分子机制,评估其临床相关性及潜在应用价值。方法首先通过高通量测序筛选出在膀胱癌及淋巴转移膀胱癌组织外泌体中高表达的lncRNAs... 目的探讨膀胱癌源性外泌体长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CIAT1在肿瘤集体侵袭中的作用及其分子机制,评估其临床相关性及潜在应用价值。方法首先通过高通量测序筛选出在膀胱癌及淋巴转移膀胱癌组织外泌体中高表达的lncRNAs,并进一步通过扩大临床样本验证其在膀胱癌组织外泌体中的表达情况。通过构建过表达和敲低CIAT1的膀胱癌细胞,我们在体外实验证实了CIAT1外泌体靶向肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)进而诱导肿瘤细胞集体侵袭的功能。接着通过RNA pull-down、RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)、双荧光素酶报告基因实验、染色质RNA免疫共沉淀(Chromatin isolation by RNA purification,ChIRP)及染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)等实验探究了CIAT1通过与hnRNPA2B1互作并调控N-cadherin的转录、进而调控膀胱癌集体侵袭的分子机制。结果高通量测序(差异倍数>1.5,P<0.05)和临床样本验证(P<0.01)证实CIAT1在膀胱癌组织外泌体中相对表达高于癌旁正常组织外泌体。体外实验证实外泌体CIAT1被CAFs靶向摄取,进而通过调控CAFs显著促进膀胱癌的集体侵袭能力,过表达CIAT1组相比对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度均上调(均P<0.01)。在机制上,CIAT1通过结合hnRNPA2B1被包装进入外泌体,并被CAFs靶向摄取后调控N-cadherin启动子组蛋白H3K4me3修饰而激活N-cadherin的转录,并且过表达CIAT1组相比对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度均上调(均P<0.01);而与过表达CIAT1同时阻断N-cadherin组相比,对照组共培养模型的集体侵袭链总数目和总长度无显著变化,差异无统计学意义(均P>0.05);即阻断N-cadherin可逆转CIAT1对膀胱癌集体侵袭的促进作用。进一步临床数据相关性分析证实CIAT1调控的N-cadherin与膀胱癌患者集体侵袭密切相关(P<0.01)。结论膀胱癌源性外泌体CIAT1能够靶向CAFs调控其N-cadherin转录,进而促进膀胱癌集体侵袭。 展开更多

关键词 膀胱癌 外泌体 lncRNA 集体侵袭

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CircMYCBP2促进膀胱癌淋巴管癌栓形成的机制 被引量：1

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作者 刘戴胤 李秋燕 陈长昊 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第8期1139-1148,共10页

目的探讨在淋巴转移阳性膀胱癌组织中高表达的环状RNA(circular RNA,circRNA) MYCBP2在增强膀胱癌细胞黏附能力介导淋巴管癌栓形成中的作用机制,评估其临床相关性及潜在应用价值。方法首先通过高通量测序筛选出在淋巴转移阳性膀胱癌组... 目的探讨在淋巴转移阳性膀胱癌组织中高表达的环状RNA(circular RNA,circRNA) MYCBP2在增强膀胱癌细胞黏附能力介导淋巴管癌栓形成中的作用机制,评估其临床相关性及潜在应用价值。方法首先通过高通量测序筛选出在淋巴转移阳性膀胱癌组织中高表达的circRNA,并进一步通过扩大临床样本验证其在膀胱癌组织中的表达情况。通过circBank生物信息网站预测其编码能力,免疫共沉淀结合银染实验及蛋白质印迹(Western blot,WB)检测编码短肽。通过RNA pulldown、实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和WB实验探究circMYCBP2与真核翻译起始因子3亚基H(eukaryotic translation initiation factor 3 subunit H,EIF3H)相互作用介导翻译及调控血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)的转录,进而促进脉管癌栓形成的分子机制。接着通过在体外构建过表达和敲低circMYCBP2的膀胱癌细胞,结合跨内皮细胞迁移实验和划痕实验验证circMYCBP2编码的短肽对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。结果高通量测序和临床大样本实验分析证实circMYCBP2在淋巴转移阳性的膀胱癌组织中高表达。体外实验证实过表达circMYCBP2能显著促进膀胱癌细胞跨越淋巴管内皮细胞。机制上,circMYCBP2通过IRES依赖机制结合EIF3H编码MYCBP2-227aa,过表达MYCBP2-227aa后VCAM-1的信使RNA(message RNA,mRNA)稳定性增加,进而增强UM-UC-3细胞侵袭能力。结论circMYCBP2通过EIF3H介导的IRES依赖翻译机制编码短肽MYCBP2-227aa,该短肽的表达影响VCAM-1的表达水平和膀胱癌细胞的侵袭能力。充分阐述了circMYCBP2在淋巴管癌栓形成及淋巴转移中发挥的重要生物学作用及其分子机制,为膀胱癌的早期淋巴转移靶向治疗提供了潜在生物标志物及干预靶点。 展开更多

关键词 膀胱癌 淋巴管癌栓 circRNA翻译 内部核糖体进入位点

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超声对乳腺单纯黏液癌与纤维腺瘤鉴别诊断的价值 被引量：1

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作者 王红莉 胡越 +5 位作者 谭翠 顾然 梅静思 余玥幸 陈丽莉 龚畅 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期631-636,共6页

【目的】探讨乳腺单纯黏液癌(PMC)和纤维腺瘤(FA)的超声表现差异,为临床鉴别诊断提供参考。【方法】回顾性搜集2012年1月至2021年1月间在中山大学孙逸仙纪念医院就诊的连续乳腺PMC初诊患者50例及2018年6月至2019年1月间的连续乳腺FA初... 【目的】探讨乳腺单纯黏液癌(PMC)和纤维腺瘤(FA)的超声表现差异,为临床鉴别诊断提供参考。【方法】回顾性搜集2012年1月至2021年1月间在中山大学孙逸仙纪念医院就诊的连续乳腺PMC初诊患者50例及2018年6月至2019年1月间的连续乳腺FA初诊患者100例超声资料。依据2013年版乳腺影像报告与数据系统(BI-RADS)评估两组病变的超声图像特征,并比较两组患者年龄、病变的长径及超声图像特征的差异。【结果】PMC患者中位年龄为47岁,而FA为33岁,PMC患者年龄较FA偏大,两者差异具有统计学意义(P<0.001)。PMC患者病变中位长径2.4 cm大于FA的1.8 cm,差异有统计学意义(P=0.001)。PMC中,70%(35/50)表现为不规则形,82%(41/50)与皮肤平行,92%(46/50)边缘不清晰,72%(36/50)内部呈低回声,68%(34/50)后方回声增强;FA中,69%(69/100)表现为卵圆形或圆形,98%(98/100)与皮肤平行,54%(54/100)边缘清晰,98%(98/100)内部呈低回声,75%(75/100)后方回声未见变化,PMC与FA相应超声表现的差异有统计学意义(P<0.001,P=0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001),而病变内是否存在钙化、病变的血流表现在两者间差异无统计学意义。【结论】与FA相比,PMC患者年龄及病变长径偏大,并且在超声上,大部分乳腺PMC的形态及边缘仍表现为浸润性癌的生长特点,同时,PMC的后方回声增强,是其独特的表现。 展开更多

关键词 乳腺 黏液癌 单纯黏液癌 纤维腺瘤 超声

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钆对比剂剂量对增强T2 FLAIR序列与增强T1WI序列脑转移瘤强化效果的影响及对比研究 被引量：7

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作者 曹明慧 苏赟 +3 位作者 苏卫锋 毛家骥 李韵华 沈君 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期152-157,共6页

目的对比不同剂量钆对比剂注射后增强液体衰减反转恢复(contrast enhanced T2 fluid attenuated inversion recovery,CE-T2 FLAIR)序列与对比增强T1WI(contrast enhanced T1WI,CE-T1WI)上脑转移瘤的强化效果,探讨半剂量对比剂条件下CE-T... 目的对比不同剂量钆对比剂注射后增强液体衰减反转恢复(contrast enhanced T2 fluid attenuated inversion recovery,CE-T2 FLAIR)序列与对比增强T1WI(contrast enhanced T1WI,CE-T1WI)上脑转移瘤的强化效果,探讨半剂量对比剂条件下CE-T2 FLAIR序列在脑转移瘤MRI检查的诊断价值。材料与方法前瞻性纳入颅外原发恶性肿瘤经病理学明确诊断、脑转移瘤经病理或临床随访证实的患者30例,于3.0 T MRI设备行头颅MRI增强扫描,在常规平扫序列的基础上,行半剂量(0.05 mmol/kg)CE-T2 FLAIR和CE-T1WI扫描,随后分次补充钆对比剂达常规剂量(0.1 mmol/kg)后至双倍剂量(0.2 mmol/kg),在注射对比剂后均进行CE-T2 FLAIR和CE-T1WI扫描。由两位观察者对三次扫描的CE-T2 FLAIR和CE-T1WI图像进行客观测量。计算不同剂量条件下CE-T2 FLAIR和CE-T1WI图像的对比信噪比(contrast to noise ratio,CNR)、相对对比度(relative contrast,RC)及百分比增加(percentage increase,PI)。采用方差分析对客观测量结果进行组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)时进行后续多重比较;采用t检验比较两组之间的差异。结果两位观察者客观评分一致性良好。三组对比剂剂量下CE-T2 FLAIR图像间CNR值与RC值差异无统计学意义(P>0.05);与平扫T2 FLAIR相比,病灶PI增高,增强效果良好。三组对比剂剂量下CE-T1WI图像间CNR值与RC值差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明双倍剂量CE-T1WI图像上CNR值及RC值均明显大于半剂量组(P<0.05)。半剂量及常规剂量CE-T2 FLAIR图像CNR值及RC值上均较该组CE-T1WI明显增大,差异有统计学意义(P<0.05)。半剂量CE-T2 FLAIR图像CNR值及RC值均明显大于常规剂量CE-T1WI(P<0.05)。与双倍剂量CE-T1WI相比,半剂量CE-T2 FLAIR图像CNR值增大(P<0.05),RC值差异无统计学意义(P>0.05)。结论半剂量对比剂下CE-T2FLAIR图像上脑转移瘤的强化效果与常规CE-T1WI相仿,病灶显示良好,为半剂量对比剂的CE-T2 FLAIR序列应用于脑转移瘤MRI检查提供依据。 展开更多

关键词 脑转移瘤 磁共振成像 液体衰减反转恢复序列 半剂量钆对比剂 对比增强

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二次移植成功治疗急性白血病单倍体造血干细胞移植植入失败 被引量：3

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作者 黄克智 李益清 +5 位作者 谢少凡 肖洁 杨文娟 谢双锋 马丽萍 聂大年 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期427-434,共8页

目的探讨急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植后植入失败的二次移植治疗策略。方法2例急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植的2例供者均伴有地中海贫血,分别采集CD34+细胞2.57×10^(6)/kg和1.99×10^(6)/kg,首次单倍体... 目的探讨急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植后植入失败的二次移植治疗策略。方法2例急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植的2例供者均伴有地中海贫血,分别采集CD34+细胞2.57×10^(6)/kg和1.99×10^(6)/kg,首次单倍体造血干细胞移植植入失败。二次移植更换为非地中海贫血供者,分别采集CD34+细胞4.28×10^(6)/kg和5.75×10^(6)/kg,采用减低剂量氟达拉滨(Flu)+白消安(Bu)+抗胸腺细胞球蛋白(ATG)预处理方案行二次移植。结果2例患者二次移植中性粒细胞和血小板植入时间分别为+12 d和+10 d、+10 d和+10 d。截止至末次随访时间(分别为二次移植+1062 d、+265 d),2例患者原发病均完全缓解,无明显移植并发症。结论减低剂量预处理的二次移植能够成功治疗急性白血病单倍体造血干细胞移植植入失败。 展开更多

关键词 二次移植 单倍体造血干细胞移植 植入失败 急性白血病 地中海贫血 移植物抗宿主病 环磷酰胺 抗胸腺细胞球蛋白

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SCN10A rs12632942单核苷酸多态性与结直肠癌化疗奥沙利铂外周神经毒性的相关性 被引量：5

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作者 孔连广 彭俊玲 +5 位作者 郑祥珍 苏芳 魏宜胜 张啸 洪楚原 翁洁玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期788-792,共5页

目的:探讨SCN10A基因外显子区rs12632942位点多态性与结直肠癌(CRC)患者化疗奥沙利铂外周神经毒性(OXLIPN)的相关性。方法:选取2011年1月至2013年6月广州医科大学附属第二医院、南昌大学第二附属医院、广州市白云区中医医院319例接受含... 目的:探讨SCN10A基因外显子区rs12632942位点多态性与结直肠癌(CRC)患者化疗奥沙利铂外周神经毒性(OXLIPN)的相关性。方法:选取2011年1月至2013年6月广州医科大学附属第二医院、南昌大学第二附属医院、广州市白云区中医医院319例接受含奥沙利铂(OXL)化疗方案的CRC患者(均为中国中南地区汉族)血液标本,常规提取DNA、PCR扩增及分析SCN10A外显子多态位点rs12632942基因型,评估OXLIPN程度。通过单因素卡方检验、Logistic多因素回归分析评估外显子多态rs12632942基因型与OXLIPN的相关性。结果:319例CRC患者rs12632942基因型:AA134例、AG156例、GG29例,rs12632942基因型频率符合哈温平衡(P>0.05)。rs12632942的AG+GG基因型与Ⅱ~Ⅳ度OXLIPN相关(P<0.01),是发生Ⅱ~Ⅳ度OXLIPN的独立危险因素(OR=2.044,95%CI=1.231~3.392,P<0.01)。结论:SCN10A基因外显子区rs12632942AG+GG基因型的CRC患者易感Ⅱ~Ⅳ度OXLIPN。 展开更多

关键词 结直肠癌 奥沙利铂 SCN10A 单核苷酸多态性 外周神经毒性

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12周是使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机 被引量：6

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作者 傅光涛 刘生 +7 位作者 李长川 伍俊妍 李仕勋 秦岭 刘伟 邱俊雄 彭芃 丁悦 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期582-587,共6页

目的评估成年C57/BL6J雌性小鼠行卵巢切除术后不同时间点骨密度及松质骨的变化,探讨使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机。方法将60只成年C57/BL6J雌性小鼠随机平均分为8周去势组及12周去势组;前者于8... 目的评估成年C57/BL6J雌性小鼠行卵巢切除术后不同时间点骨密度及松质骨的变化,探讨使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机。方法将60只成年C57/BL6J雌性小鼠随机平均分为8周去势组及12周去势组;前者于8周,后者于12周行双侧卵巢切除术。两组均于手术当天,术后6周、8周、10周及12周各随机抽取6只小鼠进行检测。使用DEXA测量小鼠全身、脊柱及下肢骨密度,并使用micro-CT重建胫骨近端的三维图像及计算松质骨微结构参数。结果两组小鼠使用DEXA测量的组内各时间点的全身、脊柱及下肢骨密度相比均无统计学差异。micro-CT的结果显示:与8周相比,12周小鼠的胫骨近端松质骨骨量有显著的上升(Tb.N:+29.4%,Tb.Sp:-28.9%,均P<0.05)。8周去势组的小鼠在术后8周首次观察到BV/TV(-46.1%,P<0.05),Tb.N(-52.2%,P<0.05)及Tb.Sp(+57.0%,P<0.05)较术前的显著性改变,上述参数的变化在随后的时间点有所减缓。12周去势组小鼠则在去势6周后即可观察到上述参数的显著性变化(BV/TV:-26.6%,Tb.N:-37.1%,Tb.Sp:+59.6%,均P<0.05),并在随后的随访时间中进入平台期。结论与DEXA相比,micro-CT更适合于评估小鼠模型的骨密度及骨微结构变化。本研究认为12周是使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机。 展开更多

关键词 卵巢切除术 骨质疏松症 小鼠 动物模型

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HER-2/CEP17信号比与乳腺癌新辅助化疗后病理完全缓解的相关性研究 被引量：4

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作者 董兵斌 刘伊铖 +2 位作者 李铨 吴畏 姚燕丹 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期832-837,共6页

目的:评价HER-2/CEP17信号比与乳腺癌新辅助化疗后病理完全缓解的相关性及其预测作用。方法:收集中山大学孙逸仙纪念医院2013年1月至2017年12月635例临床分期为ⅡB~Ⅲ期浸润性乳腺癌行新辅助化疗患者的临床资料。根据患者新辅助化疗后... 目的:评价HER-2/CEP17信号比与乳腺癌新辅助化疗后病理完全缓解的相关性及其预测作用。方法:收集中山大学孙逸仙纪念医院2013年1月至2017年12月635例临床分期为ⅡB~Ⅲ期浸润性乳腺癌行新辅助化疗患者的临床资料。根据患者新辅助化疗后手术病理标本,分为病理完全缓解组117例和非病理完全缓解组518例。统计分析HER-2/CEP17信号比是否为全体患者以及联合和非联合靶向治疗亚组病理完全缓解的独立预测因子,并且分析HER-2/CEP17信号比是否与病理完全缓解率具有相关性。结果:635例乳腺癌患者中,总体病理完全缓解率为18.4%(117/635),多因素Logistic回归分析结果显示T分期(OR为0.500,95%CI为0.350~0.712,P<0.001)、Ki-67表达(OR为3.461,95%CI为1.891~6.333,P<0.001)、分子分型(OR为1.458,95%CI为1.188~1.791,P<0.001)、HER-2基因拷贝数(OR为6.173,95%CI为2.110~17.857,P=0.001)及HER-2/CEP17信号比(OR为9.076,95%CI为3.142~26.215,P<0.001)为乳腺癌新辅助化疗获得病理完全缓解的独立预测因子。分析显示HER-2/CEP17信号比也是新辅助化疗联合靶向治疗和非联合靶向治疗亚组的独立预测因子。Spearman秩相关性分析显示HER-2/CEP17信号比与乳腺癌新辅助化疗病理完全缓解率具有相关性(r=0.235,P<0.001)。结论:HER-2/CEP17信号比与乳腺癌新辅助化疗后病理完全缓解具有相关性,是其独立预测因子。 展开更多

关键词 乳腺癌 新辅助化疗 HER-2/CEP17信号比 病理完全缓解

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细胞培养中“黑胶虫”污染的检测及防治 被引量：4

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作者 周怡婷 高增鸿 +3 位作者 杨嘉文 汪瑾 郭雅彬 马广伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第1期61-68,共8页

很多国内的细胞培养实验室受到"黑胶虫"(或称为"胶虫"、"焦虫")污染的困扰,类似的污染在国外通常称为"纳米细菌"(nanobacteria)污染,但"黑胶虫"/纳米细菌究竟是何物种抑或是一种非... 很多国内的细胞培养实验室受到"黑胶虫"(或称为"胶虫"、"焦虫")污染的困扰,类似的污染在国外通常称为"纳米细菌"(nanobacteria)污染,但"黑胶虫"/纳米细菌究竟是何物种抑或是一种非生命颗粒,至今还没有定论.我们将细胞培养中的污染物从培养基中分离出来,进行培养和形态学观察,并利用16S r DNA鉴定技术及VITEK-2微生物鉴定系统对"黑胶虫"进行鉴定,最后通过抗生素敏感试验及细胞结晶紫染色技术筛选出抑制"黑胶虫"增殖的抗生素及可用于细胞培养的工作浓度.形态学观察结果显示:"黑胶虫"在普通倒置显微镜下呈点状或片状;电镜下展示为杆状,长1 300~1 600 nm,宽400~500 nm;在激光共聚焦扫描显微镜400倍镜下进行原地"布朗运动". 16 S rDNA鉴定及VITEK-2微生物鉴定系统结果显示:本实验室分离的"黑胶虫"为一株短波单胞菌属(Brevundimonas)的新菌株,该菌株与Brevundimonas diminuta的相似性为97.8%,与Brevundimonas faecalis的相似性为98.1%.抗生素敏感试验结果显示:"黑胶虫"对氯霉素(25 mg/L)、红霉素(200 mg/L)和四环素(2.5 mg/L)敏感,对氨苄青霉素(50 mg/L)、嘌呤霉素(2 mg/L)、青霉素-链霉素双抗(100×)和庆大霉素-两性霉素B双抗(100×)均不敏感.细胞结晶紫染色结果显示:细胞培养基中添加一定浓度的氯霉素(25 mg/L)、红霉素(200 mg/L)或四环素(2.5 mg/L)均可抑制细胞培养中"黑胶虫"的增殖,降低其对细胞增殖的抑制作用.综上所述,本研究分离鉴定的"黑胶虫"为一种短波单胞菌,低浓度的氯霉素、红霉素或四环素均可降低该菌对细胞增殖的抑制作用.鉴于研究的局限性,我们不排除"黑胶虫"是其他物种的可能性,但是本研究为"黑胶虫"的种属鉴定及细胞无菌化培养提供了新的研究思路及方法,并有望帮助一些实验室解决"黑胶虫"污染的困扰. 展开更多

关键词 细胞培养 污染 “黑胶虫” 纳米细菌 抗生素

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MMS21通过维持MCM2-7复合物稳定性促进肝细胞癌增殖活性 被引量：1

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作者 李文佳 朱元昕 胡开顺 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期203-211,共9页

【目的】探讨SUMO E3泛素连接酶MMS21在肝细胞癌的表达及发挥作用机制。【方法】利用GEPIA2和CPATC数据库分析MMS21在肝细胞癌中的mRNA和蛋白表达变化及与患者预后的关系;设计两条siRNA分别敲低肝癌细胞内源性MMS21的表达,并采用流式细... 【目的】探讨SUMO E3泛素连接酶MMS21在肝细胞癌的表达及发挥作用机制。【方法】利用GEPIA2和CPATC数据库分析MMS21在肝细胞癌中的mRNA和蛋白表达变化及与患者预后的关系;设计两条siRNA分别敲低肝癌细胞内源性MMS21的表达,并采用流式细胞技术检测细胞周期分布比例;进行BrdU染色和DNA fiber实验检测细胞增殖能力与DNA合成速度;构建带有MYC标签的MMS21蛋白过表达载体,并在细胞系SK-hep1中建立其稳定表达的细胞株;利用Co-IP联合质谱分析的方法鉴定MMS21的互作蛋白组并进行信号通路富集分析;采用West⁃ern Blot,检测MMS21对细胞周期相关蛋白的影响。【结果】在肝细胞癌中,与癌旁组织(160例)相比,MMS21在癌组织(369例)中显著高表达(P<0.05),其高表达与患者不良预后相关(P<0.01)。在肝癌细胞系中,使用两条siRNA分别敲低内源MMS21的表达后,SK-hep1细胞中G1期的细胞比例显著上升(P<0.001;P<0.01),S期比例显著下降(P<0.01;P<0.05),G2/M期比例下降(P<0.05;P<0.05);HepG2细胞中G1期的细胞比例显著上升(P<0.001;P<0.001),S期比例显著下降(P<0.01;P<0.01),G2/M期比例下降(P<0.05;P<0.05);SK-hep1细胞的DNA合成速度明显减慢(P<0.0001;P<0.0001);SK-hep1和HepG2细胞增殖能力显著下降(P<0.01;P<0.001;P<0.001;P<0.001)。质谱鉴定MMS21的互作蛋白组,共鉴定到641个高可信度蛋白;通路富集分析表明,这些结合蛋白显著富集于细胞周期相关的生理过程;进一步的Western Blot结果表明:MMS21的缺失能抑制S期和G2/M期的周期蛋白表达量,降低微小染色体维持蛋白家族(MCMs)的蛋白水平。【结论】SUMO E3连接酶MMS21在肝细胞癌中高表达,并与患者不良预后相关;MMS21与肝癌细胞的增殖密切相关,能够维持细胞周期蛋白和复制复合物MCM蛋白稳定性,促进肝癌细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 肝癌 MMS21 增殖 CoIP-MS 微小染色体维持蛋白家族

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