漆树黄酮逆转人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的实验研究 被引量：6

1

作者 李蓉 黎小兵 +2 位作者 敬敏 陈锦 黄培春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期91-95,共5页

目的研究漆树黄酮对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响及其可能机制。方法用不同浓度的漆树黄酮(50、100、200μmol.L-1)处理HepG2细胞;MTT法检测漆树黄酮对HepG2细胞的细胞毒作用;用Transwell小室法检测漆树黄酮对HepG2细胞侵袭能力... 目的研究漆树黄酮对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响及其可能机制。方法用不同浓度的漆树黄酮(50、100、200μmol.L-1)处理HepG2细胞;MTT法检测漆树黄酮对HepG2细胞的细胞毒作用;用Transwell小室法检测漆树黄酮对HepG2细胞侵袭能力和趋化运动能力的影响,RT-PCR法检测p38MAPK、E-cadherin和vimentin mRNA表达,Western blot检测p38MAPK、E-cadherin和vimentin蛋白表达。结果漆树黄酮作用细胞24 h后能抑制HepG2细胞体外趋化运动和侵袭能力。漆树黄酮能引起HepG2细胞形态学的变化,能降低p38 MAPK和vimentin mRNA和蛋白表达,但不能改变E-Cadherin的表达。结论漆树黄酮能逆转人肝癌细胞HepG2的上皮间质转化,其抗肿瘤侵袭运动的机制可能与抑制p38MAPK的表达有关。 展开更多

关键词 漆树黄酮 肝癌 上皮间质转化 P38MAPK 侵袭 运动

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蛋白激酶C抑制剂诱导CNE-2Z细胞凋亡的研究 被引量：6

2

作者 何志巍 陈南岳 +1 位作者 鲍波 赵明伦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期22-26,共5页

目的和方法：采用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）催化区抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）、调节区抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ），诱导ＣＮＥ—２Ｚ细胞２４ｈ。结果：（１）ＳＴ、ＳＳ对细胞ＤＮＡ裂解的影响均随浓度增高而... 目的和方法：采用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）催化区抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）、调节区抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ），诱导ＣＮＥ—２Ｚ细胞２４ｈ。结果：（１）ＳＴ、ＳＳ对细胞ＤＮＡ裂解的影响均随浓度增高而逐步增强，作用明显的终浓度分别为１×１０６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０５；（２）核形态观察：诱导后部分细胞核变小，核浓缩及核碎裂；（３）ＤＮＡ琼脂糖电泳：诱导后的细胞有典型梯状ＤＮＡ条带；（４）流式细胞仪分析：诱导组Ｇ１期前均有ＤＮＡ亚二倍体峰，即凋亡峰。细胞周期改变：ＳＴ使Ｇ２期增加、Ｇ１、Ｓ期减少；ＳＳ使Ｓ期增加和Ｇ１期减少。结论：ＰＫＣ抑制剂可有效地促进ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡，但与抑制剂剂量有关，细胞周期的改变可能在ＰＫＣ抑制剂诱导的细胞凋亡中起重要作用。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 细胞凋亡 蛋白激酶C 抑制剂 ST SS

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芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用 被引量：13

3

作者 李明勇 黄培春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期88-92,共5页

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-... 目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。 展开更多

关键词 芹菜素 顺铂 鼻咽癌 中效原理 增殖 凋亡 CNE-2Z细胞

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EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响 被引量：4

4

作者 张素珍 黄培春 +3 位作者 徐永 陈锦 蔡康荣 黄河 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1646-1649,共4页

目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响。方法将LMP1基因真核表达质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞,脂质体介导端粒酶反义核酸处理转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测LMP1和P53蛋白表达,原位杂交技术检测... 目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响。方法将LMP1基因真核表达质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞,脂质体介导端粒酶反义核酸处理转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测LMP1和P53蛋白表达,原位杂交技术检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达。结果对照组,转染并表达LMP1基因的细胞的增殖能力、P53蛋白和hTERTmRNA表达水平均显著高于未转染细胞和转染空载质粒的细胞。端粒酶反义核酸作用组,LMP1基因转染细胞的LMP1蛋白表达水平显著低于对照组(P<001);LMP1基因转染细胞与未转染细胞和转染空载质粒的细胞的增殖能力、P53蛋白和hTERTmRNA表达水平均显著低于对照组(P<001),但LMP1基因转染细胞的增殖能力和P53蛋白表达水平仍显著高于未转染细胞和转染空载质粒的细胞(P<001)。结论EB病毒LMP1可促进鼻咽癌细胞P53蛋白的表达。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 疱疹病毒4型 人 膜蛋白质类 蛋白质P53 寡核苷酸类 反义

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口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞迁移和体外血管生成拟态的抑制作用 被引量：7

5

作者 孔霞 尚九龙 +3 位作者 李丽 吴孟晏 别延红 顾帝水 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1025-1028,共4页

目的:研究口虾蛄提取物(extract of Oratosquilla,EOS)对人低分化鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移及体外血管生成拟态的影响。方法:用不同浓度(0 mg/L、125 mg/L、250 mg/L、500 mg/L)EOS处理CNE-2细胞24 h后,创伤修复实验检测细胞迁移能力;通... 目的:研究口虾蛄提取物(extract of Oratosquilla,EOS)对人低分化鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移及体外血管生成拟态的影响。方法:用不同浓度(0 mg/L、125 mg/L、250 mg/L、500 mg/L)EOS处理CNE-2细胞24 h后,创伤修复实验检测细胞迁移能力;通过Matrigel三维细胞培养观察CNE-2细胞形成类血管网状结构的能力及其特点;体外管道形成抑制实验检测不同浓度EOS对CNE-2细胞管道形成能力的影响;Western blotting法检测不同浓度EOS对CNE-2细胞fascin 1和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。结果:EOS可以显著降低CNE-2细胞的迁移能力,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);CNE-2细胞在Matrigel上培养能形成类似血管的网状样结构;EOS能以剂量依赖方式抑制CNE-2细胞体外管道形成的数量(P<0.01);EOS能抑制CNE-2细胞中fas-cin 1和VEGF蛋白的表达(P<0.01),且其管状结构数量与2种蛋白变化趋势呈正相关(P<0.05)。结论:CNE-2细胞具有血管生成拟态的能力;EOS能够抑制CNE-2细胞的迁移和体外血管生成拟态的能力,其机制可能与下调fascin 1和VEGF蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 口虾蛄 鼻咽肿瘤 血管生成拟态

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细胞周期和骨架在CNE-2Z细胞凋亡中的变化 被引量：4

6

作者 何志巍 陈南岳 +1 位作者 廖新波 蔡康荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期245-249,共5页

采用DNA电泳、PI染色流式细胞仪 (FCM )分析和激光共聚焦显微镜 (LCM )观察 ,检测了蛋白激酶C (PKC)抑制剂诱导CNE 2Z细胞凋亡时细胞周期和骨架的改变 .PKC抑制剂staurospoine(ST)、sphingosine (SS) ,终浓度分别为 1× 1 0 - 6mol/... 采用DNA电泳、PI染色流式细胞仪 (FCM )分析和激光共聚焦显微镜 (LCM )观察 ,检测了蛋白激酶C (PKC)抑制剂诱导CNE 2Z细胞凋亡时细胞周期和骨架的改变 .PKC抑制剂staurospoine(ST)、sphingosine (SS) ,终浓度分别为 1× 1 0 - 6mol/L和 4× 1 0 - 5mol/L ,诱导细胞 2 4h .结果发现处理组细胞均有典型的DNA亚二倍体峰 ,DNA电泳有梯状图谱 ;细胞周期百分比SS组较对照组S期增加及G1期减少明显 (P <0 0 5) ;ST组G2期增加、G1和S期显著减少 (P <0 0 1 ) .对照组细胞染色质分布均匀 ;胞质微丝呈细颗粒状 ,均匀分布 .诱导细胞染色质碎裂呈不规则缺损 ;胞质微丝散乱 ,颗粒粗大 ,排列不均 .结果表明 ,SS、ST可诱导CNE 2Z细胞凋亡 ,细胞周期和骨架在细胞凋亡时 ,均发生了明显改变 . 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 细胞周期 骨架 细胞凋亡

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口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞P53、COX-2和VEGF表达的影响 被引量：3

7

作者 孔霞 顾帝水 +1 位作者 陈锦 黄培春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期390-393,共4页

目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)中P53、环氧化酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法:不同浓度EOS(0 mg/L、125 mg/L、250 mg/L和500 mg/L)作用CNE-2Z细胞24 h后,Western blotting检测... 目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)中P53、环氧化酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法:不同浓度EOS(0 mg/L、125 mg/L、250 mg/L和500 mg/L)作用CNE-2Z细胞24 h后,Western blotting检测P53蛋白表达,免疫细胞化学法及RT-PCR法分别检测COX-2、VEGF蛋白和mRNA的表达。结果:CNE-2Z细胞中P53蛋白、COX-2和VEGF蛋白和mRNA表达均随EOS作用浓度增高而逐渐降低,呈量效关系(P<0.01);且COX-2和VEGF表达量呈正相关(P<0.05),COX-2和P53表达量亦呈正相关(P<0.05)。结论:EOS可能通过抑制CNE-2Z细胞中P53蛋白的表达,干扰COX-2和VEGF的表达而发挥其抗肿瘤作用的。 展开更多

关键词 口虾蛄 鼻咽癌 蛋白质P53 环氧化酶2 血管内皮生长因子

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限钠或补钠对充血性心衰大鼠心钠素及心功能的影响 被引量：3

8

作者 张素珍 徐永 +3 位作者 万瑜 杨钢 胡建民 徐芳玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1077-1080,共4页

目的 :观察限钠或补钠对充血性心衰大鼠心钠素及心功能的影响。方法 :将充血性心衰大鼠随机分为 3组 (心衰组、心衰限钠组、心衰补钠组 ) ,假手术大鼠为对照组 ,用放射免疫分析法测定各组血浆和心肌心钠素水平 ,同时检测心功能。结果 :... 目的 :观察限钠或补钠对充血性心衰大鼠心钠素及心功能的影响。方法 :将充血性心衰大鼠随机分为 3组 (心衰组、心衰限钠组、心衰补钠组 ) ,假手术大鼠为对照组 ,用放射免疫分析法测定各组血浆和心肌心钠素水平 ,同时检测心功能。结果 :心衰限钠组血钠、心房心钠素及左室收缩压和动脉压显著低于心衰组 ,血浆和心室心钠素、右房压均显著高于心衰组 ;心衰补钠组血钠和动脉压与对照组无显著差别 ,血浆和心肌心钠素、右房压与心衰组无显著差别 ,左室收缩压显著高于心衰组 ,左室舒张末压显著低于心衰组。结论 :心衰后适量补钠维持血钠平衡有利于心钠素发挥排钠利尿作用 ,改善心功能。 展开更多

关键词 充血性心力衰竭 心钠素 限钠 补钠 心功能 大鼠

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口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响 被引量：3

9

作者 孔霞 顾帝水 +2 位作者 李明勇 陈锦 黄培春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期937-940,共4页

目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)端粒酶活性的抑制作用及其可能机制。方法:MTT法检测不同浓度的EOS对CNE-2Z细胞增殖能力的影响;端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测各组细胞端粒酶活性,RT-PC... 目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)端粒酶活性的抑制作用及其可能机制。方法:MTT法检测不同浓度的EOS对CNE-2Z细胞增殖能力的影响;端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测各组细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达,Western blotting检测c-Myc蛋白表达。结果:EOS对CNE-2Z细胞增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.01);EOS处理组CNE-2Z细胞端粒酶的活性、hTERT mRNA和c-Myc蛋白的表达水平均低于对照组(P<0.01),也呈剂量依赖性,并且hTERT mRNA的下调与c-Myc的抑制存在相关性(P<0.05)。结论:EOS可能通过下调细胞c-Myc表达而抑制了hTERT mRNA的转录,以致端粒酶的活性降低而抑制CNE-2Z细胞增殖。 展开更多

关键词 口虾蛄 鼻咽肿瘤 端粒 末端转移酶

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表没食子儿茶素没食子酸酯通过调控P53/miR-34a抑制鼻咽癌细胞的增殖 被引量：3

10

作者 李彬彬 万郑 +3 位作者 孔霞 廖丹 王籽又 黄国良 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1557-1562,共6页

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对鼻咽癌细胞增殖的影响,并以微小RNA-34a(miR-34a)为靶点探讨其作用机制。方法:不同浓度的EGCG处理CNE-2Z细胞,CCK-8法、Ed U染色法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测... 目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对鼻咽癌细胞增殖的影响,并以微小RNA-34a(miR-34a)为靶点探讨其作用机制。方法:不同浓度的EGCG处理CNE-2Z细胞,CCK-8法、Ed U染色法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞周期分布的改变;Western blot检测P53和Notch1蛋白水平的变化;real-time PCR检测miR-34a和Notch1 mRNA的表达。结果:EGCG处理后,CNE-2Z细胞的增殖受到明显抑制,克隆形成能力降低,细胞周期阻滞于G0/G1期,呈剂量依赖关系;随着EGCG浓度增高,P53和miR-34a的表达水平明显上调,而其下游Notch1 mRNA和蛋白的表达水平则明显下降。结论:EGCG可能通过调控P53/miR-34a/Notch1通路诱导细胞周期阻滞,抑制鼻咽癌细胞增殖。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 鼻咽癌 P53 微小RNA-34a NOTCH1

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蛋白激酶C在鼻咽癌细胞周期中的作用 被引量：4

11

作者 陈南岳 何志巍 +1 位作者 蔡康荣 赵明伦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期627-630,共4页

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）调控人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长的机制，研究ＰＫＣ与ＣＮＥ－２Ｚ细胞周期的关系。方法：使用同位素标记有丝分裂法测细胞周期总时间及流式细胞仪（ＦＣＭ）测细胞周期；ＭＴＴ法测细胞增殖，蛋白－... 目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）调控人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长的机制，研究ＰＫＣ与ＣＮＥ－２Ｚ细胞周期的关系。方法：使用同位素标记有丝分裂法测细胞周期总时间及流式细胞仪（ＦＣＭ）测细胞周期；ＭＴＴ法测细胞增殖，蛋白－ＤＮＡ双参数法检测ＰＫＣα亚型在细胞周期中的分布。结果：细胞周期总时间为１８５ｈ；各时相分别为Ｇ１期８７ｈ，Ｓ期７１ｈ，Ｇ２／Ｍ期３９ｈ。作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与作用于调节区的抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）在抑制ＣＮＥ－２Ｚ细胞生长的浓度（分别为１０６ｍｏｌ／Ｌ与２×１０５ｍｏｌ／Ｌ）能影响细胞周期，ＳＴ使细胞阻滞在Ｇ２期，Ｇ２期细胞由对照组１３８％增加到７１７％（Ｐ＜００１）；ＳＳ使细胞部分阻滞在Ｇ１期，Ｇ１期细胞由对照组５６９％增加到６５９％（Ｐ＜００１）。ＳＴ与ＳＳ使细胞核有丝分裂指数由对照组３０降低到分别为１３与１０。ＰＫＣα在Ｇ１期表达逐渐增多，当达足够量时，细胞进入Ｓ期，在Ｓ期细胞ＰＫＣα量不增多，在Ｇ２／Ｍ期末表达又增强。结论：提示ＰＫＣ能调控ＣＮＥ－２Ｚ的细胞周期，其中可能主要是ＰＫＣα亚型在Ｇ２? 展开更多

关键词 蛋白激酶C 鼻咽肿瘤 细胞系 细胞周期

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PKC抑制剂与六种海洋生物和中草药对鼻咽癌细胞生长的影响 被引量：8

12

作者 陈南岳 赵明伦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期596-599,共4页

本文检测了几种海洋生物与中草药对鼻咽癌细胞ＣＮＥ一２Ｚ生长的作用，分别观察了作用于蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）催化区与调节区的抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（Ｓ... 本文检测了几种海洋生物与中草药对鼻咽癌细胞ＣＮＥ一２Ｚ生长的作用，分别观察了作用于蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）催化区与调节区的抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）对这些药物作用的影响。发现①ＰＫＣ抑制剂ＳＴ或ＳＳ能抑制ＣＮＥ一２Ｚ细胞生长；②浒苔、青蟹与皂角刺对其生长产生明显抑制，制天南星则有一定的刺激作用（Ｐ＜０．０５）；③ＳＴ（２×１０（－７）ｍｏｌ／Ｌ）与ＳＳ（１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ），能消除制天南星刺激生长的作用（Ｐ＜０．０５），能增强多数抑制生长的药物的抑制效应；④对某些药物，ＳＳ的促抑制效应显著强于ＳＴ：如皂角刺、高良姜、青蟹，ＳＳ对它们的效应的抑制率（分别为４２％、３４％、７０％）明显强于ＳＴ的抑制率（分别为７％、１３％、２９％）。提示对ＰＫＣ调节区的抑制可明显加强某些海洋生物及中草药的抑制鼻咽癌细胞生长的作用。结果为这些药物的抗癌作用机制和应用的研究提供了新线索。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 生长抑制剂 中草药 海洋生物

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反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞增殖及PKC-α表达的影响 被引量：2

13

作者 何志巍 陈南岳 +2 位作者 蔡康荣 鲍波 张梦妮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第3期175-179,共5页

为探讨反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞生长的影响及与PKC-α表达的关系.本研究联合应用反义c-fos和c-jun寡核苷酸作用于CNE-2Z细胞,MTT法检测细胞生长指数,流式细胞仪(FCM)检测细胞PKC-α表达.结果显示,c-fos、c-jun反义寡核苷酸在Lipofe... 为探讨反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞生长的影响及与PKC-α表达的关系.本研究联合应用反义c-fos和c-jun寡核苷酸作用于CNE-2Z细胞,MTT法检测细胞生长指数,流式细胞仪(FCM)检测细胞PKC-α表达.结果显示,c-fos、c-jun反义寡核苷酸在Lipofectin(LP)最低有效浓度为1.7×10^(-6)μg/ml作用下,对CNE-2Z细胞抑制作用随浓度增大而增强,最低有效浓度为1.7×10^(-5)μg/ml;在一定时间内,对细胞生长的抑制作用,随作用时间延长而增强,最大抑制作用时间为20小时,其生长指数为63.9±5.0,较对照组明显降低(P<0.01).在以上浓度的LP和反义寡核苷酸作用于细胞20小时后,FCM检测发现PKC-α荧光强度明显低于各对照组,阳性细胞数百分比为10.40±5.23,较对照组29.87±7.41及其它各组均显著降低(P<0.01).结果表明,反义c-fos、c-jun寡核苷酸可抑制CNE-2Z细胞生长增殖,并呈明显的浓度和时间效应依赖关系,且明显抑制PKC-α蛋白的表达. 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 CNE-2Z细胞 蛋白激酶C-Α

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蛋白激酶C对鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶活性的影响 被引量：2

14

作者 鲍波 黄培春 +1 位作者 董传仁 陈锦 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期148-149,152,共3页

为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 CNE- 2 Z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 CNE- 2 Z端粒酶活性的影响。结果显示 :CNE- 2 Z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。... 为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 CNE- 2 Z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 CNE- 2 Z端粒酶活性的影响。结果显示 :CNE- 2 Z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。提示抑制 PKC可以抑制 CNE- 2 Z细胞的端粒酶活性 ,PKC可能通过调控端粒酶活性从而影响 CNE- 2 展开更多

关键词 蛋白激酶C 鼻咽癌 端粒酶 CNE-2Z细胞

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siRNA靶向干扰组蛋白H3表达对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用 被引量：2

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作者 李彬彬 黄国良 +3 位作者 孔霞 李蓉 董子明 何志巍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1625-1630,共6页

目的:应用RNA干扰技术抑制人鼻咽癌细胞株CNE1中组蛋白H3的表达,观察其对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:构建针对组蛋白H3的小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,转染CNE1细胞并筛选获得稳定表达细胞株。实时荧光定量RT-PCR和Western blottin... 目的:应用RNA干扰技术抑制人鼻咽癌细胞株CNE1中组蛋白H3的表达,观察其对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:构建针对组蛋白H3的小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,转染CNE1细胞并筛选获得稳定表达细胞株。实时荧光定量RT-PCR和Western blotting检测细胞中组蛋白H3 mRNA和蛋白表达的改变;CCK-8法和平板克隆形成实验观察细胞增殖能力的改变;双萤光素酶报告系统检测细胞激活蛋白1(AP-1)转录活性的改变。结果:与阴性对照组和空白对照组相比,siRNA-H3质粒转染组的组蛋白H3 mRNA和蛋白表达均显著下降,细胞生长速度明显减慢,表皮生长因子诱导的细胞克隆形成能力和AP-1转录活性均受到明显抑制。结论:通过RNA干扰技术阻断组蛋白H3的表达,可抑制CNE1细胞的生长、增殖,其机制可能与下调AP-1转录活性有关。组蛋白H3可能是潜在的肿瘤治疗新靶点。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 组蛋白H3 RNA干扰 激活蛋白1

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Fascin1基因沉默对人鼻咽癌细胞CNE-2上皮-间质转化的抑制作用 被引量：3

16

作者 孔霞 陈锦 顾帝水 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第19期3055-3059,共5页

目的:研究聚束蛋白(Fascin1)基因沉默后对人鼻咽癌细胞CNE-2上皮-间质转化的影响,以探讨Fascin1在鼻咽癌发展中的作用。方法:构建Fascin1-sh RNA干扰载体,包装成慢病毒以感染CNE-2,构建干扰Fascin1表达的CNE-2细胞系;定量PCR及Western-b... 目的:研究聚束蛋白(Fascin1)基因沉默后对人鼻咽癌细胞CNE-2上皮-间质转化的影响,以探讨Fascin1在鼻咽癌发展中的作用。方法:构建Fascin1-sh RNA干扰载体,包装成慢病毒以感染CNE-2,构建干扰Fascin1表达的CNE-2细胞系;定量PCR及Western-blot法检测Fascin1、E-cadherin Vimentin及Twist1的m RNA及蛋白表达变化;Transwell小室法及划痕实验检测细胞运动能力的变化,Matrigel法检测细胞侵袭能力的变化。结果:干扰组(sh RNA-Fascin1)与对照组(sh RNA-ctrl)比较,Fascin1蛋白及m RNA表达均明显降低;下调Fascin1后CNE-2细胞侵袭能力无明显变化,但细胞运动能力明显降低,且与EMT相关的上皮型钙黏附素(E-cadherin)表达上调(P<0.05),而Vimentin表达下调(P=0.006 2),Twist1表达下调(P=0.001 9)。结论:靶向抑制Fascin1基因表达可降低CNE-2细胞运动能力,抑制CNE-2细胞EMT,其机制可能与下调Vimentin和Twist1表达及上调E-cadherin表达有关。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 聚束蛋白 基因沉默 上皮-间质转化

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ESO联合DDP对肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制 被引量：1

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作者 邵松军 张湘宁 +4 位作者 史梦婕 李蓉 李明勇 黄培春 周艳芳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期548-553,共6页

目的:探讨海洋生物口虾咕乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Squilla Oratoria,ESO)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制。方法:MTT法测定不同浓度ESO和DDP单独或联合处理对HepG2细胞增殖的抑制作用... 目的:探讨海洋生物口虾咕乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Squilla Oratoria,ESO)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制。方法:MTT法测定不同浓度ESO和DDP单独或联合处理对HepG2细胞增殖的抑制作用,并计算联合效应指数(CI);流式细胞术检测ESO对细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blotting检测HepG2细胞Survivin、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。建立裸鼠皮下HepG2细胞移植瘤模型,并观察ESO和DDP单用或联用对移植瘤的抑制效应。结果:ESO能有效地抑制HepG2细胞的生长(呈浓度依赖性),促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在S期;与DDP联合用药时,对HepG2细胞增殖的抑制呈现出协同效应,凋亡率明显增加(P<0.05)。ESO可下调Survivin和Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达,且呈浓度依赖性(P<0.05)。裸鼠成瘤抑制实验发现,随着ESO浓度的增大,肿瘤增长的速度减慢,以联合用药组抑制作用更为明显。结论:ESO可通过细胞周期阻滞及促细胞凋亡作用抑制HepG2细胞增殖;与顺铂联合用药,能对HepG2细胞增殖产生协同抑制效应。 展开更多

关键词 海洋药物 口虾蛄 肝癌 HEPG2细胞 抑制瘤 增殖 凋亡

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番茄红素对鱼藤酮损伤PC12细胞的保护作用研究 被引量：2

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作者 罗连响 李晓玲 +3 位作者 朱少平 黎柔君 朱丽飞 鲍波 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期328-331,336,共5页

目的:探讨番茄红素(Lycopene)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)释放... 目的:探讨番茄红素(Lycopene)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)释放量;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;比色法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC);DCFH-DA染色检测细胞内活性氧类物质(ROS)水平。结果:番茄红素能明显提高鱼藤酮损伤PC12细胞存活率(p<0.05),恢复细胞增殖;明显减轻了细胞损伤的形态的改变,降低LDH的释放、MDA和ROS含量(p<0.05),提高PC12细胞内SOD活性、GSH含量、T-AOC能力(p<0.05)。结论:番茄红素拮抗鱼藤酮致PC12细胞的损伤,其机制可能与抗氧化,清除细胞内ROS,诱导抗氧化酶的活性有关。 展开更多

关键词 番茄红素 鱼藤酮 PC12细胞 抗氧化

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不同来源潜伏膜蛋白1基因转染对鼻咽癌CNE1细胞生长的影响 被引量：1

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作者 黄河 黄培春 +1 位作者 张素珍 陈锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1890-1894,共5页

目的 :探讨不同来源的EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因转染对人高分化鼻咽癌 (NPC)细胞系CNE1生长的影响。方法 :采用脂质体介导法分别将含有来源于B95 - 8淋巴细胞标准株的LMP1基因 (B95 - 8-LMP1)和来源于NPC组织的LMP1基因 (CAO -LMP1... 目的 :探讨不同来源的EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因转染对人高分化鼻咽癌 (NPC)细胞系CNE1生长的影响。方法 :采用脂质体介导法分别将含有来源于B95 - 8淋巴细胞标准株的LMP1基因 (B95 - 8-LMP1)和来源于NPC组织的LMP1基因 (CAO -LMP1)的质粒转染CNE1;RT -PCR和蛋白印迹法分别鉴定LMP1mRNA和蛋白表达 ;结晶紫法、流式细胞术和平板克隆形成法测定不同来源的LMP1对CNE1生长特性的影响。结果 :成功建立稳定表达不同来源LMP1的CNE1细胞系。两种不同来源的LMP1均可促进CNE1细胞的生长 (P <0 0 1) ;CAO -LMP1比B95 - 8-LMP1具有更强促进CNE1生长的作用 (P <0 0 1)。结论 :不同来源LMP1对CNE1的体外生长均有促进作用 ,CAO -LMP1比B95 - 展开更多

关键词 膜蛋白质类 鼻咽肿瘤 疱疹病毒4型 人

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hTR反义寡核苷酸对不同鼻咽癌细胞生长分化的影响 被引量：1

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作者 张素珍 徐永 +2 位作者 黄培春 陈锦 蔡康荣 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期397-400,共4页

目的 :研究端粒酶反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长分化的影响。方法 :脂质体介导反义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞株 ,用细胞体外增殖实验、免疫组织化学S P法 ,观察细胞生长分化的变化情况。结果 :针对端粒酶RNA模板区的反义寡核... 目的 :研究端粒酶反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长分化的影响。方法 :脂质体介导反义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞株 ,用细胞体外增殖实验、免疫组织化学S P法 ,观察细胞生长分化的变化情况。结果 :针对端粒酶RNA模板区的反义寡核苷酸可抑制CNE1和CNE2Z细胞的增殖并呈剂量和时间依赖性 ,反义寡核苷酸组细胞角蛋白表达高于其它处理组及空白对照组 (P <0 0 1) ,细胞形态趋向分化成熟。结论 :端粒酶反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞的生长 ,并促进细胞分化。 展开更多

关键词 HTR 反义寡核苷酸 鼻咽癌 细胞生长分化

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