斑蝥素诱导高转移卵巢癌细胞HO-8910PM凋亡的研究 被引量：27

1

作者 何太平 莫丽儿 梁念慈 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期164-167,共4页

目的:探讨斑蝥素对人高转移卵巢癌细胞HO- 8910PM凋亡的影响及其作用机制。方法:MTT法检测IC50 值;流式细胞术、Hoechst 332 5 8/PI荧光染色分析细胞凋亡;Westernblot分析核因子- κB(nuclearfactor kap -paB ,NF- κB)P6 5亚基、半胱... 目的:探讨斑蝥素对人高转移卵巢癌细胞HO- 8910PM凋亡的影响及其作用机制。方法:MTT法检测IC50 值;流式细胞术、Hoechst 332 5 8/PI荧光染色分析细胞凋亡;Westernblot分析核因子- κB(nuclearfactor kap -paB ,NF- κB)P6 5亚基、半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase -3)的表达及粘着斑激酶(focaladhesionkinase ,FAK)酪氨酸磷酸化水平。结果:斑蝥素对HO 8910PM细胞的IC50 值为4 7 99μmol/L ;流式细胞术分析斑蝥素使S期的细胞减少,有明显的凋亡峰出现。荧光双染可见典型的凋亡形态学特征;斑蝥素可使NF- κB(P6 5 )、Caspase -3的表达下调,并下调FAK酪氨酸磷酸化水平。结论:斑蝥素抗肿瘤细胞凋亡的机制与NF -κB(P6 5 )、Caspase -3的表达下调及FAK酪氨酸磷酸化水平下调有关。 展开更多

关键词 斑蝥素 凋亡 卵巢癌

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翡翠贻贝提取物对小鼠抗疲劳作用的研究 被引量：14

2

作者 刘勇军 李江滨 +1 位作者 侯敢 黄迪南 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2006年第2期126-129,共4页

为探讨翡翠贻贝提取物对小鼠的抗疲劳作用,采用不同浓度翡翠贻贝提取物(EME)溶液作为饮用水喂养实验小鼠,然后测定小鼠负重游泳时间、血尿素氮(BUN)和肝糖原等指标。结果显示,20g/L的EME即可明显延长小鼠负重游泳时间,降低小鼠血清尿素... 为探讨翡翠贻贝提取物对小鼠的抗疲劳作用,采用不同浓度翡翠贻贝提取物(EME)溶液作为饮用水喂养实验小鼠,然后测定小鼠负重游泳时间、血尿素氮(BUN)和肝糖原等指标。结果显示,20g/L的EME即可明显延长小鼠负重游泳时间,降低小鼠血清尿素氮,提高小鼠肝糖原水平,表明翡翠贻贝提取物对小鼠有抗疲劳作用。 展开更多

关键词 翡翠贻贝 提取液 小鼠 抗疲劳

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miR-150与临床疾病研究的新进展 被引量：19

3

作者 刘付梅 李祥勇 周克元 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第2期194-198,共5页

microRNA(miRNA)是一种新型的小分子非编码RNA,对基因表达具有非常重要的调控作用。miR-150是一个长度为22个核苷酸的非编码小分子RNA,定位于人类染色体19q13.33,主要通过调控其靶基因的表达,在免疫系统、造血系统发生、胚胎发育和干细... microRNA(miRNA)是一种新型的小分子非编码RNA,对基因表达具有非常重要的调控作用。miR-150是一个长度为22个核苷酸的非编码小分子RNA,定位于人类染色体19q13.33,主要通过调控其靶基因的表达,在免疫系统、造血系统发生、胚胎发育和干细胞分化中发挥重要作用,并在许多疾病中发生异常表达,提示miR-150与疾病的发生与发展密切相关。本文就miR-150在人体正常生理过程中的作用以及异常表达引起的机体变化和可能的作用机制作一综述。 展开更多

关键词 miR-150 临床疾病 基因表达调控

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桃金娘对颈动脉血栓形成的影响及其机制的实验研究 被引量：7

4

作者 李果明 沈毅华 刘文 《山东医药》 CAS 2012年第43期14-16,共3页

目的探讨桃金娘对血栓形成的影响及其机制。方法经大鼠颈静注射桃金娘5、10 mg/kg,用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;分别采用全血与桃金娘及生理盐水孵育5 min,用全血血小板聚集仪观察全血血小板聚集情况;用ELISA法检测血小板... 目的探讨桃金娘对血栓形成的影响及其机制。方法经大鼠颈静注射桃金娘5、10 mg/kg,用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;分别采用全血与桃金娘及生理盐水孵育5 min,用全血血小板聚集仪观察全血血小板聚集情况;用ELISA法检测血小板环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的含量;用硝酸还原酶法观察血小板释放NO情况。结果桃金娘5 mg/kg和10 mg/kg能够促进大鼠颈总动脉血栓形成,堵塞率分别为(87.46±10.31)%和(95.26±12.42)%。200、400和800μg/mL的桃金娘均能够诱导全血血小板聚集,其最大聚集率分别为(0.75±0.50)、(3.75±2.36)和(7.75±0.96)Ω。200、400和800μg/mL的桃金娘均能减少血小板cAMP、cGMP和NO的生成,含量分别为[(22±5.05)、(18.71±5.11)、(15.62±6.19)pmol/mL]、[(6.54±1.86)、(5.34±2.36)、(5.03±1.67)nmol/mL]和[(120.89±26.34)、(104.28±21.27)、(86.61±16.98)μmol/mL]。结论桃金娘能促进血栓形成和血小板聚集,可能机制为下调血小板cAMP、cGMP和NO水平。 展开更多

关键词 桃金娘 血栓形成 血小板聚集 环磷酸腺苷 环磷酸鸟苷 一氧化氮

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翡翠贻贝多糖免疫调节作用研究 被引量：10

5

作者 李江滨 侯敢 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第5期3-5,共3页

通过小鼠免疫器官重量测定、碳粒廓清试验,血清溶血素测定、迟发型超敏反应(DTH)和NK细胞活性测定研究翡翠贻贝多糖对小鼠免疫功能的影响。结果显示与对照组比较,翡翠贻贝多糖能促进小鼠脾脏发育,增强单核-巨噬细胞功能、体液免疫功能... 通过小鼠免疫器官重量测定、碳粒廓清试验,血清溶血素测定、迟发型超敏反应(DTH)和NK细胞活性测定研究翡翠贻贝多糖对小鼠免疫功能的影响。结果显示与对照组比较,翡翠贻贝多糖能促进小鼠脾脏发育,增强单核-巨噬细胞功能、体液免疫功能和细胞免疫功能。翡翠贻贝多糖具有增强免疫功能的作用。 展开更多

关键词 翡翠贻贝 多糖 免疫调节

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翡翠贻贝营养粉改善生长发育功能研究

6

作者 李江滨 侯敢 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第4期146-148,共3页

对翡翠贻贝营养粉改善生长发育功能进行研究。按《保健食品检验与评价技术规范》中的改善生长发育功能检验方法进行试验,检测大鼠体重、身长、摄食量和食物利用率等指标。结果表明:翡翠贻贝营养粉能够显著增加大鼠体重、身长和食物利用... 对翡翠贻贝营养粉改善生长发育功能进行研究。按《保健食品检验与评价技术规范》中的改善生长发育功能检验方法进行试验,检测大鼠体重、身长、摄食量和食物利用率等指标。结果表明:翡翠贻贝营养粉能够显著增加大鼠体重、身长和食物利用率。翡翠贻贝营养粉具有改善生长发育的保健功能。 展开更多

关键词 翡翠贻贝 营养粉 改善生长发育

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MicroRNA调控肿瘤干细胞凋亡的研究进展 被引量：2

7

作者 崔仲宜 李继霞 +4 位作者 李祥勇 马晓娟 刘付梅 林碧华 周克元 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期769-771,共3页

微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非蛋白质编码小RNAs,主要在转录后水平负性调控基因表达。miRNAs表达水平的改变与许多人类疾病尤其是癌症密切相关。肿瘤干细胞(CSCs)亦称为肿瘤起源细胞,是存在于肿瘤细胞中的一小群具有干... 微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非蛋白质编码小RNAs,主要在转录后水平负性调控基因表达。miRNAs表达水平的改变与许多人类疾病尤其是癌症密切相关。肿瘤干细胞(CSCs)亦称为肿瘤起源细胞,是存在于肿瘤细胞中的一小群具有干细胞特性的亚群细胞,具有高度致瘤性及耐药性。近年来,miRNAs在CSCs凋亡调控中的作用逐渐成为研究热点。靶向miRNAs的分子疗法有望成为校正CSCs调节异常的有力工具。了解CSCs凋亡信号系统的分子机制对开发新型癌症疗法尤为重要。本文就miRNAs与CSCs凋亡相关研究作一综述。 展开更多

关键词 微小核糖核酸 肿瘤干细胞 细胞凋亡

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山萘酚对脂多糖诱导RAW264-7细胞中COX-2和iNOS表达及产物生成的影响 被引量：10

8

作者 陈美珺 金宏伟 +3 位作者 陈振胜 黄回滨 梁统 周克元 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期982-985,990,共5页

目的探讨山萘酚对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW 264.7细胞COX-2及iNOS表达的影响。方法四氮唑盐法(monote-trazolium test,MTT)检测山奈酚对RAW264.7细胞生长增殖的影响,放射免疫测定法(RIA)检测山萘酚对PGE2和NO生成的影响... 目的探讨山萘酚对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW 264.7细胞COX-2及iNOS表达的影响。方法四氮唑盐法(monote-trazolium test,MTT)检测山奈酚对RAW264.7细胞生长增殖的影响,放射免疫测定法(RIA)检测山萘酚对PGE2和NO生成的影响,免疫印迹法(western blotting)检测COX-2及iNOS蛋白的表达。结果山萘酚抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞PGE2和NO的生成,同时下调LPS诱导的RAW 264.7细胞COX-2及iNOS蛋白的表达。结论山萘酚抑制2个诱导酶COX-2和iNOS的表达,从而减少炎性产物PGE2和NO的生成,这可能是山萘酚抗炎的机制之一。 展开更多

关键词 山萘酚 环氧合酶-2 诱导型一氧化氮合酶 前列腺素E2 一氧化氮

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冬、夏季6种经济贝类脂肪酸组成 被引量：7

9

作者 元冬娟 邵正 +2 位作者 程小广 周克元 江黎明 《南方水产》 2009年第4期47-53,共7页

测定和比较了广东湛江地区6种常见经济贝类冬、夏季19种主要脂肪酸组成,探讨了冬、夏2季气候变化对贝类脂肪酸组成的影响和相应的脂肪酸营养价值。结果表明,检测的6种海洋贝类冬、夏季总脂含量分别为(0.11±0.01)%～(0.19±0.01... 测定和比较了广东湛江地区6种常见经济贝类冬、夏季19种主要脂肪酸组成,探讨了冬、夏2季气候变化对贝类脂肪酸组成的影响和相应的脂肪酸营养价值。结果表明,检测的6种海洋贝类冬、夏季总脂含量分别为(0.11±0.01)%～(0.19±0.01)%,(0.15±0.00)%～(0.45±0.04)%;饱和脂肪酸(SFA)分别为35.15%～47.29%,41.96%～45.99%;单不饱和脂肪酸(MUFA)分别为9.47%～17.68%,13.62%～18.04%;多不饱和脂肪酸(PUFA)分别为39.35%～48.56%,36.25%～43.15%。通过方差分析,6种贝类冬季SFA、MUFA和PUFA的含量均比夏季高,且具有显著差异;冬季的总脂含量虽然比夏季高,但差异不显著。 展开更多

关键词 海洋贝类 脂肪酸组成 气相色谱-质谱

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靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体构建及其在NIH3T3细胞中的表达 被引量：3

10

作者 李祥勇 罗海清 +1 位作者 林观平 周克元 《医学研究生学报》 CAS 2010年第12期1240-1243,共4页

目的慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究。文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础。方法... 目的慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究。文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础。方法根据慢病毒表达载体酶切位点的特征序列设计PCR扩增引物并扩增人Bi-1 cDNA,并采用DNA重组技术定向克隆至pLCMV-IG质粒中,构建重组慢病毒载体质粒pLCMV-IG-Bi-1,经PCR、双酶切和测序鉴定后,包装慢病毒感染至小鼠成纤维细胞株NIH3T3中,RT-PCR及Western-blot分别检测NIH3T3细胞中Bi-1基因和蛋白的表达。结果 PCR、酶切及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;NIH3T3细胞感染重组载体包装的慢病毒后出现明显的Bi-1基因高表达。结论成功构建靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体,为进一步研究Bi-1基因对细胞生长转化的影响提供了实验依据。 展开更多

关键词 Bi-1 重组慢病毒载体 NIH3T3

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去甲斑蝥素对HO-8910PM细胞中NAG-1表达的影响 被引量：2

11

作者 何太平 莫丽儿 梁念慈 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期356-359,共4页

目的:研究去甲斑蝥素对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中非类固醇抗炎药物激活基因(non-steroidal anti-in-flammatory drug-activated gene,NAG-1)表达的影响,探讨其抗肿瘤的作用机理。方法:应用肿瘤基因芯片、荧光定量实时PCR和Western ... 目的:研究去甲斑蝥素对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中非类固醇抗炎药物激活基因(non-steroidal anti-in-flammatory drug-activated gene,NAG-1)表达的影响,探讨其抗肿瘤的作用机理。方法:应用肿瘤基因芯片、荧光定量实时PCR和Western blot法检测去甲斑蝥素对NAG-1表达的影响。结果:去甲斑蝥素能明显上调NAG-1表达,3种方法检测去甲斑蝥素上调HO-8910PM细胞中NAG-1表达的倍数分别为6.69、8.33±0.76和16.00倍。结论:去甲斑蝥素抗肿瘤作用与NAG-1表达有关。 展开更多

关键词 去甲斑蝥素 卵巢癌 非类固醇抗炎药物激活基因 表达

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槲皮素对肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡和结构重建的影响 被引量：1

12

作者 李果明 庞玲品 +1 位作者 刘文 黄石安 《山东医药》 CAS 2012年第39期44-47,共4页

目的探讨槲皮素对肺动脉高压的预防及治疗作用。方法将成年雄性SD大鼠40只随机分为模型组、预防组、治疗组及对照组各10只。前三组采用野百合碱(MCT)诱导制作肺动脉高压模型,对照组注射等量生理盐水。制模后模型组及对照组予生理盐水2 m... 目的探讨槲皮素对肺动脉高压的预防及治疗作用。方法将成年雄性SD大鼠40只随机分为模型组、预防组、治疗组及对照组各10只。前三组采用野百合碱(MCT)诱导制作肺动脉高压模型,对照组注射等量生理盐水。制模后模型组及对照组予生理盐水2 mL/d灌胃,预防组制模同时、治疗组制模20 d予槲皮素100 mg/(kg.d)灌胃,均为20 d。干预后测定各组平均肺动脉压力(mPAP)、肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%);采用免疫组化和Western blot法检测肺小动脉平滑肌细胞Bcl-2表达。结果与对照组、预防组和治疗组比较,模型组mPAP、WT%、WA%和Bcl-2%显著升高(P<0.05),Bcl-2的表达显著增多(P<0.05)。结论槲皮素对MCT诱导的大鼠肺动脉高压有预防和治疗作用,其机理可能是通过下调肺血管中小动脉平滑肌细胞Bcl-2表达,促进细胞凋亡,改善肺血管重构。 展开更多

关键词 肺动脉高压 野百合碱 槲皮素 肺血管重构 Bcl-2(B细胞淋巴瘤 白血病-2) 凋亡

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原花青素对白介素-1β诱导的A549细胞环氧合酶-2mRNA转录的抑制作用 被引量：1

13

作者 梁统 卢婷婷 +1 位作者 周克元 王旭光 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期663-666,共4页

目的研究原花青素对白介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞A549中环氧合酶-2(COX-2)mRNA转录的抑制机制。方法采用RT-PCR法测定原花青素对IL-1β诱导的A549细胞中COX-2 mRNA转录的影响,采用Western blot和免疫组化法考察原花青素对IL-1β... 目的研究原花青素对白介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞A549中环氧合酶-2(COX-2)mRNA转录的抑制机制。方法采用RT-PCR法测定原花青素对IL-1β诱导的A549细胞中COX-2 mRNA转录的影响,采用Western blot和免疫组化法考察原花青素对IL-1β诱导的A549细胞核转录因子κB(NF-κB)亚基p65(NF-κB/p65)及NF-κB抑制性蛋白(I-κB)表达的抑制作用。结果原花青素对A549细胞中COX-2 mRNA的转录有较强抑制作用,抑制NF-κB/p65的表达及I-κB的降解。结论原花青素可能是通过抑制NF-κB/p65的表达及I-κB的降解而抑制COX-2mRNA的转录。 展开更多

关键词 环氧合酶-2 原花青素 细胞核转录因子kB

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三种Tyrphostin对重组人蛋白激酶CK2全酶的影响 被引量：1

14

作者 刘新光 梁念慈 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期451-456,共6页

目的 :观察三种 Tyrphostins AG110 9、AG5 5 5和 AG1394对重组人蛋白激酶 CK2全酶的直接作用。方法 :利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶 CK2α和β亚基 ,在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组 CK2全酶 ,在不同条... 目的 :观察三种 Tyrphostins AG110 9、AG5 5 5和 AG1394对重组人蛋白激酶 CK2全酶的直接作用。方法 :利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶 CK2α和β亚基 ,在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组 CK2全酶 ,在不同条件下测定 CK2的活性。 CK2活性通过测定转移到 CK2底物上的 [γ-3 2 P] ATP或 [γ-3 2 P] GTP的 [3 2 P]放射活度来检测。结果 :重组人 CK2是一种 Ca2 +、c AMP和 c GMP等第二信使非依赖性蛋白激酶 ,与天然 CK2的性质一致。 AG110 9对重组人CK2全酶具有较强的抑制作用 ,IC50 为 9.7μmol/L ,抑制作用稍大于已知 CK2抑制剂 DRB和 A3。 AG5 5 5对重组人 CK2全酶具有一定的抑制作用 ,而 AG1394则对人 CK2全酶基本无影响。 AG110 9对重组人 CK2的动力学研究表明 :它与 GTP呈现以竞争性为主的混合型抑制作用 ,与酪蛋白呈非竞争性抑制作用。结论 :AG110 9不仅是酪氨酸蛋白激酶的抑制剂 ,而且是一种十分有效的蛋白激酶 CK2的抑制剂。重组人蛋白激酶 CK2可作为一种较为简便筛选和开发有效的 CK2抑制剂的分子靶点。 展开更多

关键词 蛋白激酶CK2 重组蛋白 TYRPHOSTIN AG1109 AG555 AG1394 酶动力学

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大黄素对卵巢癌HO-8910PM细胞中PRL-3和NAG-1表达的影响 被引量：1

15

作者 何太平 莫丽儿 梁念慈 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第27期12-14,共3页

目的研究大黄素对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)和非类固醇抗炎药物激活基因(NAG-1)表达的影响。方法采用Western blot法检测大黄素对HO-8910PM细胞中PRL-3和NAG-1蛋白表达的影响,荧光定量实时PCR分析大黄... 目的研究大黄素对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)和非类固醇抗炎药物激活基因(NAG-1)表达的影响。方法采用Western blot法检测大黄素对HO-8910PM细胞中PRL-3和NAG-1蛋白表达的影响,荧光定量实时PCR分析大黄素对HO-8910PM细胞中PRL-3和NAG-1 mRNA表达的影响。结果大黄素能明显下调HO-8910PM细胞中PRL-3的表达,强烈上调NAG-1表达。结论大黄素影响高转移卵巢癌细胞转移能力可能与PRL-3和NAG-1表达有关。 展开更多

关键词 大黄素 卵巢肿瘤 聚合酶链反应

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藏红花素对CNE2细胞的增殖及迁移抑制作用 被引量：3

16

作者 董盛宇 刘付梅 李祥勇 《湖北民族学院学报（医学版）》 2013年第2期6-9,12,共5页

目的探讨藏红花素(crocin)对人鼻咽癌细胞株CNE2细胞的增殖和迁移抑制作用及其可能的作用机制。方法使用高倍显微镜观察不同浓度crocin作用后的细胞形态变化,CCK-8法测定细胞增殖能力的改变,Transwell小室实验分析细胞迁移能力变化,RT-... 目的探讨藏红花素(crocin)对人鼻咽癌细胞株CNE2细胞的增殖和迁移抑制作用及其可能的作用机制。方法使用高倍显微镜观察不同浓度crocin作用后的细胞形态变化,CCK-8法测定细胞增殖能力的改变,Transwell小室实验分析细胞迁移能力变化,RT-PCR技术测定bi-1基因mRNA表达变化。结果藏红花素作用于CNE2细胞24h后,可抑制其增殖和迁移能力,且呈剂量依赖关系,但当药物浓度超过0.8 mmol/L时,细胞形态发生明显改变,细胞死亡增加。RT-PCR结果显示,不同浓度的藏红花素作用于CNE2细胞24h后,bi-1基因的mRNA表达明显下调。结论藏红花素对CNE2细胞有增殖和迁移抑制作用,并可影响抗凋亡基因bi-1的表达,其机制可能是通过调控bi-1基因的表达实现的。 展开更多

关键词 藏红花素 CNE2 增殖 迁移 bi-1

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半边旗中二萜类化合物5F对乳腺癌生长和转移的体内抑制作用

17

作者 何振辉 何太平 +3 位作者 翁闪凡 黄越群 覃燕梅 梁念慈 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期92-96,共5页

为研究半边旗中二萜类化合物5F在体内对乳腺癌生长和转移的影响及其作用机制,以MDA-MB-231乳腺癌原位移植模型观察5F抗乳腺癌的效应。在治疗的同时,观察5F对裸鼠的不良反应。以RT-PCR、Western blot法检测5F对乳腺肿瘤组织血管内皮生长... 为研究半边旗中二萜类化合物5F在体内对乳腺癌生长和转移的影响及其作用机制,以MDA-MB-231乳腺癌原位移植模型观察5F抗乳腺癌的效应。在治疗的同时,观察5F对裸鼠的不良反应。以RT-PCR、Western blot法检测5F对乳腺肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、激酶嵌入结构域受体(KDR)mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,5F通过减少原发肿瘤体积和肺转移结节数目,显著抑制MDA-MB-231乳腺癌移植瘤的生长和肺转移。这种抑制转移的作用不依赖于其对原发肿瘤的生长抑制作用。5F对裸鼠的肝肾功能无明显的影响。5F抗MDA-MB-231乳腺癌作用机制与5F下调肿瘤组织VEGF、KDR mRNA和蛋白表达水平有关。 展开更多

关键词 半边旗提取物5F 血管内皮生长因子 激酶嵌入结构域受体 转移 乳腺癌

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真核表达载体pEGFP-N1-kin17的构建及其在Zmpste24^(-/-)小鼠胚胎成纤维细胞内的表达

18

作者 郑慧玲 崔红晶 +2 位作者 余磊 黄颖 刘新光 《中国医药科学》 2014年第13期34-37,127,共5页

目的构建人kin17基因真核表达载体pEGFP-N1-kin17,将载体转染至野生型及Zmpste24基因缺失的小鼠胚胎成纤维上皮细胞,荧光显微镜观察kin17蛋白表达情况。方法用高保真DNA聚合酶,从pCMV-kin17载体中扩增获取人kin17 cDNA编码序列,将其克隆... 目的构建人kin17基因真核表达载体pEGFP-N1-kin17,将载体转染至野生型及Zmpste24基因缺失的小鼠胚胎成纤维上皮细胞,荧光显微镜观察kin17蛋白表达情况。方法用高保真DNA聚合酶,从pCMV-kin17载体中扩增获取人kin17 cDNA编码序列,将其克隆至pEGFP-N1载体中,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液进行PCR、菌液质粒双酶切及测序鉴定;将成功构建的GFP-kin17表达载体转染Zmpste24-/-MEFs,荧光显微镜观察kin17蛋白的核定位情况。结果 pEGFP-N1-kin17转化细菌克隆测序结果完全正确;将载体转入MEFs后,可以通过荧光显微镜观察到kin17蛋白的表达。结论成功构建GFP融合的kin17真核表达载体,该载体为kin17蛋白的研究提供工具。本实验中载体pEGFP-N1-kin17在野生型和Zmpste24-/-MEFs中均成功表达。 展开更多

关键词 kin17 GFP Zmpste24 小鼠胚胎成纤维细胞

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