"三点分析法"在医学生物化学教学中的应用

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作者 李江滨 黄迪南 侯敢 《海南医学院学报》 CAS 2004年第6期427-428,共2页

生物化学是医学教学中的一门重要专业基础课,知识点密集,内容及深度更新快,教学难度较大.为了在有限学时内达到更好的教学效果,教学方法是很重要的."三点分析法"就是在授课中从"重点、难点、考点"三方面对众多知识... 生物化学是医学教学中的一门重要专业基础课,知识点密集,内容及深度更新快,教学难度较大.为了在有限学时内达到更好的教学效果,教学方法是很重要的."三点分析法"就是在授课中从"重点、难点、考点"三方面对众多知识点加以分析的教学方法,"教、学、考"相结合,引导学生增强分析能力和自学能力. 展开更多

关键词 三点分析法 化学 生物无机 医学生物化学教学

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改进生物化学检验实验课管理的实践 被引量：2

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作者 丁航 侯敢 +2 位作者 周克元 刘新光 李江滨 《海南医学院学报》 CAS 2005年第5期459-460,共2页

关键词 生物化学 诊断 化验室 实验室 教学

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根皮素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡 被引量：18

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作者 罗辉 汪亚君 +2 位作者 陈杰 刘江琴 张海涛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1249-1251,共3页

目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素... 目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素对BEL-7402细胞IC50在89.23μg/mL。BEL-7402细胞生长曲线表明,根皮素浓度增高,生长率明显下降。细胞凋亡可在40-160μg/mL根皮素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强。根皮素阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变。根皮素处理BEL-7402细胞12hCaspase-9活性最高,而Caspase-6活性在18h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在24h后。结论根皮素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多

关键词 根皮素 BEL-7402 细胞凋亡 线粒体膜电位

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厚朴酚对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的影响 被引量：28

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作者 梁统 周克元 +1 位作者 李杰萍 徐美弈 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期151-154,共4页

目的 :研究厚朴酚对花生四烯酸代谢酶活性的影响 ,以阐明其抗炎机理。方法 :以大鼠胸腔白细胞为材料 ,分别用高效液相色谱法和放免方法测定白三烯B4(LTB4)、5 羟二十碳四烯酸 (5 HETE)和 6 酮前列腺素1α的生物合成。结果 :在 5 5～... 目的 :研究厚朴酚对花生四烯酸代谢酶活性的影响 ,以阐明其抗炎机理。方法 :以大鼠胸腔白细胞为材料 ,分别用高效液相色谱法和放免方法测定白三烯B4(LTB4)、5 羟二十碳四烯酸 (5 HETE)和 6 酮前列腺素1α的生物合成。结果 :在 5 5～ 13 5 μmol/L的浓度范围内 ,厚朴酚可剂量依赖性地抑制完整中性白细胞中LTB4的生物合成 ,在 10～ 2 0 μmol/L的浓度下可以抑制破碎细胞中 5 脂氧合酶 (5 LO)的酶活性。在浓度低于 10 μmol/L时 ,厚朴酚对破碎细胞中白三烯A4水解酶 (LTA4 H)的活性没有明显的影响 ,但增加其浓度 ,则可以明显地抑制LTA4 H的活性。同时 ,厚朴酚在较高浓度下可以抑制破碎细胞中环氧化酶的活性。结论 :厚朴酚可以抑制花生四烯酸的 5 LO和环氧化酶代谢通路 ,这可能与其抗炎作用机理有关。 展开更多

关键词 厚朴酚 5—脂氧合酶 白三烯A4水解酶 环氧化酶 中性白细胞 花生四烯酸

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蛇床子素固体分散体的制备与分析 被引量：7

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作者 李宝红 张立坚 +3 位作者 庄海旗 东野广智 邓亦峰 梁念慈 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期598-600,共3页

应用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为载体,采用溶剂挥发法制备了蛇床子素(OSL)的固体分散体,测定了OSL原料药、固体分散体以及机械混合物的体外溶解度,并通过扫描电镜观察、红外光谱以及紫外光谱分析对固体分散体进行了研究,结果表明,OSL固体分... 应用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为载体,采用溶剂挥发法制备了蛇床子素(OSL)的固体分散体,测定了OSL原料药、固体分散体以及机械混合物的体外溶解度,并通过扫描电镜观察、红外光谱以及紫外光谱分析对固体分散体进行了研究,结果表明,OSL固体分散物的溶解度与OSL原料药和机械混合物相比有明显提高;OSL分子和载体分子之间未发生化学变化。 展开更多

关键词 蛇床子素 聚乙烯吡咯烷酮 溶剂法 固体分散体 溶解度

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半边旗中二萜类化合物5F对K562细胞几种癌基因表达的影响 被引量：13

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作者 王京滨 梁念慈 莫丽儿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期418-421,共4页

目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 ent贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞癌基因Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,用蛋白印迹法检测Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun的表达。结果... 目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 ent贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞癌基因Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,用蛋白印迹法检测Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun的表达。结果　半边旗中二萜类化合物 5F作用于K5 6 2细胞 2 4h后 ,Bcl 2表达减少 ,Bax、c Fos、c Jun表达增多。结论　推测化合物 5F抗肿瘤的机制之一是上调Bax、c Fos、c Jun表达和下调Bcl 展开更多

关键词 半边旗 二萜类化合物5F K562细胞 癌基因 基因表达

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DNA修饰碱基5-甲基胞嘧啶和8-羟基鸟嘌呤的毛细管气相色谱分析及质谱鉴定 被引量：7

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作者 宋元宗 祝其锋 +1 位作者 庄海旗 莫丽儿 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期295-299,共5页

探索了GC/FID定量分析DNA修饰碱基 5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的实验条件 ,用GC/MS鉴定各有关成分。结果表明 ,DNA水解物中不同成分可被成功地衍生和分离 ;5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的相对摩尔反应因子分别为 3 0和 1 3;灵敏度分... 探索了GC/FID定量分析DNA修饰碱基 5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的实验条件 ,用GC/MS鉴定各有关成分。结果表明 ,DNA水解物中不同成分可被成功地衍生和分离 ;5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的相对摩尔反应因子分别为 3 0和 1 3;灵敏度分别为 5 50× 1 0 9mV·s/ g和 7 59× 1 0 1 0 mV·s/ g ;检测限可分别达 36 4pg/s和 1 5 8pg/s ;整个分析流程的相对标准偏差小于 2 0 %。 展开更多

关键词 5-甲基胞嘧啶 8-羟基鸟嘌呤 GC/FID 分析鉴定

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毛细管电泳法分析血清中华法林对映体的浓度 被引量：5

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作者 梁统 周克元 +1 位作者 丁航 凌光鑫 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期36-38,共3页

建立了血中华法林对映体的毛细管电泳分析方法。电泳缓冲液由１４０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液和７ｍｍｏｌ／Ｌ的甲基β－环糊精组成（ｐＨ７．９）。工作电压１３ｋＶ，检测波长２１０ｎｍ。两种对映体Ｓ（－）－华法林及Ｒ（＋）－华... 建立了血中华法林对映体的毛细管电泳分析方法。电泳缓冲液由１４０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液和７ｍｍｏｌ／Ｌ的甲基β－环糊精组成（ｐＨ７．９）。工作电压１３ｋＶ，检测波长２１０ｎｍ。两种对映体Ｓ（－）－华法林及Ｒ（＋）－华法林达到基线分离，在０～５μｇ／ｍｌ范围内呈线性。血中华法林对映体最低检测浓度均为０．０２μｇ／ｍｌ，精密度及回收率均较好。 展开更多

关键词 华法林 手性药物 毛细管电泳

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细胞氧化损伤时8-羟基鸟嘌呤的测定 被引量：4

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作者 张海涛 祝其锋 +2 位作者 莫丽儿 庄海旗 蔡春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期280-283,共4页

利用Ｈ２Ｏ２易通过细胞膜而到达核这一特点，初步探讨了不同浓度Ｈ２Ｏ２对ＨＬ６０细胞ＤＮＡ的氧化损伤程度．发现Ｈ２Ｏ２浓度在０４ｍｍｏｌ／Ｌ以上时，作用８～２４ｈ可以用气相色谱／火焰离子检测器（ＧＣ／ＦＩＤ）检测到... 利用Ｈ２Ｏ２易通过细胞膜而到达核这一特点，初步探讨了不同浓度Ｈ２Ｏ２对ＨＬ６０细胞ＤＮＡ的氧化损伤程度．发现Ｈ２Ｏ２浓度在０４ｍｍｏｌ／Ｌ以上时，作用８～２４ｈ可以用气相色谱／火焰离子检测器（ＧＣ／ＦＩＤ）检测到氧化损伤标志产物———８羟基鸟嘌呤（８ｏｈＧ），并观测到在０４～０８ｍｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２作用一定时间时。 展开更多

关键词 8-羟基鸟嘌呤 H2O2 GC/FID 细胞氧化损伤

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槲皮素单硫酸酯钠对 HL-60细胞生长的影响(英文) 被引量：4

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作者 翁云 佘戟 +2 位作者 康铁邦 徐美亦 梁念慈 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期183-186,共4页

通过观察槲皮素单硫酸酯钠 (SQMS)对 HL-60细胞毒作用 ,细胞周期变化 ,胞内 Ca2 +浓度([Ca2 +]i)变化及蛋白激酶 CK2活性的变化研究SQMS对 HL- 60细胞生长的影响 .发现 SQMS(2 0- 1 2 0μmol· L-1)可浓度依赖性抑制 HL- 60细胞的生... 通过观察槲皮素单硫酸酯钠 (SQMS)对 HL-60细胞毒作用 ,细胞周期变化 ,胞内 Ca2 +浓度([Ca2 +]i)变化及蛋白激酶 CK2活性的变化研究SQMS对 HL- 60细胞生长的影响 .发现 SQMS(2 0- 1 2 0μmol· L-1)可浓度依赖性抑制 HL- 60细胞的生长 ,阻断 HL- 60细胞于 G0 /G1期 ;SQMS(1 0 0μmol· L-1)可使 [Ca2 +]i 由 (1 0 5± 9) nmol·L-1上升到 (2 0 1± 1 3) nmol· L-1;低浓度 SQMS(0 .55-8.8μmol· L-1)可显著抑制从 HL- 60细胞中纯化的蛋白激酶 CK2的活性 .结果提示 ,SQMS可抑制HL- 60细胞生长 ,其机理可能与抑制 HL- 60细胞中蛋白激酶 CK2的活性 ,提高细胞 [Ca2 +]i 及促进细胞分化有关 . 展开更多

关键词 槲皮素 SQMS 细胞周期 HL-60 白血病 抑制作用

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气相色谱/氢火焰检测器检测HL-60细胞DNA中氧化损伤产物8-羟基鸟嘌呤的研究 被引量：3

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作者 张海涛 祝其锋 +2 位作者 莫丽儿 庄海旗 蔡春 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期262-263,共2页

用0．4mmol／LH2O2处理HL－60细胞株24h，采用气相色谱／氢火焰检测器（GC／FID）检测DNA氧化损伤产物8-羟基鸟嘌呤，并用气相色谱质谱仪选择性离子检测（CGC／MS－SIM）对其进一步鉴定。所用方法的平均回收率为81．7％，RSD小于5％。

关键词 DNA损伤 氧化损伤 HL-60细胞 羟基鸟嘌呤

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广佛手中总多糖含量的分光光度法测定 被引量：12

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作者 李小凤 程荷凤 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期i005-i006,共2页

关键词 广佛手 多糖 分光光度法 含量测定

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苯丙烯酸对松节油转化水合萜二醇的作用研究 被引量：5

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作者 庄海旗 李炳强 +1 位作者 莫丽儿 赵子牛 《化学研究与应用》 CAS CSCD 1998年第1期58-62,共5页

本文对苯丙烯酸在松节油转化成水合萜二醇反应中的作用进行了对比研究。结果表明，在传统的２７％Ｈ２ＳＯ４催化，平平加，ＯＰ－１０，吐温－８０及吐温－８０～吐温－２０混合剂分别作乳化剂的松节油水合反应中，加入苯丙烯酸可使水... 本文对苯丙烯酸在松节油转化成水合萜二醇反应中的作用进行了对比研究。结果表明，在传统的２７％Ｈ２ＳＯ４催化，平平加，ＯＰ－１０，吐温－８０及吐温－８０～吐温－２０混合剂分别作乳化剂的松节油水合反应中，加入苯丙烯酸可使水合萜二醇的收率提高８～１０％，反应时间缩短４－７小时。本文还对产物及副产物作了质谱分析。 展开更多

关键词 水合萜二醇 松节油 苯丙烯酸 松油醇 生产

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发烟硫酸与槲皮素作用的研究 被引量：4

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作者 佘戟 莫丽儿 梁念慈 《化学研究与应用》 CAS CSCD 1999年第2期206-207,共2页

槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）属天然黄酮类化合物，在自然界多种植物中含量丰富，并具有肯定的抗肿瘤、抗血小板、抗氧化作用，还影响多种酶的活性［１～４］，在国内外引起广泛的关注。本研究组多年致力于槲皮素的应用研究，为解决槲... 槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）属天然黄酮类化合物，在自然界多种植物中含量丰富，并具有肯定的抗肿瘤、抗血小板、抗氧化作用，还影响多种酶的活性［１～４］，在国内外引起广泛的关注。本研究组多年致力于槲皮素的应用研究，为解决槲皮素不溶于水，体内服药难于吸收［５... 展开更多

关键词 发烟硫酸 槲皮素 酯化 衍生物 硫酸

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半边旗中二萜类化合物5F对K562细胞MAPK活性、表达的影响 被引量：4

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作者 王京滨 梁念慈 莫丽儿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期294-297,共4页

目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 对映贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞MAPK活性、表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,以MBP为底物检测MAPK的活性、用蛋白印迹法测定MAPK的表达。结果　半边旗中... 目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 对映贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞MAPK活性、表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,以MBP为底物检测MAPK的活性、用蛋白印迹法测定MAPK的表达。结果　半边旗中二萜类化合物 5F作用于K5 6 2细胞使MAPK活性增强 ,表达增多 ,且有量效关系。结论　推测异常激活和表达的MAPK是化合物 展开更多

关键词 半边旗 二萜类 丝裂原活化蛋白激酶 K562细胞

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半边旗提取物6F抑制HL-6 0细胞蛋白激酶C活性(英文) 被引量：2

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作者 何承伟 梁念慈 +2 位作者 莫丽儿 李金华 张晓 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期81-86,共6页

目的　探讨半边旗提取物 6F的细胞毒作用及诱导DNA片段化与蛋白激酶C(PKC)信号转导途径的关系 ,检测 6F对PKC活性的影响。方法　受试对象为HL 6 0细胞 ,超速离心法获得的胞液 (可溶部分 )及颗粒 (不可溶部分 ,包括细胞膜系统及胞核 )部... 目的　探讨半边旗提取物 6F的细胞毒作用及诱导DNA片段化与蛋白激酶C(PKC)信号转导途径的关系 ,检测 6F对PKC活性的影响。方法　受试对象为HL 6 0细胞 ,超速离心法获得的胞液 (可溶部分 )及颗粒 (不可溶部分 ,包括细胞膜系统及胞核 )部分用作PKC活性测定。经 0 .4g·L- 1磷脂酰丝氨酸 ,0 .0 4g·L- 1甘油二油酸酯激动剂作用酶粗提物后 ,用液体闪烁计数仪计数 [γ 32 P]ATP参入外源底物的量以测定PKC活性。MTT法测定HL 6 0细胞的活力 ,二苯胺法测定 6F诱导DNA片段化程度。结果　在所测试的浓度范围内 (0 .5～ 312 μmol·L- 1) ,化合物 6F显著抑制胞液及颗粒部分PKC活性 ,最大抑制率达 88.6 % ,呈浓度依赖关系 (胞液部分r =0 .781,P <0 .0 5 ,颗粒部分r =0 .931,P <0 .0 1)。 6F诱导HL 6 0细胞DNA片段化及对细胞的毒性作用可被具有致癌作用的PKC激活剂肉豆蔻酸酯 (PMA ,浓度为 6 5nmol·L- 1)拮抗 ,抑制率分别是 30 %和 4 4% (P <0 .0 1)。PMA单独用使HL 6 0细胞线粒体将MTT还原为甲月赞的能力增强 14 % (P <0 .0 1) ,即增强细胞活力。结论化合物 6F是PKC的抑制剂。 6F对HL 6 展开更多

关键词 半边旗 HL-60细胞 蛋白激酶C 细胞毒作用 DNA片段化 信号转导途径

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丙戊酸钠对大鼠脑组织中γ-氨基丁酸代谢的影响 被引量：2

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作者 梁统 周克元 凌光鑫 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期380-382,共3页

为研究丙戊酸钠对脑组织不同区域γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）生成的机制，分别给大鼠ｉｐ２００ｍｇ／ｋｇ丙戊酸钠、２００ｍｇ／ｋｇ丙戊酸钠＋１００ｍｇ／ｋｇ氨基羟乙酸（ＡＯＡＡ），３０ｍｉｎ后断头处死，观察下丘脑、小脑、延髓... 为研究丙戊酸钠对脑组织不同区域γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）生成的机制，分别给大鼠ｉｐ２００ｍｇ／ｋｇ丙戊酸钠、２００ｍｇ／ｋｇ丙戊酸钠＋１００ｍｇ／ｋｇ氨基羟乙酸（ＡＯＡＡ），３０ｍｉｎ后断头处死，观察下丘脑、小脑、延髓、大脑皮层四个脑区谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）、γ－氨基丁酸转氨酶（ＧＡＢＡ－Ｔ）活性及ＧＡＢＡ含量的变化。结果表明，丙戊酸钠既抑制ＧＡＢＡ－Ｔ也能激活ＧＡＤ，显著提高下丘脑、大脑皮层两个脑区的ＧＡＢＡ含量。虽然四个脑区的ＧＡＢＡ－Ｔ活性得到显著的抑制，但ＧＡＢＡ并没有相应地显著提高；仅在ＧＡＤ活性显著升高的下丘脑及大脑皮层两个脑区的ＧＡＢＡ含量显著增加。ＡＯＡＡ加丙戊酸钠组与单独ＡＯＡＡ组比较，各脑区ＧＡＢＡ－Ｔ活性无明显差别变化，仅在下丘脑中的ＧＡＤ活性显著提高，相应的ＧＡＢＡ含量也显著增加。提示丙戊酸钠主要是通过激活ＧＡＤ，从而提高脑组织ＧＡＢＡ的含量。 展开更多

关键词 氨基丁酶 谷氨酸脱羧酶 GABA-T 丙戊酸钠

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交联聚苯乙烯固载聚乙二醇树脂（PEG）含量与活性的依赖关系研究 被引量：5

18

作者 杨建文 俞善信 《化学研究与应用》 CAS CSCD 1995年第3期260-263,共4页

将具有不同ＰＥＧ（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）含量的交联聚苯乙烯固载聚乙二醇树脂用于催化环己烯的二氯卡宾加成和乙酰苯胺的Ｎ－丁基化反应，发现树脂ＰＥＧ含量与催化剂活性之间存在依赖关系。通过测定不同ＰＥＧ含量... 将具有不同ＰＥＧ（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）含量的交联聚苯乙烯固载聚乙二醇树脂用于催化环己烯的二氯卡宾加成和乙酰苯胺的Ｎ－丁基化反应，发现树脂ＰＥＧ含量与催化剂活性之间存在依赖关系。通过测定不同ＰＥＧ含量的树脂分别在水和甲苯中的溶胀系数，用树脂亲油－亲水性的变化规律，解释树脂活性与ＰＥＧ含量之间的依赖关系。 展开更多

关键词 溶胀系数 聚乙二醇 活性 聚苯乙烯

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配合物[Co(PMBP)_2(MeOH)(EtOH)]的合成、表征及晶体结构 被引量：2

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作者 吴喜仁 贾振斌 郑明彬 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期229-233,共5页

在醇溶液中合成了标题配合物[Co(PMBP)2(MeOH)(EtOH)](HPMBP=1-phenyl-3-methyl-4-benzoyl-pyrazolone-5),并进行了元素分析、红外光谱、摩尔电导率、X-射线衍射等表征。结果表明此配合物属单斜晶系,空间群为P2(1)/n,晶胞参数为:a=13.80... 在醇溶液中合成了标题配合物[Co(PMBP)2(MeOH)(EtOH)](HPMBP=1-phenyl-3-methyl-4-benzoyl-pyrazolone-5),并进行了元素分析、红外光谱、摩尔电导率、X-射线衍射等表征。结果表明此配合物属单斜晶系,空间群为P2(1)/n,晶胞参数为:a=13.802(2)b,=13.889(2)nmc,=17.488(3),α=90°,β=100.805(2)°,γ=90°,V=3292.9(9),Z=4,Dc=1.395 Mg.m-3,μ=0.575mm-1,F(000)=1444。配合物中的金属钴离子与2个PMBP-中的4个氧原子以及2个醇分子中氧原子配位,而形成六配位的变形八面体。 展开更多

关键词 钴配合物 Β-二酮 合成 晶体结构

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用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究 被引量：2

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作者 马卫列 刘芳 何承伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1476-1478,共3页

目的探索用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin)重组蛋白的最佳生产工艺路线。方法用pTh ioH is-endo重组质粒转化不同的大肠杆菌BL21、JM109、DH5α,经几种不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(isopro-pylth io-galactoside,... 目的探索用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin)重组蛋白的最佳生产工艺路线。方法用pTh ioH is-endo重组质粒转化不同的大肠杆菌BL21、JM109、DH5α,经几种不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(isopro-pylth io-galactoside,IPTG)诱导表达重组融合蛋白,或诱导表达不同时间后,采用SDS-PAGE分析表达产物;按所优化的条件进行重组内皮抑素的表达、包涵体的提取、洗涤、变性和复性,最后经N i+柱纯化,再通过SDS-PAGE分析纯化的结果。结果3种大肠杆菌表达效果相差无几,最佳IPTG的浓度0.9 mmol/L,最佳诱导时间为5 h,经N i+柱纯化后可获得可溶性的重组内皮抑素。结论利用本实验的优化条件可获得高产量、高纯度、可溶性的小鼠内皮抑素重组蛋白。 展开更多

关键词 ENDOSTATIN 硫氧还蛋白融合表达系统 融合蛋白

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