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胰腺多肽纳米抗体的制备及结合活性分析 被引量:1
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作者 任泓睿 贾琼 +6 位作者 王家庆 田婧婧 李荣杰 郝花花 李建丽 渠志灿 范瑞文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1273-1281,共9页
胰腺多肽(pancreatic polypeptide,PP)是一种含36个氨基酸的胰腺激素,在评估胰腺功能和辅助诊断相关疾病中发挥重要作用。以PP为靶点,筛选特异性的PP纳米抗体,评估其与PP抗原是否具有结合活性。利用原核表达系统制备了高纯度的PP抗原,... 胰腺多肽(pancreatic polypeptide,PP)是一种含36个氨基酸的胰腺激素,在评估胰腺功能和辅助诊断相关疾病中发挥重要作用。以PP为靶点,筛选特异性的PP纳米抗体,评估其与PP抗原是否具有结合活性。利用原核表达系统制备了高纯度的PP抗原,经免疫羊驼后构建了高库容和高丰度的胰腺多肽免疫的纳米抗体噬菌体文库,并通过噬菌体展示技术进行文库筛选,获得8株胰腺多肽纳米抗体。选取1株纳米抗体(PP-VHH)构建原核表达体系,经IPTG诱导表达、纯化与鉴定,通过间接ELISA和双抗夹心ELISA分别检测和评价抗原抗体的结合活性和血清中PP含量,结果显示,PP-VHH与PP具有结合活性,且PP-VHH可用于检测鸡和人血清中的PP。建立的双抗夹心ELISA法拟合曲线R^(2)为0.9868,可检测不同个体鸡血清中PP浓度为48~55 pg/mL。而人血清中PP浓度范围波动较大。综上所述,本研究筛选到的1株纳米抗体PP-VHH,可用于检测鸡和人血清中的PP含量,为评估胰腺功能异常或诊断相关疾病提供基础。 展开更多
关键词 胰腺多肽 纳米抗体 原核表达 结合活性
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小米糠多酚提取工艺的研究 被引量:6
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作者 李晓君 张梅 +4 位作者 张建丰 张红娇 丁东源 谭永兰 渠志灿 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期43-49,共7页
以山西省沁县产的晋谷21号小米糠为原料,通过比较超声法、微波法、冷浸法、热回流、闪式法五种提取方法的小米糠多酚得率以及抗氧化能力的大小,选择超声提取法并通过单因素及响应面实验对小米糠多酚提取工艺进行优化,最后使用HPLC-ESI-M... 以山西省沁县产的晋谷21号小米糠为原料,通过比较超声法、微波法、冷浸法、热回流、闪式法五种提取方法的小米糠多酚得率以及抗氧化能力的大小,选择超声提取法并通过单因素及响应面实验对小米糠多酚提取工艺进行优化,最后使用HPLC-ESI-MS对小米糠多酚成分进行定性分析。结果表明,超声提取得到的小米糠多酚得率最高,为1.55%,浓度6 g/L时对DPPH·的清除率可达80.45%;小米糠多酚的最佳提取工艺条件为:液料比10∶1 mL/g、颗粒度60目、提取温度48℃、提取时间48 min、超声功率240 W、乙醇体积分数70%,在此条件下小米糠多酚得率为1.726%;通过HPLC-ESI-MS分析,小米糠多酚中含有香草酸-4-O-β-D-葡萄糖苷和阿魏酸甲酯。 展开更多
关键词 小米糠 多酚 抗氧化
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牡丹籽粗蛋白提取工艺优化 被引量:3
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作者 丁东源 李海波 +1 位作者 梁锐 渠志灿 《粮食与油脂》 北大核心 2021年第4期96-99,共4页
以牡丹籽粕为原料,采用超声波辅助碱溶酸沉工艺,利用氧化还原电位水对其粗蛋白进行提取,在单因素试验基础上,进行正交试验,对料液比、提取时间、提取温度进行了优化,同时将牡丹籽蛋白与大豆蛋白进行比较。结果表明:最佳的工艺条件为料液... 以牡丹籽粕为原料,采用超声波辅助碱溶酸沉工艺,利用氧化还原电位水对其粗蛋白进行提取,在单因素试验基础上,进行正交试验,对料液比、提取时间、提取温度进行了优化,同时将牡丹籽蛋白与大豆蛋白进行比较。结果表明:最佳的工艺条件为料液比1∶25(g/mL)、提取时间50 min、提取温度50℃、pH 9.5,然后以浓盐酸将提取液pH调节为4.0,酸沉30 min,得到牡丹籽粗蛋白,其提取率为86.53%,氨基酸组成合理,具有较高的营养价值。 展开更多
关键词 牡丹籽 粗蛋白 碱溶酸沉 氧化还原电位水 氨基酸分析
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