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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤热休克蛋白70合成与TNF-α的关系 被引量:2
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作者 卢先锋 秦琴 杨晓丽 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期864-867,共4页
目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后HSP70合成与TNF-α的关系。方法 7日龄SD大鼠54只,随机分为空白对照组、假手术组和实验组(HIBD后2、6、12、18、24、48、72h组)共9组。用HE染色法观察脑皮质细胞形态变化,免疫组织化学法测定... 目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后HSP70合成与TNF-α的关系。方法 7日龄SD大鼠54只,随机分为空白对照组、假手术组和实验组(HIBD后2、6、12、18、24、48、72h组)共9组。用HE染色法观察脑皮质细胞形态变化,免疫组织化学法测定脑皮质HSP70阳性细胞数,放射免疫平衡法测定TNF-α含量。结果 HIBD后2h即可在皮质部位观察到HSP70阳性细胞数,HIBD后48h达到高峰,72hHSP70阳性细胞数仍比对照组高(P<0.05)。HIBD后2h,实验组大鼠脑组织出现TNF-α,12h达到高峰,然后逐渐减少,HIBD后48、72hTNF-α含量明显减少(P<0.05)。结论 HSP70和TNF-α共同参与了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤病理生理过程,两者之间可能存在某种联系。 展开更多
关键词 新生大鼠 缺氧缺血性脑损伤 热休克蛋白70 肿瘤坏死因子Α
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新型miRNA表达框架下调端粒酶活性并抑制视网膜母细胞瘤细胞生长
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作者 赵丹丹 丁彩云 李文涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2428-2439,共12页
目的本研究致力于设计一种新的miRNA表达框架(MEC),其以hTERT和hTR的特异性序列为靶点。该框架能够有效改善传统RNAi方法中miRNA易降解和细胞毒性问题,为miRNA的合成提供一种简便的方法。方法采用重叠PCR方法构建hTERT和hTR特异的miRNA... 目的本研究致力于设计一种新的miRNA表达框架(MEC),其以hTERT和hTR的特异性序列为靶点。该框架能够有效改善传统RNAi方法中miRNA易降解和细胞毒性问题,为miRNA的合成提供一种简便的方法。方法采用重叠PCR方法构建hTERT和hTR特异的miRNA表达框架。采用TRAP银染色和TRAP实时荧光定量PCR检测端粒酶活性。实时荧光定量PCR法测定端粒长度,MTT法测定细胞活力。annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果成功构建了靶向hTERT/hTR特异性miRNA表达框架。不同MEC对端粒酶活性的抑制程度不同。端粒酶的沉默可引起视网膜母细胞瘤(RB)细胞G0/G1期生长阻滞,导致细胞凋亡。结论miRNA介导的端粒酶沉默是一种有效抑制RB细胞生长的策略,开发一个强大的系统来充分探索miRNA的作用是必要的。本文构建的MEC显示了强大的RNAi效应,可成为筛选用于RB基因治疗的RNAi靶向序列的有效工具。 展开更多
关键词 端粒酶 MIRNA RNAI 视网膜母细胞瘤 基因治疗
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