洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了...洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了检测水体中邻苯二酚的邻苯二酚双加氧酶传感器.以100mmol/L磷酸钠标准缓冲液(pH7.24)作为该酶传感器的的工作介质,在25℃条件下测得传感器对邻苯二酚标准液的工作曲线线性范围为0.2～3mmol/L,检测限为0.05mmol/L,响应时间为1min,平均回收率达到1.03%.展开更多
目的研究阿司咪唑对斑马鱼的心脏毒性,为斑马鱼的心脏毒性模型提供依据。方法选择1、4、10、20μmol·L-1的阿司咪唑观察其对72 hpf(hour post fertilization)斑马鱼的形态影响,包括畸形、心囊水肿、血细胞在心区堆积等情况,计算心...目的研究阿司咪唑对斑马鱼的心脏毒性,为斑马鱼的心脏毒性模型提供依据。方法选择1、4、10、20μmol·L-1的阿司咪唑观察其对72 hpf(hour post fertilization)斑马鱼的形态影响,包括畸形、心囊水肿、血细胞在心区堆积等情况,计算心率、死亡率及EC50,测量静脉窦-动脉球(SV-BA)间距,以及对2 hpf斑马鱼心脏发育的影响。结果阿司咪唑处理后,斑马鱼出现出心率下降、SV-BA间距增大、血细胞在心区堆积、全身无血流、心囊水肿、心脏停止跳动等中毒现象,并具有时间、剂量依赖性;同时观察到阿司咪唑对2 hpf斑马鱼的心脏发育有明显影响。结论利用阳性药物阿司咪唑探讨药物对斑马鱼心脏功能和发育方面的毒性,有助于建立基于斑马鱼的心脏毒性评价筛选体系。展开更多
文摘洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了检测水体中邻苯二酚的邻苯二酚双加氧酶传感器.以100mmol/L磷酸钠标准缓冲液(pH7.24)作为该酶传感器的的工作介质,在25℃条件下测得传感器对邻苯二酚标准液的工作曲线线性范围为0.2～3mmol/L,检测限为0.05mmol/L,响应时间为1min,平均回收率达到1.03%.
