环状RNA:潜在的新型miRNA活性调控分子 被引量：7

1

作者 张燕燕 任国诚 张晾 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1158-1163,共6页

环状RNA(circular RNA,circRNA)是近年来RNA领域最新的研究热点.它是一类由特殊的选择性剪切产生且在真核细胞中广泛表达的环形内源性RNA分子.研究发现,circRNA富含microRNA(miRNA)结合位点,可以发挥竞争性内源RNA作用,作为miRNA"... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是近年来RNA领域最新的研究热点.它是一类由特殊的选择性剪切产生且在真核细胞中广泛表达的环形内源性RNA分子.研究发现,circRNA富含microRNA(miRNA)结合位点,可以发挥竞争性内源RNA作用,作为miRNA"海绵"来解除对其靶基因的抑制效应.近年来,circRNA作为一种新型调控分子调控miRNA功能的发挥,受到众多研究者的青睐.本文综述circRNA的产生机制,及其调控miRNA的最新研究进展与研究方法等. 展开更多

关键词 环状RNA 竞争性内源性RNA 微RNA

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束缚-浸水应激大鼠下丘脑前部、延髓内脏带突触可塑性的变化 被引量：1

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作者 赵东芹 孙海基 +1 位作者 姚旭东 艾洪滨 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期352-358,共7页

目的:研究束缚-浸水应激不同时间段(0,1,2和4 h)雄性Wistar大鼠下丘脑前部(主要是室旁核和视上核)、延髓内脏带(主要是迷走复合体)中突触膨体素和突触蛋白I表达量的变化情况,以期探讨在束缚-浸水应激致胃粘膜损伤过程中上述部位的突触... 目的:研究束缚-浸水应激不同时间段(0,1,2和4 h)雄性Wistar大鼠下丘脑前部(主要是室旁核和视上核)、延髓内脏带(主要是迷走复合体)中突触膨体素和突触蛋白I表达量的变化情况,以期探讨在束缚-浸水应激致胃粘膜损伤过程中上述部位的突触可塑性是否发生了改变。方法:随机将雄性Wistar大鼠分为4组:束缚-浸水应激0,1,2和4 h组,利用免疫组织化学和Western Blot两种方法统计各组下丘脑前部、延髓内脏带中突触膨体素和突触蛋白I的分布和含量变化情况。结果:在束缚-浸水应激0 h到4 h过程中,下丘脑前部中突触膨体素表达在不同应激时间段差异均无统计学意义,但突触蛋白I,尤其是突触蛋白I b的含量发生了显著性变化(P<0.05);迷走复合体中的突触膨体素和突触蛋白I的表达均发生了显著性变化(P<0.05)。结论:这些结果提示,下丘脑前部、延髓内脏带在束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的中枢调控过程中均发生了突触可塑性的变化。 展开更多

关键词 束缚-浸水应激 下丘脑前部 延髓内脏带 突触膨体素 突触蛋白I 大鼠

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鲤鱼NLR-C基因分子克隆及其特性分析 被引量：1

3

作者 张珍 杨桂文 +2 位作者 黄建勋 彭少卿 安利国 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期92-96,共5页

利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)NLR-C基因cDNA全长。经qRT-PCR检测发现,NLR-C基因在鲤鱼血液和脑中表达最高,在头肾、鳃、后肠和口腔上皮中有较高表达。采用鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后,NLR-C mRNA在肝、脾、... 利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)NLR-C基因cDNA全长。经qRT-PCR检测发现,NLR-C基因在鲤鱼血液和脑中表达最高,在头肾、鳃、后肠和口腔上皮中有较高表达。采用鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后,NLR-C mRNA在肝、脾、头肾和后肠中的表达有不同程度升高。结果显示,NLR-C基因参与鲤鱼天然免疫应答过程,具有抵御病原微生物侵袭的作用。 展开更多

关键词 鲤鱼 NLR-C 基因克隆 鳗弧菌

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鲤鱼Xbp1基因克隆与组织特异性表达分析 被引量：1

4

作者 彭少卿 安利国 +2 位作者 张珍 袁金铎 杨桂文 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期163-168,共6页

利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)X盒结合蛋白1(Xbp1)基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼Xbp1 mRNA的26 bp内含子及其两侧序列能形成典型的茎环结构,其蛋白结构具有1个保守的碱性亮氨酸拉链(bZIP)结构域;... 利用RT-PCR和RACE技术克隆得到鲤鱼(Cyprinus carpio L.)X盒结合蛋白1(Xbp1)基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼Xbp1 mRNA的26 bp内含子及其两侧序列能形成典型的茎环结构,其蛋白结构具有1个保守的碱性亮氨酸拉链(bZIP)结构域;系统进化分析表明鲤鱼Xbp1与斑马鱼的亲缘关系最近;实时荧光定量PCR检测结果表明,两种亚型Xbp1 mRNA在鲤鱼不同组织中广泛表达,且未剪接型Xbp1 mRNA的表达量明显高于剪接型。 展开更多

关键词 鲤鱼 X盒结合蛋白1 基因克隆

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PCB118暴露对青春期雄性ICR小鼠精子发生的影响及机制

5

作者 沈文敏 陶钰荣 +3 位作者 张琳 孟令娇 刘丽 刘树真 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第11期839-846,共8页

目的观察青春期雄性ICR小鼠暴露PCB118对精子发生的损害作用,探究其与睾酮合成过程相关的作用机制。方法36只4周龄雄性ICR小鼠随机分为3组,每组12只,每日ig给予PCB118(50和500μg·kg^(-1))或溶媒(玉米油),连续4周。给药结束后计算... 目的观察青春期雄性ICR小鼠暴露PCB118对精子发生的损害作用,探究其与睾酮合成过程相关的作用机制。方法36只4周龄雄性ICR小鼠随机分为3组,每组12只,每日ig给予PCB118(50和500μg·kg^(-1))或溶媒(玉米油),连续4周。给药结束后计算脏器系数;HE染色观察睾丸组织病理变化,统计曲细精管直径、生精上皮厚度和精原细胞相对数目;检测附睾精子数目、精子活力和精子畸形率;用放射免疫法检测血清睾酮水平;RT-qPCR法检测睾丸中与睾酮合成相关的酶和雄激素受体(Ar)mRNA水平;Western印迹法和免疫组织化学法检测AR蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。结果与溶媒对照组相比,PCB118500μg·kg^(-1)组肝系数明显下降(P<0.01),PCB1182个剂量组睾丸、附睾、肾和脾系数均无显著变化。PCB1182个剂量组睾丸组织中出现精原细胞缺失、曲细精管空泡化,曲细精管直径、生精上皮厚度和精原细胞相对数目均显著下降(P<0.05,P<0.01);附睾中精子数量显著减少,畸形率显著增加(P<0.05),但精子活力无显著变化;血清睾酮水平显著下降(P<0.05);睾丸中Ar及与睾酮合成相关的酶类固醇合成急性调节酶、胆固醇侧链裂解酶、3β-羟基类固醇脱氢酶、17-20裂解酶和17β-羟基类固醇脱氢酶的mRNA表达水平显著下降(P<0.05);AR和PCNA蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论PCB118导致生精细胞增殖抑制,精子质量下降,该作用与其降低血清睾酮水平、下调睾酮合成相关酶mRNA水平、降低AR蛋白和mRNA表达以及降低PCNA蛋白表达有关。 展开更多

关键词 2 3’ 4 4’ 5-五氯联苯 精子发生 睾酮合成 雄激素受体

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气相色谱法分析豌豆粉渣中多糖的单糖组分 被引量：14

6

作者 邢丽 耿越 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第22期252-254,共3页

采用糖醇衍生化方法,运用气相色谱分析测定豌豆粉渣中多糖的单糖组分及各单糖的相对组成比例。结果表明:经水洗处理的豌豆粉渣中各单糖的相对组成质量比为鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶92.00∶39.50∶21.80∶12.30;未... 采用糖醇衍生化方法,运用气相色谱分析测定豌豆粉渣中多糖的单糖组分及各单糖的相对组成比例。结果表明:经水洗处理的豌豆粉渣中各单糖的相对组成质量比为鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶92.00∶39.50∶21.80∶12.30;未经水洗处理的豌豆粉渣中各单糖的相对组成质量比为鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶68.86∶38.43∶25.00∶9.57。豌豆粉渣中多糖主要由阿拉伯糖和木糖组成,其中阿拉伯糖的相对含量为23.78%。 展开更多

关键词 气相色谱 豌豆粉渣 多糖 衍生化

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扁玉螺、罗氏海盘车中牛磺酸的HPLC测定 被引量：1

7

作者 张晾 耿越 +1 位作者 涂文利 张静静 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期6-8,28,共4页

利用高效液相色谱OPA柱前衍生法测定扁玉螺(Nevertia didyma(Roding))肝脏、腹足,罗氏海盘车(Asterias rollestoni Bell)内脏、体壁中牛磺酸的含量。实验结果表明,100g(湿质量)样品中牛磺酸含量分别为535.2、1298.7、60.4、31.7mg。

关键词 牛磺酸 扁玉螺(Nevertia didyma(Roding)) 罗氏海盘车(Asterias rollestoni Bell) 高效液相色谱

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鲤鱼LGP2的基因克隆与表达 被引量：2

8

作者 王蕾 李华 +2 位作者 高志辉 安利国 祝瑶瑶 《济南大学学报（自然科学版）》 北大核心 2017年第6期506-512,共7页

利用反转录-聚合酶链式反应和互补脱氧核糖核酸(cDNA)末端快速扩增技术克隆得到鲤鱼的遗传和生理学实验室蛋白2(LGP2)基因的cDNA全长,并对其在鲤鱼抵抗病毒和细菌感染过程中的免疫作用进行研究。结果表明:鲤鱼的LGP2的cDNA全长共2 978 ... 利用反转录-聚合酶链式反应和互补脱氧核糖核酸(cDNA)末端快速扩增技术克隆得到鲤鱼的遗传和生理学实验室蛋白2(LGP2)基因的cDNA全长,并对其在鲤鱼抵抗病毒和细菌感染过程中的免疫作用进行研究。结果表明:鲤鱼的LGP2的cDNA全长共2 978 bp,开放阅读框为2 037 bp,编码679个氨基酸;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测鲤鱼的LGP2的信使核糖核酸(mRNA)表达于所有被测组织中,且在鳃和脑中的表达量较大,而在性腺和血液中的表达量较小;采用poly I:C和嗜水气单胞菌腹腔注射刺激鲤鱼后,各组织中LGP2的mRNA表达量均有所增大;LGP2是鲤鱼以依赖维甲酸诱导基因I样受体(RIG-like receptors,RLR)信号通路的方式进行抗病毒和抗细菌天然免疫过程中的重要调节因子。 展开更多

关键词 鲤鱼 遗传和生理学实验室蛋白2 基因表达 嗜水气单胞菌

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慢病毒载体感染人主动脉血管平滑肌细胞的效率 被引量：1

9

作者 张燕燕 李亭伟 +1 位作者 王莎莎 张晾 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第3期190-194,共5页

为探讨慢病毒载体感染人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)株效率的最佳条件,培养人主动脉VSMCs,携带UbiEGFP-MCS-IRES-Puromycin报告基因表达元件慢病毒载体按0、1、10、50和100等不同病毒感染复数(MOI)或完全培养液、完全培养液加polybren... 为探讨慢病毒载体感染人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)株效率的最佳条件,培养人主动脉VSMCs,携带UbiEGFP-MCS-IRES-Puromycin报告基因表达元件慢病毒载体按0、1、10、50和100等不同病毒感染复数(MOI)或完全培养液、完全培养液加polybrene、感染增强液、感染增强液加polybrene等不同感染试剂进行细胞感染,48 h后荧光显微拍照,分析感染效率;MTT法测定不同MOI慢病毒载体感染48 h后细胞活性;荧光显微镜观察病毒感染后第2代和第10代细胞中荧光强度。结果显示,随MOI的增加,感染效率逐渐增加,细胞活力逐渐降低,MOI为100时,对VSMCs株具有接近90%的感染效率,添加polybrene后感染效率显著升高,完全培养液与感染增强液间无显著性差异。第10代细胞与第2代细胞相比荧光信号无差异。 展开更多

关键词 慢病毒载体 血管平滑肌细胞 感染

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切断膈肌下迷走神经对应激大鼠延髓、下丘脑Fos表达的影响 被引量：4

10

作者 李慧 张玉玉 艾洪滨 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期107-111,共5页

目的:探讨在束缚-浸水应激状态下,情绪变化、体温降低、胃肠道的反馈信息三者中哪种因素是诱发延髓、下丘脑神经元Fos表达的主导因素。方法:将雄性Wistar大鼠随机分两组:手术组、对照组。手术组切断双侧膈肌下迷走神经,对照组同样暴露... 目的:探讨在束缚-浸水应激状态下,情绪变化、体温降低、胃肠道的反馈信息三者中哪种因素是诱发延髓、下丘脑神经元Fos表达的主导因素。方法:将雄性Wistar大鼠随机分两组:手术组、对照组。手术组切断双侧膈肌下迷走神经,对照组同样暴露神经但不切断。术后6d进行实验,将大鼠束缚-浸水应激3h后处死,测腹腔温度;取胃,观察胃粘膜损伤程度;取脑,应用免疫组化染色方法观察两组动物延髓、下丘脑神经元的Fos表达。结果:手术组动物延髓迷走神经运动背核、孤束核、下丘脑室旁核Fos表达较对照组减弱(P<0.05),延髓最后区减弱最为显著(P<0.01);腹腔温度低于对照组(P<0.05);胃粘膜损伤程度较对照组减轻(P<0.05)。结论:研究表明,束缚-浸水应激过程中,诱发延髓迷走神经背核、孤束核、最后区、下丘脑室旁核神经元Fos表达的主要因素是胃肠的反馈信息。 展开更多

关键词 束缚-浸水应激 切断膈肌下迷走神经 FOS 延髓 下丘脑 反馈信息

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肥胖与非肥胖小鼠间充质干细胞成脂分化 被引量：1

11

作者 李亚红 潘杰 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期264-269,共6页

分离培养瘦素受体基因突变型(db/db)和野生型(Wild Type,WT)小鼠原代间充质干细胞(Mesenchymal StemCells,MSCs);采用油红O染色和异丙醇萃取法分析不同分化时期细胞中脂质积累和成脂诱导率;免疫印迹检测PPARγ和脂联素蛋白水平。结果表... 分离培养瘦素受体基因突变型(db/db)和野生型(Wild Type,WT)小鼠原代间充质干细胞(Mesenchymal StemCells,MSCs);采用油红O染色和异丙醇萃取法分析不同分化时期细胞中脂质积累和成脂诱导率;免疫印迹检测PPARγ和脂联素蛋白水平。结果表明,db/db小鼠MSCs通过下调脂联素和PPARγ的表达抑制成脂分化过程;db/db小鼠和WT小鼠的脂肪细胞分化过程存在差异。 展开更多

关键词 肥胖 间充质干细胞 原代培养 肥胖小鼠

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涡虫的基因沉默作用

12

作者 吴雪 袁金铎 +2 位作者 赵楠楠 杨桂文 安利国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期24-29,共6页

涡虫具有惊人的再生能力,作为经典的模型生物应用于后生动物的研究工作。基因沉默是指生物体中特定基因由于外源性或内源性因素的作用而无法表达的现象。目前,RNA干扰作用作为诱导涡虫基因沉默的有效技术,在涡虫发育生物学和分子生物学... 涡虫具有惊人的再生能力,作为经典的模型生物应用于后生动物的研究工作。基因沉默是指生物体中特定基因由于外源性或内源性因素的作用而无法表达的现象。目前,RNA干扰作用作为诱导涡虫基因沉默的有效技术,在涡虫发育生物学和分子生物学的研究中发挥重要作用。对涡虫中的基因沉默作用进行了归纳总结,为理解涡虫再生的分子机制提供了基础资料。 展开更多

关键词 涡虫 基因沉默 RNA干扰 MIRNA PIRNA

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涡虫整体原位杂交方法的优化改良

13

作者 王秀丽 袁金铎 +2 位作者 孙璐 杨桂文 安利国 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期147-151,共5页

从原位杂交样品的预处理、固定液选择、杂交温度和时长选择、封闭时长等方面对日本三角涡虫整体原位杂交技术进行优化改良。实验表明,采用NAC处理10 min、w=4%的多聚甲醛溶液固定、56℃杂交48 h以及封闭3 h的改良方法可获得高特异性、... 从原位杂交样品的预处理、固定液选择、杂交温度和时长选择、封闭时长等方面对日本三角涡虫整体原位杂交技术进行优化改良。实验表明,采用NAC处理10 min、w=4%的多聚甲醛溶液固定、56℃杂交48 h以及封闭3 h的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。 展开更多

关键词 涡虫 整体原位杂交 优化改良

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TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征

14

作者 范正伟 张晾 潘杰 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期258-263,共6页

分离培养肿瘤坏死因子α(TNF-α)缺失与野生(WT)型小鼠前脂肪细胞,诱导其成脂分化,观察成脂相关蛋白的时序性变化,探讨TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征。结果表明,TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞诱导后第14 d,油红O染色阳性细胞显著多... 分离培养肿瘤坏死因子α(TNF-α)缺失与野生(WT)型小鼠前脂肪细胞,诱导其成脂分化,观察成脂相关蛋白的时序性变化,探讨TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征。结果表明,TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞诱导后第14 d,油红O染色阳性细胞显著多于WT小鼠细胞(p<0.05);成脂分化过程中,脂联素与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平逐渐上调,且TNF-α缺失小鼠前脂肪及成熟脂肪细胞表达量高于WT小鼠细胞。提示TNF-α缺失可上调前脂肪细胞分化过程中脂联素与PPARγ的表达,促进其成脂分化。 展开更多

关键词 TNF-α缺失小鼠 前脂肪细胞 成脂分化 脂联素 PPARΓ

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体外染色体畸变试验染色体标本制备的质量控制 被引量：6

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作者 贾庆文 英永 +2 位作者 马会 朱春花 高梅 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期108-112,共5页

目的探讨体外染色体畸变试验染色体制备过程的影响因素及质量控制,总结分析体外染色体标本成功制备方法及要点。方法选用中国仓鼠肺细胞(CHL)进行细胞培养及染色体制备,阳性诱变剂选用丝裂霉素和环磷酰胺,经过常规低渗、固定、滴片,最... 目的探讨体外染色体畸变试验染色体制备过程的影响因素及质量控制,总结分析体外染色体标本成功制备方法及要点。方法选用中国仓鼠肺细胞(CHL)进行细胞培养及染色体制备,阳性诱变剂选用丝裂霉素和环磷酰胺,经过常规低渗、固定、滴片,最后镜检阅片。结果 CHL染色体畸变试验,丝裂霉素、环磷酰胺处理后染色体畸变率显著增高,均>20%;而阴性对照组在有和无代谢活化系统两种测试条件下,染色体结构畸变率均小于5%。所制备的染色体分散良好,长短适中,成功率较高。结论影响体外染色体畸变试验细胞染色体标本制备的因素很多,每一个步骤都很关键,必须严格按照操作规程,掌握每一个步骤的原理,细致、耐心、科学地操作,才能制备出好的标本。 展开更多

关键词 染色体畸变试验 染色体标本制备 质量控制 中国仓鼠肺细胞

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中国口蹄疫病毒同源重组研究

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作者 武治印 何成强 +3 位作者 刘莹莹 冯倩 滕俊琳 陈建国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第6期689-695,共7页

从GenBank数据库中获得在我国分离的16株口蹄疫病毒全基因组序列,进而运用常规的系统发生方法分析了这16株病毒的同源重组情况,发现5株重组毒株.这些重组病毒主要来源于亚洲Ⅰ型(Asia1)和O型病毒间的重组.这些重组事件的鉴定也表明口蹄... 从GenBank数据库中获得在我国分离的16株口蹄疫病毒全基因组序列,进而运用常规的系统发生方法分析了这16株病毒的同源重组情况,发现5株重组毒株.这些重组病毒主要来源于亚洲Ⅰ型(Asia1)和O型病毒间的重组.这些重组事件的鉴定也表明口蹄疫病毒间的交叉感染在我国比较常见.另外,在我国还出现了由于Asia1型和O型病毒重组后导致病毒血清型发生转化的现象.这些结果解释了我国口蹄疫病毒(FMDV)遗传多样性和抗原多变性的成因,提示了我国在口蹄疫预防、治疗方面所面临的复杂局面. 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 同源重组 进化

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