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胶质细胞源性神经营养因子(△N39)-R9神经营养活性和透过血脑屏障的研究
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作者 崔敏 潘新 王丽梅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期738-744,共7页
为了研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在中枢神经系统疾病中的治疗应用,运用基因突变、蛋白质融合表达和蛋白质纯化技术获得分子质量较小的GDNF(!N39)活性片段.将HIV-1Tat蛋白转导区(proteintransductiondomain,PTD)的9个碱性氨基酸4... 为了研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在中枢神经系统疾病中的治疗应用,运用基因突变、蛋白质融合表达和蛋白质纯化技术获得分子质量较小的GDNF(!N39)活性片段.将HIV-1Tat蛋白转导区(proteintransductiondomain,PTD)的9个碱性氨基酸49RKKRRQRRR57模拟物9个精氨酸(R9)与GDNF("N39)活性片段融合表达,获得纯度达95%以上的GDNF(#N39)-R9融合蛋白.将GDNF、GDNF($N39)、GDNF(%N39)-R9分别加入原代培养的中脑多巴胺能神经元和转染GDNF受体GFR&1和Ret的PC12细胞中,观察它们的神经营养活性和毒性.运用脑微血管内皮细胞株B-Endo3,观察GDNF(’N39)-R9蛋白穿越血管内皮细胞膜的功能;运用脑血管内皮细胞和Matrigel铺板模拟血脑屏障,Transwell法检测Tat-GDNF((N39)蛋白穿越脑血管内皮细胞和外周胶质膜的能力.结果显示:GDNF()N39)-R9蛋白具有类似GDNF的神经营养活性,促进原代培养的中脑多巴胺能神经元和稳定表达GFR*1和Ret受体的PC12-GFR+1-Ret细胞株的存活,没有显示毒性,并且能很好地穿过脑微血管内皮细胞层和模拟的血脑屏障. 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子(GDNF) 融合蛋白 脑微血管内皮细胞(B-Endo 3) 蛋白质转运 血脑屏障
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沙苑子总黄酮对高血压大鼠的降压作用及血管紧张素含量的影响 被引量:27
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作者 李景新 薛冰 陈连璧 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期336-338,共3页
目的 研究沙苑子总黄酮对肾血管性高血压大鼠 (RHR)有无降压作用及可能机理。方法 应用二肾一夹法制作RHR模型 ,沙苑子总黄酮急性灌胃给药 ,尾袖法测量清醒RHR尾动脉收缩压 ,八导生理记录仪检测麻醉RHR血压及心率 ,放射免疫法检测RHR... 目的 研究沙苑子总黄酮对肾血管性高血压大鼠 (RHR)有无降压作用及可能机理。方法 应用二肾一夹法制作RHR模型 ,沙苑子总黄酮急性灌胃给药 ,尾袖法测量清醒RHR尾动脉收缩压 ,八导生理记录仪检测麻醉RHR血压及心率 ,放射免疫法检测RHR血浆血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量。结果 单次ig沙苑子总黄酮 10 0和 2 0 0mg·kg- 1,1h后清醒RHR血压显著降低 ,75min时分别下降了 8.5 %和10 .5 %;麻醉RHR在 4 5~ 6 0min时平均动脉压分别下降了 8.0 %和 14 .9%,与给药前或生理盐水对照组相比均有统计学显著性差异 ,2h时恢复至原来水平 ,心率无明显变化 ;单次ig后 30min ,AngⅡ含量分别下降了 2 2 %和 31%。结论 沙苑子总黄酮对RHR有明显降压作用 ,其机理可能与其降低AngⅡ水平有关。 展开更多
关键词 沙苑子总黄酮 沙苑子 肾血管性高血压 血管紧张素Ⅱ 药理学 血压
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大鼠淋巴滞留性脑病bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化 被引量:7
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作者 李育娴 夏作理 +3 位作者 陈连璧 叶文静 杨明峰 孙巧玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期102-106,共5页
目的:研究大鼠淋巴滞留性脑病模型中大脑皮层bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化。方法:用阻断颈部淋巴引流的方法复制大鼠淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,HE染色观察脑组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细... 目的:研究大鼠淋巴滞留性脑病模型中大脑皮层bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化。方法:用阻断颈部淋巴引流的方法复制大鼠淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,HE染色观察脑组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡,RT-PCR检测大脑皮层凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:显微镜下见脑组织有水肿的结构变化,第5d最明显。大脑皮层TUNEL阳性细胞数和bax表达从术后2d开始增多,5d达最高峰,14d降至对照组水平。bcl-2表达于术后1d开始增高,5d达最高值,第7d下降至对照组水平。bax表达增高的程度大于bcl-2。结论:阻断颈部淋巴引流可导致淋巴滞留性脑病,大脑皮层神经细胞死亡以凋亡为主并与bcl-2和bax的表达增加有关。 展开更多
关键词 脑病 淋巴滞留性 大鼠 颈部淋巴结切除 细胞凋亡 基因表达
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缺血预处理经抑制p53表达减轻缺血再灌后大鼠海马神经元损伤 被引量:4
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作者 刘慧敏 崔鹤 +3 位作者 刘亚君 许复郁 王志宏 陈连璧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期515-519,共5页
目的:观察缺血预处理能否对大鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡起拮抗作用,并探讨p53基因在其中的作用。方法:复制全脑缺血再灌注及缺血预处理模型,利用HE染色,流式细胞仪,RT-PCR和免疫组化方法检测海马CA1区锥体细胞形态学变化、神... 目的:观察缺血预处理能否对大鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡起拮抗作用,并探讨p53基因在其中的作用。方法:复制全脑缺血再灌注及缺血预处理模型,利用HE染色,流式细胞仪,RT-PCR和免疫组化方法检测海马CA1区锥体细胞形态学变化、神经元凋亡百分率及p53基因表达。结果:缺血预处理(IPC)组的神经元存活数目[(217±9)/0.72mm2]明显高于单纯缺血再灌注(IR)组[(29±5)/0.72mm2],P<0.01;IPC组的凋亡百分率(2.07%±0.21%)显著低于IR组(4.26%±0.08%),P<0.01;IPC组p53基因表达显著弱于IR组。结论:缺血预处理可通过抑制p53基因表达,从而抑制大鼠海马神经元凋亡,对缺血神经元起保护作用。 展开更多
关键词 大鼠 海马 缺血预处理 基因 p53 基因表达
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赭曲霉转化洋地黄毒苷的工艺优化和产物活性分析 被引量:4
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作者 骆健美 宋霆 +3 位作者 朱凤芝 申雁冰 李景新 王敏 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期398-403,共6页
以赭曲霉Rn405转化洋地黄毒苷的微生物转化工艺为研究对象,对助溶剂种类、底物浓度、金属离子种类和浓度等关键参数进行优化,确定的最优转化条件为:发酵培养基中添加1 mmol/L Mn2+离子,28℃,180 rpm振荡培养28 h时加入溶解于DMSO的底物... 以赭曲霉Rn405转化洋地黄毒苷的微生物转化工艺为研究对象,对助溶剂种类、底物浓度、金属离子种类和浓度等关键参数进行优化,确定的最优转化条件为:发酵培养基中添加1 mmol/L Mn2+离子,28℃,180 rpm振荡培养28 h时加入溶解于DMSO的底物溶液,使其终浓度为100 mg/L,然后在相同的条件下转化96 h。此时,底物的转化率和11α-羟基洋地黄毒苷元的生成率分别达到了100%和25.4%,比优化前分别提高了33.1%和14.5%。通过斯氏灌流法和Langendorff灌流法,探讨两个转化产物对蟾蜍和大鼠心肌细胞收缩能力的影响。结果表明,洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响和底物洋地黄毒苷相当,而11α-羟基洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响比底物洋地黄毒苷和洋地黄毒苷元均有所增强。 展开更多
关键词 赭曲霉 洋地黄毒苷 微生物转化 工艺优化 活性分析
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脑淋巴引流阻滞对缺血大鼠脑组织谷氨酸、Ca^(2+)含量和NMDAR1表达的影响 被引量:1
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作者 司金超 范天黎 +1 位作者 夏作理 许予明 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期384-390,共7页
目的:探讨脑梗塞后给予大鼠颈淋巴管阻塞对缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)表达水平等的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,以及行大鼠大脑中动脉阻塞15mi... 目的:探讨脑梗塞后给予大鼠颈淋巴管阻塞对缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)表达水平等的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,以及行大鼠大脑中动脉阻塞15min后摘除双侧颌下腺的颈浅和颈深淋巴结,制成脑梗塞后颈淋巴管阻塞(MCAO+CLB)模型,检测缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及NMDAR1mRNA表达水平和免疫活性的变化。结果:在不同的时间点,MCAO+CLB组大鼠上述各指标要比MCAO组明显升高(P<0.05)。结论:颈淋巴管阻塞通过提高脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及上调NMDAR1表达水平而加重脑梗塞。 展开更多
关键词 大脑中动脉阻塞 颈淋巴管阻塞 CA2+ 谷氨酸 N-甲基D-天冬氨酸受体1 大鼠
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链脲佐菌素诱发的大鼠糖尿病对cAMP介导的小冠状动脉舒张的影响 被引量:1
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作者 柴强 刘志向 陈连璧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1066-1070,共5页
目的:观察链脲佐菌素(streptozotoxin)诱发的大鼠糖尿病(STZ大鼠)对cAMP介导的小冠状动脉舒张的影响。方法:Wistar大鼠尾静脉注射streptozotoxin造模。应用视频显微测量技术(videomicroscopymeasurement)活体观察小冠状动脉的舒张。结果... 目的:观察链脲佐菌素(streptozotoxin)诱发的大鼠糖尿病(STZ大鼠)对cAMP介导的小冠状动脉舒张的影响。方法:Wistar大鼠尾静脉注射streptozotoxin造模。应用视频显微测量技术(videomicroscopymeasurement)活体观察小冠状动脉的舒张。结果:(1)STZ诱发的大鼠糖尿病对经cAMP信号系统起作用的isoproterenol(ISO)引起的剂量依赖性舒张产生减弱,且与血管内皮无关。(2)STZ诱发的糖尿病大鼠的小冠状动脉对腺苷酸环化酶激活剂forskolin引起的舒张减弱,而腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536可使舒张进一步减弱。(3)血管平滑肌细胞特异性电压依赖性钾通道阻断剂4-aminopyridine使STZ大鼠ISO和forskolin引起的舒张被阻断。(4)G蛋白刺激剂NaF使STZ大鼠小冠状动脉产生的舒张减弱,明显被抑制。结论:STZ诱发的大鼠糖尿病可以抑制cAMP信号系统介导的非内皮依赖性的小冠状动脉的舒张,此种作用是通过抑制平滑肌细胞电压依赖性钾通道的作用实现并受G蛋白影响。 展开更多
关键词 糖尿病 冠状动脉 环AMP 钾通道 CTP结合蛋白质类
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