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RNA干扰靶向沉默诱骗受体3基因增加人胰腺癌细胞的放射敏感性 被引量:5
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作者 肖华平 李庆 +2 位作者 谢辉 罗春阳 方玉江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期833-837,共5页
目的:探讨RNA干扰沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其相关机制。方法:构建带有DcR3 siRNA序列的稳定表达质粒,通过脂质体转染至胰腺癌AsPC-1细胞株,设对照组、siRNA(-)阴性对照组和DcR3 siRNA组... 目的:探讨RNA干扰沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其相关机制。方法:构建带有DcR3 siRNA序列的稳定表达质粒,通过脂质体转染至胰腺癌AsPC-1细胞株,设对照组、siRNA(-)阴性对照组和DcR3 siRNA组,应用Western blotting检测AsPC-1细胞中DcR3表达的变化,平板克隆形成实验检测转染DcR3 siRNA后AsPC-1细胞放射敏感性的变化,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blotting检测Caspase-8、Caspase-3和PARP-1表达的变化。结果:DcR3 siRNA组细胞中DcR3蛋白表达水平较对照或siRNA(-)组明显降低(均P<0.01);DcR3 siRNA组的克隆形成率明显低于对照或siRNA(-)组,其存活分数(survival fraction,SF)降低、α/β比值升高(均P<0.01);放射后DcR3 siRNA组肿瘤细胞凋亡率明显高于对照或siRNA(-)组(均P<0.01);转染DcR3 siRNA后可以明显上调Caspase-8、Caspase-3的表达和下调PARP-1的表达。结论:RNA干扰沉默DcR3基因通过激活凋亡因子Caspase-8和Caspase-3促进细胞凋亡,从而增加胰腺癌细胞对放射的敏感性。 展开更多
关键词 胰腺癌 AsPC-1细胞 诱骗受体3基因 RNA干扰 放射敏感性
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RNA干扰沉默DcR3对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性影响的实验研究 被引量:1
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作者 肖华平 谢辉 +2 位作者 罗春阳 李庆 方玉江 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期873-878,共6页
背景与目的:大部分胰腺癌具有高表达诱骗受体-3(decoy receptor 3,Dc R3)的特征,而后者与Fas L凋亡途径相关,可能导致胰腺癌对化疗耐药。该研究旨在探讨RNA干扰沉默Dc R3基因对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法:构... 背景与目的:大部分胰腺癌具有高表达诱骗受体-3(decoy receptor 3,Dc R3)的特征,而后者与Fas L凋亡途径相关,可能导致胰腺癌对化疗耐药。该研究旨在探讨RNA干扰沉默Dc R3基因对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法:构建带有Dc R3-si RNA序列的稳定表达质粒,通过LipofectamineTM2000转染至人胰腺癌细胞As PC-1细胞株,筛选出转染后稳定低表达Dc R3的胰腺癌细胞,同时设未转染对照组(control组)和转染阴性质粒对照组(mock组)。应用ELISA和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测各组As PC-1细胞中Dc R3的蛋白表达;MTT实验检测各组As PC-1细胞对吉西他滨的敏感性;流式细胞术检测各组As PC-1细胞凋亡情况;Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测各组As PC-1细胞中Fas L、Caspase-8、Caspase-3蛋白和m RNA的表达。结果:转染Dc R3-si RNA后As PC-1细胞中Dc R3蛋白较其他对照组明显降低;转染Dc R3-si RNA后As PC-1细胞对吉西他滨的敏感性显著增加;沉默Dc R3基因可以上调Fas L、Caspase-8和Caspase-3的表达并促进吉西他滨诱导的细胞凋亡。结论:RNA干扰沉默Dc R3基因可激活Fas L/Caspase凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,增加人胰腺癌As PC-1细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 诱骗受体-3 RNA干扰 胰腺癌 凋亡 化疗敏感性
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