天然药物化学实验教学模式的改革探索 被引量：8

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作者 陆维丽 彭磊 程文明 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期100-102,共3页

天然药物化学是药学专业一门重要的必修课程。其实验课以培养学生的综合实验技能,提高学生的创新能力为主。针对天然药物化学实验教学中存在的问题,对其实验教学内容和方法作出相应的改革,以提高教学效果和质量。

关键词 天然药物化学 实验教学 教学改革

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泽漆化学成分研究 被引量：12

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作者 赵杰 吴繁荣 +3 位作者 韩续 李宁 葛金芳 陈飞虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第3期383-388,共6页

目的研究大戟属植物泽漆的化学成分,并对分离得到的单体化合物进行初步抗银屑病活性筛选。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基键和硅胶及重结晶等方法进行分离纯化,并通过波谱学技术进行结构鉴定。应用CCK-8法体外检... 目的研究大戟属植物泽漆的化学成分,并对分离得到的单体化合物进行初步抗银屑病活性筛选。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基键和硅胶及重结晶等方法进行分离纯化,并通过波谱学技术进行结构鉴定。应用CCK-8法体外检测单体化合物对人角质形成细胞(HaCaT)的抑制作用,ELISA法检测单体化合物的抗炎活性。结果从石油醚部位和氯仿部位分离纯化得到12个化合物,分别为正三十一烷醇(1)、β-谷甾醇(2)、金色酰胺醇脂(3)、槲皮素(4)、5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮(5)、山奈酚香豆酰基葡萄吡喃糖苷(6)、柚皮素(7)、异嗪皮啶(8)、松脂素(9)、14α,15β-二乙酰氧基-3α,7β-二苯甲酰基-9-氧代-2β,13α-麻风树-5E,11E-二烯(10)、euphoscopin B(11),大戟苷Ⅰ(12)。结论其中5,6,8,9为首次从大戟属中分离得到。化合物4,9,11能较好的抑制HaCaT细胞增殖,同时所有单体化合物对肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激的HaCaT细胞分泌白介素1(IL-1)无显著性改变,但化合物4,5,12能在一定程度上减少IL-6的分泌。 展开更多

关键词 泽漆 化学成分 结构鉴定 角质形成细胞HaCaT

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栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运研究 被引量：8

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作者 韩静文 李俊 +2 位作者 黄成 陈昭琳 胡婷婷 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期468-472,共5页

目的考察栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运特性。方法利用MTT实验筛选出栀子苷和栀子柏皮汤在MDCK细胞上的安全浓度,以MDCK细胞跨膜转运模型研究药物的双向转运,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂及E... 目的考察栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运特性。方法利用MTT实验筛选出栀子苷和栀子柏皮汤在MDCK细胞上的安全浓度,以MDCK细胞跨膜转运模型研究药物的双向转运,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂及EDTA对栀子苷转运的影响,然后比较相同浓度的栀子苷和栀子柏皮汤中栀子苷吸收转运的差异,采用HPLC法检测栀子苷的浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果栀子苷在MDCK细胞模型上的转运量具有一定的时间和浓度依赖性,P-gp抑制剂对其转运没有明显影响,EDTA能够增加其跨膜转运量,各浓度栀子柏皮汤中栀子苷的吸收Papp分别为(8.96±0.35)×10-7cm·s-1,(8.95±0.38)×10-7cm·s-1和(9.16±0.30)×10-7cm·s-1、明显高于栀子苷单体的吸收Papp(5.85±0.44)×10-7cm·s-1、(6.88±0.38)×10-7cm·s-1和(6.31±0.19)×10-7cm·s-1(P<0.05)。结论栀子苷在MDCK细胞模型上表现为被动扩散,且不受P-gp的影响,可能有细胞旁路转运,栀子柏皮汤能促进栀子苷的吸收。 展开更多

关键词 栀子苷 栀子柏皮汤 跨膜转运 被动转运

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老鹰茶的化学成分研究 被引量：7

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作者 王静 陆维丽 +3 位作者 张义龙 唐敏芳 汤文建 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第4期479-483,共5页

目的研究老鹰茶的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及制备型HPLC等色谱方法分离化合物，利用NMR、MS波谱学方法鉴定其结构。结果从老鹰茶70％乙醇回流提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到9个化合物，分别鉴定为儿茶素... 目的研究老鹰茶的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及制备型HPLC等色谱方法分离化合物，利用NMR、MS波谱学方法鉴定其结构。结果从老鹰茶70％乙醇回流提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到9个化合物，分别鉴定为儿茶素（1）、表儿茶素（2）、菜豆酸（3）、山奈酚-3—O—β-D-芸香糖苷（4）、松属素-7-O—β-D-葡萄糖苷（5）、香树素-3—O-β—L-阿拉伯糖苷（6）、2，4，6-三羟基苯丁酮-2-O-β-D-葡萄糖苷（7）、腺苷（8）、（＋）-异落叶松脂醇-9—O—β-D-葡萄糖苷（9）。结论化合物3～9为首次从樟科木姜子属植物中分离得到，1、2为首次从该植物中分离得到。 展开更多

关键词 老鹰茶 乙酸乙酯 正丁醇 结构鉴定

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鬼针草总黄酮部分化学成分研究 被引量：6

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作者 邓子云 陈飞虎 +6 位作者 李宁 高文凡 赵杰 韩续 雷静 葛金芳 李晓祥 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第10期1456-1459,1463,共5页

目的对鬼针草中的化学成分进行分离纯化,并筛选出具有抗肝纤维化活性的单体化合物。方法采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基硅烷键合硅胶柱等柱层析的方法进行分离纯化,并利用波谱技术进行化合物的鉴定。应用... 目的对鬼针草中的化学成分进行分离纯化,并筛选出具有抗肝纤维化活性的单体化合物。方法采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基硅烷键合硅胶柱等柱层析的方法进行分离纯化,并利用波谱技术进行化合物的鉴定。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测单体化合物对肝星状细胞T6(HSC-T6)的抑制作用。结果从鬼针草中分离鉴定的化合物为3-羟基乙酰基吲哚(1)、山奈酚(2)、6,7,3',4'-四羟基橙酮(3)、槲皮素(4)、奥卡宁(5)、松脂素(6)、1,2,13-三羟基-3,11(E)-十三二烯-5,7,9-三炔(7)、异奥卡宁(8)、邻苯二甲酸-双(2'-乙基庚基)酯(9)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10)、(2S/2R)-异奥卡宁-7-O-β-D-(2″,4″,6″-三乙酰基)吡喃葡糖苷(11/12)、2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-1,13-二羟基-3,11(E)十三二烯-5,7,9-三炔(13)。结论化合物6,9为首次从鬼针草种属中分离得到。其中黄酮类化合物2,4具有较强的体外抑制HSC-T6细胞的增殖作用。 展开更多

关键词 鬼针草 化学成分 结构鉴定 肝星状细胞T6

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8-异丙胺亚甲基橙皮素(IPHP)在Caco-2细胞模型上跨膜转运的研究 被引量：3

6

作者 胡婷婷 黄成 +3 位作者 孟晓明 陈昭琳 沈陈林 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期769-774,共6页

目的利用Caco-2细胞模型研究8-异丙胺亚甲基橙皮素(IPHP)在小肠吸收转运的机制。方法在Caco-2细胞模型上进行IPHP的跨膜转运实验,探讨药物浓度、p H、温度、P-gp抑制剂维拉帕米、MRP2抑制剂MK-571和丙磺舒对IPHP在体外细胞模型上跨膜转... 目的利用Caco-2细胞模型研究8-异丙胺亚甲基橙皮素(IPHP)在小肠吸收转运的机制。方法在Caco-2细胞模型上进行IPHP的跨膜转运实验,探讨药物浓度、p H、温度、P-gp抑制剂维拉帕米、MRP2抑制剂MK-571和丙磺舒对IPHP在体外细胞模型上跨膜转运的影响。结果 IPHP在Caco-2细胞模型上的转运具有一定的浓度依赖性,IPHP不同浓度从A侧到B侧的渗透系数Papp(AP-BL)(×10-5)分别为:(2.21±0.200)、(3.56±0.306)、(3.81±0.179)、(4.23±0.229)、(4.17±0.262)cm·s-1,B侧到A侧的渗透系数Papp(BL-AP)(×10-5)分别为:(3.57±0.209)、(4.51±0.113)、(4.97±0.229)、(5.24±0.550)、(5.07±0.557)cm·s-1,外排率分别为:1.61、1.26、1.3、1.23、1.21。温度和p H对其转运均有影响,而P-gp抑制剂对于IPHP的转运没有明显的影响,MRP2抑制剂在一定程度上增加了IPHP的转运量(P<0.05)。结论 IPHP在Caco-2细胞模型上的转运方式主要是被动扩散,且其转运不受P-gp外排蛋白影响,而外排蛋白MRP2可能参与了IPHP的外排转运。 展开更多

关键词 IPHP CACO-2细胞 吸收 外排 渗透系数 被动扩散 高效液相色谱

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SOCS3对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化进展和逆转的影响及机制研究 被引量：11

7

作者 夏家露 严醒 +2 位作者 刘亚如 黄成 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1215-1221,共7页

目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白-3(suppressor of cytokine signaling3,SOCS3)对肝纤维化进展和逆转过程的影响。方法皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)建立C57BL/6小鼠肝纤维化模型,纤维化模型成功后正常饮食喂养1个月... 目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白-3(suppressor of cytokine signaling3,SOCS3)对肝纤维化进展和逆转过程的影响。方法皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)建立C57BL/6小鼠肝纤维化模型,纤维化模型成功后正常饮食喂养1个月为纤维化逆转模型,以同体重、同性别的正常小鼠为对照组。分别在1、2、3、4、5、6、7、8周后处死小鼠,取肝组织,HE染色观察肝组织损伤情况,Masson染色观察胶原变化,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Colla-1)、α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)和SOCS3蛋白表达。体外用TGF-β1刺激HSC-T6细胞株形成纤维化体外模型,MDI培养基逆转纤维化过程,SOCS3过表达质粒作用于逆转过程,Western blot方法检测SOCS3、Colla-1、α-SMA、TGF-β1表达情况。结果 SOCS3和TGF-β1在小鼠纤维化模型中随着纤维化加重而表达增加,逆转过程中减少,过表达逆转过程,纤维化指标降低,有利于逆转的进行,TGF-β1表达也相应降低。结论SOCS3可能通过调控TGF-β1的表达参与肝脏纤维化的形成和逆转过程。 展开更多

关键词 SOCS3 肝脏纤维化 肝脏纤维化逆转 TGF-β1 HSC-T6 MDI

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茵陈中6,7-二甲氧基香豆素在MDCK模型中的吸收机制研究 被引量：5

8

作者 李杨杨 黄成 +3 位作者 孟晓明 陈昭琳 马陶陶 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第7期973-977,共5页

目的基于马丁达比犬的肾近曲小管上皮(MDCK)细胞模型研究茵陈中6,7-二甲氧基香豆素的吸收机制。方法考察时间、药物浓度(12.5、25、50、100、200μmol/L)、温度(4、37℃)和抑制剂(碘乙酰胺、维拉帕米、MK571)对6,7-二甲氧基香豆素吸收... 目的基于马丁达比犬的肾近曲小管上皮(MDCK)细胞模型研究茵陈中6,7-二甲氧基香豆素的吸收机制。方法考察时间、药物浓度(12.5、25、50、100、200μmol/L)、温度(4、37℃)和抑制剂(碘乙酰胺、维拉帕米、MK571)对6,7-二甲氧基香豆素吸收和转运的影响。采用高效液相色谱法(HPLC)检测6,7-二甲氧基香豆素的浓度,计算出表观渗透系数(Papp),并分析其吸收机制。结果根据Papp得出6,7-二甲氧基香豆素在MDCK细胞模型上的转运量呈时间和浓度依赖性且不同浓度下的Papp(B-A)/Papp(A-B)≈1,4、37℃和加入抑制剂碘乙酰胺后,6,7-二甲氧基香豆素的吸收Papp(A-B)之间差异无统计学意义,37℃和加入外排蛋白抑制剂维拉帕米、MK571后,6,7-二甲氧基香豆素的外排Papp(B-A)之间差异无统计学意义。结论 6,7-二甲氧基香豆素在MDCK细胞模型上表现为浓度依赖的单纯扩散。 展开更多

关键词 MDCK 6 7-二甲氧基香豆素 HPLC 单纯扩散

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四氯化碳诱导大鼠肝纤维化进展期和恢复期模型的建立 被引量：23

9

作者 张磊 李俊 +2 位作者 朱鹏里 黄成 吕雄文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1757-1760,共4页

目的确定肝纤维化进展期和恢复期。方法采用50%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)皮下注射建立大鼠肝纤维化和自然恢复模型。检测血清中丙氨酸氨基转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(as-partate aminotransf... 目的确定肝纤维化进展期和恢复期。方法采用50%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)皮下注射建立大鼠肝纤维化和自然恢复模型。检测血清中丙氨酸氨基转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(as-partate aminotransferase,AST)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅳ-C型胶原(collagenⅣ,Ⅳ-C)和Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)含量及肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)水平;HE染色和Masson胶原染色观察肝脏病理组织学改变。结果 CCl4注射8周,大鼠肝组织己出现慢性肝炎的病理变化,注射12～16周出现了典型的从肝纤维化—肝硬化的病理改变,同时大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、Ⅳ-C和PCⅢ含量及肝组织Hyp水平逐渐上升。而随着恢复期的延长,血清中ALT、AST、HA、LN、Ⅳ-C和PCⅢ含量及肝组织Hyp水平逐渐下降。结论成功建立CCl4诱导的大鼠自愈性肝纤维化模型,并确定进展期和恢复期。 展开更多

关键词 肝纤维化 进展 恢复 四氯化碳 大鼠 模型

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肝纤维化病程中Kupffer细胞分泌的细胞因子对肝星状细胞活化增殖、凋亡的调控 被引量：82

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作者 黄艳 黄成 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期9-13,共5页

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化... 肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化的进程是抗肝纤维化研究的重点之一。在肝纤维化病程中,一系列细胞因子通过旁分泌和自分泌方式作用于邻近的HSC,影响其增殖、趋化、代谢及凋亡。鉴于Kupffers细胞为细胞因子的主要来源,其在肝纤维化病程中对HSC细胞的活化增殖、凋亡发挥着重要的调控作用。HSC、Kupffers细胞及细胞因子与肝纤维化的发生发展关系极为密切,阐明其关系,有助于以HSC为靶点的肝纤维化方面的研究,现就其关系综述如下。 展开更多

关键词 肝星状细胞 枯否细胞 细胞因子 肝纤维化 增殖 凋亡

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玉屏风多糖对佐剂性关节炎大鼠T细胞亚群的影响 被引量：12

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作者 陈莹瑛 李俊 +2 位作者 施磊 王佳佳 黄艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期588-592,共5页

目的观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharide,YPF-P)对佐剂性关节炎大鼠T细胞亚群的影响。方法采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠AA模型。足容积法测量继发侧足肿胀度;MTT法检测刀豆蛋白(ConA)诱导的外周血淋巴细胞增殖反应;流式细胞仪... 目的观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharide,YPF-P)对佐剂性关节炎大鼠T细胞亚群的影响。方法采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠AA模型。足容积法测量继发侧足肿胀度;MTT法检测刀豆蛋白(ConA)诱导的外周血淋巴细胞增殖反应;流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4+和CD8+T细胞的变化;ELISA法检测大鼠外周血中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)含量;放免法检测大鼠外周血中IL-4含量;RT-PCR法检测淋巴细胞IFN-γmRNA的表达。结果80、160mg.kg-1YPF-P给药能明显减轻关节肿胀度,不同程度地改善AA大鼠低下的外周血淋巴细胞增殖反应,明显降低CD4+/CD8+的相对比值。此外,80、160mg.kg-1YPF-P给药也能明显降低外周血IFN-γ含量和轻度提高IL-4含量,并能抑制IFN-γmRNA的表达。结论YPF-P能改善模型大鼠外周血T细胞亚群,纠正佐剂性关节炎模型大鼠Th1/Th2平衡的Th1偏移,这可能是减轻足肿胀的原因之一。 展开更多

关键词 玉屏风多糖 佐剂性关节炎 T细胞亚群 IFN-Γ IL-4 RT-PCR

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5, 7, 3′-三乙酰橙皮素对AA大鼠成纤维样滑膜细胞Jak2/Stat3信号通路及凋亡相关蛋白的影响 被引量：9

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作者 任丹阳 徐涛 +5 位作者 黄成 李荣 王亚丽 于明哲 黄艳 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1063-1068,共6页

目的研究5,7,3'-三乙酰橙皮素(5,7,3'-triacetylhesperetin,TAHP)对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)Jak2/Stat3信号通路及凋亡相关蛋白的影响。方法用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型;MTT法检测FLS的增殖反应;Hoechst 33258... 目的研究5,7,3'-三乙酰橙皮素(5,7,3'-triacetylhesperetin,TAHP)对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)Jak2/Stat3信号通路及凋亡相关蛋白的影响。方法用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型;MTT法检测FLS的增殖反应;Hoechst 33258染色法检测FLS的凋亡;RT-PCR法检测FLS中Jak2、Stat3、Bcl-2、Bax及Caspase-3的基因表达;Western blot法检测FLS中p-Stat3及Caspase-3的蛋白表达情况。结果 TAHP呈剂量和时间依赖性抑制FLS的增殖(P<0.05);Hoechst 33258染色结果提示TAHP可以明显地促进FLS的凋亡;同时TAHP(50,250μmol·L-1)可以明显降低Jak2、Stat3及Bcl-2表达,而上调Bax及Caspase-3表达。Western blot结果显示,TAHP可降低p-Stat3的表达、上调Caspase-3表达。结论 TAHP可以抑制FLS增殖,其作用机制可能与抑制FLS Jak2/Stat3信号通路、促进Bax及Caspase-3表达、抑制Bcl-2的表达有关。 展开更多

关键词 5 7 3′三乙酰橙皮素 佐剂性关节炎 JAK2/STAT3 成纤维样滑膜细胞 细胞凋亡 CASPASE3

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枇杷叶三萜酸对TGF-β_1刺激的人胚肺成纤维细胞转分化及ERK通路的影响 被引量：11

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作者 杨雅茹 黄艳 +5 位作者 李俊 吕雄文 金涌 熊自忠 张磊 刘红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期341-346,共6页

目的研究枇杷叶三萜酸(Triterpene acids of loquat,TAL)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞转分化、胶原合成及ERK通路的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ),MTT比色法测定TAL对HFL-Ⅰ细胞的增殖抑制率。RT-PCR... 目的研究枇杷叶三萜酸(Triterpene acids of loquat,TAL)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞转分化、胶原合成及ERK通路的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ),MTT比色法测定TAL对HFL-Ⅰ细胞的增殖抑制率。RT-PCR检测每组中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(CⅠ)、Ⅲ型胶原(CⅢ)mRNA的水平,Western blot检测各组细胞中p-ERK1/2和ERK1/2表达水平。结果 TAL呈剂量和时间依赖性抑制HFL-Ⅰ细胞的增殖(P<0.05),并能够降低CⅠ、CⅢ、α-SMA、CTGF的过度表达(P<0.05);Western blot结果显示TAL能降低TGF-β1刺激组p-ERK1/2的表达,而对ERK1/2的表达没有差异。结论 TAL能抑制HFL-Ⅰ的增殖,同时也能使活化后HFL-Ⅰ中的α-SMA生成减少,CTGF、胶原和p-ERK1/2表达降低。 展开更多

关键词 枇杷叶三萜酸 TGF-β1 肺纤维化 人胚肺成纤维细胞 ERK CTGF

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豹皮樟总黄酮体外对酒精性脂肪肝大鼠肝细胞脂肪变性的影响 被引量：7

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作者 胡成穆 曹琦 +3 位作者 解雪峰 刘洪峰 丁琦 李俊 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期193-199,共7页

目的探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对酒精性脂肪肝(AFL)大鼠肝细胞脂肪变性的影响。方法大鼠自由饮用含乙醇饮料,起始浓度为5%,依次增加为10%,15%,20%,25%,30%和35%,每个浓度持续1周,第8周～第12周浓度为40%的方法制备大鼠AFL模型,原位二步灌... 目的探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对酒精性脂肪肝(AFL)大鼠肝细胞脂肪变性的影响。方法大鼠自由饮用含乙醇饮料,起始浓度为5%,依次增加为10%,15%,20%,25%,30%和35%,每个浓度持续1周,第8周～第12周浓度为40%的方法制备大鼠AFL模型,原位二步灌流法分离AFL大鼠肝细胞,用细胞角蛋白18(CK18)抗体进行肝细胞鉴定。肝细胞培养16 h后加入TFLC 1,10和100 mg.L-1或谷胱甘肽(GSH)10 mmo.lL-1孵育48 h。MTT法测定肝细胞存活,用试剂盒方法检测肝细胞丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性以及肝细胞内甘油三酯(TG)含量,免疫组化和逆转录PCR方法测定脂肪分化相关蛋白(ADRP)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA和蛋白表达的变化。结果 TFLC对正常大鼠肝细胞存活无明显影响。TFLC 100 mg.L-1明显增加AFL大鼠肝细胞存活(P<0.05)。AFL大鼠肝细胞培养液ALT和AST活性分别为(63±12)和(74±19)U.L-1,TFLC 10和100 mg.L-1分别将ALT活性降低到(42±12)和(44±8)U.L-1(P<0.05),将AST活性降低到(46±14)和(47±8)U.L-1(P<0.05)。AFL大鼠肝细胞内TG含量为(2.3±0.6)mmol.L-1,TFLC 10和100 mg.L-1分别将AFL肝细胞内TG含量降低到(1.4±0.3)和(1.5±0.5)mmo.lL-1(P<0.05)。AFL肝细胞ADRP和PPARγ阳性表达细胞分别为(41±6)%和(37±10)%,TFLC 100 mg.L-1治疗组ADRP和PPARγ阳性表达细胞分别降低为(26±6)%(P<0.01)和(25±5)%(P<0.05)。结论 TFLC可能通过改善肝细胞活性、减少肝细胞内TG生成、抑制ADRP表达及调控肝细胞PPARγ的表达,从而改善AFL大鼠肝细胞的脂肪变性。 展开更多

关键词 脂肪肝 酒精性 豹皮樟总黄酮 肝细胞 脂肪分化相关蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ

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橙皮苷对刀豆蛋白A致小鼠免疫性肝损伤的保护作用 被引量：20

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作者 李晓冬 李俊 +3 位作者 李荣 黄艳 吴芙蓉 陶辉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期350-353,共4页

目的研究橙皮苷(HDN)对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用尾静脉一次性注射给予一定剂量的ConA(20mg/kg),造成急性肝损伤模型,造模8h后采血,并处死动物,剖腹取肝,制备肝匀浆。测定不同剂量的橙皮苷对肝损伤谷丙转氨酶(ALT)、谷草转... 目的研究橙皮苷(HDN)对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用尾静脉一次性注射给予一定剂量的ConA(20mg/kg),造成急性肝损伤模型,造模8h后采血,并处死动物,剖腹取肝,制备肝匀浆。测定不同剂量的橙皮苷对肝损伤谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量、肝匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响;同时对肝组织进行病理学检查。结果 HDN能降低小鼠免疫性肝损伤血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ和IL-1的水平,降低肝匀浆中MDA、NO的含量,升高GSH的含量增强SOD的活性,减轻ConA对肝组织的病理损伤。结论 HDN对ConA致小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与他清除自由基,增强机体抗脂质过氧化能力及降低IL-1、TNF-α和IFN-γ等炎性细胞因子的表达有关。 展开更多

关键词 肝疾病/病理学 橙皮苷/药理学 伴刀豆球蛋白A

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橙皮苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用及部分机制 被引量：9

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作者 熊立 李俊 +3 位作者 王雯 楼蓉 凡小燕 黄艳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第10期1013-1017,共5页

目的研究橙皮苷(HDN)对胶原性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及部分机制。方法用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)联合氟氏完全佐剂(FCA)诱导CIA大鼠模型;采用足爪肿胀及病理组织学变化等指标观察HDN(80、160、320 mg/kg)对CIA大鼠的影响;ELISA法测定外周血... 目的研究橙皮苷(HDN)对胶原性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及部分机制。方法用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)联合氟氏完全佐剂(FCA)诱导CIA大鼠模型;采用足爪肿胀及病理组织学变化等指标观察HDN(80、160、320 mg/kg)对CIA大鼠的影响;ELISA法测定外周血清白介素17(IL-17)水平;体外用药(HDN 10-6、10-5、10-4 mol/L),MTT法检测刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖反应;无菌取腹腔巨噬细胞(PMФ),体外用药HDN(10-6、10-5、10-4 mol/L),中性红法测定CIA大鼠PMΦ的吞噬功能;ELISA法测定PMФ产生白介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 HDN(80、160、320 mg/kg)ig给药能抑制关节肿胀,改善膝关节病理损伤,降低CIA大鼠外周血IL-17的水平。体外实验能使CIA大鼠升高的ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应不同程度下降;抑制CIA大鼠PMФ过高的吞噬功能;下调升高的PMФIL-1和TNF-α水平。结论 HDN对CIA大鼠继发性炎症具有治疗作用,其作用机制可能与调节机体异常的免疫功能,抑制促炎因子分泌有关。 展开更多

关键词 橙皮苷/药理学 关节炎 免疫调节

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毛细管电泳法检测野菊花中的黄酮类化合物 被引量：5

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作者 吴婷妮 李俊 +2 位作者 余长柱 黄艳 马云鹏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第6期734-737,共4页

建立野菊干燥头状花序中9种黄酮类化合物的毛细管电泳分析方法。通过优选检测波长、pH值、缓冲溶液浓度和进样时间等确定分离检测条件,通过精密度实验、回收率实验验证方法的重复性、准确性。该方法简便、重复性好、准确,是野菊花黄酮... 建立野菊干燥头状花序中9种黄酮类化合物的毛细管电泳分析方法。通过优选检测波长、pH值、缓冲溶液浓度和进样时间等确定分离检测条件,通过精密度实验、回收率实验验证方法的重复性、准确性。该方法简便、重复性好、准确,是野菊花黄酮类化合物定量测定中的一种可靠方法,能够为野菊花药材和制剂的质量控制提供依据。 展开更多

关键词 毛细管电泳 黄酮分析 野菊花

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栀子苷对PDGF诱导的HSC-T6增殖活化的影响 被引量：2

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作者 孔令娜 占书箱 +3 位作者 黄成 马陶陶 林翔 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期481-485,共5页

目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀... 目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀子苷,PDGF刺激后,采用MTT、实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测细胞增殖和细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;进一步采用Western blot法检测栀子苷对MAPK通路蛋白P-ERK、P-p38和Akt/mT OR/p70S6K通路蛋白的表达。结果栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖和减少活化标志物α-SMA的表达,并且明显抑制Akt、mT OR和p70S6K的磷酸化水平,但是对ERK、p38活化水平无显著影响。结论栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖与活化,可能起到抗纤维化的作用,这一作用的产生可能与Akt/mT OR/p70S6K通路有关。 展开更多

关键词 栀子苷 HSC—T6 肝纤维化 Akt/mTOR/p70S6K

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高效液相色谱-质谱法同时测定玉屏风汤中的3种主要成分 被引量：4

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作者 郑世瑞 李俊 宋珏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期598-600,共3页

目的建立同时测定玉屏风汤中黄芪甲苷、白术内酯-Ⅰ和升麻苷含量的高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)。方法采用Hedera ODS-2(2.0 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇∶水(68∶32),流速为0.2 ml/min;电喷雾电离(ESI+),选择性离子监测(... 目的建立同时测定玉屏风汤中黄芪甲苷、白术内酯-Ⅰ和升麻苷含量的高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)。方法采用Hedera ODS-2(2.0 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇∶水(68∶32),流速为0.2 ml/min;电喷雾电离(ESI+),选择性离子监测(SIM)质荷比为807.50、287.05、469.05的离子对,内标为替米沙坦。结果 3种成分含量的线性范围和相关系数分别为:黄芪甲苷0.015 62～0.5μg/ml(r=0.999 7),白术内酯-Ⅰ0.005 859～0.187 5μg/ml(r=0.999 7),升麻苷0.031 25～8μg/ml(r=0.996 5)。平均回收率分别为:95.47%、101.94%和103.70%,RSD分别为:2.47%、2.20%和1.64%。结论本研究建立的HPLC-MS法方便、快捷、稳定,可同时测定玉屏风汤中3种主要成分的含量,结果准确可靠,可为玉屏风汤体内药动学研究提供依据。 展开更多

关键词 玉屏风散/化学

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蜂毒素全氟碳纳米囊的制备及评价

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作者 代坤坤 李俊 +1 位作者 赵斌 秦娣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第9期909-912,共4页

目的制备蜂毒素全氟碳纳米囊,考察其外观特征、粒径、Zeta电位、电镜形态、包封率及稳定性。方法以全氟碳为纳米核心,通过高压均质法制备蜂毒素纳米囊。采用透射电镜和激光粒度分析仪检测纳米颗粒形态、粒径及Zeta电位,双波长考马斯亮... 目的制备蜂毒素全氟碳纳米囊,考察其外观特征、粒径、Zeta电位、电镜形态、包封率及稳定性。方法以全氟碳为纳米核心,通过高压均质法制备蜂毒素纳米囊。采用透射电镜和激光粒度分析仪检测纳米颗粒形态、粒径及Zeta电位,双波长考马斯亮蓝法测定纳米颗粒载药包封率。将制备的蜂毒素全氟碳纳米囊乳液置于4℃下密封贮藏30 d,以纳米囊的粒径和包封率的变化作为指标,考察其稳定性。结果蜂毒素全氟碳纳米囊的平均粒径为84.41 nm,多分散系数为0.115,Zeta电位为-52.1 mV。采用双波长考马斯亮蓝法测定蜂毒素全氟碳纳米囊包封率,在吸收度及线性均良好的情况下,考马斯亮蓝法检测游离蜂毒素含量的检测范围为0.5～25 mg/L,该范围内线性良好,相关系数为0.9993,蜂毒素药物的包封率为(86.31±0.76)%(n=3),RSD<1%,稳定性良好。结论采用高压均质法制备蜂毒素全氟碳纳米囊的方法可行,经粒径、形态、包封率方面的考察,结果良好。 展开更多

关键词 蜂毒肽 纳米囊

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