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类风湿性关节炎血管增生的机制研究进展 被引量:19
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作者 章敏 高梅 +2 位作者 陈镜宇 宋礼华 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期649-652,共4页
血管增生是指在原先已有的血管基础上形成新的微血管,广泛存在于一些肿瘤及自身免疫性疾病中。在类风湿关节炎中,滑膜组织新生血管致血管翳的形成是其重要表现,关节内巨噬细胞、滑膜成纤维细胞及内皮细胞分泌血管内皮生长因子、缺氧诱... 血管增生是指在原先已有的血管基础上形成新的微血管,广泛存在于一些肿瘤及自身免疫性疾病中。在类风湿关节炎中,滑膜组织新生血管致血管翳的形成是其重要表现,关节内巨噬细胞、滑膜成纤维细胞及内皮细胞分泌血管内皮生长因子、缺氧诱导因子、趋化因子、促炎细胞因子等多种促血管生成因子,这些促血管生成因子主要通过促进新生血管形成维持滑膜及关节的炎症免疫反应,现就类风湿关节炎血管增生的相关机制研究进展作一综述。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 血管增生 促血管生长因子
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重组TACI-Ig融合蛋白抑制抗CD3抗体诱导T淋巴细胞增殖与活化 被引量:3
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作者 杨思民 汪庆童 +3 位作者 刘亢亢 汪龙生 吴莉 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第7期919-925,共7页
目的探讨抗CD3抗体诱导小鼠T淋巴细胞增殖与活化的机制并观察重组人TACI-Ig融合蛋白(rh TACI-Ig)对其的影响。方法免疫磁珠纯化得到小鼠T淋巴细胞,用抗CD3抗体刺激,同时给予rh TACI-Ig、rh TNFR∶Fc或Ig G-Fc。[3H]-TdR参入法检测T细胞... 目的探讨抗CD3抗体诱导小鼠T淋巴细胞增殖与活化的机制并观察重组人TACI-Ig融合蛋白(rh TACI-Ig)对其的影响。方法免疫磁珠纯化得到小鼠T淋巴细胞,用抗CD3抗体刺激,同时给予rh TACI-Ig、rh TNFR∶Fc或Ig G-Fc。[3H]-TdR参入法检测T细胞增殖能力,流式细胞术检测T细胞亚群比率,Western blot法检测B淋巴细胞刺激因子、BAFF受体(BAFFR)和跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(TACI)两个受体及IL-2受体(IL-2R)表达水平和NF-κB活性,采用小干扰RNA(siRNA)抑制T细胞BAFFR或TACI的表达。结果抗CD3抗体体外可促进T细胞增殖与活化,BAFF、白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和转化生长因子-β(TGF-β)分泌,BAFFR、TACI、IL-2R表达升高和NF-κB活性增强(P<0.05)。Rh TACI-Ig(0.1、1、10、100μg/ml)体外给药可抑制抗CD3抗体诱导的T淋巴细胞增殖(P<0.05);rh TACI-Ig(1、10、100μg/ml)可明显降低抗CD3抗体诱导产生的细胞因子水平(P<0.05,P<0.01),显著抑制CD4+CD69+T细胞、CD4+CD154+T细胞比率,提高CD4+CD62L+T细胞比率(P<0.05,P<0.01),且rh TACI-Ig(10、100μg/ml)能降低T细胞上BAFFR、TACI、IL-2受体的表达,抑制NF-κB活性(P<0.05)。沉默BAFFR或TACI对抗CD3抗体诱导的T细胞增殖有抑制作用(P<0.01)。结论抗CD3抗体部分通过产生BAFF,激活BAFFR信号而促进T细胞增殖与活化,rh TACI-Ig中和BAFF,抑制BAFF相关受体的表达和NF-κB活性,减少T细胞表达IL-2受体,阻止T细胞过度增殖与活化。 展开更多
关键词 B淋巴细胞刺激因子 重组TACI-Ig融合蛋白 T淋巴细胞 免疫治疗 自身免疫病
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流式细胞术检测IgD与IgD受体结合实验方法的建立 被引量:3
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作者 陈恒石 吴育晶 +3 位作者 黄琼 陈文生 董进 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第8期1105-1110,共6页
目的建立非放射性荧光标记的配体受体结合实验,检测Ig D与其受体结合的作用特性。方法以配体受体结合理论为基础,利用荧光标记抗体技术,建立非放射性配体受体结合实验方法。利用流式细胞术检测人CD4+T细胞和人滑膜细胞上Ig D与Ig D受体... 目的建立非放射性荧光标记的配体受体结合实验,检测Ig D与其受体结合的作用特性。方法以配体受体结合理论为基础,利用荧光标记抗体技术,建立非放射性配体受体结合实验方法。利用流式细胞术检测人CD4+T细胞和人滑膜细胞上Ig D与Ig D受体结合的亲和力。结果人CD4+T细胞上Ig D与Ig D受体结合的解离常数(KD)和受体最大结合容量(Bmax)分别是8.10×10-10mol/L和6 605相对值/104细胞,人滑膜细胞上Ig D受体与Ig D结合的KD和Bmax值分别是7.02×10-10mol/L和5 977相对值/104细胞。结论该方法避免了传统受体与配体结合分析中放射性标记的问题,操作简便、稳定性好、灵敏度及选择性均较高,可为分析配体受体结合提供新的方法。 展开更多
关键词 配体受体结合 亲和力 IGD 荧光标记
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荧光共振能量转移法对细胞cAMP含量的实时检测
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作者 汪龙生 吴莉 +6 位作者 胡珊珊 王瑞 张梅 韩陈陈 马旸 汪庆童 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第11期1726-1730,共5页
大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)转染pc DNA3-ICUE3质粒,用荧光共振能量转移(FRET)法观察前列腺素(PGE2)刺激下大鼠FLS环磷酸腺苷(c AMP)水平的实时变化,与放免法检测进行比较。FRET检测到FLS在PGE2刺激后1 min,c AMP升高14.93%,且不同批次... 大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)转染pc DNA3-ICUE3质粒,用荧光共振能量转移(FRET)法观察前列腺素(PGE2)刺激下大鼠FLS环磷酸腺苷(c AMP)水平的实时变化,与放免法检测进行比较。FRET检测到FLS在PGE2刺激后1 min,c AMP升高14.93%,且不同批次实验差异较小;放免法检测到c AMP升高7.79%;FRET可检测到PGE2受体拮抗剂对c AMP产生的抑制,可观察到1 nmol/L PGE2促进c AMP产生,放免法检测PGE2产生效应最低浓度为0.1μmol/L。提示FRET法检测灵敏、重复性高,为G蛋白偶联受体信号通路研究的可靠技术手段。 展开更多
关键词 荧光共振能量转移 c AMP G蛋白偶联受体 荧光探针 活细胞研究
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超声成像在早期干燥综合征小鼠模型中的评价作用 被引量:4
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作者 周伟杰 周正炜 +6 位作者 陶娟 邰宇 汪丹丹 王珍 郭派派 汪庆童 魏伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期140-145,共6页
目的探讨颌下腺超声成像在评价干燥综合征动物模型中的作用和价值。方法C57BL/6雌性小鼠建立SS模型,在d 0、21、28和35对小鼠进行唾液量、饮水量和体重等常规指标检测,d 35检测颌下腺指数和病理改变,同时运用Vevo 2100小动物超声成像系... 目的探讨颌下腺超声成像在评价干燥综合征动物模型中的作用和价值。方法C57BL/6雌性小鼠建立SS模型,在d 0、21、28和35对小鼠进行唾液量、饮水量和体重等常规指标检测,d 35检测颌下腺指数和病理改变,同时运用Vevo 2100小动物超声成像系统,对小鼠颌下腺部位进行纵切超声检查,将超声观察的结果与常规检测指标进行相关性分析。结果SS小鼠造模d 28出现唾液量明显减少,饮水量显著增多,造模d 35颌下腺指数明显增高,颌下腺发生SS的典型病理改变。超声扫描在造模d 21发现SS组颌下腺轴面面积较正常组明显增高,颌下腺血流信号在d 28和35较正常组明显增多。分析表明,超声观察的结果与常规检测指标具有显著相关性。结论颌下腺的超声成像可能为SS动物模型的评价提供早期线索和半定量指标,在评价SS模型病情变化以及治疗SS的药效学基础研究中具有重要价值。 展开更多
关键词 超声成像 干燥综合征 颌下腺 Color Doppler-mode B-MODE 诊断
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G蛋白偶联受体激酶2杂合子敲除小鼠构建及表型鉴定 被引量:3
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作者 陶娟 周伟杰 +5 位作者 邰宇 郭派派 周正炜 王珍 汪庆童 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第7期1035-1041,共7页
目的应用CRISPR/Cas9技术构建G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)杂合敲除(GRK2^+/-)小鼠,用于疾病病理机制及药物靶点研究。方法构建靶向敲除GRK2基因的载体,在体外将先导RNA和Cas9 mRNA显微注射到C57BL/6小鼠的受精卵中,在小鼠GRK2基因的第3个... 目的应用CRISPR/Cas9技术构建G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)杂合敲除(GRK2^+/-)小鼠,用于疾病病理机制及药物靶点研究。方法构建靶向敲除GRK2基因的载体,在体外将先导RNA和Cas9 mRNA显微注射到C57BL/6小鼠的受精卵中,在小鼠GRK2基因的第3个外显子上造成基因突变,通过PCR及基因测序测定F0代基因型,成功获得13bp和19bp敲除两种GRK2^+/-小鼠。因GRK2纯合子敲除胚胎期死亡,将19bp敲除F0代小鼠与C57BL/6小鼠回交,获得稳定的19bp敲除F1代GRK2^+/-小鼠用于扩繁及实验。结果 GRK2^+/-小鼠基因型稳定,体重较同龄C57BL/6小鼠低,Western blot检测证实GRK2^+/-小鼠心脏、脾脏、胸腺、肝脏、巨噬细胞及肾脏组织中GRK2蛋白的表达均显著降低。结论该研究利用CRISPR/Cas9技术成功建立了GRK2^+/-小鼠模型,为进一步研究GRK2在多种脏器、细胞发育中的作用,疾病发病机制及药物作用靶点提供了重要的动物模型。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体激酶2 CRISPR/Cas9 基因工程小鼠 基因型鉴定
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