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siRNA干扰STAT3基因对食管癌Eca-109细胞生物学特性的影响
1
作者
赵环宇
张维铭
陈锦飞
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第24期1420-1423,共4页
目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3信号传导通路对人食管癌Eca-109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:针对人STAT3基因mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA (siRNA)的DNA模板,将其连入pRNAT-U6.1/neo质粒中,构建STAT3-siRNA表达载体,稳...
目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3信号传导通路对人食管癌Eca-109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:针对人STAT3基因mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA (siRNA)的DNA模板,将其连入pRNAT-U6.1/neo质粒中,构建STAT3-siRNA表达载体,稳定转染人食管癌Eca-109细胞,利用RT-PCR、Westernblot技术分别检测转染细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,MTT实验、流式细胞技术检测转染细胞的增殖、细胞周期和凋亡变化情况。结果:成功构建STAT3-siRNA表达载体,经测序鉴定正确。RT-PCR和Western blot结果显示,STAT3-siRNA3表达载体明显抑制了人食管癌Eca-109细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。MTT实验显示,稳定转染siRNA后,siRNA3实验组细胞的增殖能力明显下降,细胞生长抑制率为 35.68%,较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞技术显示,siRNA3实验组出现了细胞周期阻滞和细胞调亡,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞凋亡率为13.26%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01):结论:RNA干扰技术沉默STAT3基因可以有效地抑制STAT3基因的表达,进而抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖,引起细胞周期G_0/G_1期阻滞,促进其凋亡。
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关键词
RNA干扰
STAT3
食管癌
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职称材料
X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响
被引量：
3
2
作者
赵环宇
张维铭
陈锦飞
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期836-841,共6页
背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如头颈部鳞癌、食管癌、前列腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究探讨X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡的影响。方法:针对STAT3 mRNA序列设计...
背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如头颈部鳞癌、食管癌、前列腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究探讨X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡的影响。方法:针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,转染Eca-109细胞,G418筛选获得阳性克隆,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞STAT3 mRNA和蛋白表达。转染细胞分别接受0、2、4、6和8GyX线照射,平板克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞仪检测4GyX线照射的细胞凋亡。结果:成功构建了pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,经测序鉴定正确;RT-PCR和Western blot检测显示,STAT3-siRNA有效地抑制了肿瘤细胞STAT3 mRNA和蛋白表达;平板克隆形成实验和流式细胞仪分析表明,不同剂量X线照射联合STAT3-siRNA可抑制肿瘤细胞增殖,4GyX线照射可诱导肿瘤细胞凋亡。结论:X线照射联合RNA干扰STAT3基因表达可抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡。
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关键词
照射
RNA干扰
STAT3
食管癌
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职称材料
题名
siRNA干扰STAT3基因对食管癌Eca-109细胞生物学特性的影响
1
作者
赵环宇
张维铭
陈锦飞
机构
南京
医科大
学附属南京第一医院肿瘤科
天津医科大学分子生物学实验室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第24期1420-1423,共4页
基金
南京市医学重点科技发展项目基金资助(编号:zKx08012)
文摘
目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3信号传导通路对人食管癌Eca-109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:针对人STAT3基因mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA (siRNA)的DNA模板,将其连入pRNAT-U6.1/neo质粒中,构建STAT3-siRNA表达载体,稳定转染人食管癌Eca-109细胞,利用RT-PCR、Westernblot技术分别检测转染细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,MTT实验、流式细胞技术检测转染细胞的增殖、细胞周期和凋亡变化情况。结果:成功构建STAT3-siRNA表达载体,经测序鉴定正确。RT-PCR和Western blot结果显示,STAT3-siRNA3表达载体明显抑制了人食管癌Eca-109细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。MTT实验显示,稳定转染siRNA后,siRNA3实验组细胞的增殖能力明显下降,细胞生长抑制率为 35.68%,较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞技术显示,siRNA3实验组出现了细胞周期阻滞和细胞调亡,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞凋亡率为13.26%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01):结论:RNA干扰技术沉默STAT3基因可以有效地抑制STAT3基因的表达,进而抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖,引起细胞周期G_0/G_1期阻滞,促进其凋亡。
关键词
RNA干扰
STAT3
食管癌
Keywords
RNAinterference
STAT3
Esophageal carcinoma
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
R512.62 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响
被引量：
3
2
作者
赵环宇
张维铭
陈锦飞
机构
南京
医科大
学附属南京第一医院肿瘤科
天津医科大学分子生物学实验室
出处
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期836-841,共6页
文摘
背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如头颈部鳞癌、食管癌、前列腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究探讨X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡的影响。方法:针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,转染Eca-109细胞,G418筛选获得阳性克隆,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞STAT3 mRNA和蛋白表达。转染细胞分别接受0、2、4、6和8GyX线照射,平板克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞仪检测4GyX线照射的细胞凋亡。结果:成功构建了pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,经测序鉴定正确;RT-PCR和Western blot检测显示,STAT3-siRNA有效地抑制了肿瘤细胞STAT3 mRNA和蛋白表达;平板克隆形成实验和流式细胞仪分析表明,不同剂量X线照射联合STAT3-siRNA可抑制肿瘤细胞增殖,4GyX线照射可诱导肿瘤细胞凋亡。结论:X线照射联合RNA干扰STAT3基因表达可抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡。
关键词
照射
RNA干扰
STAT3
食管癌
Keywords
irradiation
RNA interference
STAT3
esophageal carcinoma
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siRNA干扰STAT3基因对食管癌Eca-109细胞生物学特性的影响
赵环宇
张维铭
陈锦飞
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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职称材料
2
X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响
赵环宇
张维铭
陈锦飞
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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