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采用定量蛋白质组学技术筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关蛋白 被引量:21
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作者 孙成荣 唐建武 +7 位作者 孙明忠 刘淑清 张宏颖 王波 宋波 张亚楠 张竹清 赵志英 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期856-864,共9页
淋巴道转移是上皮来源恶性肿瘤转移的早期阶段,其发生机制不清,一直是肿瘤学研究面临的难题,为寻找淋巴道转移相关蛋白,以一对来源于同一亲本细胞,且淋巴道转移潜能显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株为研究对象,其中Hca-F为高淋巴道转移... 淋巴道转移是上皮来源恶性肿瘤转移的早期阶段,其发生机制不清,一直是肿瘤学研究面临的难题,为寻找淋巴道转移相关蛋白,以一对来源于同一亲本细胞,且淋巴道转移潜能显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株为研究对象,其中Hca-F为高淋巴道转移力细胞株,Hca-P为低淋巴道转移力细胞株,采用定量蛋白质组学技术——荧光差异双向凝胶电泳,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞荧光差异蛋白表达图谱,高通量筛选与肿瘤淋巴道转移相关的蛋白质.经DeCyde软件分析,共得到163个有统计学差异的蛋白质点,选择2倍以上的差异性蛋白质点23个,经质谱鉴定得到17个蛋白质,在Hca-F中高表达的蛋白质有7个:转羟乙醛酶、波形蛋白、肌酸激酶(脑)、膜联蛋白7、膜联蛋白5、烯酰辅酶A水合酶1(过氧化物酶体)、核内异质核糖核蛋白A2/B1异构体1.而在Hca-F中低表达的蛋白质有10个:真核翻译延长因子2、Ero1样蛋白、乙醛脱氢酶2(线粒体)、苹果酸盐脱氢酶2(NAD)、β-内酰胺酶2、谷胱甘肽S转移酶"1、泛素C末端水解酶同工酶L3、内质网蛋白29(前体)、溶血磷脂酶1、微管不稳定蛋白.这些差异性蛋白质的功能涉及到代谢、蛋白质分泌、蛋白质结合、核苷酸结合,钙离子结合、凋亡和调节生长等过程.对这些蛋白质功能的进一步验证,将有助于解析肿瘤淋巴道转移的分子机制. 展开更多
关键词 肝癌 淋巴道转移 定量蛋白质组 荧光差异双向凝胶电泳 质谱
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自养小球藻多糖对人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的诱导 被引量:10
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作者 徐韬钧 张翠丽 +4 位作者 张瑜 崔琳琳 崔美美 辛毅 王亮 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第1期45-48,92,共5页
应用超声破碎碱提法制备自养小球藻多糖。在体外培养条件下,用不同浓度的小球藻多糖处理肝癌细胞,并通过MTT,双苯并咪唑(Hoechst33258)染色,免疫细胞化学等方法检测。结果表明,1g/L的小球藻多糖作用肝癌细胞SMMC-77211 2h,对其增殖有显... 应用超声破碎碱提法制备自养小球藻多糖。在体外培养条件下,用不同浓度的小球藻多糖处理肝癌细胞,并通过MTT,双苯并咪唑(Hoechst33258)染色,免疫细胞化学等方法检测。结果表明,1g/L的小球藻多糖作用肝癌细胞SMMC-77211 2h,对其增殖有显著抑制作用,且能通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2及上调凋亡执行蛋白Capase-3的表达来诱导其发生凋亡。 展开更多
关键词 自养小球藻 多糖 肝癌细胞 凋亡
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肝源性磷脂酰乙醇胺的分离及其诱导肝癌细胞凋亡的研究 被引量:5
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作者 王亮 龙腾腾 +3 位作者 李治国 周佳平 辛毅 张翠丽 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第2期223-227,共5页
采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇-氯仿为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE),并采用GF254硅胶板薄层色谱法以氯仿-甲醇-水(65:25:4,体积比)为展开剂检测PE。结果表明,以95%乙醇-氯仿顺序洗脱氧化铝色谱柱中的磷脂时,PE与磷脂酰胆碱(PC... 采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇-氯仿为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE),并采用GF254硅胶板薄层色谱法以氯仿-甲醇-水(65:25:4,体积比)为展开剂检测PE。结果表明,以95%乙醇-氯仿顺序洗脱氧化铝色谱柱中的磷脂时,PE与磷脂酰胆碱(PC)可实现完全分离。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点25μmol/LPE对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,并与子宫颈癌细胞Hela、正常人肝细胞HL7702做比较,发现肝源性PE对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且能诱导其发生凋亡。 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺 肝癌细胞 增殖抑制 凋亡 猪肝
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Gelsolin表达下调降低鼠源肝癌细胞的侵袭能力 被引量:2
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作者 王绍清 孙明忠 +2 位作者 刘淑清 王波 唐建武 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期948-952,共5页
目的:研究高低淋巴道转移力细胞株Hca-F(淋巴道转移>80%)和Hca-P(淋巴道转移<30%)细胞中gelsolin的表达及其对Hca-F细胞侵袭能力的影响,阐明gelsolin在肝癌淋巴道转移过程中发挥的作用方法:应用荧光差异双向凝胶电泳技术及质谱定... 目的:研究高低淋巴道转移力细胞株Hca-F(淋巴道转移>80%)和Hca-P(淋巴道转移<30%)细胞中gelsolin的表达及其对Hca-F细胞侵袭能力的影响,阐明gelsolin在肝癌淋巴道转移过程中发挥的作用方法:应用荧光差异双向凝胶电泳技术及质谱定量和鉴定gelsolin在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达;构建pSileneer-shR-NA-gelsolin表达载体,稳定转染Hca-F细胞并获得gelsolin的表达稳定下调的Hca-F细胞株,同时建立稳定转染pSilencer-无关序列Hca-F细胞株作为对照,在mRN水平和蛋白水平检测干扰后gelsolin的表达;Transwell 小室体外侵袭试验观察下调gelsolin表达后对Hca-F 细胞侵袭能力的影响结果:Gelsolin基因在Hca-F细胞中表达高于是Hca-P细胞( F/P= 1.7 );获得gelsolin稳定下调的Hca-F细胞株,RT-PCR和Wesiern Blot分析结果表明在稳定转染Hca-F细胞中,gelsolin在基因水平和蛋白水平的表达明显下调;在体外侵袭实验中,Hca-F细胞、对照组细胞、干扰组细胞穿过人工基底膜的细胞在570nm处的吸光度分别为0.2007±0.0129、0.2236±0.0446和0.1557±0.0051;表明下调gelsolin蛋白表达后,干扰组细胞穿过人工基底膜的细胞吸光度显著降低(P<0.05)。下调Hca-F细胞中gelsolin的表达后,转移的肿瘤细胞数量减少,癌细胞的侵袭能力下降结论:通过抑制gelsoin基因和蛋白的表达,可以降低鼠源肝癌细胞Hca-F侵袭能力的作用。 展开更多
关键词 GELSOLIN 荧光差异双向凝胶电泳 肝肿瘤 侵袭 淋巴道转移
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D-半乳糖对成年小鼠海马神经元p-ERK1/2表达和学习记忆能力的影响 被引量:4
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作者 曹雪姣 耿成燕 +3 位作者 董伟 张翠丽 刘爽 李秋娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第11期40-43,共4页
目的研究D-半乳糖对成年小鼠海马神经元p-ERK 1/2表达和学习记忆能力的影响。方法 20只健康成年昆明种小鼠,雌雄各半,分为2组。颈背部皮下注射D-半乳糖注射液,每天125 mg/kg body weight,连续35 d,建立小鼠衰老模型。对照组注射生理盐... 目的研究D-半乳糖对成年小鼠海马神经元p-ERK 1/2表达和学习记忆能力的影响。方法 20只健康成年昆明种小鼠,雌雄各半,分为2组。颈背部皮下注射D-半乳糖注射液,每天125 mg/kg body weight,连续35 d,建立小鼠衰老模型。对照组注射生理盐水。其间观察小鼠一般状况,实验的最后1周分别进行跳台实验、Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;实验结束后处死动物,提取海马组织总蛋白,免疫印迹检测p—ERK1/2表达量。结果与对照组比较,D-半乳糖组小鼠跳台试验潜伏时间减少和电击次数增加(P<0.01);Morris水迷宫实验航行逃避潜伏期明显大于对照组小鼠(P<0.01);D-半乳糖组p-ERK1/2表达量显著低于正常对照组(P<0.01),且雄性比雌性效果显著。结论 D-半乳糖可能通过抑制成年小鼠海马神经元p-ERK1/2表达而损害其学习记忆能力。 展开更多
关键词 D-半乳糖 衰老 学习记忆功能 p-ERK1 2
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卵巢生殖细胞肿瘤中cyclin E、cyclin A与CDK2的表达 被引量:2
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作者 邹向阳 王华新 +4 位作者 范姝君 张秀蓉 刘丹 孙国超 李连宏 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期621-622,共2页
关键词 卵巢肿瘤 生殖细胞肿瘤 细胞周期E 细胞周期A CDK2蛋白 免疫组织化学
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Emb和EmbC功能结构域对分枝杆菌聚阿拉伯糖合成的影响 被引量:2
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作者 张文利 马莉 +3 位作者 辛毅 徐跃飞 任风 马郁芳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1051-1060,共10页
本研究通过构建精确保留EmbB的N端跨膜区和EmbC的C端结构域相拼接的杂化质粒,将该质粒导入到embB和embC基因敲除的耻垢分枝杆菌中,观察杂合蛋白表达对这2种菌株细胞壁中阿拉伯糖合成的影响.结果表明,Embs蛋白家族成员N端完整的跨膜区能... 本研究通过构建精确保留EmbB的N端跨膜区和EmbC的C端结构域相拼接的杂化质粒,将该质粒导入到embB和embC基因敲除的耻垢分枝杆菌中,观察杂合蛋白表达对这2种菌株细胞壁中阿拉伯糖合成的影响.结果表明,Embs蛋白家族成员N端完整的跨膜区能使其正确地定位于细胞膜,此为其发挥作用的必要前提;尽管Emb家族成员间同源性高,但相互间的定位作用不能替代;Embs蛋白家族成员的C末端是其催化性的结构域,但在发挥作用时,需要其N末端的结构域能使其正确定位.本文通过研究Emb蛋白的功能性结构域,深入探讨Emb蛋白结构与功能间的关系,从而为研发有效的抗结核化合物,克服耐药性结核分枝杆菌提供理论依据. 展开更多
关键词 分枝杆菌 EmbB和EmbC蛋白 细胞壁
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