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医学分子遗传学 第九讲 基因诊断 被引量：2
1
作者 邱信芳 俞民澍 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期45-48,共4页
基因诊断就是利用重组DNA技术作为工具,直接从DNA水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷,因此这种诊断方法又称为DNA分析方法。 基因诊断主要是通过检测疾病基因的以下三个特征来确定某一遗传性疾病存在与否的:(1)某一疾病基因内的缺失或碱... 基因诊断就是利用重组DNA技术作为工具,直接从DNA水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷,因此这种诊断方法又称为DNA分析方法。 基因诊断主要是通过检测疾病基因的以下三个特征来确定某一遗传性疾病存在与否的:(1)某一疾病基因内的缺失或碱基对突变的情况;(2)疾病基因与另一个突变(通常为影响某一限制性内切酶酶切位点的突变)之间的非随机关系;(3)某一未知疾病基因与限制性位点突变的连锁关系。所以。 展开更多
关键词 医学分子遗传 基因诊断
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上海宝山香柚种群遗传多样性的RAPD分析 被引量：1
2
作者 王伟 明凤 黄洋 《安徽农学通报》 2007年第4期28-29,76,共3页
采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术,对上海市宝山区长兴岛、横沙岛、宝山区生物技术中心以及复旦大学校内的香柚共计60个样本亲缘关系进行鉴定和遗传多样性分析,运用NTSYS-pc软件计算各品种间的Jaccad遗传相似系数,按非加权配对算术... 采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术,对上海市宝山区长兴岛、横沙岛、宝山区生物技术中心以及复旦大学校内的香柚共计60个样本亲缘关系进行鉴定和遗传多样性分析,运用NTSYS-pc软件计算各品种间的Jaccad遗传相似系数,按非加权配对算术平均法(UPGMA)建立各品种间的聚类图,13个经过筛选的随机引物,获得多态性为52%的扩增条带,所有样本间的遗传距离在0.07-0.95之间,聚类图表明样本间的遗传多样性很复杂,其中只有长兴岛样品遗传距离在0.25以内,其他3地无论种群间还是种群内遗传距离都比较大,多数具有其自身的独特性,为香柚种质资源的保护提供了重要参考。 展开更多
关键词 香柚 种群差异 RAPD 保存
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凝血因子IX基因剔除小鼠的遗传及血液学指标检测
3
作者 郝光荣 孙伟 +4 位作者 陈立 崔淑芳 汤球 黄立志 曹平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第4期233-235,共3页
目的　鉴定凝血因子IX基因剔除小鼠。方法　采用PCR扩增检测小鼠的DNA样品以及采用一期法检定小鼠血浆FIX活性和血浆凝血酶原时间 (plasmaprothrombintime ,PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (Kaolinpartialthromboplastintime ,KPTT)值。... 目的　鉴定凝血因子IX基因剔除小鼠。方法　采用PCR扩增检测小鼠的DNA样品以及采用一期法检定小鼠血浆FIX活性和血浆凝血酶原时间 (plasmaprothrombintime ,PT)、白陶土部分凝血活酶时间 (Kaolinpartialthromboplastintime ,KPTT)值。结果　小鼠PCR检测为阳性 ,FIX活性 <5 %。结论　凝血因子IX基因剔除小鼠能稳定遗传 ,鉴定结果提示该小鼠符合人血友病B相应临床症状。 展开更多
关键词 白友病B 疾病模型 凝血因子Ⅸ 基因剔除小鼠 遗传 血液学指标 检测
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“211工程”建设加速遗传学科跨上新台阶
4
作者 淳于娳娟 王洪海 《实验室研究与探索》 CAS 2001年第5期111-111,126,共2页
介绍了该校遗传学科“ 2 11工程”建设的主要进展和三年来取得的标志性成果 :SCI科研论文大幅度提高。简介了“ 2 11工程”
关键词 “211工程” 科研管理 资源共享 中国 高等教育 遗传学 科学研究
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医学分子遗传学——第四讲 多基因病分子遗传学
5
作者 洪贤慷 俞民澍 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期46-48,共3页
多基因病是一种异质性疾病,是遗传因子和环境因子相互作用的结果。它的性质相当复杂,其中某些疾病仅仅是由单个基因座位与个别环境因子相互作用所致,而有些则是由多个基因座位的微小效应叠加在一起相互作用引起。尽管多基因病的遗传因... 多基因病是一种异质性疾病,是遗传因子和环境因子相互作用的结果。它的性质相当复杂,其中某些疾病仅仅是由单个基因座位与个别环境因子相互作用所致,而有些则是由多个基因座位的微小效应叠加在一起相互作用引起。尽管多基因病的遗传因子较为复杂,但在不少多基因病中往往有一个或少数几个遗传因子的作用比较明显。这就为多基因病的分子遗传研究提供了重要途径。 展开更多
关键词 多基因病 分子遗传学
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一个新的水稻C2H2型锌指蛋白cDNA的克隆与序列分析 被引量：28
6
作者 黄骥 张红生 +3 位作者 曹雅君 王东 王建飞 杨金水 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-112,共3页
关键词 水稻 C2H2 锌指蛋白 CDNA 克隆 序列分析
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猪釉基质蛋白的提取及N末端氨基酸序列分析 被引量：49
7
作者 束蓉 李超伦 +3 位作者 刘正 王洪海 陈佩丽 刘文 《口腔医学纵横》 CSCD 1999年第2期67-68,共2页
目的：从猪牙胚提取釉基质蛋白并做氨基酸测序，为进一步研究釉基质蛋白诱导牙周组织再生的生物活性奠定基础。方法：选择乙酸提取法获得釉基质蛋白，采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和印迹膜测序法分析Ｎ末端氨基酸序列。结果：提取的釉基质... 目的：从猪牙胚提取釉基质蛋白并做氨基酸测序，为进一步研究釉基质蛋白诱导牙周组织再生的生物活性奠定基础。方法：选择乙酸提取法获得釉基质蛋白，采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和印迹膜测序法分析Ｎ末端氨基酸序列。结果：提取的釉基质蛋白分子量条带主要位于２０ＫＤａ以下，优势条带为２０ＫＤａ、１３ＫＤａ、５ＫＤａ。２０ＫＤａ、５ＫＤａ釉基质蛋白Ｎ末端前１０个氨基酸残基均为：Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｐｒｏ。结论：乙酸提取法可获得典型的釉原蛋白。印迹膜测序法简易、快速、敏感。 展开更多
关键词 釉基质蛋白 氨基酸序列 提取 SDS-PAGE 牙周病
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乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因在酵母中的表达 被引量：10
8
作者 袁汉英 潘辉 +5 位作者 刘 婷 胡宝龙 李育阳 惠静毅 李光地 汪垣 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第10期35-39,共5页
利用基因工程技术，先将乙肝病毒表面抗原S－preSI融合基因SA－28置于酵母杂合启动子ADH2－SUC2的控制下，然后将SA－28基因的表达单元插入高稳定质粒PHCll的BamHI位点，构建成表达质粒YFD150和YFD150－o，并将其转化酿酒酵母Y19。对转... 利用基因工程技术，先将乙肝病毒表面抗原S－preSI融合基因SA－28置于酵母杂合启动子ADH2－SUC2的控制下，然后将SA－28基因的表达单元插入高稳定质粒PHCll的BamHI位点，构建成表达质粒YFD150和YFD150－o，并将其转化酿酒酵母Y19。对转化子表达SA－28基因的研究表明：表达受葡萄糖浓度调控；表达产物具有S和preS1双重抗原性，并形成密度为1．20—1．229／ml的颗粒。 展开更多
关键词 酵母 融合启动子 乙肝病毒 融合表面抗原
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弓形虫主要表面抗原基因编码序列的扩增、克隆及原核融合表达 被引量：11
9
作者 游东生 沈继龙 +2 位作者 马华 戴克胜 余龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期9-12,共4页
目的扩增弓形虫主要表面抗原（P30）基因编码序列并进行重组表达方法设计合成引物，从弓形虫基因组DNA中扩增P30基因编码序列，克隆入载体pGEM-T和PGEX-4T-1，经PCR和酶切筛选，测序验证后，进行诱导表达和Westemblot鉴定结果从弓形虫... 目的扩增弓形虫主要表面抗原（P30）基因编码序列并进行重组表达方法设计合成引物，从弓形虫基因组DNA中扩增P30基因编码序列，克隆入载体pGEM-T和PGEX-4T-1，经PCR和酶切筛选，测序验证后，进行诱导表达和Westemblot鉴定结果从弓形虫基因组DNA中扩增出P30基因编码序列，并诱导表达出能被兔抗弓形虫血清识别的重组P30结论P30克隆载体和GST融合表达载体的构建和P30的成功表达，为进一步从基因水平和蛋白水平研究P30及进行诊断试剂和疫苗研究创造了条件。 展开更多
关键词 弓形虫 P30 克隆 GST 弓形体病 基因融合表达
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br基因的克隆及表达 被引量：12
10
作者 李凌 吴敏 +1 位作者 乔守怡 陈抗生 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期324-327,共4页
细菌视紫红质 ( Bacteriorhodopsin,BR)是嗜盐菌细胞膜上唯一的一种光能转换色素蛋白 ,BR以视黄醛 ( retinal)作辅基 ,在光诱导下吸收光子后会产生一系列的光循环中间体 ,最后又回到原始状态 .由于 BR这种独特的分子结构和光循环过程 ,... 细菌视紫红质 ( Bacteriorhodopsin,BR)是嗜盐菌细胞膜上唯一的一种光能转换色素蛋白 ,BR以视黄醛 ( retinal)作辅基 ,在光诱导下吸收光子后会产生一系列的光循环中间体 ,最后又回到原始状态 .由于 BR这种独特的分子结构和光循环过程 ,及其作为一种具有光敏特性的蛋白质生物分子 ,可通过生物学技术进行改造 ,正引起光子学研究及生物学研究领域的高度注意 .从 Genbank查询 br基因的全序列 ,然后采用聚合酶链反应 ( Polymerase chain reaction,PCR)技术 ,采用 DNA star软件辅助设计了上下游引物 ,以嗜盐菌 ( H alobactrium H alobium)的基因组 DNA为模板克隆获得了完整的细菌视紫红质基因 br,并且将经测序鉴定的 br基因重组到原核高效表达载体 p GEX- 4 T- 2中 ,转化大肠杆菌 E.coli.,将阳性转化子经 IPTG诱导表达获得 BR与 GST(谷胱苷肽转移酶 )的融合蛋白后 ,提取蛋白进行 SDS-PAGE电泳、Western印迹反应 ,检测表达结果为阳性 ,且表达蛋白的大小与预想的一致 . 展开更多
关键词 细菌视紫红质BR 克隆 表达
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E-选择素基因多态性与冠心病相关性研究 被引量：7
11
作者 罗晓颖 戚文航 +2 位作者 陆国平 何汝敏 黄啸予 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期220-222,共3页
目的 探讨E-选择素基因多态性与中国人群冠心病发病的关系。 方法 93例年龄≤60岁的冠心病患者和97例年龄性别匹配的非冠心病对照者,运用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和直接测序技术对E-选择素基因全部外显子及其两翼的部... 目的 探讨E-选择素基因多态性与中国人群冠心病发病的关系。 方法 93例年龄≤60岁的冠心病患者和97例年龄性别匹配的非冠心病对照者,运用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和直接测序技术对E-选择素基因全部外显子及其两翼的部分内含子进行筛查。 结果 发现3个E-选择素基因多态性:2号外显子5’非翻译区存在G98→T所致的G98T多态性(G/T等位基因);4号外显子EGF结构域中存在A561→C所致的Ser128Arg多态性(A/C等位基因);11号外显子膜结构域中存在一个新的A1856→G所致的A1856G多态性(A/G等位基因)。在冠心病组中,T和C等位基因频率显著高于对照组(P=0.01,P=0.03)。 结论 T和C等位基因可能是中国人群中年龄≤60岁冠心病患者的遗传危险因素。 展开更多
关键词 E-选择素 基因多态性 冠心病 相关性 发病机制 PCR-SSCP 动脉粥样硬化 遗传病理学
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Taq DNA聚合酶功能区域的定位 被引量：6
12
作者 季朝能 杜汉森 +2 位作者 郑佐华 黄啸宇 毛裕民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期432-435,共4页
通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个，２３５个，２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体，利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸... 通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个，２３５个，２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体，利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸的５个缺失体．经ＤＮＡ聚合酶活性测定表明Ｎ端缺失３个，２３５个，２８７个氨基酸后活力和完整的Ｔａｑ相近，而缺失４４３个氨基酸后则失去了ＤＮＡ聚合酶活力；Ｃ端的５个缺失体都失去了ＤＮＡ聚合酶活性．据此ＴａｑＤＮＡ聚合酶的功能区域被定位在２８７～８３２氨基酸之间． 展开更多
关键词 TAQ DNA聚合酶 功能区域 定位
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玉米T型胞质感病性及雄性不育性的分子基础 被引量：10
13
作者 徐明良 杨金水 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1995年第S1期24-29,共6页
关键词 雄性不育性 恢复基因 感病性 毒素 不育基因 分子基础 雄性不育胞质 玉米 氨基酸残基 线粒体基因组
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表达谱基因芯片 被引量：13
14
作者 徐伟文 李文全 毛裕民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期822-826,共5页
表达谱基因芯片具有高通量、缩微、多参数、平行化等优点 .在功能基因组学研究中正发挥越来越重要的作用 .就其原理、应用。
关键词 表达谱基因芯片 基因表达谱 应用
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人体高必需氨基酸编码蛋白转基因马铃薯的获得及RT-PCR分析 被引量：8
15
作者 宋东光 于湄 +1 位作者 王惠珍 汪训明 《生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期16-19,共4页
人口的增长增加了对粮食的需求而提高食物的蛋白质营养将能够缓解这一状况。将人体高必需氨基酸蛋白基因(HEAAE)导入马铃薯以改善马铃薯主食地区的蛋白质营养的研究得到了重视。经过PCR和RT -PCR分析 ,HEAAE与GUS融合基因在马铃薯块茎... 人口的增长增加了对粮食的需求而提高食物的蛋白质营养将能够缓解这一状况。将人体高必需氨基酸蛋白基因(HEAAE)导入马铃薯以改善马铃薯主食地区的蛋白质营养的研究得到了重视。经过PCR和RT -PCR分析 ,HEAAE与GUS融合基因在马铃薯块茎专一性高表达classIpatatin基因启动子驱动下在转基因马铃薯中获得了稳定表达。 展开更多
关键词 人体高必需氨基酸编码蛋白 RT-PCR 转基因马铃薯
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脂质体转染AFP基因构建树突状细胞肝癌瘤苗及体外活性检测 被引量：5
16
作者 范强 钟翠平 +3 位作者 陈空 王国强 傅继东 吴超群 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期255-258,共4页
目的：探讨以ＡＦＰ为靶点，构建ＡＦＰ－ＤＣ肝癌瘤苗及其抗肝癌免疫治疗的可能性。方法：应用脂质体将ＡＦＰ基因转染体外培养的未成熟 ＢＭＤＣ，构建 ＡＦＰ－ＤＣ肝癌瘤苗，以流式细胞术、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、３Ｈ－ＴｄＲ法... 目的：探讨以ＡＦＰ为靶点，构建ＡＦＰ－ＤＣ肝癌瘤苗及其抗肝癌免疫治疗的可能性。方法：应用脂质体将ＡＦＰ基因转染体外培养的未成熟 ＢＭＤＣ，构建 ＡＦＰ－ＤＣ肝癌瘤苗，以流式细胞术、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、３Ｈ－ＴｄＲ法和 ＭＴＴ法等检测其免疫活性。结果：ＡＦＰ－ＤＣ瘤苗不仅能产生和分泌ＡＦＰ，而且能上调自身的Ｂ７分子和ＭＨＣ分子，明显刺激Ｔ细胞增殖及提高ＣＴＬ的杀伤作用。结论：提示肝癌相关基因ＡＦＰ可作为抗肝癌基因治疗的切入点。 展开更多
关键词 树突状细胞 DNA疫苗 AFP 基因传染 肝癌
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FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究 被引量：4
17
作者 郑佐华 周宗祥 +3 位作者 朱蔚 殷长传 季朝能 毛裕民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期170-174,共5页
ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温，最适反应温度在６５～７５℃左右，这时ＲＮＡ的高级结构能解开，... ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温，最适反应温度在６５～７５℃左右，这时ＲＮＡ的高级结构能解开，可以提高逆转录反应的效率；同时引物和ＲＮＡ模板识别的专一性强，可大大提高逆转录的特异性．实验表明ＦＤ－ＴＲＴ逆转录反应的最适条件为：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．８，１５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４，１００μｇ／ｍｌ明胶，５００μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，２５ｐｍｏｌ逆转录引物，１ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２，２ＵＦＤ耐热逆转录酶，反应在６５～７０℃下进行．在上述条件下，用ＲＴ－ＰＣＲ可检出少于５ｐｇ外周血总ＲＮＡ中特异的α珠蛋白ｍＲＮＡ． 展开更多
关键词 逆转录酶 耐热 逆转录 PCR
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抗褐飞虱转基因水稻的应用研究 被引量：7
18
作者 戚华雄 陈志军 +2 位作者 万丙良 吕亮 唐克轩 《湖北农业科学》 北大核心 2001年第3期7-8,共2页
利用基因枪法将植物雪花莲凝集素基因 (gna基因 )导入到粳稻品种鄂宜 10 5和鄂晚 5号中 ,在R3 代得到 gna基因位点纯合的株系 15份 ,从中选择 5份株系 (分别来自不同的独立转基因单株 )进行后续研究。生物学鉴定结果表明这些株系对褐飞... 利用基因枪法将植物雪花莲凝集素基因 (gna基因 )导入到粳稻品种鄂宜 10 5和鄂晚 5号中 ,在R3 代得到 gna基因位点纯合的株系 15份 ,从中选择 5份株系 (分别来自不同的独立转基因单株 )进行后续研究。生物学鉴定结果表明这些株系对褐飞虱具有明显的抑制作用。转基因材料与对照品种相比 ,主要农艺性状表现一致 。 展开更多
关键词 转基因水稻 褐飞虱 抗性品种 抗虫基因 基因枪法 凝集素基因
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人恶性疟杂合多肽抗原基因化学合成及克隆 被引量：4
19
作者 钟雄林 陈仕荣 +3 位作者 裘敏燕 王昌才 闵永洁 王启松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第4期294-298,共5页
本文报道用固相亚磷酰胺法合成人恶性疟杂合多肽抗原基因。基因全长为216bp,分为10个寡聚核苷酸片段分别合成,然后经T4 DNA连接酶按设计顺序连接成完整的杂合抗原基因,重组到噬茵体M13 mp 18 RF DNA内,转染大肠杆菌JM109。用分子杂交和... 本文报道用固相亚磷酰胺法合成人恶性疟杂合多肽抗原基因。基因全长为216bp,分为10个寡聚核苷酸片段分别合成,然后经T4 DNA连接酶按设计顺序连接成完整的杂合抗原基因,重组到噬茵体M13 mp 18 RF DNA内,转染大肠杆菌JM109。用分子杂交和酶切分析筛选出重组克隆体。经序列分析,证明所合成的人恶性疟杂合多肽抗原基因与所设计完全一致。 展开更多
关键词 疟疾 恶性 抗原基因 化学合成 克隆
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RNA干涉在基因治疗中的应用 被引量：6
20
作者 王玮 朱焕章 薛京伦 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期590-595,共6页
　RNA干涉 (RNAinterference,RNAi)是一种可以在细胞内抑制特定基因表达的现象 .它由双链RNA产生 ,可以特异性地降解具有相同或者相似序列的RNA (包括mRNA) .它是一种比反义技术更为有效的方法 ,具有更高的特异性 ,逐渐成为研究者关注... 　RNA干涉 (RNAinterference,RNAi)是一种可以在细胞内抑制特定基因表达的现象 .它由双链RNA产生 ,可以特异性地降解具有相同或者相似序列的RNA (包括mRNA) .它是一种比反义技术更为有效的方法 ,具有更高的特异性 ,逐渐成为研究者关注的焦点 .人们已经开始探讨使RNA干涉成为一种比反义药物更为有效药物的可能性及其具体的实施方案 ,但是也发现它在成为一种安全有效治疗手段之前还有很长的一段路要走 .将从RNA干涉的基本理论入手 。 展开更多
关键词 RNAI 基因治疗 SIRNA
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