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酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计、合成及生物活性 被引量：1
1
作者 杨侃 张阔军 +3 位作者 胡松源 顾勤兰 董继斌 王进欣 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期279-286,共8页
构建了基于配体的酸性神经鞘磷脂酶抑制剂药效团模型.根据此模型,以α-倒捻子素(α-Mangostin)为先导化合物进行结构优化,完成了11个新型酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计与合成,其结构经过核磁共振波谱和质谱鉴定正确.初步体外酶抑制... 构建了基于配体的酸性神经鞘磷脂酶抑制剂药效团模型.根据此模型,以α-倒捻子素(α-Mangostin)为先导化合物进行结构优化,完成了11个新型酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计与合成,其结构经过核磁共振波谱和质谱鉴定正确.初步体外酶抑制活性筛选结果显示,化合物Ⅰb,Ⅰd,Ⅰe和Ⅰf具有较好的酶抑制活性,其中化合物Ⅰf的酶抑制率为88.9%. 展开更多
关键词 酸性鞘磷脂酶 直接抑制剂 药效团模型 α-倒捻子素
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血浆高密度脂蛋白的组成成分在LPS诱导的急性相反应中的改变 被引量：7
2
作者 廖雪玲 马娟 +1 位作者 楼滨 吴满平 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期469-472,480,共5页
目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)组成成分在内毒素 (LPS)诱导的急性相反应 (APR)中的改变。方法　家兔静脉注射 1.0mg/kgLPS诱导APR ,反应不同时相血浆超离心制备的HDL通过分子筛色谱分析其分子大小的改变 ,通过SDS PAGE并分析图像以及EL... 目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)组成成分在内毒素 (LPS)诱导的急性相反应 (APR)中的改变。方法　家兔静脉注射 1.0mg/kgLPS诱导APR ,反应不同时相血浆超离心制备的HDL通过分子筛色谱分析其分子大小的改变 ,通过SDS PAGE并分析图像以及ELISA等实验手段分析其蛋白成分的变化 ;测定PEG 6 0 0 0化学沉淀分离的反应不同时相HDL胆固醇和三酰甘油含量反映HDL在APR中脂质成分的变化。结果　HDL在LPS诱导的APR中组成成分的改变包括 :①形成颗粒半径比较小的HDL ;②大约 10 %的HDL载脂蛋白A Ⅰ (apoAⅠ )—被一种相对分子质量约为 130 0 0的蛋白置换出来 ,HDL中载脂蛋白 (Apo HDL)的含量随着APR的发展降低 (P <0 .0 5 ) ;③HDL胆固醇含量显著降低 ,同时三酰甘油含量显著升高 (P <0 .0 1)。结论　HDL在HPS诱导的APR中蛋白及脂质成分均发生急剧的改变 。 展开更多
关键词 改变 HDL LPS诱导 急性 高密度脂蛋白 血浆 脂质成分 反应 分子筛 相对分子质量
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严重急性呼吸道综合征冠状病毒疫苗研究现状 被引量：6
3
作者 叶迅 孟夏 +3 位作者 董继斌 梁旻 胡放 陈红专 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期331-334,共4页
冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为... 冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为有效疫苗的开发奠定了很好的研究基础 .灭活或减毒的冠状病毒疫苗存在一定的局限性和危险性 . 展开更多
关键词 严重急性呼吸道综合征 冠状病毒 疫苗 突起蛋白 SARS 基因组
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肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况及耐药基因研究 被引量：8
4
作者 宋琳 瞿介明 +2 位作者 何礼贤 张丽珺 丁廷波 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第2期127-129,共3页
目的调查上海地区肺炎链球菌对红霉素的敏感度,研究肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法对中山医院57株临床分离肺炎链球菌进行红霉素药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)技术对上海4所医院中分离的53株红霉素耐药肺炎链球菌检测耐... 目的调查上海地区肺炎链球菌对红霉素的敏感度,研究肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法对中山医院57株临床分离肺炎链球菌进行红霉素药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)技术对上海4所医院中分离的53株红霉素耐药肺炎链球菌检测耐药基因(ermB,mefA,mefE)。结果57株肺炎链球菌中12株(21.0%)敏感,3株(5.3%)中介,42株(73.7%)耐药。53株红霉素耐药肺炎链球菌中,ermB基因、mefE基因、mefA基因分别在51株(96.2%)、22株(41.5%)和1株(1.9%)中检测到。其中21株(39.6%)同时检测到ermB基因和mefE基因,1株(1.9%)同时检测到ermB基因和mefA基因,1株(1.9%)未检测到ermB基因、mefE基因或mefA基因。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药率较高。ErmB介导的靶位改变是最常见的耐药机制,mef(特别是mefE)介导外排机制引起者也较常见。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 大环内酯类 耐药基因 ERMB基因 mefE基因 mefA基因
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高密度脂蛋白(HDL)抗动脉粥样硬化研究进展 被引量：12
5
作者 董继斌 吴满平 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期414-417,共4页
血浆高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)通过其载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,ApoA-I)介导胆固醇逆向转运,呈现抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)功能。近来大量研究结果显示高密度脂蛋白的多种抗AS、抗炎功能与胆固醇代... 血浆高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)通过其载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,ApoA-I)介导胆固醇逆向转运,呈现抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)功能。近来大量研究结果显示高密度脂蛋白的多种抗AS、抗炎功能与胆固醇代谢无关,而是由其联结的鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine 1-phosphate,S1P)和ApoA-I分别通过S1P受体和清道夫受体B-I(scavenger receptor class BI,SR-BI)介导的细胞内信号通路来实现。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白(HDL) 载脂蛋白A-I(ApoA-I) 鞘氨醇-1-磷酸受体(S1P) 清道夫受体B-I(SR-BI) 动脉粥样硬化(AS)
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利用Tet-Off表达系统构建鞘磷脂合酶可调控高表达的Huh7肝癌细胞 被引量：2
6
作者 颜念龙 吴满平 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期719-723,共5页
目的利用Tet-Off表达系统构建鞘磷脂合酶(sphingomyelin synthase,SMS)可被Dox调控高表达的Huh7细胞,为进一步探讨SMS活性升高致动脉粥样硬化的机制打下基础(建立细胞模型)。方法首先将Tet-Off调控质粒转染Huh7细胞构建Huh7-tTA细胞,然... 目的利用Tet-Off表达系统构建鞘磷脂合酶(sphingomyelin synthase,SMS)可被Dox调控高表达的Huh7细胞,为进一步探讨SMS活性升高致动脉粥样硬化的机制打下基础(建立细胞模型)。方法首先将Tet-Off调控质粒转染Huh7细胞构建Huh7-tTA细胞,然后再将含外源性人SMS基因(hSMS)的PTREE2hyg质粒转染Huh7-tTA细胞,经分离纯化成功构建可调控表达hSMS的Huh7单克隆细胞(命名为SMS细胞,SMS1和SMS2)。为了便于检测外源性hSMS,利用FLAG标记hSMS(SMS-FLAG)。结果 SMS细胞表达SMS-FLAG受不同剂量Dox调控,SMS mRNA测定结果显示:0 ng/mL Dox剂量组较0.01 ng/mL和100 ng/mL Dox组均有显著升高(P<0.05和P<0.001);0.01 ng/mL Dox组较100 ng/mL Dox组也有显著升高(P<0.05)。SMS蛋白测定结果相似于SMS mRNA结果。SMS酶活性测定结果显示0 ng/mL Dox组显著高于100 ng/mL Dx组(P<0.001),而对照组(Huh7-tTA)1、00 ng/mL Dox组和野生型Huh7细胞组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论利用Tet-Off体系成功构建SMS高表达可调控Huh7细胞,SMS细胞SMS高表达受Dox剂量调控。 展开更多
关键词 Tet-Off调控系统 鞘磷脂合酶 HUH7细胞
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重组高密度脂蛋白-阿克拉霉素大鼠体内血液动力学及组织分布 被引量：1
7
作者 楼滨 董继斌 吴满平 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期626-630,共5页
目的研究重组高密度脂蛋白-阿克拉霉素(rHDL-ACM)静脉注射给药后在大鼠体内的血液动力学及组织分布,为肝癌靶向治疗寻找新的途径。方法建立荧光法测定血浆和组织匀浆中rHDL-ACM浓度方法,测定不同时相大鼠血浆或组织匀浆中rHDL-ACM浓度... 目的研究重组高密度脂蛋白-阿克拉霉素(rHDL-ACM)静脉注射给药后在大鼠体内的血液动力学及组织分布,为肝癌靶向治疗寻找新的途径。方法建立荧光法测定血浆和组织匀浆中rHDL-ACM浓度方法,测定不同时相大鼠血浆或组织匀浆中rHDL-ACM浓度。结果加入AlCl3作为荧光增强剂,ACM的激发波长为441 nm,发射波长为505 nm。该方法测定rHDL-ACM在大鼠血浆中高中低3种浓度的平均回收率>84.5%。肝的平均回收率为85.1%,肾的平均回收率为78.2%,脾的平均回收率为86.3%,肺的平均回收率为84.4%。rHDL-ACM在血浆中消除半衰期比fACM消除半衰期延长近一倍。注射rHDL-ACM 4 h后,脾和肺中药物浓度下降迅速,药物显著浓集于肝脏。结论注射后rHDL-ACM在大鼠肝脏中累积,提示该药具有肝脏靶向作用。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白 血液动力学 组织分布
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高密度脂蛋白的抗内毒素作用 被引量：3
8
作者 张寰 吴满平 +1 位作者 楼滨 陈佩芳 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第5期474-476,共3页
目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)抗内毒素 (LPS)的作用。方法　 (1)用超离心方法分离纯化血浆各脂蛋白 ;(2 )分别给小鼠注射LPS ,HDL +LPS ,HDL +无脂蛋白血浆部分 (LFF ,d >1.2 1g/cm3 ) +LPS后观察各组小鼠的存活时间 ;(3)FITC LPS... 目的　研究高密度脂蛋白 (HDL)抗内毒素 (LPS)的作用。方法　 (1)用超离心方法分离纯化血浆各脂蛋白 ;(2 )分别给小鼠注射LPS ,HDL +LPS ,HDL +无脂蛋白血浆部分 (LFF ,d >1.2 1g/cm3 ) +LPS后观察各组小鼠的存活时间 ;(3)FITC LPS与人血浆培育后密度梯度离心观察荧光素在人血浆中的分布 ;(4 )FITC LPS、HDL及LFF培育不同时间 (0～ 3h)后密度梯度离心 ,观察不同培育时间HDL中的荧光强度 (FS)。结果　注射HDL +LFF +LPS组小鼠的存活时间 (4 0 .98± 12 .39)h比注射LPS组 (18.4 5± 2 .0 9)h和HDL +LPS组(2 2 .4 8± 12 .81)h小鼠显著性增长 (P <0 .0 1) ,而注射HDL +LPS组小鼠的存活时间与注射LPS组小鼠无显著性差异。FITC LPS在血浆VLDL、LDL层中的含量极低 (2 .77% ) ,主要集中在HDL层中 (6 0 .39% )。FITC LPS在HDL中的含量随培育时间增加而增加 ;而FITC LPS在LFF中的含量随培育时间增加而减少。结论　HDL具有抗内毒素的作用 ,并且HDL是血浆中与内毒素结合的主要组分。LFF参与HDL与LPS的结合过程。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白 抗内毒素作用 超速离心 血浆 脂蛋白
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携带Kringle 5基因重组腺病毒的构建及其对荷肺癌小鼠生存期的作用 被引量：1
9
作者 刘岩 刘芳 +5 位作者 叶迅 董继斌 陆琴 赵毅 李秋华 陈红专 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第3期254-258,共5页
目的:构建携带人纤溶酶原Kringle 5(K5)基因重组腺病毒并观察其在小鼠肺癌细胞中的表达和对荷TC-1瘤小鼠的生存期的影响。方法:构建携带人纤溶酶原K5基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1α-K5,用RT-PCR法检测腺病毒感染TC-1细胞后K5 mRNA的表... 目的:构建携带人纤溶酶原Kringle 5(K5)基因重组腺病毒并观察其在小鼠肺癌细胞中的表达和对荷TC-1瘤小鼠的生存期的影响。方法:构建携带人纤溶酶原K5基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1α-K5,用RT-PCR法检测腺病毒感染TC-1细胞后K5 mRNA的表达,用免疫沉淀和Western bloting法检测腺病毒感染TC-1细胞后K5蛋白的表达。建立荷TC-1小鼠肺癌C57BL/6小鼠模型,观察重组腺病毒对荷瘤小鼠生存期的影响。取肿瘤组织做免疫组织化学染色并计数微血管密度。结果:携带K5基因的人V型腺病毒能有效感染小鼠肺癌TC-1细胞,在转录和翻译水平进行表达,能有效延长荷瘤鼠的生存期并降低肿瘤微血管密度。结论:腺病毒可作为便捷的载体携带K5基因感染肿瘤细胞,分泌表达K5蛋白,延长荷瘤小鼠生存期,可能与其通过抑制肿瘤区血管生成、遏制肿瘤区血供有关。 展开更多
关键词 腺病毒 KRINGLE 5 血管生成 TC-1
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携带K5基因突变体的腺病毒构建及K5蛋白表达 被引量：1
10
作者 刘岩 刘芳 +4 位作者 叶迅 董继斌 陆琴 李秋华 陈红专 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期852-856,共5页
目的对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5(K5)基因进行突变,构建于重组腺病毒中,并观察突变后K5蛋白的表达情况。方法用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变,分别构建携带K5基因和突变后的K5m基因表达框的腺病毒... 目的对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5(K5)基因进行突变,构建于重组腺病毒中,并观察突变后K5蛋白的表达情况。方法用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变,分别构建携带K5基因和突变后的K5m基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1-αK5/K5m;用RT-PCR法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5和K5m mRNA的表达;用免疫沉淀和Western blot法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5蛋白和突变后K5蛋白的表达。结果成功对K5基因进行点突变,携带K5突变基因腺病毒K5蛋白表达量明显多于携带未突变K5基因腺病毒。结论对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变能提高腺病毒介导的K5蛋白分泌表达量,为进一步以腺病毒为载体携带K5基因在眼部新生血管异常增生性疾病的实验研究提供基础。 展开更多
关键词 腺病毒 KRINGLE5 Furin蛋白酶
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