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肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达变化 被引量:3
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作者 董兴刚 安增梅 +1 位作者 顾建新 杨海春 《中医药学刊》 2003年第9期1511-1511,共1页
目的 :探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法 :将实验动物分为二组 :(1)正常对照组 ;(2 )肾阳虚证大鼠模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northernblot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果 :肾阳虚证大... 目的 :探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法 :将实验动物分为二组 :(1)正常对照组 ;(2 )肾阳虚证大鼠模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northernblot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果 :肾阳虚证大鼠模型组 ,肾病理损伤 ,肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达上调。结论 :肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达明显上调。 展开更多
关键词 肾阳虚证 肾小球硬化 Ⅲ型胶原 基因表达
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β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究
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作者 沈爱国 何江虹 +3 位作者 丁斐 朱敏 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期277-282,共6页
为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1... 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 展开更多
关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 亚细胞结构 定位 肝癌细胞
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A549细胞中过表达p16^(INK4A)引起细胞衰老样表型的研究
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作者 胡匀 罗凌枫 +1 位作者 颜峻 顾建新 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期111-114,共4页
目的 研究p16 INK4A对A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3 p16质粒转染 p16基因缺失的A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系并通过Northernblot和Westernblot鉴定 p16基因的异位表达 ,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化 ,利... 目的 研究p16 INK4A对A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3 p16质粒转染 p16基因缺失的A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系并通过Northernblot和Westernblot鉴定 p16基因的异位表达 ,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化 ,利用Westernblot和SA β gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化。结果 证实了在A5 4 9中 p16 INK4A能稳定表达。p16 INK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变 ,Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在。发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型 ,如细胞体积变大 ,细胞形态呈明显的扁平状态 ,并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色。结论 在A5 4 9细胞中表达 p16 INK4A能使细胞发生衰老样表型并提示 p16 展开更多
关键词 A549细胞 表达 p16^ INK4A细胞 衰老
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TGF-β1对大鼠系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响 被引量:9
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作者 林文生 张农 +2 位作者 张颂文 顾建新 郭慕依 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期213-215,共3页
目的 通过对大鼠系膜细胞转染TGF β1基因和反义TGF β1基因 ,观察该细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响。方法 采用MTT、细胞计数和流式细胞仪检测细胞增殖 ;Northernblot和Westernblot法检测其纤溶酶原激活物抑制剂 1(PA... 目的 通过对大鼠系膜细胞转染TGF β1基因和反义TGF β1基因 ,观察该细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响。方法 采用MTT、细胞计数和流式细胞仪检测细胞增殖 ;Northernblot和Westernblot法检测其纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的表达 ;酶谱分析法检测其纤溶酶原激活物 (tPA)活性。结果 过表达TGF β1的系膜细胞生长受抑制 ,其PAI 1mRNA和蛋白表达增强 ,而tPA酶活性则降低 ;而低表达TGF β1的系膜细胞增殖加速 ,其PAI 1mRNA和蛋白表达降低 ,tPA酶活性增强。结论 TGF β1可通过对大鼠系膜细胞增殖、纤溶酶原激活物及其抑制因子表达的影响 。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 转化生长因子-Β1 细胞增殖 纤溶酶原激活物抑制剂-1 纤溶酶原激活性 大鼠
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Schwann细胞表达β1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ对神经元轴突生长的影响 被引量:4
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作者 沈爱国 姚登兵 +2 位作者 丁斐 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-22,共6页
为了探讨周围神经Schwann细胞中不同β1,4半乳糖基转移酶-1(β-1,4-GalT-I)表达水平对神经元轴突生长的影响,本实验首先构建了正、反义β-1,4-GalT-I表达质粒,然后将构建的不同浓度的正、反义表达质粒超表达于分离、纯化的大鼠Schwann细... 为了探讨周围神经Schwann细胞中不同β1,4半乳糖基转移酶-1(β-1,4-GalT-I)表达水平对神经元轴突生长的影响,本实验首先构建了正、反义β-1,4-GalT-I表达质粒,然后将构建的不同浓度的正、反义表达质粒超表达于分离、纯化的大鼠Schwann细胞,最后将转染的Schwann细胞与分离的大鼠背根神经节共培养;根据共培养神经元轴突延伸的数目和面积,分析Schwann细胞中不同β-1,4-GalT-I表达水平对神经元轴突生长的影响。结果发现:转染正义β-1,4-GalT-I的Schwann细胞能促进共培养神经节神经元轴突的长出和延伸。在一定的转染浓度内,这种促神经生长作用随转染浓度增大而增强,而转染反义β-1,4-GalT-I却有相反的作用。提示周围神经Schwann细胞中表达β-1,4-GalT-I可能在维持正常神经的功能和促进损伤神经的修复发挥重要作用。 展开更多
关键词 SCHWANN细胞 表达 β1 4半乳糖基转移酶-I 背根神经节 大鼠 神经元轴突 生长
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轴突导向分子及受体结构与功能进展 被引量:3
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作者 张勇 陈淳 +1 位作者 徐晋麟 顾建新 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期318-321,共4页
在神经发育过程中 ,轴突导向分子引导轴突选择正确途径 ,从而成功到达靶区 .近年有关轴突导向分子及其受体的研究进展迅速 ,主要介绍了Netrin DCC和UNC5 ,semaphorin neuropilins和 plexins ,Slit robo,Eph受体酪氨酸激酶及其配体的结... 在神经发育过程中 ,轴突导向分子引导轴突选择正确途径 ,从而成功到达靶区 .近年有关轴突导向分子及其受体的研究进展迅速 ,主要介绍了Netrin DCC和UNC5 ,semaphorin neuropilins和 plexins ,Slit robo,Eph受体酪氨酸激酶及其配体的结构和功能 . 展开更多
关键词 轴突导向分子 Netrin-DCC UNC5 受体 神经元
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N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化 被引量:1
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作者 沈爱国 严美娟 +3 位作者 龚蕾蕾 关晓颖 程纯 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期220-224,共5页
为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中... 为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在。以扩增的 c DNA片断标记探针 ,Northern blot分析β-1,4-Gal T- 、 、 m RNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的表达变化。结果表明 :通过 RT-PCR方法 ,检测到 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在 ;采用 Northern blot方法 ,发现β-1,4-Gal T- 、 、 在正常大鼠坐骨神经中有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化 ,但三种同功酶的表达变化各不相同。结论 :本实验发现 β-1,4-Gal T- 、 、 在坐骨神经有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示与 展开更多
关键词 大鼠 坐骨神经 RT-PCR Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 蛋白修饰
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地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用 被引量:1
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作者 沈爱国 龚蕾蕾 +3 位作者 丁斐 严美娟 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期365-368,共4页
为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- ... 为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。 展开更多
关键词 地高辛标记 小鼠 β—1 4—半乳糖基转移酶I RNA探针 RNA原位杂交探针 RT—PCR
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β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化
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作者 沈爱国 周鸣鸣 +3 位作者 丁斐 顾晓松 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期272-276,共5页
为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键... 为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1~ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1。 展开更多
关键词 β—1 4-半乳糖苷键 周围神经损伤 表达变化 蓖麻凝集素-1
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