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卵黄蛋白原1(vtg1)启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因斑马鱼的构建被引量：12: 1; 作者陈浩杨健 +3 位作者王跃祥蒋璆徐绘宋后燕《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期965-970,共6页; 环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达... 展开更多; 关键词转基因斑马鱼绿色荧光蛋白卵黄蛋白原启动子环境雌激素; 在线阅读下载PDF 职称材料

Lys_(10)-PAI-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和凝胶阻滞实验被引量：3: 2; 作者孙兴会李平 +5 位作者张宇清谭理王霞侯敏陈怡韵朱运松《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期457-462,共6页; 用PCR方法构建 10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物 1的融合基因Lys10 PAI 1,并克隆于pET2 8a(+ )和pET32a(+ )原核表达载体 .将重组表达质粒pET32 PAI和pET2 8 PAI转化大肠杆菌BL2 1(DE3) .IPTG诱导后可获得分子量分别为 6 3kD和 4 ... 展开更多; 关键词纤溶酶原激活剂抑制物-1 融合基因凝胶阻滞表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定被引量：2: 3; 作者王霞侯敏 +4 位作者孙兴会张宇清李平谭理朱运松《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期61-66,共6页; 为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物 2型(PAI 2 )突变体所构成的融合蛋白基因 ,并在Pichiapastoris中表达 ,应用PCR获得了人ATF PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF PAI2CD) ,将其克隆到酵母表达载... 展开更多; 关键词 ATF-PAI2CD 融合蛋白基因毕赤酵母克隆表达鉴定尿激酶型纤溶酶原激活物; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导的uPAR反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭: 4; 作者孙兴会谭理 +5 位作者李平张宇清王霞侯敏宋后燕朱运松《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期761-766,共6页; 为了观察尿激酶受体(uPAR)反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用PCR方法扩增uPARcDNA 5′端 -4 6bp～ +45 4bp一段长 5 0 0bp的序列,利用DNA重组技术将其克隆到病毒载体pAdeno X中,构建出重组腺病毒载体pAdeno X uPAR( - )和pAdeno ... 展开更多; 关键词腺病毒介导反义核酸抑制肿瘤细胞腺病毒尿激酶受体; 在线阅读下载PDF 职称材料

Miyabenol C和kobophenol A防治骨质疏松作用机制的初步研究: 5; 作者田春艳高海东 +2 位作者徐光胡昌奇宋后燕《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第2期120-123,共4页; 目的　研究MiyabenolC(MiyC)和KobophenolA(KobA)的选择性雌激素受体调节剂 (se lectiveestrogenreceptormodulators,SERMs)的性质及其在防治骨质疏松中的机制。方法　运用MTT实验 ,检测它们对类成骨细胞和子宫内膜癌细胞增殖的影响 ,... 展开更多; 关键词 MiyabenolC kobophenolA 骨质疏松作用机制 IL-6基因植物雌激素; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名卵黄蛋白原1(vtg1)启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因斑马鱼的构建被引量：12: 1; 作者陈浩杨健王跃祥蒋璆徐绘宋后燕; 机构复旦大学上海医学院分子遗传学教研室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期965-970,共6页; 基金上海市自然科学基金重点项目(03DZ14020)~~; 文摘环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达.用1ng/L的17!-炔雌醇(17'-ethynylestradiol,EE2)诱导4天后,仔鱼肝脏中出现绿色荧光.RT-PCR和整体原位杂交实验证实,仔鱼体内EGFP和vtg1的时空表达模式相同.通过在显微镜下观察转基因鱼的绿色荧光,可以直观判断水环境中是否含有雌激素活性物质.该研究为环境雌激素的监测提供了一种简便直观的新型工具.; 关键词转基因斑马鱼绿色荧光蛋白卵黄蛋白原启动子环境雌激素; Keywords transgenic zebrafish, green fluorescent protein, vitellogenin, promoter, environmental estrogens; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Lys_(10)-PAI-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和凝胶阻滞实验被引量：3: 2; 作者孙兴会李平张宇清谭理王霞侯敏陈怡韵朱运松; 机构复旦大学上海医学院分子遗传教研室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期457-462,共6页; 基金国家自然科学基金项目 (No .3 0 170 3 98)~~; 文摘用PCR方法构建 10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物 1的融合基因Lys10 PAI 1,并克隆于pET2 8a(+ )和pET32a(+ )原核表达载体 .将重组表达质粒pET32 PAI和pET2 8 PAI转化大肠杆菌BL2 1(DE3) .IPTG诱导后可获得分子量分别为 6 3kD和 4 3kD的目的蛋白 ,表达蛋白占菌体蛋白2 0 %以上 ,大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物经变性、复性、超滤、透析和亲和层析等步骤 ,可以得到纯化的Trx·PAI 1和rPAI 1重组蛋白 .Western印迹结果表明 ,目的蛋白具有人PAI 1的抗原性 .凝胶阻滞实验发现 ,纯化的重组蛋白在一定条件下 ,可以与质粒结合 ,使质粒的迁移率明显改变 .研究结果表明 ,Trx·PAI 1和rPAI; 关键词纤溶酶原激活剂抑制物-1 融合基因凝胶阻滞表达纯化; Keywords plasminogen activator inhibitor 1, gel retardation experiment, fused gene, expression, purification; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R394.8 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定被引量：2: 3; 作者王霞侯敏孙兴会张宇清李平谭理朱运松; 机构复旦大学上海医学院分子遗传教研室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期61-66,共6页; 基金国家自然科学基金 (No.3 0 170 3 98)资助~~; 文摘为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物 2型(PAI 2 )突变体所构成的融合蛋白基因 ,并在Pichiapastoris中表达 ,应用PCR获得了人ATF PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF PAI2CD) ,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K ,获得融合基因表达质粒pZWY ATF PAI2CD .该质粒转化毕赤酵母菌GS115 ,用G4 18 YPD平板筛选高拷贝转化子 ,然后用甲醇诱导表达 .工程菌用摇瓶发酵 ,表达产物ATF PAI2CD占培养液中总蛋白 5 0 %以上 .经硫酸铵沉淀、分子筛和离子交换层析纯化得到的目标表达产物纯度达 95 % .Western印迹检测具有PAI 2与uPA的免疫原性 ,经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 .经流式细胞仪 (FCM )检测 ,能与肿瘤细胞特异性结合 .结果表明 ,ATF PAI2CD融合蛋白成功地在毕赤酵母中表达 ,且具有抑制uPA及与肿瘤细胞表面uPAR特异性结合的双重功能 .提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景 .; 关键词 ATF-PAI2CD 融合蛋白基因毕赤酵母克隆表达鉴定尿激酶型纤溶酶原激活物; Keywords ATF-PAI2CD, fusion protein, Pichia pastoris, tumor invasion and metastasis; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导的uPAR反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭: 4; 作者孙兴会谭理李平张宇清王霞侯敏宋后燕朱运松; 机构复旦大学上海医学院分子遗传教研室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期761-766,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(3 0 170 3 98)~~; 文摘为了观察尿激酶受体(uPAR)反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用PCR方法扩增uPARcDNA 5′端 -4 6bp～ +45 4bp一段长 5 0 0bp的序列,利用DNA重组技术将其克隆到病毒载体pAdeno X中,构建出重组腺病毒载体pAdeno X uPAR( - )和pAdeno X uPAR( +).线性化后的重组腺病毒载体转染HEK2 93细胞 7天后,可以获得滴度分别为 1 5× 10 8pfu/ml和 0 5× 10 8pfu/ml的uPAR反义和正义核酸表达重组腺病毒,分别命名为Ad uPAR( -)和Ad uPAR( +).以不同的病毒感染指数(MOI)感染人肺巨细胞癌高转移株 95D肿瘤细胞,3天后用RNA印迹法可以检测肿瘤细胞uPAR正义和反义核酸表达水平,随着MOI的升高,Ad uPAR( - )感染的肿瘤细胞uPAR蛋白水平逐渐下降,肿瘤细胞的体外侵袭能力也明显下降,而感染Ad uPAR( +)的肿瘤细胞无明显变化.结果表明,重组腺病毒可以表达uPAR正义和反义核酸,uPAR反义核酸可以明显抑制人肺巨细胞癌高转移株 95D肿瘤细胞在体外的侵袭能力.; 关键词腺病毒介导反义核酸抑制肿瘤细胞腺病毒尿激酶受体; Keywords urokinase receptor antisense gene invasiveness cancer cells adenovirus; 分类号 R730 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Miyabenol C和kobophenol A防治骨质疏松作用机制的初步研究: 5; 作者田春艳高海东徐光胡昌奇宋后燕; 机构复旦大学上海医学院分子遗传教研室山东大学齐鲁医院普外科; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第2期120-123,共4页; 文摘目的　研究MiyabenolC(MiyC)和KobophenolA(KobA)的选择性雌激素受体调节剂 (se lectiveestrogenreceptormodulators,SERMs)的性质及其在防治骨质疏松中的机制。方法　运用MTT实验 ,检测它们对类成骨细胞和子宫内膜癌细胞增殖的影响 ,以及半定量RT PCR技术检测它们对IL 6基因转录水平的影响。结果　MiyC和KobA对大鼠的类成骨细胞有促增殖作用 ,对子宫内膜癌细胞无促增殖作用 ,使IL 6的mRNA水平降低。结论　MiyC和KobA具有SERMs的特点 ,具有防治骨质疏松的作用。; 关键词 MiyabenolC kobophenolA 骨质疏松作用机制 IL-6基因植物雌激素; Keywords Phytoestrogen IL-6 gene Osteoporosis; 分类号 R681 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	卵黄蛋白原1(vtg1)启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因斑马鱼的构建	陈浩杨健王跃祥蒋璆徐绘宋后燕	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2006	12	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Lys_(10)-PAI-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和凝胶阻滞实验	孙兴会李平张宇清谭理王霞侯敏陈怡韵朱运松	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定	王霞侯敏孙兴会张宇清李平谭理朱运松	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	腺病毒介导的uPAR反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭	孙兴会谭理李平张宇清王霞侯敏宋后燕朱运松	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Miyabenol C和kobophenol A防治骨质疏松作用机制的初步研究	田春艳高海东徐光胡昌奇宋后燕	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料