胚胎脑细胞移植促进脑损伤修复的基础研究

1

作者 王传松 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期87-87,共1页

胚胎脑细胞移植促进脑损伤修复的基础研究ＩｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆＦｅｔａｌＣｅｒｅｂｒａｌＳｕｓｐｅｎｓｉｏｎＥｎｈａｎｃｅｄｔｈｅＲｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｏｆＢｒａｉｎＩｎｊｕｒｙ￥... 胚胎脑细胞移植促进脑损伤修复的基础研究ＩｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆＦｅｔａｌＣｅｒｅｂｒａｌＳｕｓｐｅｎｓｉｏｎＥｎｈａｎｃｅｄｔｈｅＲｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｏｆＢｒａｉｎＩｎｊｕｒｙ￥／／王传松，蔡文琴（第三军医大学基... 展开更多

关键词 颅脑损伤 修复术 胚胎脑细胞 脑细胞移植

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小肠组织中降钙素基因相关肽的放射免疫测定

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作者 吴康 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期123-126,共4页

小肠组织中降钙素基因相关肽的放射免疫测定吴康，蔡文琴（第三军医大学基础部组织胚胎学教研室）６３００３８降钙素基因相关肽（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）是近年来应用现代分子生物学... 小肠组织中降钙素基因相关肽的放射免疫测定吴康，蔡文琴（第三军医大学基础部组织胚胎学教研室）６３００３８降钙素基因相关肽（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）是近年来应用现代分子生物学技术新发现的生物活性肽（１）。大量... 展开更多

关键词 小肠 降钙素 基因相关肽 测定

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小剂量吗啡关节内注射用于膝关节镜术后镇痛的临床观察及机制探究 被引量：17

3

作者 袁红斌 王成才 +3 位作者 傅强 胡世杰 石学银 王新华 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2003年第11期667-669,共3页

目的 观察和对比小剂量吗啡关节内注射用于膝关节镜术后的镇痛效果和慢性炎症时膝关节滑膜组织μ阿片受体的表达。方法 采用随机分组,双盲研究。腰麻下行膝关节镜手术病人100例,随机分为吗啡组和对照组,每组50例。吗啡组手术后在关节内... 目的 观察和对比小剂量吗啡关节内注射用于膝关节镜术后的镇痛效果和慢性炎症时膝关节滑膜组织μ阿片受体的表达。方法 采用随机分组,双盲研究。腰麻下行膝关节镜手术病人100例,随机分为吗啡组和对照组,每组50例。吗啡组手术后在关节内注射盐酸吗啡1mg,对照组注射等体积的生理盐水,给药后8和24h在病人双足站立、膝关节伸展状态下进行视觉模拟评分(VAS),观察吗啡用于膝关节手术后的镇痛效果。膝关节内阿片受体免疫组化研究以成年人膝关节滑膜组织为研究对象,分为炎性组和对照组,每组20例。炎性组取自诊断为慢性膝关节炎需做全膝置换手术的病人,对照组取自健康成年人膝关节滑膜组织。采用免疫组化的方法测定μ阿片受体的表达情况。结果 给药后8和24h,吗啡组VAS评分为1.7±1.0和1.4±1.0,而对照组为3.7±1.5和2.4±1.3,吗啡组均显著低于相应的对照组,两组有显著差异。免疫组化结果显示,炎性组膝关节滑膜组织μ阿片受体光密度值、阳性细胞百分率较对照组显著增高(P<0.05)。结论 小剂量吗啡关节内注射可以有效缓解膝关节镜手术后的疼痛,其机制可能与膝关节组织阿片受体上调有关。 展开更多

关键词 小剂量 吗啡 关节内注射 膝关节镜 术后镇痛 临床观察

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小胶质细胞源性因子对培养星形胶质细胞的活化作用研究 被引量：5

4

作者 杨忠 蔡文琴 +1 位作者 马军 李成仁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期920-922,共3页

目的和方法 :本实验采用胶质细胞分离纯化培养、胶质原纤维酸性蛋白 (glialfibricacidicprotein ,GFAP)表达的免疫荧光流式细胞仪检测及 [3H]-TdR掺入等方法 ,观察离体条件下小胶质细胞条件培养液对星形胶质细胞增殖与GFAP表达的影响。... 目的和方法 :本实验采用胶质细胞分离纯化培养、胶质原纤维酸性蛋白 (glialfibricacidicprotein ,GFAP)表达的免疫荧光流式细胞仪检测及 [3H]-TdR掺入等方法 ,观察离体条件下小胶质细胞条件培养液对星形胶质细胞增殖与GFAP表达的影响。结果 :小胶质细胞条件培养液能明显促进培养星形胶质细胞的增殖和GFAP的表达。结论 :小胶质细胞源性因子能刺激星形胶质细胞的活化 。 展开更多

关键词 星形细胞 神经胶质增生 CNS 小胶质细胞源性因子 活化作用 细胞培养

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人皮下脂肪来源脂肪干细胞的分离培养及鉴定 被引量：9

5

作者 张迅轶 仵敏娟 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期813-816,共4页

目的:建立从切除得到的人皮下脂肪组织分离及培养脂肪干细胞(ADSC)的方法。方法:以人皮下脂肪组织为材料来源,分离、培养、扩增ADSC,并应用针对相对特异性分子的免疫组化、流式细胞术及多向诱导分化等方法鉴定干细胞特性。结果:本实验... 目的:建立从切除得到的人皮下脂肪组织分离及培养脂肪干细胞(ADSC)的方法。方法:以人皮下脂肪组织为材料来源,分离、培养、扩增ADSC,并应用针对相对特异性分子的免疫组化、流式细胞术及多向诱导分化等方法鉴定干细胞特性。结果:本实验培养的ADSC具有干细胞生长特性并表达相对特异分子,有多向分化的潜能,并且具有遗传稳定性。结论:从切取的人皮下脂肪组织可成功分离得到ADSC,为组织工程提供了新的来源丰富、提取方便的种子细胞。 展开更多

关键词 脂肪组织 间质干细胞 细胞分离 组织工程

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人胎儿小肠肌间神经丛神经元群体的计算机三维重建 被引量：4

6

作者 杨恬 蔡文琴 +1 位作者 张家树 李时光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期182-184,共3页

利用在微机系统上建立的三维重建实验方法对胎龄４、７、１０月的８例人胎儿小肠肌间神经节微构筑进行了研究，并测定了有关的三维形态参数。

关键词 胎儿 肠肌丛 神经节 计算机 重建

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牛磺酸减轻兴奋性氨基酸对培养新生大鼠小脑皮层神经元的损害 被引量：8

7

作者 杨忠 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期22-25,共4页

取新生大鼠小脑皮层进行体外神经细胞培养，用兴奋性氨基酸建立离体的神经元损害模型，观察了不同浓度牛磺酸对兴奋性氨基酸神经毒性的影响。结果表明：５００μｍｏｌ／Ｌ谷氨酸或使君子酸均能造成培养神经元大量死亡，培养液中乳酸脱... 取新生大鼠小脑皮层进行体外神经细胞培养，用兴奋性氨基酸建立离体的神经元损害模型，观察了不同浓度牛磺酸对兴奋性氨基酸神经毒性的影响。结果表明：５００μｍｏｌ／Ｌ谷氨酸或使君子酸均能造成培养神经元大量死亡，培养液中乳酸脱氢酶含量同步明显增高，在培养液中加入牛磺酸能明显降低神经细胞死亡率，其中以２．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度效果最为明显。揭示牛磺酸可拮抗兴奋性氨基酸神经毒性。 展开更多

关键词 牛磺酸 兴奋性 氨基酸 神经元

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P44/42 MAPK和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的表达 被引量：2

8

作者 傅志超 蔡建明 +5 位作者 韩玲 王凤玫 黄定德 黄越承 李百龙 高建国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期199-203,共5页

为了观察P4 4 / 4 2MAPK和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的变化情况 ,首先利用γ射线诱发Balb/C小鼠发生白血病 ,成功地建立了辐射致癌模型 .在此基础上 ,将动物分为三组 :癌变组、辐射未癌变组和对照组 ,利用免疫沉淀和免... 为了观察P4 4 / 4 2MAPK和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的变化情况 ,首先利用γ射线诱发Balb/C小鼠发生白血病 ,成功地建立了辐射致癌模型 .在此基础上 ,将动物分为三组 :癌变组、辐射未癌变组和对照组 ,利用免疫沉淀和免疫印迹技术 ,检测各组骨髓细胞的P4 4 / 4 2MAPK和STAT3蛋白及磷酸化水平变化情况 .结果显示 :癌变组骨髓细胞P4 4 / 4 2MAPK蛋白及磷酸化水平均高于辐射未癌变组和对照组 (P <0 0 5 ) ;而STAT3蛋白及磷酸化水平在三组骨髓细胞之间无显著差异 (P >0 0 5 ) .说明Ras/P4 4 / 4 2MAPK途径可能在γ射线诱发的小鼠白血病中发挥一定的作用 。 展开更多

关键词 P44/42MAPK STAT3 白血病 骨髓细胞 辐射致癌 信号转导 肿瘤 生长因子 丝裂活化蛋白激酶

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抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体可变区基因的克隆和序列分析 被引量：3

9

作者 付建芳 黄威权 +1 位作者 夏永娟 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期57-59,共3页

　目的: 克隆并分析抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体(mAb)VH及VL基因。方法: 从分泌抗溶藻弧菌独特型mAb的杂交瘤细胞株 (AL1 )中提取总RNA。利用RT- PCR技术,克隆抗溶藻弧菌独特型mAbVH 和VL基因, 并将其重组入PMD18 Tvector中进行测序分... 　目的: 克隆并分析抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体(mAb)VH及VL基因。方法: 从分泌抗溶藻弧菌独特型mAb的杂交瘤细胞株 (AL1 )中提取总RNA。利用RT- PCR技术,克隆抗溶藻弧菌独特型mAbVH 和VL基因, 并将其重组入PMD18 Tvector中进行测序分析。结果: VH基因序列全长为369bp, 编码 123个氨基酸; VL基因序列全长为 339bp, 编码113个氨基酸。通过国际联机检索及Kabat库分析, 二者均符合小鼠IgGV区基因的特征, 含有 4个框架区 (FR), 3个抗原互补决定区 (CDR)及两个抗体特征性的半胱氨酸残基。结论: 抗溶藻弧菌独特型mAb的VH和VL基因的克隆成功,为抗溶藻弧菌独特型mAb基因工程疫苗的构建奠定了基础。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 单克隆抗体 基因克隆 序列测定 VL基因

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P物质在脊髓痛觉调制中作用的研究 被引量：4

10

作者 阮怀珍 李希成 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期308-308,共1页

Ｐ物质在脊髓痛觉调制中作用的研究ＡｓｔｕｄｙｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｓｕｂｓｔａｎｃｅＰｏｎｐａｉｎｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄ阮怀珍，李希成（第三军医大学基础部生理教研室）６３００３８蔡文琴（第三军医大... Ｐ物质在脊髓痛觉调制中作用的研究ＡｓｔｕｄｙｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｓｕｂｓｔａｎｃｅＰｏｎｐａｉｎｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄ阮怀珍，李希成（第三军医大学基础部生理教研室）６３００３８蔡文琴（第三军医大学基础部组织胚胎学教研室）６３００... 展开更多

关键词 P物质 蛋白质 脊髓 痛阈

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CNTF对应激大鼠行为障碍和海马CA1神经元损害的作用 被引量：8

11

作者 严进 路长林 +7 位作者 汤淑萍 何成 王成海 王雪琦 黄爱军 孟玲 鲍璇 张铁峰 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2000年第2期210-216,共7页

实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化... 实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化，及双侧海马注射睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对它的影响。结果表明，急性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动增加，海马ＣＡ１神经元形态无明显变化；慢性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动减少，海马ＣＡ１神经元出现明显的损伤性形态变化；睫状神经营养因子对对照组大鼠和急性应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态均无明显作用，但可显著减轻慢性应激大鼠海马ＣＡ１神经元损伤程度，改善其行为障碍。实验结果提示睫状神经营养因子可能通过保护海马神经元从而改善慢性应激大鼠的行为障碍。 展开更多

关键词 CNTF 应激 海马 CA1神经元

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免疫联合四氯化碳方法形成大鼠亚急性肝细胞病变 被引量：1

12

作者 张罗修 吴其俭 +3 位作者 曹致芳 成令忠 钟翠平 顾云娣 《中国药理学通报》 CAS 1988年第1期57-58,22,共3页

肝细胞在炎症或其它因素反复破坏后会引起机体对自身肝细胞的免疫反应,加重肝脏的损害。反之,在免疫性肝脏损害的基础上是否可能提高对肝毒剂的敏感性,这是一个值得探索的问题。已知以同种肝细胞为抗原,以完全福氏佐剂配制,可以引起免... 肝细胞在炎症或其它因素反复破坏后会引起机体对自身肝细胞的免疫反应,加重肝脏的损害。反之,在免疫性肝脏损害的基础上是否可能提高对肝毒剂的敏感性,这是一个值得探索的问题。已知以同种肝细胞为抗原,以完全福氏佐剂配制,可以引起免疫性肝脏损害。本文比较四氯化碳（CCl4）、肝细胞免疫及CCl4联合肝细胞免疫对肝脏的影响。 展开更多

关键词 大鼠 四氯化碳 氯代烃 肝脏损害 肝毒剂 完全福氏佐剂 亚急性

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体外培养人脐静脉内皮细胞合成与分泌心钠素的初步观察 被引量：4

13

作者 姚忠祥 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期326-327,共2页

采用体外细胞培养、免疫细胞化学（ＩＣＣ）染色和放射免疫（ＲＩＡ）测定等技术，从定性和定量分析等方面对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）及心钠素（ＡＮＰ）进行研究，结果显示：体外培养第５天的ＨＵＶＥＣ，ＩＣＣ染色呈ＡＮＰ样... 采用体外细胞培养、免疫细胞化学（ＩＣＣ）染色和放射免疫（ＲＩＡ）测定等技术，从定性和定量分析等方面对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）及心钠素（ＡＮＰ）进行研究，结果显示：体外培养第５天的ＨＵＶＥＣ，ＩＣＣ染色呈ＡＮＰ样免疫阳性反应；ＲＩＡ测定作为空白对照的未培养细胞的ＲＰＭＩ－１６４０细胞培养液，其中不含ＡＮＰ，而培养了ＨＵＶＥＣ的细胞培养上清液中ＡＮＰ含量为２５．２±２．９ｎｇ／１０＾５个细胞。 展开更多

关键词 脐静脉 内皮细胞 细胞培养 心钠素

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肾上腺髓质脑内移植后帕金森病鼠纹状体内单胺类神经递质的变化 被引量：4

14

作者 杨辉 张可成 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第4期292-295,共4页

采用高压液相色谱──电化学检测法测定纹状体内单胺类递质多巴胺及其代谢产物３，４－二羟基苯乙酸、去甲肾上腺素，以研究肾上腺髓质脑内移植后帕金森病（ＰＤ）鼠纹状体内部分神经生化改变。结果发现肾上腺髓质脑内移植可以基本矫正... 采用高压液相色谱──电化学检测法测定纹状体内单胺类递质多巴胺及其代谢产物３，４－二羟基苯乙酸、去甲肾上腺素，以研究肾上腺髓质脑内移植后帕金森病（ＰＤ）鼠纹状体内部分神经生化改变。结果发现肾上腺髓质脑内移植可以基本矫正ＰＤ鼠异常旋转行为、弥补单胺类神经递质缺乏。研究结果提示肾上腺髓质脑内移植后可能与宿主神经组织形成神经再支配，肾上腺髓质脑内移植是治疗ＰＤ的较有效的手段。 展开更多

关键词 肾上腺髓质 脑内移植 神经递质 震颤性麻痹

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黑素瘤细胞诱导人胚上皮干细胞的恶性转化 被引量：2

15

作者 孙红玉 胡凯猛 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1161-1164,共4页

目的:探索体外肿瘤微环境中正常成体干细胞是否可以发生恶性转化而具有相关肿瘤学特性。方法:利用共培养池建立黑素瘤A-375细胞诱导表皮干细胞转化的模型,应用相差显微镜观察诱导前后表皮干细胞形态变化,免疫荧光法检测诱导后表皮干细... 目的:探索体外肿瘤微环境中正常成体干细胞是否可以发生恶性转化而具有相关肿瘤学特性。方法:利用共培养池建立黑素瘤A-375细胞诱导表皮干细胞转化的模型,应用相差显微镜观察诱导前后表皮干细胞形态变化,免疫荧光法检测诱导后表皮干细胞E-钙黏着蛋白、肿瘤相关抗原P53突变蛋白的表达变化和双层软琼脂实验鉴定诱导后表皮干细胞克隆形成能力情况。结果:7d后与黑素瘤细胞A-375直接接触共培养的表皮干细胞开始克隆样生长,细胞E-钙黏着蛋白表达下降,部分细胞表达P53突变蛋白,软琼脂培养克隆形成率为0.55%。结论:表皮干细胞经黑素瘤细胞直接诱导后,可以具有肿瘤细胞的相关生物学特性。结果表明,肿瘤微环境可以造成干细胞自我更新能力的失控。 展开更多

关键词 黑素瘤 表皮干细胞 肿瘤干细胞 钙黏着蛋白 蛋白质P53 突变

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LIF受体胞内功能域调节白血病细胞增殖分化 被引量：2

16

作者 姚云 王静 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1165-1168,共4页

目的:探讨白血病抑制因子受体(LIFR)浕亚基胞内游离功能域gp190CT3对启动靶细胞内信号转导通路(JAK/STAT3),使白血病细胞HL-60向粒细胞方向分化的作用。方法:采用免疫细胞化学、RT-PCR以及流式细胞术等技术和方法,观测pcDNA3.0-gp190CT... 目的:探讨白血病抑制因子受体(LIFR)浕亚基胞内游离功能域gp190CT3对启动靶细胞内信号转导通路(JAK/STAT3),使白血病细胞HL-60向粒细胞方向分化的作用。方法:采用免疫细胞化学、RT-PCR以及流式细胞术等技术和方法,观测pcDNA3.0-gp190CT3重组质粒稳定转染CHO细胞中靶基因的表达;以及稳定转染的CHO细胞与HL-60细胞共培养后,HL-60细胞的形态学、STAT3磷酸化水平、细胞表面抗原CD15表达的变化。结果:(1)重组质粒转染的CHO细胞表达目的基因gp190CT3,并获得稳定表达目的基因的细胞株;(2)重组质粒转染的CHO细胞与野生型HL-60细胞共培养可使HL-60细胞体积变大,形态不规则,STAT3磷酸化水平和细胞表面抗原CD15表达升高。结论:LIF受体α亚基胞内游离片段表达的功能蛋白gp190CT3能够启动靶细胞内JAK/STAT3信号转导通路,从而发挥其调节白血病细胞增殖分化的效能。 展开更多

关键词 白血病 白血病抑制因子受体 细胞分化 信号转导

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溶藻弧菌抗独特型抗体单链抗体基因真核表达载体的构建 被引量：2

17

作者 付建芳 黄威权 +2 位作者 秦红 金晓航 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期767-768,771,共3页

目的:构建溶藻弧菌抗独特型抗体的单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母分泌型表达载体。方法:从分泌溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中克隆该抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因(GenBank acces-sion No:DQ011530和DQ01153... 目的:构建溶藻弧菌抗独特型抗体的单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母分泌型表达载体。方法:从分泌溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中克隆该抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因(GenBank acces-sion No:DQ011530和DQ011531),并通过基因重组为scFv基因。然后将其克隆入毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K中,经序列测定后,电转化入毕赤酵母菌SMD1168中,将经表型筛选和G418抗性筛选的重组酵母菌株进行PCR鉴定。结果:获得毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K-scFv,经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母菌株。结论:成功地构建溶藻弧菌抗独特型抗体的scFv基因的真核表达载体,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 单链抗体 真核表达 毕赤酵母菌

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抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体单链抗体ScFv的构建和表达 被引量：2

18

作者 付建芳 黄威权 +1 位作者 夏永娟 杨安钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期735-738,共4页

目的:克隆抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体ScFv。方法:从分泌抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,克隆该抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过基因重组构建VH-VL的表达载体pTAT-AL1,转... 目的:克隆抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体ScFv。方法:从分泌抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,克隆该抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过基因重组构建VH-VL的表达载体pTAT-AL1,转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达。结果:VH基因序列全长369碱基对,编码123个氨基酸,VL基因序列全长339碱基对,编码113个氨基酸,二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FRs)、3个抗原互补决定区(CDRs)及抗体特征性的两个半胱氨酸残基。ELISA测定显示基因工程抗体ScFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力。结论:成功构建了抗溶藻弧菌独特型抗体ScFv基因并表达于细菌壁膜间隙和包涵体中,为溶藻弧菌独特型抗体单链抗体ScFv成为新一代基因工程疫苗奠定了初步基础。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 单链抗体 基因工程疫苗

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人脐血管内皮细胞发育进程中心钠素的免疫组化观察 被引量：2

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作者 姚忠祥 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期237-238,共2页

应用免疫细胞化学（ＩＣＣ）染色技术，用抗心钠素（ＡＮＰ）血清对人胚胎发育不同时期的脐带血管进行免疫染色，观察结果：在第１４周（月经龄）时脐动静内皮细胞（ＨＵＡ／ＶＥＣ）即显阳性反应，并随胎龄增加而略微增强，至第３２周... 应用免疫细胞化学（ＩＣＣ）染色技术，用抗心钠素（ＡＮＰ）血清对人胚胎发育不同时期的脐带血管进行免疫染色，观察结果：在第１４周（月经龄）时脐动静内皮细胞（ＨＵＡ／ＶＥＣ）即显阳性反应，并随胎龄增加而略微增强，至第３２周时阳性反应明显增强达高峰，维持至出生。人脐动脉内皮细胞（ＨＵＡＥＣ）与人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）之间存在明显差异。至于ＨＵＡ／ＶＥＣ及ＡＮＰ是否参与对脐血管舒缩的调节，尚有待进一步实验证实。 展开更多

关键词 心钠素 免疫细胞化学 内皮细胞 脐带血管

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显微吸收光度法测定细胞核DNA含量 被引量：2

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作者 胡庆沈 江兰英 +1 位作者 薛同一 徐胜 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1989年第1期50-54,共5页

用显微吸收光度计扫描法测定500个Feulgen染色的睾丸生精上皮细胞核DNA相对含量,数据经计算机处理后表明所测各倍体细胞的DNA含量比和它们实际含量比相符合。如采用内插生物标准来进行显微吸收光度法测试细胞核DNA相对含量,可成为一种... 用显微吸收光度计扫描法测定500个Feulgen染色的睾丸生精上皮细胞核DNA相对含量,数据经计算机处理后表明所测各倍体细胞的DNA含量比和它们实际含量比相符合。如采用内插生物标准来进行显微吸收光度法测试细胞核DNA相对含量,可成为一种方便有效的细胞分析技术。文中讨论了扫描法测量时影响测量值的一些因素。 展开更多

关键词 光度法 扫描法 DNA含量

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