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心血管疾病的分子生物学简介(2)──3 载脂蛋白基因异常表达引起的高脂血症和动脉粥样硬化及转基因技术在研究心血管疾病中的意义 被引量:4
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作者 陈保生 《中国循环杂志》 CSCD 1995年第2期65-68,共4页
心血管疾病的分子生物学简介(2)──3载脂蛋白基因异常表达引起的高脂血症和动脉粥样硬化及转基因技术在研究心血管疾病中的意义动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的形成因素涉及血管内膜的损伤、平滑肌细胞的... 心血管疾病的分子生物学简介(2)──3载脂蛋白基因异常表达引起的高脂血症和动脉粥样硬化及转基因技术在研究心血管疾病中的意义动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的形成因素涉及血管内膜的损伤、平滑肌细胞的增殖,也涉及血液组成成分的异常变化... 展开更多
关键词 心血管疾病 分子生物学 载脂蛋白 基因异常
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新世纪医学分子生物学的历史使命 被引量:1
2
作者 方福德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期303-305,共3页
关键词 医学分子生物学 分子生物学 生物大分子 结构
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外源性野生型p53基因对人喉癌等肿瘤细胞生长抑制的实验研究
3
作者 陈晓巍 刘德培 +2 位作者 王直中 刘庆辉 梁植权 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第10期51-54,共4页
以反转录病毒N2A为载体,使携带自身正调控序列的野生型p53基因反向插入N2A两端LTR间的XhoI位点,获得了野生型p53基因反转录病毒重组体,建立了产病毒的PA317细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有p5... 以反转录病毒N2A为载体,使携带自身正调控序列的野生型p53基因反向插入N2A两端LTR间的XhoI位点,获得了野生型p53基因反转录病毒重组体,建立了产病毒的PA317细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有p53基因异常的人喉癌细胞系(Hep2)和纤维肉瘤细胞系(MDAH041),Southern-blot分析证实野生型p53基因反转录病毒前病毒能稳定整合在受体细胞染色体基因组上并有表达。感染病毒后的肿瘤细胞恶性表型发生了逆转,在裸鼠体内形成生长缓慢的移植瘤或不形成移植瘤。 展开更多
关键词 P53基因 喉癌 肿瘤 细胞生长抑制
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人类基因组研究的主题:基因组医学与公共卫生——2004年亚太人类基因组与遗传学大会简介
4
作者 方福德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期709-714,共6页
关键词 人类基因组研究 基因组医学 公共卫生 2004年亚太人类基因组与遗传学大会
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我国人类疾病基因控制工程基础研究的近期进展
5
作者 方福德 public3.bta.net.cn 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期205-207,共3页
关键词 疾病基因控制工程 基因研究 进展
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单核苷酸多态性的研究进展 被引量:53
6
作者 杜玮南 孙红霞 方福德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期392-394,共3页
单核苷酸多态性 (SNP)是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的一种 DNA序列多态性。SNP现象在人类基因组中广泛存在 ,并具有很高的信息含量。目前已发现数万个 SNP标记 ,且有多个生物医学网站开辟了专页对其加以介绍。随着对 SN... 单核苷酸多态性 (SNP)是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的一种 DNA序列多态性。SNP现象在人类基因组中广泛存在 ,并具有很高的信息含量。目前已发现数万个 SNP标记 ,且有多个生物医学网站开辟了专页对其加以介绍。随着对 SNP检测和分析技术的进一步发展 ,尤其是与 DNA芯片等技术的结合 ,它已成为第三代遗传标记 ,初步满足对疾病相关基因定位研究的需要 ,尤其是对多基因遗传病高精度基因定位的要求 ,并将最终取代目前最常用的微卫星标记技术进入基因应用研究的领域。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 遗传标记 基因研究 DNA芯片
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去乙酰化酶SIRT1的研究进展 被引量:16
7
作者 陈厚早 张祝琴 +1 位作者 韦玉生 刘德培 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期441-447,共7页
去乙酰化酶Sir2基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用,可能是所有生物共同的寿命控制基因之一。去乙酰化酶(SIRT1)是SIR2的同源物,以许多非组蛋白和组蛋白为底物,与代谢综合征、基因稳定性、肿瘤,神经退... 去乙酰化酶Sir2基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用,可能是所有生物共同的寿命控制基因之一。去乙酰化酶(SIRT1)是SIR2的同源物,以许多非组蛋白和组蛋白为底物,与代谢综合征、基因稳定性、肿瘤,神经退行性疾病的发生相关。能量限制可通过增加SIRT1活性来延长啮鼠动物的寿命。因此,SIRT1可作为治疗不同疾病的靶点逐渐被人们所重视。 展开更多
关键词 去乙酰化酶 能量限制 衰老
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神经黏附分子NECL1抑制神经胶质瘤细胞的迁移、侵袭并诱导其分化 被引量:2
8
作者 阴彬 陈涛 +2 位作者 高静 袁建刚 彭小忠 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期669-673,795-796,共7页
目的在NECL1表达缺失的神经胶质瘤细胞系中探讨神经黏附分子NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响。方法在U251胶质瘤细胞系中,通过划痕及Transwell实验观察NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响,通过对细胞外金属蛋白酶活... 目的在NECL1表达缺失的神经胶质瘤细胞系中探讨神经黏附分子NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响。方法在U251胶质瘤细胞系中,通过划痕及Transwell实验观察NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响,通过对细胞外金属蛋白酶活性的检测证明NECL1恢复表达后对肿瘤侵袭能力的影响。利用不同培养密度的U251细胞,对NECL1恢复表达后细胞形态进行观察,并通过Western blot实验验证相关蛋白的表达。结果在NECL1表达缺失的胶质瘤细胞系U251中,恢复NECL1的表达后,肿瘤细胞的迁移及侵袭受到了抑制。NECL1恢复表达的U251细胞有向星形胶质细胞分化的趋势,星形胶质细胞标志蛋白神经胶质纤维酸性蛋白的表达上调。结论神经黏附分子NECL1作为一个潜在的胶质瘤抑制因子,对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力均有不同程度抑制作用,同时,NECL1具有诱导神经胶质瘤U251细胞向星形胶质细胞方向分化的潜能。 展开更多
关键词 神经胶质瘤细胞系U251 NECL1 转移 侵袭 星形胶质细胞
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酵母单杂交体系——一种研究DNA-蛋白质相互作用的有效方法 被引量:15
9
作者 廖名湘 方福德 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期388-391,共4页
酵母单杂交体系是借鉴酵母双杂交体系的基本原理 ,通过观察酵母细胞内报告基因的表达状况 ,研究DNA-蛋白质之间的相互作用。通过筛选 DNA文库可直接得到与靶序列相互作用的蛋白质基因序列 ,而无需分离、纯化蛋白 ,从而克服了体内研究的... 酵母单杂交体系是借鉴酵母双杂交体系的基本原理 ,通过观察酵母细胞内报告基因的表达状况 ,研究DNA-蛋白质之间的相互作用。通过筛选 DNA文库可直接得到与靶序列相互作用的蛋白质基因序列 ,而无需分离、纯化蛋白 ,从而克服了体内研究的局限性。目前酵母单杂交体系已被广泛应用于寻找与目的 DNA片段相互作用的蛋白质分子 ,该体系是一种用于研究 DNA-蛋白质之间的相互作用的有效方法。本文就酵母单杂交体系的原理、具体实现方法、在研究 DNA结合蛋白质中的应用及其优缺点等方面作一简要介绍。 展开更多
关键词 酵母单杂交体系 DNA-蛋白质 相互作用
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染色质免疫沉淀技术及其在基因表达调控研究中的初步应用 被引量:1
10
作者 张勇 程小款 +1 位作者 吴宁华 沈珝琲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期52-55,共4页
目的验证抑癌基因表达产物p53蛋白在体内是否结合于p21WAF1/CIP1基因的启动子区,并检测p53蛋白对热休克蛋白hsp90β基因启动子区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀(ChIP)及PCR技术检测特异基因调节序列,Western印迹分析p53蛋白。结果... 目的验证抑癌基因表达产物p53蛋白在体内是否结合于p21WAF1/CIP1基因的启动子区,并检测p53蛋白对热休克蛋白hsp90β基因启动子区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀(ChIP)及PCR技术检测特异基因调节序列,Western印迹分析p53蛋白。结果在p53抗体免疫沉淀的DNA片段中含有p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区p53蛋白结合序列,免疫沉淀样品中含有p53蛋白。结论p53蛋白在体内结合于p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区,参与两基因的表达调控。 展开更多
关键词 染色质免疫沉淀 hsp90β P53 P21^WAF1/CIP1
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疾病基因组学研究——后基因组时代的主旋律 被引量:1
11
作者 王琳芳 方福德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期217-218,共2页
关键词 后基因组学 人类基因组计划 病理学 疾病基因组学
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人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母P.pastoris中的表达、分泌和性质研究 被引量:1
12
作者 李旌军 黄秉仁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期893-898,共6页
为获得IGF-Ⅱ的高效表达,构建了其多拷贝、分泌型表达载体:含有5个串联的IGF-Ⅱ表达单元;由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达;利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌.线形化表达载体转化P.pastoris蛋白酶缺陷... 为获得IGF-Ⅱ的高效表达,构建了其多拷贝、分泌型表达载体:含有5个串联的IGF-Ⅱ表达单元;由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达;利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌.线形化表达载体转化P.pastoris蛋白酶缺陷型菌株后,筛选到有IGF-Ⅱ表达和分泌的阳性转化子;进一步优化表达、培养条件后,IGF-Ⅱ在高密度发酵上清中的产量可达60 m g/L.对P.pastoris产生的rhIGF-Ⅱ的性质分析表明,其具有正确的分子量,N 端和较好的生物活性. 展开更多
关键词 甲醇营养型酵母 分泌 IGF-Ⅱ 表达 性质
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白细胞介素2受体α基因表达中两组近端启动子活性的研究
13
作者 程小款 衡凤燕 +2 位作者 刘觉辉 吴宁华 沈珝琲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期40-40,共1页
关键词 启动子 转录调控 白细胞介素2受体α基因 基因表达
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阵发性睡眠性血红蛋白尿症发病机制研究动向
14
作者 张之南 崔毅 +3 位作者 杜涛 廖少希 李强 许彩民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期48-51,共4页
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH)发生机制一直是血液学、免疫学、生物化学家都有兴趣的研究课题,但百余年中仅近十年才有一些较重要的发现,对今后工作有所启示。
关键词 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 PIG-A基因 克隆优势
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DR4死亡结构域结合蛋白的初步研究
15
作者 李晓玲 刘彦信 +1 位作者 刘士廉 郑德先 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期310-314,共5页
目的克隆DR4死亡结构域的结合蛋白,为进一步研究DR4诱导细胞凋亡的信号传递途径提供条件。方法以TRAIL(TNF-relatedapoptosisinducingligand)死亡受体DR4的死亡结构域(DR4DD)为钓饵,采用酵母双杂交系统筛选人白细胞MATCHMAKERcDNA文库。... 目的克隆DR4死亡结构域的结合蛋白,为进一步研究DR4诱导细胞凋亡的信号传递途径提供条件。方法以TRAIL(TNF-relatedapoptosisinducingligand)死亡受体DR4的死亡结构域(DR4DD)为钓饵,采用酵母双杂交系统筛选人白细胞MATCHMAKERcDNA文库。以DNA自动分析仪测定核苷酸序列,采用计算机软件分析核苷酸的同源性及功能结构域。并用免疫共沉淀方法分析人类甲酰肽受体1(formylpeptidereceptor-like1,FPRL1)在哺乳动物细胞内是否与DR4CD(thecytoplsmicdomainofDR4)特异性地结合。结果获得了两个阳性克隆pADB1和pADB2。DNA序列分析及同源性比较表明,pADB1的插入片段与人FPRL1的mRNA序列具有97%的同源性。pADB2的插入片段与GeneBank中的已知序列无同源性。免疫共沉淀结果表明FPRL1在哺乳动物细胞内可与DR4CD特异性地结合。结论FPRL1可与DR4的死亡结构域特异性结合,推测FPRL1与DR4的结合可能在DR4介导的细胞凋亡信号传导途径中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 类甲酰肽受体1 死亡受体4 TRAIL 酵母双杂交系统
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A+G连接介导PCR方法的建立及其在体内足迹研究中的应用
16
作者 纪新军 刘德培 +3 位作者 徐冬冬 李磊 王晶 梁植权 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期229-232,共4页
目的建立一种新的连接介导聚合酶链反应(ligation-mediatedpoly-merasechainreaction,LM-PCR)方法,使之能够对G-残基含量过低或不含G-残基的区域进行体内足迹研究。方法对原化... 目的建立一种新的连接介导聚合酶链反应(ligation-mediatedpoly-merasechainreaction,LM-PCR)方法,使之能够对G-残基含量过低或不含G-残基的区域进行体内足迹研究。方法对原化学测序法中的A>G法进行修改,化学裂解后进行连接介导的PCR反应,通过测序胶分离分析PCR反应结果。结果建立了A+GLM-PCR方法,本法能够应用于体内足迹研究。结论应用本实验建立的方法可分析A-残基和G-残基上的蛋白质-DNA相互作用状况,可获得更多信息及扩大使用范围。 展开更多
关键词 连接介导 化学裂解法 序列测定 PCR 体内足迹法
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Apo(a)结构基因5′调控区多个基因多态性与颅内动脉瘤的相关性研究
17
作者 康元宝 赵元立 +3 位作者 王硕 赵继宗 曾武威 陈保生 《中国卒中杂志》 2006年第5期332-336,共5页
目的探讨Apo(a)结构基因(APOA)5′调控区多个基因多态性与颅内动脉瘤发病的关系。方法选择经全脑动脉造影证实为颅内动脉瘤的患者90例和健康对照者96例为研究对象,采集其血浆,提取白细胞基因组DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多... 目的探讨Apo(a)结构基因(APOA)5′调控区多个基因多态性与颅内动脉瘤发病的关系。方法选择经全脑动脉造影证实为颅内动脉瘤的患者90例和健康对照者96例为研究对象,采集其血浆,提取白细胞基因组DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合琼脂糖凝胶电泳(AGE)和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等方法,检测Apo(a)的结构基因5′调控区-1500位点五核苷酸重复序列的多态性(PNR) [(TTTTA)n]、-914位点G/A、-49位点C/T、-21位点G/A等多态性的基因型和等位基因在中国人群中的分布。结果两组研究对象Apo(a)结构基因的PNR共检测出8种基因型和5种等位基因,两组间差别无显著性意义;两组研究对象的-914位点G/A多态性分布间差别无显著性意义,但组内分析显示-914位点G/A多态性与动脉瘤大小相关;两组研究对象均未发现存在-49位点C/T、-21位点G/A多态性。结论未发现Apo(a)结构基因5′调控区多个基因多态性与颅内动脉瘤发病有相关性;Apo(a)结构基因5′调控区-914G/A等位基因可能与动脉瘤的发展相关,具体机制有待进一步研究;Apo(a)结构基因5′调控区-49C/T、-21G/A的多态性在中国人群中可能并不存在。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 Apo(a)结构基因 基因多态性
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转基因小鼠在脂质代谢研究中的应用
18
作者 汝昆 琦祖和 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1995年第2期121-126,共6页
转基因小鼠在脂质代谢研究中的应用汝昆综述琦祖和校(中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京)动脉粥样硬化是一种严重危害人类身体健康的多发性疾病,该病与脂质代谢紊乱有非常密切的关系。本文综述了近年... 转基因小鼠在脂质代谢研究中的应用汝昆综述琦祖和校(中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京)动脉粥样硬化是一种严重危害人类身体健康的多发性疾病,该病与脂质代谢紊乱有非常密切的关系。本文综述了近年来转基因小鼠技术在脂质代谢研究中的... 展开更多
关键词 转基因小鼠 脂质代谢 动脉粥样硬化 小鼠动物模型
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肿瘤靶向药物研究进展与展望 被引量:1
19
作者 郑德先 《生物产业技术》 2009年第3期38-45,共8页
肿瘤靶向药物是指与肿瘤发生、生长、转移和凋亡密切相关的分子或基因为靶点而设计的药物,应用肿瘤靶向药物治疗肿瘤是肿瘤治疗的首选策略。
关键词 肿瘤 靶分子 靶向药物 基因治疗
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人类基因组研究的若干发展方向
20
作者 强伯勤 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期497-497,共1页
关键词 人类基因组 研究方向 测序 医学基因组学
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