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GPC3在卵巢癌中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 王莉 惠宁 +1 位作者 满晓波 唐亮 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1017-1019,共3页
目的探讨GPC3在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法利用实时荧光定量RT-PCR技术检测2004年1月-2005年10月手术获得的35例卵巢上皮性癌组织及23例正常卵巢组织中GPC3 mRNA的表达量,并结合卵巢癌的临床病理特点进行分析。利用Western blo... 目的探讨GPC3在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法利用实时荧光定量RT-PCR技术检测2004年1月-2005年10月手术获得的35例卵巢上皮性癌组织及23例正常卵巢组织中GPC3 mRNA的表达量,并结合卵巢癌的临床病理特点进行分析。利用Western blot技术检测4例卵巢癌组织和3例正常卵巢组织中GPC3蛋白的表达水平。结果GPC3 mRNA在卵巢癌组织中的表达量低于正常卵巢组织(P〈0.05),部分卵巢癌组织无GPC3 mRNA表达。GPC3 mRNA的表达量与卵巢癌临床分期有关,在Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中的表达量显著低于Ⅰ、Ⅱ期(P〈0.05)。GPC3 mRNA与CA125在卵巢癌中的表达无相关性(P〉0.05)。GPC3蛋白在正常卵巢组织中的表达水平是卵巢癌组织中的2-3倍。结论GPC3在卵巢癌的发生发展中起着一定作用,其与CA125联合应用有可能提高卵巢癌的阳性诊断率。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 基因表达 蛋白表达
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丁酸钠体外诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞分化为胆管上皮细胞 被引量:4
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作者 唐庆贺 杨文 +1 位作者 谈冶雄 周伟平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期32-35,共4页
目的:观察不同浓度丁酸钠对大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞生长、分化的影响,探讨丁酸钠体外诱导WB-F344细胞分化为胆管上皮细胞的条件及分化规律。方法:不同浓度丁酸钠(0.75、2.25、3.75、4.5mmol/L)作用于WB-F344细胞(丁酸钠处理组),观... 目的:观察不同浓度丁酸钠对大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞生长、分化的影响,探讨丁酸钠体外诱导WB-F344细胞分化为胆管上皮细胞的条件及分化规律。方法:不同浓度丁酸钠(0.75、2.25、3.75、4.5mmol/L)作用于WB-F344细胞(丁酸钠处理组),观察细胞形态学的变化,MTT法检测细胞生长情况,3.75mmol/L丁酸钠作用WB-F344细胞后,免疫组化观察细胞角蛋白19(CK19)蛋白表达的变化;RT-PCR观察CK19、β4-整合蛋白、γ-谷胺酰转肽酶(GGT)以及甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)mRNA表达的变化。以同期常规培养未作处理的WB-F344细胞作为空白对照组。结果:丁酸钠处理后,各组WB-F344细胞生长均受到抑制,3.75、4.5mmol/L丁酸钠处理组光密度值明显低于空白对照组(P<0.01),而0.75、2.25mmol/L组与空白对照组无明显差异;3.75、4.5mmol/L丁酸钠诱导后细胞变大变圆,细胞核增大,核质比减小,而0.75、2.25mmol/L组细胞形态无显著变化。3.75mmol/L丁酸钠处理组WB-F344细胞CK19阳性率为(92.3±1.1)%,明显高于空白对照组(1.3±0.2)%(P<0.01)。3.75mmol/L丁酸钠处理组可见β4-integrin表达,而空白对照组未见表达;GGT、CK19表达较空白对照组增强;空白对照组见AFP表达,而3.75mmol/L丁酸钠处理组未见表达;ALB在两组均未见表达。结论:3.75mmol/L丁酸钠适合体外诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞向胆管上皮细胞分化。 展开更多
关键词 WB-F344细胞 丁酸钠 胆管 上皮细胞 细胞分化
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连环蛋白基因功能区截短突变体的构建及其功能
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作者 张瑞 鄢和新 +3 位作者 陈磊 唐亮 杨安钢 王红阳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期385-389,共5页
目的 :观察连环蛋白 (βcatenin)基因功能截短体的亚细胞定位及转录活性的变化。方法 :采用反转录PCR克隆全长野生型βcatenin基因。在此基础上 ,分别构建 βcatenin基因N端、C端及Armadillo区缺失突变体的真核基因表达载体和融合绿色... 目的 :观察连环蛋白 (βcatenin)基因功能截短体的亚细胞定位及转录活性的变化。方法 :采用反转录PCR克隆全长野生型βcatenin基因。在此基础上 ,分别构建 βcatenin基因N端、C端及Armadillo区缺失突变体的真核基因表达载体和融合绿色荧光蛋白 (EGFP)的表达载体。应用双荧光素酶报告系统 ,在2 93细胞中检测不同功能截短体的转录活性。在倒置荧光显微镜下观察不同功能截短体在COS7细胞中的亚细胞定位。结果 :成功地构建了 βcatenin基因不同功能截短体的真核表达载体及与绿色荧光蛋白基因融合的表达载体。在 2 93细胞中检测到Armadillo区缺失的突变体蛋白丧失了转录活性 ,N端及C端缺失突变体蛋白的转录活性较野生型分别下降了80 %和 90 %。在COS7细胞中观察到C端缺失突变体蛋白主要定位于胞浆中 ,N端缺失突变体蛋白以粗颗粒形式定位于胞核中 ,Armadillo区缺失突变体的定位情况类似野生型 βcatenin ,以细颗粒形式定位于胞核中。结论 :βcatenin基因不同功能区亚细胞定位的不同 ,提示其在转录激活过程中发挥着不同的作用。 展开更多
关键词 连环蛋白 绿色荧光蛋白 转录活性 亚细胞定位
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异质性胞核核糖核蛋白K在肝癌组织及不同密度肝癌细胞中的表达 被引量:3
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作者 范薇薇 余艳婷 +2 位作者 洪毅 谈冶雄 王红阳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期20-23,共4页
目的:观察异质性胞核核糖核蛋白K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,hnRNPK)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及在不同密度肝癌细胞(PLC/PRF/5)中的亚细胞定位。方法:免疫组化染色观察肝细胞癌组织中hnR... 目的:观察异质性胞核核糖核蛋白K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,hnRNPK)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及在不同密度肝癌细胞(PLC/PRF/5)中的亚细胞定位。方法:免疫组化染色观察肝细胞癌组织中hnRNPK的表达;Western印迹检测肝癌组织(n=30)及对应癌旁组织hnRNPK蛋白表达差异;应用细胞免疫组化和Western印迹法比较不同密度肝癌细胞hnRNPK蛋白的亚细胞定位及表达。结果:肝细胞癌组织hnRNPK蛋白主要表达于细胞核。hnRNPK蛋白表达在30例的肝癌组织中有21例高于其对应的癌旁组织;20倒HBV阳性肝癌组织有16例高于其对应的癌旁组织,而10例HBV阴性肝癌组织仅有5例表达高于癌旁组织。细胞免疫组化结果表明。hnRNPK主要表达于PLC细胞核中,并且随密度(汇合率为30%、50%、90%)的上升。其表达量逐渐上升。Western印迹结果表明,不同密度(汇合率为30%、50%、70%、90%)肝癌细胞的细胞质中,hnRNPK的表达量无统计学差异;而在细胞核中,随着细胞密度的增大,hnRNPK的表达量逐渐升高。结论:肝癌组织细胞核hnRNPK表达上调,且随着肝癌细胞密度的增加。其表达会逐渐增强,HBV感染可能会促进其表达。 展开更多
关键词 肝细胞癌 异质性胞核核糖核蛋白K 乙型肝炎病毒
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乙型肝炎病毒X蛋白相关微小RNA差异表达在乙型肝炎病毒复制中的作用研究 被引量:4
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作者 陈静 陈磊 +1 位作者 吴孟超 石晓祯 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期1786-1791,共6页
背景乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)在乙型肝炎病毒复制及肝癌形成中扮演着重要的角色。研究HBX相关微小RNA(miRNAs)的差异表达有可能为调控乙型肝炎病毒复制、阐明肝癌发展进程及开展预后干预提供重要信息。目的探讨肝癌细胞中HBX相关miRNAs... 背景乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)在乙型肝炎病毒复制及肝癌形成中扮演着重要的角色。研究HBX相关微小RNA(miRNAs)的差异表达有可能为调控乙型肝炎病毒复制、阐明肝癌发展进程及开展预后干预提供重要信息。目的探讨肝癌细胞中HBX相关miRNAs的差异表达及其在乙型肝炎病毒复制中的作用。方法选取2014年1—10月第二军医大学附属东方肝胆外科医院收治的13例肝癌患者的肝癌组织及距离肝癌组织>2 cm癌旁组织的新鲜石蜡包埋标本,采用微阵列技术分析HBX相关miRNAs的差异表达,实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)法定量分析肝癌组织与癌旁组织中7个与肝脏功能相关的miRNAs及HBX mRNA表达水平,同时分析过表达hsa-miR-373或抑制hsa-miR-22对乙型肝炎病毒复制的影响。结果微阵列技术分析显示,HepG2-X细胞系和HepG2-CAT细胞系中有46种miRNAs差异表达,与HepG2-CAT细胞系相比,HepG2-X细胞系中20种miRNAs表达上调,26种miRNAs表达下调。肝癌组织与癌旁组织中hsa-miR-22、hsa-miR-373、hsa-miR-92、hsa-miR-155及HBX mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);肝癌组织与癌旁组织中hsa-miR-181a、hsa-miR-34a、hsa-let-7i表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,hsa-miR-22表达水平与HBX mRNA表达水平呈正相关(r=0.415,P=0.018),hsa-miR-373、hsa-miR-92、hsa-miR-155表达水平与HBX mRNA表达水平呈负相关(r=-0.322,P=0.043;r=-0.369,P=0.028;r=-0.426,P=0.016);hsa-miR-181a、hsa-miR-34a、hsa-let-7i表达水平与HBX mRNA表达水平无直线相关关系(r=0.076,P=0.363;r=0.017,P=0.676;r=0.122,P=0.242)。第2天和第3天hsa-miR-22抑制剂组、hsamiR-373前体组HepG2.2.15细胞系及HepAD-38细胞系乙型肝炎病毒拷贝数较阴性对照组降低(P<0.05);第2天和第3天hsa-miR-373前体组Hep G2.2.15细胞系乙型肝炎病毒拷贝数较hsa-miR-22抑制剂组降低(P<0.05)。第2天hsa-miR-373前体组Hep AD-38细胞系乙型肝炎病毒拷贝数较hsa-miR-22抑制剂组升高,第3天hsa-miR-373前体组Hep AD-38细胞系乙型肝炎病毒拷贝数较hsa-miR-22抑制剂组降低(P<0.05)。第2天和第3天hsa-miR-373前体组HepG 2.2.15细胞系乙型肝炎病毒拷贝抑制率较hsa-miR-22抑制剂组升高(P<0.05)。第2天hsa-miR-373前体组Hep AD-38细胞系乙型肝炎病毒拷贝抑制率较hsa-miR-22抑制剂组降低,第3天hsa-miR-373前体组Hep AD-38细胞系乙型肝炎病毒拷贝抑制率较hsa-miR-22抑制剂组升高(P<0.05)。结论 HBX相关miRNAs的差异表达可通过靶向相关信号转导通路影响乙型肝炎病毒在肝癌细胞内的复制。 展开更多
关键词 肝肿瘤 乙型肝炎病毒X蛋白 微小RNA 病毒复制
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坏死性凋亡研究进展 被引量:14
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作者 石珅男 覃夏 +1 位作者 王红阳 蔡振宇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第7期561-573,共13页
程序性细胞死亡对于机体的生长发育及组织器官的稳态具有重要作用.坏死性凋亡是最近发现的一种可调控的程序性细胞死亡方式,其在形态学上具有坏死的特征.目前的研究表明,坏死性凋亡是由受体结合丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(receptor-interac... 程序性细胞死亡对于机体的生长发育及组织器官的稳态具有重要作用.坏死性凋亡是最近发现的一种可调控的程序性细胞死亡方式,其在形态学上具有坏死的特征.目前的研究表明,坏死性凋亡是由受体结合丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3,RIPK3)以及其底物混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)共同介导.细胞的增殖和死亡在维持机体内环境稳态中发挥重要作用,大量研究表明坏死性凋亡的失调和人类疾病的发展密切相关,比如炎症性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤以及退行性病变.在这篇综述中,将讨论坏死性凋亡的分子机制及其相关疾病的研究进展. 展开更多
关键词 程序性细胞死亡 坏死性凋亡 炎症 RIPK3 MLKL
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