WTO与动植物卫生检疫

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作者 姚文国 陈小帆 《粮油食品科技》 2002年第4期38-39,共2页

关键词 WTO 动植物卫生检疫 SPS协定 国际贸易 检验检疫

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植原体DNA提取方法的改良 被引量：15

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作者 漆艳香 谢艺贤 +3 位作者 张辉强 朱水芳 廖晓兰 肖启明 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第4期44-46,共3页

在总结多种植原体DNA提取方法的基础上 ,发展了一种提取植原体DNA新方法。用此方法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测到大于 15kb的DNA主带 ,基本无DNA碎带 ,不用RNase处理 ,也无RNA干扰 ,OD2 60 / 2 80 值显示产物纯度较高 ,无需任何处理 。

关键词 植原体 DNA 提取方法 琼脂糖凝胶电泳 序列分析

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河北省西瓜病毒病普查及毒原检测 被引量：8

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作者 潘秀清 武彦荣 +2 位作者 朱水芳 王洪昌 刘俊山 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期143-143,共1页

关键词 河北 西瓜 病毒病 普查 毒原检测

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用实时荧光PCR方法鉴定转基因玉米T14/T25 被引量：13

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作者 曹际娟 覃文 +1 位作者 朱水芳 曹远银 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期689-694,共6页

以实时荧光PCR技术鉴定商业化种植的转基因玉米T14/T25品系。根据转基因玉米T14/T25转入的外源基因质粒图谱,设计转基因引物和探针进行PCR和实时荧光PCR检测,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光PCR方法。实验结果表明,用TaqMan探针可... 以实时荧光PCR技术鉴定商业化种植的转基因玉米T14/T25品系。根据转基因玉米T14/T25转入的外源基因质粒图谱,设计转基因引物和探针进行PCR和实时荧光PCR检测,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光PCR方法。实验结果表明,用TaqMan探针可检测到T14/T25产生的荧光信号,而对其他玉米品系则检测不到荧光信号,为转基因产品的鉴定检测提供了新方法。 展开更多

关键词 实时荧光PCR T14/T25转基因玉米 鉴定

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玉米细菌性枯萎病菌16S rDNA基因克隆及TaqMan探针实时荧光PCR 被引量：14

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作者 漆艳香 肖启明 朱水芳 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期183-187,共5页

为给农业和植物检疫部门提供一种特异性强、灵敏度高,可以快速、直接检测植物病原菌的方法,将玉米细菌性枯萎病菌16SrDNA基因克隆测序,根据该细菌与其他细菌菌株16SrDNA序列差异,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定点突变的特异性探针... 为给农业和植物检疫部门提供一种特异性强、灵敏度高,可以快速、直接检测植物病原菌的方法,将玉米细菌性枯萎病菌16SrDNA基因克隆测序,根据该细菌与其他细菌菌株16SrDNA序列差异,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定点突变的特异性探针,除泛菌属3个种和欧氏菌属3个种外,还对假单胞菌属1个种,黄单胞菌属1个种,棒形杆菌属1个种,短小杆菌属1个种以及5种植原体进行了实时荧光PCR检测.结果表明:只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光,其他细菌和植原体都没有荧光产生.检测的灵敏度为104CFU/mL的菌悬浮液,相当于4个细菌细胞的基因,灵敏度高,也就是说,反应体系中只要有2个活细菌,实时荧光PCR就能检测到.相对灵敏度为107CFU/mL,而且整个检测过程只需2h,由于实验采用独特全封闭反应管及光电传导系统,不用凝胶电泳,降低了污染. 展开更多

关键词 玉米细菌性枯萎病菌 16S RDNA TAQMAN探针

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实时荧光PCR定量检测加工产品中转基因玉米Mon810成分 被引量：9

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作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期132-134,共3页

采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成... 采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分。某些检测样品不仅检出转基因玉米Mon810成分,还同时检出其它转基因玉米品系或其它转基因品种。本研究实验建立的转基因玉米Mon810品系鉴定检测方法,即可以用于加工产品中转基因成分的定量检测(检测低限为0.1%),也可以用于定性检测,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多

关键词 转基因玉米 实时荧光PCR技术 定量检测 食品 饲料 Mon810成分

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加工产品中转基因玉米Bt11成分实时荧光PCR定量(性)检测 被引量：16

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作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第6期46-50,共5页

实验在玉米自身基因和外源基因的边界序列之间设计了具有品种和品系特异性的引物和探针 ,并以实时荧光PCR技术 ,建立了加工产品中转基因玉米Bt1 1成分品系鉴定检测和定量检测的方法。实验对加热条件和时间对检测转基因成分的影响作了探... 实验在玉米自身基因和外源基因的边界序列之间设计了具有品种和品系特异性的引物和探针 ,并以实时荧光PCR技术 ,建立了加工产品中转基因玉米Bt1 1成分品系鉴定检测和定量检测的方法。实验对加热条件和时间对检测转基因成分的影响作了探讨 ,并检测了部分市售食品和饲料。检测结果发现 ,加热时间温度越高、时间越长 ,对转基因成分定量检测的影响越大 ;在所检测的样品中可以检测出转基因玉米Bt1 1成分 ,有些样品还同时检出其他转基因成分。本研究实验建立的方法 ,可以用于加工产品中转基因成分的定量检测 ,也可以用于定性检测 ,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多

关键词 转基因玉米 实时荧光定量PCR 检测 外源基因 引物

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商业化种植的六种基因改良玉米品系的鉴定检测方法 被引量：6

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作者 曹际娟 覃文 +3 位作者 朱水芳 徐宝梁 陈明生 曹远银 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第1期23-29,共7页

以PCR方法鉴定检测六种商业化种植的基因改良玉米 (geneticallymodifiedmaize,简称GM 玉米 )。针对Mon810 (Monsanto公司 )、Bt11(Novartis公司 )、Event176 (Novartis公司 )、CBH 35 1(AgrEvo公司 )、T14/T2 5Liberty (AgrEvo公司 )及G... 以PCR方法鉴定检测六种商业化种植的基因改良玉米 (geneticallymodifiedmaize,简称GM 玉米 )。针对Mon810 (Monsanto公司 )、Bt11(Novartis公司 )、Event176 (Novartis公司 )、CBH 35 1(AgrEvo公司 )、T14/T2 5Liberty (AgrEvo公司 )及GA2 1(Monsanto公司 )GM 玉米转入的外源基因质粒图谱 ,设计具有品系特异性的引物进行PCR检测 ,建立了GM 玉米品系鉴定检测的方法。 展开更多

关键词 基因改良玉米品系 品系鉴定 商业化种植 PCR方法 检测

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苜蓿细菌性萎蔫病菌16S rDNA片段的克隆及序列分析(简报) 被引量：3

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作者 漆艳香 朱水芳 +1 位作者 谢艺贤 肖启明 《草业学报》 CSCD 2006年第3期123-127,共5页

利用细菌16S rDNA保守序列通用引物对16sF/16sR对苜蓿细菌性萎蔫病菌的标准菌株(IPQ0019)总DNA进行扩增,得到了大约1.5 kb的片段。将此片段插入到pGEM-T载体并转化进大肠杆菌DH5α菌株中,经PCR鉴定、限制性内切酶分析及核苷酸序列同源... 利用细菌16S rDNA保守序列通用引物对16sF/16sR对苜蓿细菌性萎蔫病菌的标准菌株(IPQ0019)总DNA进行扩增,得到了大约1.5 kb的片段。将此片段插入到pGEM-T载体并转化进大肠杆菌DH5α菌株中,经PCR鉴定、限制性内切酶分析及核苷酸序列同源性分析均表明克隆成功。该研究为制备苜蓿细菌性萎蔫病菌的DNA分子探针奠定了基础。 展开更多

关键词 苜蓿细菌性萎蔫病菌 16S rDNA克隆 序列分析

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转基因食品检验分析技术概述 被引量：22

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作者 姚文国 朱水芳 《粮油食品科技》 2003年第1期26-28,共3页

随着转基因产品的出现,人们对其安全性愈来愈重视。转基因产品在研究、生产和销售的过程中,存在各种转基因产品扩散、污染及安全隐患,因此对转基因产品的检测监管是非常必要的。本文详细介绍了国内转基因产品的检验分析技术,对指导转基... 随着转基因产品的出现,人们对其安全性愈来愈重视。转基因产品在研究、生产和销售的过程中,存在各种转基因产品扩散、污染及安全隐患,因此对转基因产品的检测监管是非常必要的。本文详细介绍了国内转基因产品的检验分析技术,对指导转基因产品的检测具有重要的意义。 展开更多

关键词 转基因食品 检验分析技术 安全性

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冀中南主要西瓜病毒病症状类型与病毒种类 被引量：2

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作者 潘秀清 王洪昌 +3 位作者 武彦荣 刘俊山 朱水芳 高秀瑞 《河北农业科学》 2003年第B09期15-18,共4页

对冀中南西瓜主产区西瓜病毒病进行了调查和毒原检测,发现西瓜病毒病普遍发生,复合侵染现象普遍,症状类型复杂繁多。发病程度与气候、地理位置和田间管理有关。用血清学SPA-ELISA方法检测主要西瓜病毒病毒原种类为WMV-2,ZYMV,PRSV,SgMV。

关键词 冀中南地区 西瓜 病毒病 症状类型 病毒种类 毒原检测 气候条件 地理位置 田间管理

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