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具抗肿瘤活性的海洋微生物菌株的初步筛选 被引量:4
1
作者 李根 陈瑞川 林昱 《台湾海峡》 CAS CSCD 2002年第1期18-22,共5页
本研究采用MTT法对海洋放线菌、细菌、霉菌及极地和大洋细菌进行细胞毒活性物质的筛选 ,结果有 1 0 %放线菌及一株极地细菌具有细胞毒活性 .此外利用DNA修复特性在E .coli 3 4 3 /591和E .coli 3 4 3 /63 6之间的差异性 ,对前面筛得的... 本研究采用MTT法对海洋放线菌、细菌、霉菌及极地和大洋细菌进行细胞毒活性物质的筛选 ,结果有 1 0 %放线菌及一株极地细菌具有细胞毒活性 .此外利用DNA修复特性在E .coli 3 4 3 /591和E .coli 3 4 3 /63 6之间的差异性 ,对前面筛得的菌株进行DNA损伤的筛选 ,结果得到两株活性菌株 .采用荧光染色观察得到 3株具有诱导肿瘤细胞凋亡的菌株 ,这些具抗肿瘤活性的菌株可供进一步研究 . 展开更多
关键词 MTT分析法 DDRT法 细胞毒活性物质 细胞凋亡 海洋微生物 海洋药物 抗肿瘤活性
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极端酶的研究进展 被引量:1
2
作者 张锐 曾润颖 《台湾海峡》 CAS CSCD 2001年第3期405-410,共6页
本文综述了近年来国内外关于极端酶研究的新进展 .介绍了最新发现的极端酶 ,从一些极端酶的三维构成、晶体结构和氨基酸序列等方面初步阐述了它们的作用机制 ,极端酶的定向突变 ,极端酶在普通微生物菌体内表达等基因工程进展和极端酶初... 本文综述了近年来国内外关于极端酶研究的新进展 .介绍了最新发现的极端酶 ,从一些极端酶的三维构成、晶体结构和氨基酸序列等方面初步阐述了它们的作用机制 ,极端酶的定向突变 ,极端酶在普通微生物菌体内表达等基因工程进展和极端酶初步应用的研究成果 . 展开更多
关键词 极端酶 极端生物 三维构成 晶体结构 氨基酸 作用机制
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伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因在杆状病毒载体系统中的表达研究
3
作者 陈新华 杨林 +4 位作者 龙綮新 王章 陈曲侯 洪文洲 陈焕春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期415-419,共5页
克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白... 克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹均证明了表达产物为 71ku的GST gD融合蛋白 ,其产量占细胞不溶蛋白量的 2 0 %左右 .以GST gD融合蛋白作为抗原进行小鼠免疫保护实验 ,结果表明表达的GST gD融合蛋白具有较好的免疫原性 ,不仅能诱导小鼠产生血清抗体 (1∶12 8) 。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 鄂A株 囊膜蛋白gD基因 杆状病毒载体系统 表达 免疫原性
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一株具抗肿瘤活性的北极细菌的筛选及分子鉴定 被引量:14
4
作者 曾润颖 李根 林昱 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期800-803,共4页
在中国首次北极科学考察期间 ,从北极海域采集了水体 ,沉积物等样品 ,从中分离得到一批嗜冷细菌 ,采用MTT法对这些北极海洋细菌进行了细胞毒活性物质的筛选 ,得到一株具有细胞毒活性的菌株 .采用
关键词 抗肿瘤活性 北极细菌 MTT分析法 细胞毒活性物质 分子鉴定 菌株筛选 海洋微生物
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分子信标探针用于PCR检测对虾白斑杆状病毒 被引量:11
5
作者 章晓波 徐洵 +2 位作者 李庆阁 徐丽美 public.xm.fj.cn 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期277-280,共4页
将对虾白斑杆状病毒的一段特异性DNA设计成分子信标探针 ,用于该病毒的PCR检测 .温度与荧光强度之间的关系表明 ,所设计探针的发夹既可以形成也可以打开 ,符合PCR对分子信标探针的要求 .结果表明 ,在PCR同时加入分子信标探针不影响PCR扩... 将对虾白斑杆状病毒的一段特异性DNA设计成分子信标探针 ,用于该病毒的PCR检测 .温度与荧光强度之间的关系表明 ,所设计探针的发夹既可以形成也可以打开 ,符合PCR对分子信标探针的要求 .结果表明 ,在PCR同时加入分子信标探针不影响PCR扩增 ,分子信标探针只能与目的DNA杂交 ,具有较高的特异性 .随着PCR循环数的增加以及含目的DNA的质粒拷贝数的增加 。 展开更多
关键词 对虾 白斑杆状病毒 PCR 分子信标探针
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重组鲈鱼生长激素的分离纯化及抗体制备 被引量:3
6
作者 曾润颖 刘小青 杨丰 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第5期13-16,共4页
用IPTG诱导鲈鱼生长激素基因工程菌E coli RV30 8,使重组鲈鱼生长激素得以表达并分泌到周质空间。利用渗透休克法从菌液中提取间质蛋白 ,经DEAE SepharoseCL 6B、聚丙烯酰胺凝胶电泳及SephadexG 75纯化后得到单一电泳纯的重组鲈鱼生长激... 用IPTG诱导鲈鱼生长激素基因工程菌E coli RV30 8,使重组鲈鱼生长激素得以表达并分泌到周质空间。利用渗透休克法从菌液中提取间质蛋白 ,经DEAE SepharoseCL 6B、聚丙烯酰胺凝胶电泳及SephadexG 75纯化后得到单一电泳纯的重组鲈鱼生长激素 ,并将此激素作为抗原制备抗体 ,可应用于鱼类血液中生长激素含量的测定。 展开更多
关键词 重组鲈鱼生长激素 纯化 抗体 分离 制备
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对虾白斑杆状病毒基因中的小顺反子及其表达 被引量:1
7
作者 章晓波 徐洵 杨丰 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期73-78,共6页
通过对虾白斑杆状病毒DNA文库和cDNA文库的碱基序列测定和分析,发现 对虾白斑杆状病毒的一个开放阅读框的前导序列中含有一个小顺反子,这个小顺反 子较多使用对虾基因和白斑杆状病毒基因的稀有密码子.试验表明在该基因的前导... 通过对虾白斑杆状病毒DNA文库和cDNA文库的碱基序列测定和分析,发现 对虾白斑杆状病毒的一个开放阅读框的前导序列中含有一个小顺反子,这个小顺反 子较多使用对虾基因和白斑杆状病毒基因的稀有密码子.试验表明在该基因的前导 序列中存在或不存在小顺反子时,该基因都可在大肠杆菌中诱导表达,但两者的表达 量不同.小顺反子可能对基因的表达具有调控作用. 展开更多
关键词 对虾 白斑杆状病毒 小顺反子 密码子使用频率 基因
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对虾白斑杆状病毒对螯虾血淋巴原代细胞的感染 被引量:8
8
作者 李钫 杨丰 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第12期74-77,共4页
应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的... 应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的螯虾原代血淋巴细胞 ,并在其中增殖 ;WSBV感染螯虾原代血淋巴细胞后 6h左右病毒开始大量复制 ,感染后的细胞可以存活数日。在目前虾细胞系尚未建立之前 ,螯虾血淋巴原代细胞可以作为研究WSBV感染、转录和复制等机理的替代系统。 展开更多
关键词 对虾白斑杆状病毒 WSBV 螯虾血淋巴细胞 原代培养 病毒感染
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斑节对虾肝胰腺全长cDNA表达文库的构建
9
作者 罗田 徐洵 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第S2期116-121,共6页
采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连接,再经GigapackⅢGold蛋白体外包装和感染E.coli菌株XL1-Blue... 采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连接,再经GigapackⅢGold蛋白体外包装和感染E.coli菌株XL1-BlueMRF′,成功构建了库容量为7 7×105,重组率高达99 1%的cDNA表达文库.将初级文库进行扩增,并在滴定扩增文库时随机挑取9个噬菌斑,在辅助噬菌体ExAssist的作用下通过体内切除形成phagemid,再用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切获得插入cDNA片段,其长度最长达1 6kb.我们还用PCR法从库中扩增出完整的肌动蛋白编码区cDNA(约1 2kb).以上结果说明此表达文库含有斑节对虾肝胰腺全长cDNA片段,因此本文库为对虾基因的克隆、表达及其结构和功能的研究奠定了基础. 展开更多
关键词 斑节对虾 CDNA表达文库 肝胰腺
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