百合巯基蛋白酶抑制剂的纯化及部分性质研究 被引量：5

1

作者 曾仲奎 杨育红 +3 位作者 鲍锦库 周红 罗亮 邓俊林 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1996年第2期182-186,共5页

百合的鳞茎中含有一种对木瓜蛋白酶有强抑制作用的巯基蛋白酶抑制剂．百合的鳞茎经浸取加热处理，木瓜蛋白酶偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析，可获得在ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均为... 百合的鳞茎中含有一种对木瓜蛋白酶有强抑制作用的巯基蛋白酶抑制剂．百合的鳞茎经浸取加热处理，木瓜蛋白酶偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析，可获得在ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均为单一蛋白带的百合巯基蛋白酶抑制剂（ＣＰＩ）．此ＣＰＩ为单链蛋白，含有０．３０７％的中性糖；Ｎ端氨基酸为Ｉｌｅ；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得亚基分子量为１２０００；ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００测得分子量为１２５００．百合ＣＰＩ在１００℃内和ｐＨ２～１２范围内非常稳定；对木瓜蛋白酶的抑制属竞争性抑制类型，其Ｋｉ值为１．１５×１０^（－９）ｍｏｌ／Ｌ，对木瓜蛋白酶的抑制摩尔比为８．５：１． 展开更多

关键词 巯基蛋白酶 百合巯基酶 抑制剂 提纯 性质

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油麻藤种子中凝集素的纯化及性质的研究 被引量：8

2

作者 周红 曾仲奎 +1 位作者 鲍锦库 鲍林 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期336-340,共5页

中药常春油麻藤种子中含有Ａ型血专一性的凝集素（ＭＳＬ）．该凝集素可经盐析、离子交换及凝胶过滤进行纯化，当其浓度为０．４９μｇ／ｍｌ时就能凝集人Ａ型血细胞，对人类Ｂ、Ｏ型及兔红细胞无作用．Ｇａｌ，ＧａｌＮＡｃ和胃粘蛋白... 中药常春油麻藤种子中含有Ａ型血专一性的凝集素（ＭＳＬ）．该凝集素可经盐析、离子交换及凝胶过滤进行纯化，当其浓度为０．４９μｇ／ｍｌ时就能凝集人Ａ型血细胞，对人类Ｂ、Ｏ型及兔红细胞无作用．Ｇａｌ，ＧａｌＮＡｃ和胃粘蛋白对ＭＳＬ的凝血活性有强抑制作用．ＭＳＬ含中性糖５．７％，凝胶过滤测得分子量为１３１８００，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为６６０００和３３０００，表明ＭＳＬ可能由两个不同亚基组成．ＭＳＬ还是一种促有丝分裂原，对人外周血中淋巴细胞的转化率可达７６．２％． 展开更多

关键词 油麻藤 药用植物 凝集素 提纯 性质

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岩豆凝集素寡糖链的纯化及组成研究 被引量：2

3

作者 曾仲奎 郑建 +1 位作者 刘荣华 周红 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1992年第5期635-638,共4页

糖蛋白分子上的寡糖链是细胞间和分子间相互识别的基础。寡糖链的结构研究首先是寡糖链的分离纯化及糖基组成分析。寡糖链的组成分析多用气相色谱或高效液相色谱。本文报道用气相色谱法对纯化的岩豆凝集素(Milletia dielsiana Harms.Lec... 糖蛋白分子上的寡糖链是细胞间和分子间相互识别的基础。寡糖链的结构研究首先是寡糖链的分离纯化及糖基组成分析。寡糖链的组成分析多用气相色谱或高效液相色谱。本文报道用气相色谱法对纯化的岩豆凝集素(Milletia dielsiana Harms.Lectin,简称MDL)寡糖链糖基组成的研究结果。 展开更多

关键词 岩豆凝集素 寡糖链 纯化

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植物凝集素在植物体内的生理作用 被引量：5

4

作者 曾仲奎 吴洽庆 邓忠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1993年第3期69-76,共8页

现有研究表明,植物种子中的凝集素是植物体内的储存蛋白;扁豆和稻胚凝集素对胚胎的分裂和分化有促进作用;在豆科植物和根瘤菌之间的共生作用中,凝集素起着高度专一的识别作用;麦胚凝集素在种胚萌发时,起着抗真菌的作用;体外实验也证明... 现有研究表明,植物种子中的凝集素是植物体内的储存蛋白;扁豆和稻胚凝集素对胚胎的分裂和分化有促进作用;在豆科植物和根瘤菌之间的共生作用中,凝集素起着高度专一的识别作用;麦胚凝集素在种胚萌发时,起着抗真菌的作用;体外实验也证明凝集素对危害玉米的主要害虫的发育有阻碍作用;还发现植物凝集素具有酶的活性和酶抑制剂的作用,从而调节植物体的生理活动。 展开更多

关键词 植物凝集素 凝集素 生理作用

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白茯苓凝集素的研究 被引量：2

5

作者 刘荣华 曾仲奎 周红 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1994年第2期202-207,共6页

以中药白茯苓为材料，采用盐析、离子交换及凝胶过滤可纯化出快速蛋白液相谱（ＦＰＬＣ）纯的白茯苓凝集素（ＳＬＬ）。当其浓度为０．２５μｇ／ｍＬ时就能凝集兔红细胞，对人类Ａ，Ｂ，Ｏ型血细胞无作用。甲状腺球蛋白、卵粘蛋白和胃... 以中药白茯苓为材料，采用盐析、离子交换及凝胶过滤可纯化出快速蛋白液相谱（ＦＰＬＣ）纯的白茯苓凝集素（ＳＬＬ）。当其浓度为０．２５μｇ／ｍＬ时就能凝集兔红细胞，对人类Ａ，Ｂ，Ｏ型血细胞无作用。甲状腺球蛋白、卵粘蛋白和胃粘蛋白对ＳＬＬ的凝血活性有强抑制作用，而常见糖类对其无明显抑制作用。ＳＬＬ含中性糖１２．５％，凝胶过滤及ＦＰＬＣ测得分子量为３１０００，亚基分子量为８０００，表明ＳＬＬ可能由四个相同亚基组成。ＳＬＬ对酸、碱、热均有较高的耐受性，并且是一个强促有丝分裂原。 展开更多

关键词 凝集素 糖蛋白 白茯苓凝集素

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岩豆凝集素的圆二色性与生物学活性关系的研究 被引量：2

6

作者 曾仲奎 郑建 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1994年第1期103-110,共8页

岩豆凝集素（ＭＤＬ）的远紫外圆二色性谱（ＣＤ谱）显示２１６－２１７ｎｍ处的单一负峰。此时ＭＤＬ分子含有１６．２％的α螺旋，４６．３％的β折叠和３７．５％的无规卷曲。ｐＨ９．０时负峰红移至２２０ｎｍ，且在２１７－２２２... 岩豆凝集素（ＭＤＬ）的远紫外圆二色性谱（ＣＤ谱）显示２１６－２１７ｎｍ处的单一负峰。此时ＭＤＬ分子含有１６．２％的α螺旋，４６．３％的β折叠和３７．５％的无规卷曲。ｐＨ９．０时负峰红移至２２０ｎｍ，且在２１７－２２２ｎｍ处的峰值几乎相同；在２０－４０℃范围内，ＣＤ谱的变化甚微；６０℃时谱峰蓝移；在８０℃或１００℃时，２１２ｎｍ处出现一大负峰。１ｍｏｌ／Ｌ或２ｍｏｌ／Ｌ脲时，ＭＤＬ的ＣＤ谱已发生明显变化，二级结构单元也有变化，凝集兔红细胞的活性也随之减弱；随脲浓度的增加，ＭＤＬ的谱峰蓝移，最终在２１２ｎｍ处出现大负峰。当胍浓度为０．７５ｍｏｌ／Ｌ时，ＭＤＬ的ＣＤ谱即有明显变化和活性丧失；胍浓度继续增加，ＣＤ谱逐渐成为特征的无规卷曲的谱形。在ｐＨ９．０、温度超过８０℃、脲或胍浓度分别高于２ｍｏｌ／Ｌ和０．７５ｍｏｌ／Ｌ时，ＭＤＬ的ＣＤ谱发生显著变化的同时，其凝集兔红细胞的生物学活性全部丧失，分子的二级结构单元也发生很大改变。 展开更多

关键词 凝集素 岩豆凝集素 圆二色性

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岩豆(Millettia dielsiana Harms ex Diels)凝集素的分离纯化和性质研究 被引量：6

7

作者 曾仲奎 郑建 刘荣华 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第1期93-98,共6页

用猪甲状腺球蛋白-Sepharose 4B作亲和吸附剂,再经Sephadex G-100凝胶过滤,可以从岩豆种子中纯化出岩豆凝集素(MDL)。该凝集素可以凝集人类A、B、O型血细胞和兔红细胞,纯化的MDL凝集兔红细胞的能力可被D-松三糖、邻硝基-苯酚-D-半乳糖... 用猪甲状腺球蛋白-Sepharose 4B作亲和吸附剂,再经Sephadex G-100凝胶过滤,可以从岩豆种子中纯化出岩豆凝集素(MDL)。该凝集素可以凝集人类A、B、O型血细胞和兔红细胞,纯化的MDL凝集兔红细胞的能力可被D-松三糖、邻硝基-苯酚-D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺抑制,甘露糖也有弱的抑制作用。纯化的MDL在PAGE和SDS-PAGE上均显现单一蛋白质染色带,经Schiff’s试剂染色证明为糖蛋白;以酚-硫酸法测得其中性糖含量为6.0％;SDS-PAGE测得亚基分子量为32 000;Sephadex G-100分子筛柱测得其分子量为63 800;等电聚焦电泳显示其等电点为5.1;氨基酸组成分析表明其中Asp、Glu、Phe含量较高,但不含有Pro、Tyr。MDL也是一个强促有丝分裂原,对人外周血淋巴细胞转化率可达81.2％,细胞分裂比率达14.8％。 展开更多

关键词 岩豆

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猪血浆α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化 被引量：3

8

作者 周昂 郑远旗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第4期317-319,共3页

α1-抗胰蛋白酶（α1-Antitrypsin,简称α1-AT）是由肝细胞分泌的一种糖蛋白,是存在于动物血液中的一种重要的蛋白酶抑制剂,它能抑制多种丝氨酸类蛋白水解酶,占血浆胰蛋白酶抑制总活力的90％以上。α1-AT通过调节蛋白水解酶的活性而参... α1-抗胰蛋白酶（α1-Antitrypsin,简称α1-AT）是由肝细胞分泌的一种糖蛋白,是存在于动物血液中的一种重要的蛋白酶抑制剂,它能抑制多种丝氨酸类蛋白水解酶,占血浆胰蛋白酶抑制总活力的90％以上。α1-AT通过调节蛋白水解酶的活性而参与机体的一系列生理活动,如血液凝固、纤维蛋白溶解、组织激肽释放、细胞融合、大分子装配和免疫反应等过程,对防止组织过度损伤有重要作用。目前国际上对人的α1-AT研究较多,而对猪α1-AT的研究甚少。 展开更多

关键词 猪血浆 纯化 α1抗胰蛋酶

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猪血纤维蛋白溶酶原的纯化及性质研究

9

作者 刘荣华 凡开明 郑远旗 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第5期444-450,共7页

用偶联有L-赖氨酸的Sepharose 4B亲和柱对猪血纤维蛋白溶酶原进行分离纯化,所得酶原在酸性及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白质区带,在碱性条件下电泳及等电聚焦电泳表现出较明显的不均一性。还原及非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳... 用偶联有L-赖氨酸的Sepharose 4B亲和柱对猪血纤维蛋白溶酶原进行分离纯化,所得酶原在酸性及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白质区带,在碱性条件下电泳及等电聚焦电泳表现出较明显的不均一性。还原及非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得酶原分子量为88kD,经尿激酶激活后,进行还原SDS-凝胶电泳,出现两条新的蛋白质区带,分子量分别为63kD和26kD。酶原含中性糖1.35％,N-末端为异亮氨酸。尿激酶激活后产生的血纤维蛋白溶酶以对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯为底物,测得Km为4.2m mol/L,V_(max)为13.5 IU。6-氨基已酸对酶活性有双重影响。此外,还观察了胰蛋白酶对猪血纤维蛋白溶酶原的激活。 展开更多

关键词 猪 PG PM

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桑寄生凝集素的纯化及部分性质研究 被引量：4

10

作者 陈希宏 曾仲奎 刘荣华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1992年第2期150-156,共7页

利用DEAE一纤维素柱盐离子浓度梯度洗脱,再经猪胃粘蛋白-Sepharose 4 B亲和柱可以从中药桑寄生中分离纯化出桑寄生凝集素。经pH8.9,Tris-EDTAN_2a-borate的PACE和SDS-PAGE测定均呈现单一蛋白带,测得其分子量为67 500,中性糖含量为14.6％... 利用DEAE一纤维素柱盐离子浓度梯度洗脱,再经猪胃粘蛋白-Sepharose 4 B亲和柱可以从中药桑寄生中分离纯化出桑寄生凝集素。经pH8.9,Tris-EDTAN_2a-borate的PACE和SDS-PAGE测定均呈现单一蛋白带,测得其分子量为67 500,中性糖含量为14.6％,DNS法测得N-末端氨基酸为缬氨酸。氨基酸组成分析表明,该凝集素富含酸性氨基酸,而碱性氨基酸含量较少,不含精氨酸。当凝集素浓度为15.6μg/mL时,即可凝集兔红细胞,而对人的A、B、O型血细胞,凝集素浓度高达1000μg/mL,也不发生凝集反应。Gal、GalNAc、山梨糖、岩藻糖和松三糖对凝集兔红细胞的能力有抑制作用。桑寄生凝集素是一种促有丝分裂原,对猪血淋巴细胞的转化率达78％,细胞分裂比率为11.2％。 展开更多

关键词 纯化 桑寄生凝集素 凝集素

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高压快速柱分离纯化牛血球超氧化物歧化酶的研究

11

作者 张鹏飞 周红 +1 位作者 鲍锦库 曾仲奎 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1995年第4期9-17,共9页

以牛血球为材料,经溶血等处理和丙酮沉淀,获得牛血球超氧化物歧化酶粗品。此粗酶可以通过DEAE-Sepharose和CM-Sepharose快速柱层析,获得超氧化物歧化酶纯品。纯化的酶比活可达13500μ/mg,经PAGE、SDS-PAGE和快速蛋白液相色谱(FPLC)检测... 以牛血球为材料,经溶血等处理和丙酮沉淀,获得牛血球超氧化物歧化酶粗品。此粗酶可以通过DEAE-Sepharose和CM-Sepharose快速柱层析,获得超氧化物歧化酶纯品。纯化的酶比活可达13500μ/mg,经PAGE、SDS-PAGE和快速蛋白液相色谱(FPLC)检测,结果表明,纯化酶是均一的。Sephadex G-100凝胶过滤测得该酶分子量为31,800,SDS-PAGE测得亚基分子量为15,800;N-末端氨基酸是丙氨酸;氨基酸组成分析及色氨酸含量测定表明,该酶由290个氨基酸组成,不含色氨酸,紫外吸收光谱的最大吸收峰在257nm,对酶稳定性的研究表明,该酶是一种稳定性很高的酶,对温度、pH和某些变性剂表现出很高的耐受性。 展开更多

关键词 超氧化物歧化酶 牛血球 高压快速柱 分离

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