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短发夹RNA介导RNA干扰的时间和剂量效应研究被引量：13: 1; 作者何国平张思仲 +7 位作者王英成肖翠英马用信许文明丁兰陶大昌孙岩陈玉娟《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期258-267,共10页; 用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制哺乳动物细胞中外源报告基因的表达,以探讨该过程中RNAi作用的剂量和时间效应.应用Lipofectamine 2000将外源报告基因的表达载体与编码短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)的质粒共转染HEK293H细... 展开更多; 关键词 RNA干扰短发夹RNA 报告基因共转染时间和剂量效应; 在线阅读下载PDF 职称材料

APOA1/C3/A4/A5基因簇的新载脂蛋白基因:APOA5及其研究进展被引量：2: 2; 作者刘合焜张思仲 +2 位作者苏智广马用信王春婷《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期953-956,共4页; 应用人和鼠的比较基因组学和功能基因组学方法 ,Pennaccio等和Vliet等分别在APOA1/C3/A4基因簇中发现新的载脂蛋白基因APOA5。人的APOA5基因编码 36 6个氨基酸 ,与人APOA4、小鼠Apoa5高度同源。APOA5转基因小鼠其甘油三酯 (TG)减少至野... 展开更多; 关键词载脂蛋白APOA5 APOA5基因甘油三酯冠心病; 在线阅读下载PDF 职称材料

短发夹RNA介导RNA干涉的实验学控制研究: 3; 作者何国平张思仲 +7 位作者马用信肖翠英许文明孙岩丁兰张炜陶大昌陈玉娟《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期64-70,共7页; 采用载体介导的RNA干涉 (RNA interference,RNAi)技术抑制HEK293H细胞中外源报告基因的表达,并设置一系列的实验学控制以探讨其在RNAi应用研究中的价值及意义.运用pAVU6+27,构建了针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的一系列短发夹RNA表... 展开更多; 关键词短发夹RNA 介导 EGFP 转染蛋白表达实验抑制 RNA干涉碱基错配细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

广州市阿尔茨海默病人及正常老人丁酰胆碱酯酶基因K变异对照研究: 4; 作者邓河晃施佳军 +7 位作者郭扬波冯容妹马崔阳琼苗国栋温全球陈建平陆欣乔《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期114-116,共3页; 目的　观察丁酰胆碱酯酶基因 (BCHE)K变异在广州地区汉族老年人中的分布 ,探讨其与晚发阿尔茨海默病 (AD)的关联性。方法　以 10 6例晚发AD患者和 133名健康老年人为对象进行病例对照研究。采用等位基因特异聚合酶链反应法 (AS PCR)分... 展开更多; 关键词广州市阿尔茨海默病丁酰胆碱酯酶载脂蛋白E 关联; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名短发夹RNA介导RNA干扰的时间和剂量效应研究被引量：13: 1; 作者何国平张思仲王英成肖翠英马用信许文明丁兰陶大昌孙岩陈玉娟; 机构四川大学华西医院医学遗传学研究室四川大学华西医院精神科实验室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期258-267,共10页; 基金国家高技术"863"计划资助项目(2001AA216091) 国家自然科学基金资助项目(30470656 30371491)~~; 文摘用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制哺乳动物细胞中外源报告基因的表达,以探讨该过程中RNAi作用的剂量和时间效应.应用Lipofectamine 2000将外源报告基因的表达载体与编码短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)的质粒共转染HEK293H细胞,观察shRNA载体对报告基因的抑制效应.转染后,shRNAs的瞬时表达可特异地抑制细胞内报告基因的表达.在共转染后12,24,48,60,72,96 h时检测EGFP(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因mRNA及蛋白质表达水平,结果显示,EGFPmRNA及蛋白质表达在12 h时略有降低,24～48 h时表达逐渐降低,48～72 h时降低最明显,其后EGFP表达水平逐渐恢复.提示该过程中RNAi效应呈现由弱到强、又由强到弱的逐渐消逝趋势.共转染一系列剂量比例的EGFP干扰载体与靶载体的结果表明,在一定剂量范围内,RNA干扰载体所介导的抑制效应与干扰载体剂量大小有关,当其剂量进一步加大足以抑制外源基因表达时,抑制效应则维持在一'平台期'.此外,通过RNAi抑制HeLa细胞、HEK293细胞中荧光素酶基因的表达,荧光素酶活性变化也表现出上述类似的效应.这些结果表明,在体外哺乳动物细胞中,基于表达载体的RNAi作用呈现剂量和时间依赖性效应.这为基于载体表达的RNAi技术应用研究提供了一定的理论参考及依据.; 关键词 RNA干扰短发夹RNA 报告基因共转染时间和剂量效应; Keywords RNA interference short haipin RNA reporter gene cotranstection time and dose effect; 分类号 Q522 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名APOA1/C3/A4/A5基因簇的新载脂蛋白基因:APOA5及其研究进展被引量：2: 2; 作者刘合焜张思仲苏智广马用信王春婷; 机构四川大学华西医院医学遗传学研究室福建医科大学细胞生物学与遗传学系; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期953-956,共4页; 基金国家"8 63"高技术项目No .2 0 0 1AA2 2 40 2 10 3 2 0 0 2BA711A0 8~~; 文摘应用人和鼠的比较基因组学和功能基因组学方法 ,Pennaccio等和Vliet等分别在APOA1/C3/A4基因簇中发现新的载脂蛋白基因APOA5。人的APOA5基因编码 36 6个氨基酸 ,与人APOA4、小鼠Apoa5高度同源。APOA5转基因小鼠其甘油三酯 (TG)减少至野生型的 1/3,而Apoa5基因敲除小鼠其TG却增加 4倍。APOA5多态位点SNP3( 1131T >C)和S19W及单倍型APOA5 3有显著升高TG的作用。APOA5调节血浆TG水平的作用与APOC3作用相反。; 关键词载脂蛋白APOA5 APOA5基因甘油三酯冠心病; Keywords Apolipoprotein A5 APOA5 gene Triglycerides Coronary heart disease; 分类号 R543 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名短发夹RNA介导RNA干涉的实验学控制研究: 3; 作者何国平张思仲马用信肖翠英许文明孙岩丁兰张炜陶大昌陈玉娟; 机构四川大学华西医院医学遗传学研究室、人类疾病基因组学研究室、人类疾病生物治疗国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期64-70,共7页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金; 文摘采用载体介导的RNA干涉 (RNA interference,RNAi)技术抑制HEK293H细胞中外源报告基因的表达,并设置一系列的实验学控制以探讨其在RNAi应用研究中的价值及意义.运用pAVU6+27,构建了针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的一系列短发夹RNA表达载体,并用脂质体法转染于HEK293H细胞中,检测EGFP mRNA及蛋白表达水平.瞬时转染48h后, RT-PCR及Western blot结果表明,针对EGFP三个靶点的干涉质粒均不同程度地抑制细胞内EGFP的表达,但仅转录正反义链、链内1-2个碱基错配的干涉载体不能介导特异的RNAi效应.此外,共转染实验结果表明干涉质粒两两间无相互增强或抑制的RNAi效应.在此基础上,通过G418筛选生成了HEK293H EGFP稳定表达株,在转染后不同时间点检测EGFP mRNA及蛋白表达变化,发现RNAi 效应在一定时间范围内呈现明显的时间依赖性.这些结果表明,有效的实验控制在RNAi研究中十分必要,具有重要的参考价值.基于载体表达的RNAi作用呈现明显的时间依赖性效应,为RNAi应用研究提供了一定的参考及借鉴价值.; 关键词短发夹RNA 介导 EGFP 转染蛋白表达实验抑制 RNA干涉碱基错配细胞; 分类号 R735 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名广州市阿尔茨海默病人及正常老人丁酰胆碱酯酶基因K变异对照研究: 4; 作者邓河晃施佳军郭扬波冯容妹马崔阳琼苗国栋温全球陈建平陆欣乔; 机构广州医学院附属广州市脑科医院四川大学华西医院医学遗传学研究室; 出处《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期114-116,共3页; 基金广州医学院科研基金资助项目 (编号 :2 0 0 0 GK 2 5 ); 文摘目的　观察丁酰胆碱酯酶基因 (BCHE)K变异在广州地区汉族老年人中的分布 ,探讨其与晚发阿尔茨海默病 (AD)的关联性。方法　以 10 6例晚发AD患者和 133名健康老年人为对象进行病例对照研究。采用等位基因特异聚合酶链反应法 (AS PCR)分析BCHE基因K型多态性。结果　晚发AD患者和正常老年人中 ,正常等位基因 1的频率分别为 93 4 0 %和 93 6 1% ,K变异等位基因 2的频率分别为 6 6 0 %和 6 39% ;晚发AD患者和正常老年人之间BCHE基因K多态各等位基因和基因型分布差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;样本采用载脂蛋白Eε4基因 (APOEε4 )分层后 ,AD组与对照组BCHE基因K变异频率仍然无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　BEHE K变异在广州地区汉族人群中与晚发AD不存在关联 ,提示该多态性不是晚发AD的风险因子。; 关键词广州市阿尔茨海默病丁酰胆碱酯酶载脂蛋白E 关联; Keywords Alzheimers disease Butyrylcholinesterase Apolipoprotein E Association; 分类号 R749.161 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	短发夹RNA介导RNA干扰的时间和剂量效应研究	何国平张思仲王英成肖翠英马用信许文明丁兰陶大昌孙岩陈玉娟	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2005	13	在线阅读下载PDF 职称材料
2	APOA1/C3/A4/A5基因簇的新载脂蛋白基因:APOA5及其研究进展	刘合焜张思仲苏智广马用信王春婷	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	短发夹RNA介导RNA干涉的实验学控制研究	何国平张思仲马用信肖翠英许文明孙岩丁兰张炜陶大昌陈玉娟	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	广州市阿尔茨海默病人及正常老人丁酰胆碱酯酶基因K变异对照研究	邓河晃施佳军郭扬波冯容妹马崔阳琼苗国栋温全球陈建平陆欣乔	《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料