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“溴”结构域(bromodomain)简介
被引量:
2
1
作者
陈建业
张晛
+1 位作者
陈俊杰
李瑞祥
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期801-801,共1页
关键词
真核生物
保守结构域
溴结构域蛋白
bromo-domain
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职称材料
结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量:
2
2
作者
谢勇恩
鲍朗
+2 位作者
陈炜
李学敏
于向华
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期28-31,共4页
目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用I...
目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和Western -blotting对表达蛋白进行初步分析。结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT - 6基因。 2 )成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达质粒 pBK - 85A -E6。 3)重组质粒 pBK - 85A -E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 38kDa的融合蛋白。 结论 成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达载体 ,并在大肠杆菌中实现了稳定表达 ,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础。
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关键词
结核杆菌
AG85A
ESAT-6
融合表达
免疫保护性抗原
大肠杆菌
表达载体
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职称材料
糖尿病大鼠视网膜组织突触核蛋白家族的表达
被引量:
1
3
作者
袁爱花
梅妍
+1 位作者
周鸿鹰
羊惠君
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012年第3期215-218,共4页
目的观察突触核蛋白(synuclein)家族三种同源蛋白基因α-synuclein、β-synucle-in和γ-synuclein在8周糖尿病大鼠视网膜组织中的表达情况,初步探讨其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中的作用。方法采用限制性片段差异显...
目的观察突触核蛋白(synuclein)家族三种同源蛋白基因α-synuclein、β-synucle-in和γ-synuclein在8周糖尿病大鼠视网膜组织中的表达情况,初步探讨其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中的作用。方法采用限制性片段差异显示聚合酶链反应技术,建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱,经生物信息学分析两者差异,初步确定α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein为DR相关基因,并以实时定量PCR和Western blot-ting方法分别从mRNA和蛋白水平上对三个基因的表达进行验证。结果限制性片段差异显示聚合酶链反应结果显示,糖尿病大鼠α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein表达明显强于正常大鼠;实时定量PCR结果显示,α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein在糖尿病大鼠(1.41±0.14、1.30±0.18、1.47±0.15)的表达(相对Ct比值)高于正常大鼠(1.67±0.12、1.62±0.20、1.86±0.26),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);Western blotting显示,糖尿病大鼠三种蛋白的表达(相对A值比值)分别为0.31±0.06、0.60±0.11、0.39±0.09,显著高于正常大鼠(0.19±0.07、0.44±0.09、0.29±0.08),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。结论α-synuclein、β-synuclein和γ-sy-nuclein在糖尿病大鼠视网膜组织中表达显著升高,α-synuclein的表达升高可能在DR中起到神经毒性作用,而β-synuclein和γ-synuclein的高表达则可能对神经细胞起到保护作用。
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关键词
糖尿病视网膜病变
突触核蛋白
基因表达谱
定时定量PCR
WESTERN
BLOTTING
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职称材料
题名
“溴”结构域(bromodomain)简介
被引量:
2
1
作者
陈建业
张晛
陈俊杰
李瑞祥
机构
四川大学华西医学中心基础医学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期801-801,共1页
关键词
真核生物
保守结构域
溴结构域蛋白
bromo-domain
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量:
2
2
作者
谢勇恩
鲍朗
陈炜
李学敏
于向华
机构
四川大学华西医学中心基础医学院
感染免疫研究室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期28-31,共4页
基金
高校博士点基金资助项目 (编号 :2 0 0 0 0 63 0 0 6)
文摘
目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和Western -blotting对表达蛋白进行初步分析。结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT - 6基因。 2 )成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达质粒 pBK - 85A -E6。 3)重组质粒 pBK - 85A -E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 38kDa的融合蛋白。 结论 成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达载体 ,并在大肠杆菌中实现了稳定表达 ,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础。
关键词
结核杆菌
AG85A
ESAT-6
融合表达
免疫保护性抗原
大肠杆菌
表达载体
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Ag85A
ESAT-6
Fused expression
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
糖尿病大鼠视网膜组织突触核蛋白家族的表达
被引量:
1
3
作者
袁爱花
梅妍
周鸿鹰
羊惠君
机构
上海交通
大学
医学院
附属精神卫生
中心
遗传研究室
四川大学华西医学中心基础医学院
人体解剖与组织胚胎学教研室
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012年第3期215-218,共4页
基金
2010年上海市卫生局青年基金资助(编号:2010Y030)~~
文摘
目的观察突触核蛋白(synuclein)家族三种同源蛋白基因α-synuclein、β-synucle-in和γ-synuclein在8周糖尿病大鼠视网膜组织中的表达情况,初步探讨其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中的作用。方法采用限制性片段差异显示聚合酶链反应技术,建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱,经生物信息学分析两者差异,初步确定α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein为DR相关基因,并以实时定量PCR和Western blot-ting方法分别从mRNA和蛋白水平上对三个基因的表达进行验证。结果限制性片段差异显示聚合酶链反应结果显示,糖尿病大鼠α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein表达明显强于正常大鼠;实时定量PCR结果显示,α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein在糖尿病大鼠(1.41±0.14、1.30±0.18、1.47±0.15)的表达(相对Ct比值)高于正常大鼠(1.67±0.12、1.62±0.20、1.86±0.26),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);Western blotting显示,糖尿病大鼠三种蛋白的表达(相对A值比值)分别为0.31±0.06、0.60±0.11、0.39±0.09,显著高于正常大鼠(0.19±0.07、0.44±0.09、0.29±0.08),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。结论α-synuclein、β-synuclein和γ-sy-nuclein在糖尿病大鼠视网膜组织中表达显著升高,α-synuclein的表达升高可能在DR中起到神经毒性作用,而β-synuclein和γ-synuclein的高表达则可能对神经细胞起到保护作用。
关键词
糖尿病视网膜病变
突触核蛋白
基因表达谱
定时定量PCR
WESTERN
BLOTTING
Keywords
diabetic retinopathy
synuclein
gene expression profile
fluorescence quantitative PCR
Western blotting
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
“溴”结构域(bromodomain)简介
陈建业
张晛
陈俊杰
李瑞祥
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达
谢勇恩
鲍朗
陈炜
李学敏
于向华
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
糖尿病大鼠视网膜组织突触核蛋白家族的表达
袁爱花
梅妍
周鸿鹰
羊惠君
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012
1
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