刺五加内生链霉菌Streptomyces amritsarensis 13-85的次级代谢产物研究

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作者 梁国栋 苏冰洁 +6 位作者 陈渝川 刘爱华 王彬 千晔 司书毅 陈明华 袁丽杰 《中国抗生素杂志》 北大核心 2025年第1期22-32,共11页

目的研究刺五加内生链霉菌(Streptomyces amritsarensis)13-85的次级代谢产物。方法采用大孔吸附色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、半制备高效液相等方法分离纯化菌株13-85的次级代谢产物,结合质谱和核磁共振波谱等方法确定化合物的结构;最后采... 目的研究刺五加内生链霉菌(Streptomyces amritsarensis)13-85的次级代谢产物。方法采用大孔吸附色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、半制备高效液相等方法分离纯化菌株13-85的次级代谢产物,结合质谱和核磁共振波谱等方法确定化合物的结构;最后采用倍比稀释法评价化合物抗菌活性。结果从链霉菌Streptomyces amritsarensis 13-85中分离得到2个新化合物和14个已知化合物,分别为:溶藻链霉苷A(1)、溶藻链霉苷B(2)、omicsynin A4(3)、环(L-脯-L-酪)(4)、环(D-脯-L-酪)(5)、环(L-酪-L-酪)(6)、环(L-酪-L-缬)(7)、N-乙酰色氨酸(8)、环(甘-L-色)(9)、环(L-色-L-丙)(10)、(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-咔啉-3-羧酸(11)、(1R,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-咔啉-3-羧酸(12)、环(L-异亮-L-脯)(13)、环(L-异亮-D-脯)(14)、环(L-亮-L-脯)(15)、环(L-亮-D-脯)(16)。其中化合物3对枯草芽孢杆菌的MIC为50μg/mL。结论从Streptomyces amritsarensis 13-85中发现了两个新的鼠李糖酯苷,该研究结果丰富了链霉菌次级代谢产物的结构类型。 展开更多

关键词 鼠李糖苷 溶藻链霉菌 刺五加 内生放线菌

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DNMT1和CCNA1在不同级别宫颈病变组织中的表达及临床意义 被引量：3

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作者 曹佳宇 白洁 +2 位作者 董建新 邵婷 陈燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第24期4105-4109,共5页

目的探讨DNMT1和CCNA1在不同级别宫颈病变组织中的表达及临床意义。方法选取病理学诊断的正常宫颈(NC)、宫颈低级别上皮内病变(LSIL)、宫颈高级别上皮内病变(HSIL)、宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织各30例,采用Western blot法、实时荧光聚合酶... 目的探讨DNMT1和CCNA1在不同级别宫颈病变组织中的表达及临床意义。方法选取病理学诊断的正常宫颈(NC)、宫颈低级别上皮内病变(LSIL)、宫颈高级别上皮内病变(HSIL)、宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织各30例,采用Western blot法、实时荧光聚合酶链反应(q RT-PCR)法检测各组DNMT1、CCNA1 mRNA和蛋白的表达。结果 DNMT1 mRNA和蛋白表达量在LSIL、HSIL及SCC组织中均高于NC组织(F=117.93,P<0.05;F=61.24,P<0.05),随着病变程度的增加,DNMT1 mRNA和蛋白的表达水平逐渐上升(χ~2趋势=26.25,P<0.05;χ~2趋势=26.60,P<0.05)。CCNA1 mRNA和蛋白的表达水平在HSIL、SCC组织中均低于NC、LSIL组织(F=77.04,P<0.05;F=57.15,P<0.05),随着病变程度的增加,CCNA1 mRNA和蛋白表达量逐渐下降(χ~2趋势=64.19,P<0.05;χ~2趋势=60.24,P<0.05)。DNMT1、CCNA1 mRNA和蛋白在LSIL、HSIL、SCC组织中的表达呈负相关(r=-0.75、-0.56,P<0.05)。结论 DNMT1 mRNA、蛋白的高表达,CCNA1 mRNA、蛋白低表达,二者可能与宫颈癌的发生发展有关。 展开更多

关键词 DNA甲基转移酶1 细胞周期蛋白A1 宫颈癌 宫颈癌前病变

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1株西藏来源链霉菌10-37的次级代谢产物研究

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作者 王嘉涵 常珊珊 +4 位作者 陈铭旭 何宁 王梦源 解云英 袁丽杰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1289-1296,共8页

目的对1株西藏来源链霉菌10-37的次级代谢产物进行研究。方法在分子网络指导下,利用HW40 C凝胶柱、Flash快速液相分离制备色谱仪、半制备型高效液相色谱等方法对化合物进行分离纯化,运用核磁共振、高分辨液质联用技术对单体化合物进行... 目的对1株西藏来源链霉菌10-37的次级代谢产物进行研究。方法在分子网络指导下,利用HW40 C凝胶柱、Flash快速液相分离制备色谱仪、半制备型高效液相色谱等方法对化合物进行分离纯化,运用核磁共振、高分辨液质联用技术对单体化合物进行结构鉴定,最后利用微量肉汤稀释法进行抗菌活性测定。结果从链霉菌10-37的菌丝体提取物中分离得到了4个代谢产物,包括2个新化合物oxazolomycin A3(1)和A4(2),以及2个已知化合物oxazolomycin A2(3)和oxazolomycin B(4)。其中化合物1和2为化合物3的一对几何异构体,它们三烯部分的构型分别为(4’E,6'E,8'E)(1)、(4’Z,6'E,8'E)(2)、(4’Z,6'Z,8'E)(3)、(4’E,6'E,8'E)(4)。结论西藏特境的地理优势结合分子网络分析的策略,可以更高效地挖掘新结构次级代谢产物。 展开更多

关键词 链霉菌 次级代谢产物 结构鉴定 分子网络

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荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的影响 被引量：9

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作者 王建行 王妍 +3 位作者 刘曼 穆玉 张博 韩淑英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1026-1031,共6页

目的探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制。方法 9周龄♂db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H,0.1 g·kg^(-1))、低(EFBFL-L,0.05 g·kg^(-1))剂量组,二甲双胍对照组,模... 目的探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制。方法 9周龄♂db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H,0.1 g·kg^(-1))、低(EFBFL-L,0.05 g·kg^(-1))剂量组,二甲双胍对照组,模型对照组,每组10只。同时以10只db/m小鼠为正常对照组。各组均每天灌胃给药1次,连续8周。于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测小鼠随机血糖(RBG),8周后处死取血清检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和糖基化终末代谢产物(AGEs)含量;HE染色光镜下观察心肌组织形态学改变,电镜下观察心肌超微结构;免疫组化法和Western blot法检测心肌组织葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达。结果 EFBFL能有效抑制db/db小鼠心肌细胞损伤及心肌纤维化的病理进程,降低小鼠血糖及血清中CK、CK-MB、AGEs的含量,增加小鼠心肌组织Glut4蛋白表达水平。结论 EFBFL对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤具有抑制作用,其机制可能与降低小鼠血糖、抑制AGEs的产生及促进心肌细胞Glut4蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 荞麦花叶发酵提取物 2型糖尿病 糖尿病性心脏病 心肌损伤 DB/DB小鼠 葡萄糖转运蛋白4

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赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用及其分子机制 被引量：5

5

作者 郝晓方 张荣花 +4 位作者 王琳 王梅梅 甄永占 章广玲 陈静 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期481-485,I0004,共6页

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方... 目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型。使用全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)水平;HE染色对肝脏组织行病理学检查;Masson三色染色观察肝组织纤维数量;使用试剂盒通过酶标仪测定肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布;Western blotting法检测α-SMA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平升高(P<0.05);肝组织肝小叶结构被破坏,纤维异常增生,Hyp水平亦升高(P<0.05)。免疫组织化学染色,α-SMA着色于胞膜和胞浆且表达增多;Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠α-SMA表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,35和70mg·kg-1RHL治疗组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平明显降低(P<0.05)。肝脏病理组织学,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中纤维成分数量减少,Hyp水平降低(P<0.05);免疫组织化学和Western blotting法,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中α-SMA表达减少(P<0.05)。结论:RHL能抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性和蓄积以发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,RHL有望成为治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物。 展开更多

关键词 胆汁淤积 肝纤维化 赖氨大黄酸

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肺癌小鼠MDSC和T细胞变化 被引量：5

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作者 郑全辉 刘英文 张雪梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期595-599,共5页

目的:探讨肺癌小鼠CD4+T细胞、CD8+T细胞和骨髓源性抑制细胞(MDSC)的比例和数量变化。方法:采用LLC细胞皮下接种制备小鼠肺癌肿瘤模型,流式细胞仪检测肿瘤小鼠骨髓、脾脏、淋巴结内CD4+T细胞、CD8+T细胞和MDSC的数量变化。结果:与正常... 目的:探讨肺癌小鼠CD4+T细胞、CD8+T细胞和骨髓源性抑制细胞(MDSC)的比例和数量变化。方法:采用LLC细胞皮下接种制备小鼠肺癌肿瘤模型,流式细胞仪检测肿瘤小鼠骨髓、脾脏、淋巴结内CD4+T细胞、CD8+T细胞和MDSC的数量变化。结果:与正常对照小鼠相比,肿瘤小鼠脾脏、淋巴结内CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例和数量显著降低,骨髓CD4+T细胞变化不明显,但CD8+T细胞显著减少。MDSC在肿瘤小鼠骨髓、脾脏和淋巴结内的比例和数量则显著增加。结论:肺癌小鼠T细胞数量降低而MDSC细胞数量增加,诱导对肿瘤细胞的免疫耐受。 展开更多

关键词 肺癌 CD4+T细胞 CD8+T细胞 骨髓源性抑制细胞

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刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107活性次级代谢产物研究 被引量：5

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作者 席楠 郭文强 +3 位作者 王珊珊 何宁 袁丽杰 解云英 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期891-895,共5页

目的从药用植物刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107次级代谢产物中发现抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性良好的天然产物。方法采用16S r RNA基因序列分析对菌株CWJ-107进行初步分类鉴定,大量发酵获得粗提物,通过硅胶... 目的从药用植物刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107次级代谢产物中发现抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性良好的天然产物。方法采用16S r RNA基因序列分析对菌株CWJ-107进行初步分类鉴定,大量发酵获得粗提物,通过硅胶柱层析、LH20凝胶柱层析、薄层色谱以及高效液相色谱等方法,以抗MRSA活性导向进行目标化合物的分离纯化,利用核磁共振和质谱鉴定化合物结构,并利用微孔板法测定化合物最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),对其抗MRSA活性进行评价。结果菌种鉴定结果显示菌株CWJ-107为Streptomyces tauricus,从菌株CWJ-107的菌丝体中分离得到1个抗MRSA活性化合物107-A,经波谱解析证实其结构为糖基化蒽醌类化合物cinerubin B,抗菌活性测定结果证实其具有良好的抗MRSA活性,MIC值为1μg/m L。结论从刺五加内生放线菌CWJ-107的代谢产物中分离到的107-A经结构鉴定为糖基化蒽醌类化合物cinerubin B,除此之外,本文首次报道了该化合物的抗MRSA活性。 展开更多

关键词 内生放线菌 STREPTOMYCES tauricus 分离纯化 结构鉴定 抗MRSA活性

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赖氨大黄酸对D-半乳糖致衰老模型小鼠的肾脏保护作用及其作用机制 被引量：4

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作者 魏洁 李开济 +5 位作者 赵毓芳 骆广玲 魏静波 闫丰 吕翠平 甄永占 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期680-684,I0001,共6页

目的:研究赖氨大黄酸(RHL)对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老和肾脏保护作用,阐明其作用机制,为RHL预防衰老的研究提供依据。方法:通过腹腔注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,将小鼠随机分为对照组、衰老模型组和低、高剂量RHL组。除对照组外... 目的:研究赖氨大黄酸(RHL)对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老和肾脏保护作用,阐明其作用机制,为RHL预防衰老的研究提供依据。方法:通过腹腔注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,将小鼠随机分为对照组、衰老模型组和低、高剂量RHL组。除对照组外,其余各组小鼠每天腹部皮下注射D-半乳糖100mg·kg-1,持续8周,对照组小鼠每天皮下注射等量生理盐水,低和高剂量RHL组小鼠分别每天1次灌胃25和50mg·kg-1的RHL。观察各组小鼠一般状况,计算肾脏指数;检测血清和肾脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性;HE染色行肾脏组织病理学检查;Western blotting法检测肾脏衰老相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏指数降低(P<0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05);与模型组比较,RHL组小鼠肾脏指数升高(P<0.05),血清和肾脏组织中SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05)。肾脏病理组织学检查,与衰老模型组小鼠比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞水肿减轻,且存在剂量依赖性。Western blotting法检测,与对照组比较,衰老模型组小鼠肾脏组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平降低(P<0.05),P16和P21蛋白表达水平升高(P<0.05);与衰老模型组比较,低和高剂量RHL组小鼠肾脏组织中SIRT1蛋白表达水平升高(P<0.05),P16和P21蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:RHL通过抑制氧化应激、肾小管上皮细胞水肿和调控衰老相关基因的表达来发挥对衰老小鼠肾脏的保护作用。 展开更多

关键词 赖氨大黄酸 抗衰老 衰老模型 D-半乳糖

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沉默CD276基因促进宫颈癌Caski细胞的凋亡及作用机制研究 被引量：4

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作者 王文普 丁婷婷 +2 位作者 李硕峰 李傲 孙红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期453-457,共5页

目的:探究免疫共刺激分子CD276在宫颈癌细胞(Caski、Hela)和人源胚胎肾细胞(293T)中的表达量,以及靶向沉默CD276基因来研究CD276对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡影响以及作用机制。方法:荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检... 目的:探究免疫共刺激分子CD276在宫颈癌细胞(Caski、Hela)和人源胚胎肾细胞(293T)中的表达量,以及靶向沉默CD276基因来研究CD276对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡影响以及作用机制。方法:荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测CD276在293T、Caski、Hela细胞的表达情况。通过脂质体Lipofectamine 2000体外转染controlsiRNA和CD276 siRNA至宫颈癌Caski细胞中,实验分为对照组、空转染组、CD276 siRNA组,采用Western blot检测Caski细胞中CD276蛋白的表达量。用细胞计数法(CCK-8)、膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)&碘化丙啶(PI)双染法检测Caski细胞的增殖、凋亡,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清中IL-8、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白水平。结果:免疫共刺激分子CD276在Caski、Hela细胞中的表达量显著高于293T细胞(0. 754±0. 068 vs 0. 261±0. 032; 0. 852±0. 087 vs 0. 279±0. 026; P<0. 05); Caski细胞中的表达量显著高于Hela细胞(P<0. 05)。与对照组相比,CD276 siRNA组细胞中CD276蛋白的表达量明显降低(0. 235±0. 028 vs 0. 863±0. 091,P<0. 05),显著抑制细胞的增殖(0. 326±0. 035 vs 0. 659±0. 068,P<0. 05),诱导其凋亡[(23. 487±2. 579)%vs (5. 489±0. 632)%,P<0. 05],下调IL-8(43. 257±3. 612 vs 125. 369±18. 478)、VEGF(136. 751±13. 269 vs 369. 254±28. 157)的蛋白水平(P<0. 05)。结论:CD276在宫颈癌细胞中的表达量显著增加,沉默CD276基因的表达,明显抑制Caski细胞的增殖,促进其凋亡,其作用与IL-8、VEGF的蛋白水平有关。 展开更多

关键词 CD276 宫颈癌 增殖 凋亡

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不同时间骨髓间充质干细胞移植对大鼠矽肺纤维化形成的影响 被引量：13

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作者 朱会兴 高俊玲 +5 位作者 赵曼曼 李冉 田艳霞 王鑫 张娟 崔建忠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期193-196,209,共5页

目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在不同时间窗的移植对大鼠矽肺纤维化的疗效。方法:体外分离、培养雄性3周龄SD大鼠BMSCs传至3代备用。将50只SD雌性大鼠随机分为5组:对照组,矽肺模型组,早... 目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在不同时间窗的移植对大鼠矽肺纤维化的疗效。方法:体外分离、培养雄性3周龄SD大鼠BMSCs传至3代备用。将50只SD雌性大鼠随机分为5组:对照组,矽肺模型组,早期治疗组,中期治疗组,晚期治疗组(n=10)。采用非暴露式气管插管一次性灌注二氧化硅(SiO2)粉尘混悬液法建立大鼠矽肺模型(50μg/ml),并分别于造模后1、14、28 d BMSCs干预治疗(1×106ml-1),各组大鼠分别于治疗后14 d处死取材。流式细胞仪鉴定BMSCs;HE染色观察肺组织形态学变化;免疫组织化学法及Western blot法检测MMP-9,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的定位和定量表达。结果:矽肺模型组较对照组大鼠有明显炎症细胞浸润、矽结节形成、胶原沉积等病理改变。BMSCs在矽肺早期(1 d)和中期(14 d)移植治疗较矽肺模型组病理改变有明显缓解(P<0.05);BMSCs在矽肺晚期(28 d)移植治疗无显著效果(P>0.05)。结论:BMSCs的移植在矽肺纤维化早中期对大鼠的病理进程起到延缓作用,晚期治疗效果不明显。 展开更多

关键词 矽肺 BMSCS MMP-9 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原

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西藏沙棘根瘤及根际土壤放线菌分离及抗菌活性研究 被引量：5

11

作者 罗亚军 孙红敏 +2 位作者 何宁 袁丽杰 解云英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期225-236,共12页

探索西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤样品中放线菌的多样性及抗菌活性,为天然产物药物研发提供新的微生物资源。采用稀释涂布法对10份样品中可培养放线菌进行分离,后经菌株16S rRNA序列测序,以邻接法(neighbor-joining method,N... 探索西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤样品中放线菌的多样性及抗菌活性,为天然产物药物研发提供新的微生物资源。采用稀释涂布法对10份样品中可培养放线菌进行分离,后经菌株16S rRNA序列测序,以邻接法(neighbor-joining method,N-J)构建系统发育树分析放线菌种属多样性;利用微孔板法对代表性菌株进行发酵培养及抗菌活性评价;进一步利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)考察活性菌株代谢产物情况。从10份样品中分离到112株放线菌,分属于7个目12科23个属,优势菌属为链霉菌属(Streptomyces);抗菌活性结果表明有17株放线菌至少对一种检定菌有抗菌活性,阳性抑菌率为36.9%。有16株放线菌对临床常见的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)有较强抑制活性,其中13株放线菌对MRSA抑制率超过阳性对照药万古霉素;另外有7株放线菌对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)有抑制活性,其中Streptomyces sp.XZ19-363对CRAB抑菌作用最强,抑制率为91.3%,UPLC-MS分析显示,具有广谱抗菌活性的菌株在不同培养基中产生了较为丰富的次级代谢产物。西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤中可培养放线菌资源丰富多样,同时具有较好的抗菌活性且代谢产物丰富。 展开更多

关键词 沙棘根瘤 根际土壤 放线菌 抗菌活性

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miR-185对肝癌细胞生长增殖及侵袭迁移的影响 被引量：2

12

作者 王密斯 张荣花 +5 位作者 王琳 孔艺璇 冯雪研 刘志勇 甄永占 章广玲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期1918-1923,共6页

目的探讨miR-185对人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721生长增殖、侵袭迁移能力的影响。方法构建miR-185过表达载体、合成miR-185反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO),经脂质体转染肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721。利用CCK-8和Transwel... 目的探讨miR-185对人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721生长增殖、侵袭迁移能力的影响。方法构建miR-185过表达载体、合成miR-185反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO),经脂质体转染肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721。利用CCK-8和Transwell小室实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力;生物信息学数据库预测结合基因芯片结果确定miR-185的候选靶基因NR1D1;利用实时荧光定量PCR技术和Western blot检测miR-185对细胞中NR1D1基因表达水平的影响;荧光报告载体实验验证miR-185对靶基因的调控作用。结果 miR-185在人肝癌细胞中的mRNA表达水平显著低于正常肝细胞(P<0.01);过表达miR-185使人肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低,下调肝癌细胞中NR1D1基因的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);荧光报告载体实验证明miR-185可以通过作用于NR1D1 mRNA的3'端非翻译区(untranslated region,UTR)下调其表达水平(P<0.05)。结论 miR-185能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,NR1D1是miR-185的直接靶基因。 展开更多

关键词 miR-185 肝癌细胞 细胞增殖 肿瘤浸润 细胞运动

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刺五加内生放线菌Planomonospora sp.12代谢产物研究及其菌种鉴定 被引量：1

13

作者 刘丽 刘爱华 +4 位作者 任浩 何宁 陈汝贤 袁丽杰 解云英 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期321-324,349,共5页

目的分离、纯化及鉴定放线菌株12发酵液中抗菌活性代谢产物并对菌株12进行菌种鉴定。方法采用硅胶柱层析、高效液相色谱等方法对菌株12的活性代谢产物进行分离纯化及纯度分析,并以质谱、核磁等方法对获得的组分进行结构鉴定;采用16s r ... 目的分离、纯化及鉴定放线菌株12发酵液中抗菌活性代谢产物并对菌株12进行菌种鉴定。方法采用硅胶柱层析、高效液相色谱等方法对菌株12的活性代谢产物进行分离纯化及纯度分析,并以质谱、核磁等方法对获得的组分进行结构鉴定;采用16s r RNA基因序列检测并构建进化树对菌株进行鉴定。结果从菌株12的发酵液中分离到1个活性化合物12-A,经波谱分析证实其结构和硫肽类化合物siomycin A相同,活性测定表明其对革兰阳性菌、真菌有较明显的抑制活性;经菌种鉴定,菌株12归为Planomonospora属放线菌。结论从菌株12的发酵液中分离得到的化合物12-A为已知化合物siomycin A。 展开更多

关键词 分离纯化 鉴定 硫肽类 Siomycin Planomonospora

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PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为和组织相容性的影响 被引量：3

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作者 车鹏程 车轩 +6 位作者 李硕峰 张亚彬 熊艳杰 崔曼 崔菁 姚芳莲 孙红 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1092-1097,共6页

目的:探讨PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为的影响,评价其用于构建组织工程软骨的可行性。方法:采用物理共混技术和反复冷冻-解冻方法,将聚乙烯醇(PVA)和卡拉胶按照一定比例制作成复合支架材料PVA/ι-CA并测定其孔径和... 目的:探讨PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为的影响,评价其用于构建组织工程软骨的可行性。方法:采用物理共混技术和反复冷冻-解冻方法,将聚乙烯醇(PVA)和卡拉胶按照一定比例制作成复合支架材料PVA/ι-CA并测定其孔径和孔隙率。将ATDC-5细胞接种于支架材料,观察细胞的黏附生长情况;免疫组织化学法和免疫荧光法检测ATDC-5细胞中Ⅱ型胶原的表达情况;甲苯胺蓝检测ATDC-5细胞形态表现;扫描电镜(SEM)下观察细胞生长及细胞外基质(ECM)分泌情况。将ATDC-5细胞分为阴性对照组(加入空白培养液)和实验组(加入含材料的培养液),MTT法检测支架材料上2组ATDC-5细胞的增殖率。将支架材料植入SD大鼠皮下,评价该支架材料的组织相容性和血管化能力。结果:PVA/ι-CA软骨组织工程支架平均孔隙率为(86.88±3.88)%,平均孔径为20~40μm。HE染色,ATDC-5细胞在支架材料上贴附生长良好,呈多角形,形态饱满;免疫组织化学和免疫荧光染色,ATDC-5细胞分泌Ⅱ型胶原蛋白;甲苯胺蓝染色,ATDC-5细胞在支架材料上保持软骨细胞的特性,随着培养时间的延长,支架材料上阳性细胞数量明显增加;ATDC-5细胞与支架材料共培养7d时,SEM下可见少量细胞呈多角形;培养14d时细胞数量增多,形态饱满、相互融合,伸入材料间形成锚状结构,牢固地黏附于材料表面;培养21~28d时材料上附着的细胞分泌大量的ECM包裹材料;ATDC-5细胞在材料上于7~14d增殖较快,21~28d增殖较慢,实验组增殖率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。皮下包埋早期有轻微的炎症反应,随着时间延长而消退;后期有血管化发生,材料降解吸收比较缓慢。结论:PVA/ι-CA支架材料有望成为的软骨组织工程支架材料。 展开更多

关键词 软骨组织工程 聚乙烯醇 卡拉胶 生物相容性

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木葡聚糖基温敏水凝胶预防大鼠腹壁-肠壁再粘连及其对局部TGF-β1和CTGF表达的影响 被引量：2

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作者 孙红 李硕峰 +6 位作者 崔菁 张二帅 李景武 熊艳杰 马丽桃 姚芳莲 车鹏程 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期223-228,共6页

目的:评价木葡聚糖基(mXG)温敏水凝胶对L929鼠成纤维细胞的抗黏附性能,建立粘连松解术后再次粘连动物模型,探讨mXG温敏水凝胶对粘连松解术后再次粘连的预防作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:... 目的:评价木葡聚糖基(mXG)温敏水凝胶对L929鼠成纤维细胞的抗黏附性能,建立粘连松解术后再次粘连动物模型,探讨mXG温敏水凝胶对粘连松解术后再次粘连的预防作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:将L929鼠成纤维细胞接种于mXG温敏水凝胶表面,荧光显色检测其在凝胶表面的黏附性能。制备粘连松解术后再次粘连大鼠模型。48只SD大鼠二次损伤完成后随机分成3组,分别为再粘连组,将1mL生理盐水注射于大鼠腹壁和盲肠的创面;商业膜组,将2cm×3cm大小的壳聚糖防粘连膜覆盖于腹壁创面;mXG温敏水凝胶组,将1mL 4%mXG温敏水凝胶注射至腹壁和盲肠的创面,待水凝胶完全形成(3min)后关腹;每组16只。二次术后第7和14天,每组分别处死8只大鼠,对粘连程度进行评分及组织学观察,免疫组织化学法观察TGF-β1和CTGF表达水平。结果:对照组可见大量L929鼠成纤维细胞贴壁生长,呈细长的梭形并有伪足的形成;mXG温敏水凝胶组在凝胶表面仅有非常少的L929鼠成纤维细胞,呈圆球状。一次术后所有大鼠均形成了可用钝器分开的粘连区。二次术后第7天,再粘连组形成了4~5分粘连,纤维结缔组织大量增生;商业膜组大部分为中度粘连,纤维结缔组织增生较多;mXG组大部分大鼠未见粘连发生且盲肠及腹壁开始愈合,有少量纤维结缔组织增生。术后第14天,再粘连组大鼠腹腔粘连严重,纤维结缔组织及胶原大量增生;商业膜组形成了接近再粘连组的严重粘连;mXG组有2只大鼠发生轻微粘连,其余均未发生粘连,并且盲肠及腹壁创面恢复良好。术后第7和14天mXG水凝胶组大鼠平均粘连评分明显低于再粘连组和商业膜组(P<0.05)。免疫组织化学染色,TGF-β1和CTGF表达水平随大鼠腹膜粘连评分和胶原沉积升高而升高,在再粘连组表达最高,在mXG温敏水凝胶组表达最低。结论:mXG温敏水凝胶具有优异的抗成纤维细胞黏附性能,可以有效预防粘连松解术后再次粘连的发生,并可减少粘连相关因子TGF-β1和CTGF的表达水平。 展开更多

关键词 木葡聚糖基温敏水凝胶 再次粘连 粘连松解术 转化生长因子β1 结缔组织生长因子

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组蛋白去乙酰化酶3通过抑制AICD维持T细胞自稳（英文） 被引量：2

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作者 王姗 田枫 +9 位作者 千晔 刘颖 李会婷 张爱红 侯志宏 刘亚楠 李娟 张艳淑 赵勇 郑全辉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第1期79-90,共12页

为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4^+CD8^+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周T细胞... 为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4^+CD8^+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周T细胞主要以活化/效应/记忆表型为主.机制分析表明,hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡增加并伴随细胞增殖加速,同时,Fas和Fas配体阳性细胞比率以及Fas配体的表达显著增加.体外TCR活化不影响正常外周T细胞的凋亡,但导致hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡显著增加.实验结果表明,HDAC3通过抑制活化诱导的细胞凋亡维持外周T细胞自稳. 展开更多

关键词 外周T细胞 组蛋白去乙酰化酶3 活化诱导的细胞凋亡 FAS FAS配体

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D-手性肌醇对db/db小鼠降血糖和肝脏保护作用及机制 被引量：5

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作者 范春雪 魏敏 +4 位作者 张丹丹 高庆瑶 黄菡雪 王建行 韩淑英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1713-1718,共6页

目的观察D-手性肌醇(DCI)对2型糖尿病db/db小鼠降血糖作用和肝损伤的抑制作用,并探究其作用机制。方法 10周龄♀db/db小鼠随机分为高剂量D-手性肌醇组(HDCI,70 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量D-手性肌醇组(LDCI,35 mg·kg^(-... 目的观察D-手性肌醇(DCI)对2型糖尿病db/db小鼠降血糖作用和肝损伤的抑制作用,并探究其作用机制。方法 10周龄♀db/db小鼠随机分为高剂量D-手性肌醇组(HDCI,70 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量D-手性肌醇组(LDCI,35 mg·kg^(-1)·d^(-1))和模型对照组(MCG),另设db/m为空白对照组(NCG)。灌胃给药6周,测定各组小鼠随机血糖值和给药后血糖动态变化值;给药结束时取血,测定血清AST、ALT值;HE、Masson染色和透射电镜扫描,观察DCI对db/db小鼠肝脏组织形态结构的影响;免疫组化法测定肝脏组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达;Western blot法检测胰岛素受体(IR)和胰岛素受体底物2(IRS-2)的表达。结果 DCI具有降低db/db小鼠血糖的作用,能够减轻肝脏组织细胞器和细胞核的损伤,降低肝组织中脂肪变性和纤维化程度,促进GLUT4、IR和IRS-2蛋白在肝脏细胞中表达。结论 DCI具有抑制db/db小鼠肝损伤的作用,其作用机制可能是促进肝脏组织中IR,IRS2和GLUT4蛋白表达,从而减轻胰岛素抵抗,降低血糖。 展开更多

关键词 D-手性肌醇 2型糖尿病 DB/DB小鼠 血糖 肝损伤 胰岛素抵抗

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miR-150基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响 被引量：4

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作者 郑全辉 田枫 +2 位作者 李文婷 张秋如 王姗 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1409-1412,共4页

目的:探讨miR-150基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响。方法:采用miR-150ko小鼠,观察该小鼠的窝产仔数和离乳率及生长曲线,测定其生殖指标;以全自动血球计数仪和自动生化分析仪测定2月龄miR-150ko小鼠和正常对照C57BL/6J小鼠血液细... 目的:探讨miR-150基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响。方法:采用miR-150ko小鼠,观察该小鼠的窝产仔数和离乳率及生长曲线,测定其生殖指标;以全自动血球计数仪和自动生化分析仪测定2月龄miR-150ko小鼠和正常对照C57BL/6J小鼠血液细胞学和血清生化参数。结果:miR-150ko小鼠窝产仔数与离乳率与C57BL/6J正常对照小鼠相比均显著下降;miR-150ko小鼠外周血白细胞计数、中间细胞数、中性粒细胞数、中间细胞百分比、中性粒细胞百分比与C57BL/6J小鼠相比显著升高;而血小板计数、淋巴细胞百分比显著下降;miR-150ko小鼠的血清葡萄糖、总胆固醇水平较正常对照小鼠显著增高。结论:miR-150基因缺失可影响到小鼠的繁殖功能,并对某些血液细胞学指标及血糖、胆固醇水平产生影响。 展开更多

关键词 miR-150 基因缺失 小鼠 繁殖 血液学

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参芍口服液调控TLR4/MyD88通路改善糖尿病大鼠心肌炎症损伤 被引量：13

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作者 张红利 贾春新 +2 位作者 李海鸥 周洪霞 张春来 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第8期28-33,共6页

目的探讨参芍口服液在糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠结构功能损伤中的作用及其可能机制。方法一次性腹腔注射大剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。测定血浆心肌酶(CK、LDH)、超敏C反应蛋白(hs CRP)的变化,左心室插管... 目的探讨参芍口服液在糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠结构功能损伤中的作用及其可能机制。方法一次性腹腔注射大剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。测定血浆心肌酶(CK、LDH)、超敏C反应蛋白(hs CRP)的变化,左心室插管测定大鼠心功能,苏木素-伊红染色、透射电镜观察大鼠心肌病理改变,免疫组织化学法检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白(My D88)及核因子κB P65(NF-κB P65)表达。结果治疗6周后,DCM大鼠左心室舒张和收缩功能明显改善;心肌纤维及线粒体肿胀、断裂、坏死减少,结构紧密,排列整齐;CK、LDH、hs CRP含量降低(P<0.05),且hs CPR与CK、LDH呈正相关(r=0.753,r=0.819,P<0.05);TLR4、My D88、NF-κB P65表达明显下调(P<0.05)。而参芍口服液干预的正常大鼠上述指标无明显改变(P>0.05)。结论参芍口服液可减轻糖尿病心肌病大鼠心肌损伤,改善心脏舒张和收缩功能,其机制可能与抑制TLR4/My D88信号通路诱导的炎症反应有关。 展开更多

关键词 参芍口服液 糖尿病心肌病 心功能 TLR4/My D88 炎症

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荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠肾损伤的影响 被引量：1

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作者 王建行 姜妍 +3 位作者 王妍 吴磊 穆玉 韩淑英 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期95-100,共6页

目的:探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用,从肾脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平阐明其可能的机制。方法:选择8周龄雄性db/db小鼠,以同窝db/m小鼠... 目的:探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用,从肾脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平阐明其可能的机制。方法:选择8周龄雄性db/db小鼠,以同窝db/m小鼠为正常对照组,db/db小鼠随机分为模型组、低剂量EFBFL组和高剂量EFBFL组,每组10只。低和高剂量EFBFL组小鼠分别为给予50和100mg·kg-1 EFBFL灌胃,正常对照组和模型组小鼠给予等量蒸馏水灌胃,每天1次,连续8周。于给药前后检测各组小鼠空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血清中血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,计算肾脏指数,通过HE和Masson染色观察小鼠肾组织形态表现,免疫组织化学法和Western blotting法检测小鼠肾组织PPARγ和NF-κB蛋白表达水平。结果:与模型组比较,EFBFL组小鼠FBG及血清中SCr、BUN水平明显降低(P<0.05或P<0.01),肾脏指数增加(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组小鼠肾组织中肾小球萎缩,肾小球基底膜弥漫性增厚,足突融合甚至消失,肾组织纤维化程度严重;与模型组比较,EFBFL组小鼠上述表现不同程度改善,以高剂量EFBFL组尤为明显。与模型组比较,EFBFL组小鼠肾组织PPARγ蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:EFBFL可改善自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾损伤,其机制可能与降低小鼠血糖、促进肾PPARγ蛋白的表达及下调NF-κB的蛋白表达有关。 展开更多

关键词 荞麦花叶发酵提取物 2型糖尿病 肾损伤 DB/DB小鼠 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 核因子ΚB

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