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建构主义理论下病理生理学教学模式改革研探 被引量：1
1
作者 杨力明 田野 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1882-1882,共1页
病理生理学着重从功能与代谢的角度探讨患病机体的生命活动规律,因其理论性强,深度和跨度大,而教学时数有限,往往使学生望而生畏,影响学习质量,如何克服这些问题,利用现代的教学理念培养人才是教师所面临的最大问题。西方教育学的最新... 病理生理学着重从功能与代谢的角度探讨患病机体的生命活动规律,因其理论性强,深度和跨度大,而教学时数有限,往往使学生望而生畏,影响学习质量,如何克服这些问题,利用现代的教学理念培养人才是教师所面临的最大问题。西方教育学的最新教学理论,建构主义强调以原有的经验,心理结构和信念为基础来建构知识以此来强调学生学习的主动性、社会性与情境型。在建构主义模式中,教师不再是课堂中的主导者,而是意义构建的帮助者,促进者,成为创造和谐课堂的幕后策划人,而学生成为真正的主角,是信息加工的主体。根据本学科的特点以及对高素质人才培养的需要,将建构主义理论与本科病理生理教学模式相结合探讨教学模式的设置,其中包括利用多媒体网络技术加强课内外互动、采用多种教学手段与情景、设置教学评估多层次教学、完善考核制度等,以期通过教学模式改革加深学生对课程理解,调动和创建和谐的课堂氛围,激发学生的学习兴趣,全方位提高学生解决问题能力,培养学生自主学习与终身学习的意识。 展开更多
关键词 病理生理学 临床医学 基础医学 疾病发生机制 建构主义理论
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复方丹参滴丸对缺氧心肌细胞内钙离子平均荧光强度的影响 被引量：24
2
作者 李全凤 王孝铭 +3 位作者 朱世军 艾静 高焕焕 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期690-691,共2页
目的 :探讨复方中药丹参滴丸对缺氧 /复氧心肌细胞的保护作用。方法 :培养的乳鼠心肌细胞 ,用钙探针Fluo - 3/AM染色 ,利用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞缺氧 /复氧及在复方丹参滴丸保护作用下心肌细胞内钙离子荧光强度变化。结果 ... 目的 :探讨复方中药丹参滴丸对缺氧 /复氧心肌细胞的保护作用。方法 :培养的乳鼠心肌细胞 ,用钙探针Fluo - 3/AM染色 ,利用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞缺氧 /复氧及在复方丹参滴丸保护作用下心肌细胞内钙离子荧光强度变化。结果 :缺氧加丹参保护组 ,细胞内钙离子荧光强度 (12 17 78± 312 0 7)明显低于单纯缺氧组 (15 0 9 43± 5 0 8 5 8) ;缺氧复氧加丹参组 ,细胞内钙离子荧光强度为 (15 6 7 91± 5 77 6 1) ,亦较缺氧再给氧组 (16 17 6± 477 5 3)低。结论 :复方丹参滴丸对缺氧心肌细胞有明显保护作用。 展开更多
关键词 复方丹参滴丸 缺氧 心肌细胞 钙离子 平均荧光强度 心肌缺血 再灌注损伤 心肌保护
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冬虫夏草醇提取物对大鼠缺血再灌注过程心肌保护作用研究 被引量：29
3
作者 刘凤芝 李延平 +5 位作者 黄明莉 姜杰玲 谢振华 赵雅君 孙金圣 王孝铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期240-241,共2页
目的和方法：观察冬虫夏草对缺血再灌注过程心肌保护作用。采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ非循环式离体心脏灌流方法，与正常对照组、缺血再灌组、刺五加注射液用药组相对比，研究了冬虫夏草醇提取物对大鼠心肌缺血－再灌注过程脂质过氧化产... 目的和方法：观察冬虫夏草对缺血再灌注过程心肌保护作用。采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ非循环式离体心脏灌流方法，与正常对照组、缺血再灌组、刺五加注射液用药组相对比，研究了冬虫夏草醇提取物对大鼠心肌缺血－再灌注过程脂质过氧化产物（ＭＤＡ）和腺嘌呤核苷酸含量的影响。结果：冬虫夏草醇提取物显著降低了再灌注心肌的ＭＤＡ水平（Ｐ＜０．０１）及显著提高了心肌中腺嘌呤核苷酸含量（Ｐ＜００１）。结论：冬虫夏草可通过改善心肌的能量代谢减少缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 再灌注损伤 心肌缺血 冬虫夏草 醇提取物
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丹参酮Ⅱ-A对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及L-型钙电流的影响 被引量：74
4
作者 徐长庆 王孝铭 +3 位作者 范劲松 郝雪梅 周盈颖 刘泰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期43-47,共5页
本实验采用膜片钳全细胞式记录方法，观察了丹参酮Ⅱ－Ａ（ＤＳＴ）对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及Ｌ－型钙电流的影响。用蛋白酶（０．２ｍｇ／ｍｌ）循环消化的方法获取了７８－８０％耐钙心肌嵪赴Ｊ笛楸砻鳎模樱阅芟灾醵屉嗍笮募〉... 本实验采用膜片钳全细胞式记录方法，观察了丹参酮Ⅱ－Ａ（ＤＳＴ）对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及Ｌ－型钙电流的影响。用蛋白酶（０．２ｍｇ／ｍｌ）循环消化的方法获取了７８－８０％耐钙心肌嵪赴Ｊ笛楸砻鳎模樱阅芟灾醵屉嗍笮募〉ハ赴亩鞯缥皇背蹋ǎ粒校模始亮恳览倒叵担ǎ颍剑埃梗梗欢跃蚕⒌缥唬ǎ遥校┪藓斡跋欤唬模樱裕保唉蹋恚铮臁ぃ蹋倍猿洌ǎ希樱┖投鞯缥环龋ǎ粒校粒┪尴灾跋欤模樱裕玻唉蹋恚铮臁ぃ蹋焙停矗唉蹋恚铮臁ぃ蹋痹蚰苁梗希雍停粒校撩飨约跎伲毙募∠赴谋３值缪刮矗埃恚郑剑埃恚郑碳さ缪故背涛玻担埃恚螅德饰埃担龋保保埃玻昂停矗唉蹋恚铮臁ぃ蹋保模樱钥墒梗蹋透颇谙蚍宓缌鞣直鸺跎伲常担玻ァⅲ担罚罚ズ停罚矗罚ィǎ校迹埃埃担圆煌缪棺畲蠹せ罡频缌鞯牡缪挂览登呒拔榷せ钋呶抻跋臁Ｏ匀唬げ瓮颍辆哂欣嗨埔觳Ｑ蹋透仆ǖ雷瓒霞磷饔谩？ 展开更多
关键词 动作电位 丹参酮 钙
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运动训练通过诱导自噬、抑制凋亡改善老龄大鼠心脏功能 被引量：21
5
作者 张昊 王伟伟 +7 位作者 薛过 张伟华 王丽娜 林岩 姜晓姝 田野 徐长庆 赵雅君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期11-17,共7页
目的:观察梯度运动对老龄大鼠心肌细胞自噬及凋亡的影响,探讨运动训练提高老龄大鼠心脏功能的机制。方法:实验分为3组,青年组(young)、老年组(old)和老年运动组(old+Ex)。超声心动图记录大鼠心脏功能,透射电镜观察心肌细胞超微结构变化... 目的:观察梯度运动对老龄大鼠心肌细胞自噬及凋亡的影响,探讨运动训练提高老龄大鼠心脏功能的机制。方法:实验分为3组,青年组(young)、老年组(old)和老年运动组(old+Ex)。超声心动图记录大鼠心脏功能,透射电镜观察心肌细胞超微结构变化、自噬体的形成以及线粒体形态学的改变,Western blotting检测心肌组织自噬相关蛋白5(Atg5)、自噬相关蛋白Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及心肌线粒体细胞色素C(Cyt C)蛋白的表达,TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,分光光度法检测钙诱导的线粒体通透性转换孔(mPTP)开放。结果:(1)与young组比较,透射电镜下可见old组大鼠心肌肌原纤维排列不整齐,线粒体基质疏松,线粒体膜有破裂,肌丝间有大量脂褐素颗粒沉积;心肌组织中Beclin 1与Atg5蛋白表达降低,LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低,线粒体Cyt C表达下降,细胞凋亡指数增加,mPTP开放数目增加,左心室收缩末期与舒张末期直径明显增大,左心室射血分数与缩短分数降低(P<0.05或P<0.01)。(2)与old组比较,old+Ex组大鼠心肌超微结构观察可见肌节结构清晰,线粒体基质致密,数目增多,自噬体形成增多,脂褐素颗粒沉积明显减少;并且心肌组织Beclin 1与Atg5蛋白表达增加,LC3 I向LC3 II转换增加,细胞凋亡指数减少,mPTP开放数目减少,心肌线粒体Cyt C表达上调,左室功能有明显改善(P<0.05或P<0.01)。结论:运动训练通过上调老龄大鼠心肌细胞自噬,抑制细胞凋亡,改善老龄大鼠心脏功能。 展开更多
关键词 运动 自噬 细胞凋亡 线粒体通透转换孔 老年心脏 大鼠
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复方丹参滴丸对人血管内皮细胞功能及形态保护作用的研究 被引量：32
6
作者 王东霞 王孝铭 许晶兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期933-937,共5页
目的:观察复方丹参滴丸对细菌内毒素(LPS)所致人血管内皮细胞功能及形态结构损伤的作用。方法:人脐静脉内皮细胞培养,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的LPS培养液培养细胞12 h),按分组分别把不同浓度的丹参滴丸(1 g/L、0.5 g/L、0.25 g/L... 目的:观察复方丹参滴丸对细菌内毒素(LPS)所致人血管内皮细胞功能及形态结构损伤的作用。方法:人脐静脉内皮细胞培养,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的LPS培养液培养细胞12 h),按分组分别把不同浓度的丹参滴丸(1 g/L、0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L)于损伤前、损伤后加入,分别进行细胞活力、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET-1)、细胞内钙浓度的测定及倒置显微镜、倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜、透射电镜等形态学指标观察。结果:损伤后给不同浓度丹参滴丸对LPS所致人血管内皮细胞损伤均有明显减轻(P<0.05)。其中0.5 g/L作用最为突出(P<0.01)。损伤前给药只有浓度0.5 g/L、0.25 g/L对LPS所致内皮细胞损伤有明显减轻(P<0.05),而高浓度(1 g/L)、低浓度(0.1 g/L)虽亦有减轻,但无统计学意义(P>0.05)。损伤前、后分别给予不同浓度滴丸后,LPS所致血管内皮细胞形态结构损伤均有明显减轻。结论:丹参滴丸对血管内皮细胞具明显保护作用。 展开更多
关键词 丹参 脐静脉内皮细胞 脂多糖类 一氧化氮 内皮缩血管肽1 复方丹参滴丸
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复方丹参滴丸对过氧化氢损伤的人脐静脉血管内皮细胞的保护作用 被引量：38
7
作者 许晶兰 王孝铭 王东霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期929-932,共4页
目的:观察复方丹参滴丸对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用,探讨其在心脑血管疾病治疗中的机制。方法:用0.1 mmol/L H2O2制造HUVEC损伤模型;按分组把不同浓度的丹参滴丸(0.5g/L0、.25 g/L、0.1 g/L)分别于损伤前、... 目的:观察复方丹参滴丸对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用,探讨其在心脑血管疾病治疗中的机制。方法:用0.1 mmol/L H2O2制造HUVEC损伤模型;按分组把不同浓度的丹参滴丸(0.5g/L0、.25 g/L、0.1 g/L)分别于损伤前、损伤后加入,分别测定细胞活力(MTT法)观察滴丸对H2O2损伤内皮细胞活性的影响;硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;硝酸酶还原法测定细胞培养液中一氧化氮含量;免疫细胞化学法观察滴丸对H2O2损伤的内皮细胞NOS2、NOS3(一氧化氮合酶2、3)、NF-κB(核因子кB)表达的影响;同时进行形态学观察。结果:0.1 mmol/L H2O2对HUVEC有损伤作用。H2O2损伤后,滴丸能显著增加细胞活性;显著抑制H2O2诱导HUVEC MDA的产生;双向调节NO产生;影响H2O2损伤后细胞NOS3、NF-κB的表达。结论:损伤前给滴丸浓度0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致内皮细胞损伤有明显拮抗作用。损伤后给药滴丸浓度0.5g/L0、.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致人血管内皮细胞损伤有明显拮抗作用,其作用机制与抗氧化作用及调节NOS2、NOS3、NF-κB的表达有关。 展开更多
关键词 脐静脉内皮细胞 过氧化氢 一氧化氮合酶 NF-ΚB 复方丹参滴丸
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快速等浓度洗脱高效液相色谱法测定心肌组织中的能量物质 被引量：15
8
作者 马丽英 张乃忠 +4 位作者 邢虹 王孝铭 娄延平 李晖 梁殿权 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期140-143,共4页
本文利用快速等浓度洗脱高效液相色谱技术,测定心肌组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(PCr)、次黄嘌呤(Hypo)、尼克酰胺腺嘌呤二核营酸(NAD),腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸(ADP)、腺苷三磷酸(ATP)和环一磷酸腺苷(cAMP),同时检测与能量代谢有关的... 本文利用快速等浓度洗脱高效液相色谱技术,测定心肌组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(PCr)、次黄嘌呤(Hypo)、尼克酰胺腺嘌呤二核营酸(NAD),腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸(ADP)、腺苷三磷酸(ATP)和环一磷酸腺苷(cAMP),同时检测与能量代谢有关的标准物质色谱。检测结果表明,等浓度洗脱高效液相色谱技术,可测定与能量代谢有关的18种物质,其中八种物质可同时测定,此八种标准物质的重复性(CV%在0.97-3.78%)和回收率(88.1-117.6%),均符合方法学要求。因此,该技术是测定心肌等生物组织中能量物质的较理想方法。 展开更多
关键词 心肌 能量代谢 色谱法 高压液相
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缺血/再灌注对大鼠心肌线粒体电子传递与质子泵出偶联的影响 被引量：26
9
作者 张桦 焦选茂 +1 位作者 刘树森 王孝铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期561-564,共4页
本实验采用Langendorff灌流装置造成大鼠心肌缺血/再灌模型,用差速离心法分离线粒体,用Clark氧电极测定RCR、ADP/O,用铁氰化钾脉冲法测定了呼吸链电子传递及质子泵出初速度。结果表明,H^+/2e在缺血时与对照比无显著差异,而再灌组显著低... 本实验采用Langendorff灌流装置造成大鼠心肌缺血/再灌模型,用差速离心法分离线粒体,用Clark氧电极测定RCR、ADP/O,用铁氰化钾脉冲法测定了呼吸链电子传递及质子泵出初速度。结果表明,H^+/2e在缺血时与对照比无显著差异,而再灌组显著低于对照,H^+/2e下降早于ADP/O下降。RCR、ADP/O在缺血早期及再灌时显著高于对照。 展开更多
关键词 缺血 再灌注 线粒体 心肌 能量代谢
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丹参素对大鼠心肌缺血/再灌注致线粒体变化的影响及其作用机理的探讨 被引量：21
10
作者 张力 王孝铭 +2 位作者 梁殿权 赵保路 忻文娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第6期420-423,共4页
本实验分别以ESR自旋标记法、TBA比色法测定大鼠离体心脏缺血,再灌注时线粒体膜流动性及脂质过氧化物含量。发现心肌线粒体膜深层的流动性在缺血40分钟后有氧再灌注20分钟时(S=0.112±0.006、τ_e=7.13±0.09×10^(-10)sec... 本实验分别以ESR自旋标记法、TBA比色法测定大鼠离体心脏缺血,再灌注时线粒体膜流动性及脂质过氧化物含量。发现心肌线粒体膜深层的流动性在缺血40分钟后有氧再灌注20分钟时(S=0.112±0.006、τ_e=7.13±0.09×10^(-10)sec)明显低于富氧灌注组(S=0.103±0.007、τ_e=6.86±0.20×10^(-10)sec),P<0.05;而脂质过氧化物含量再灌注组(3.02±0.68nmol/mgpr.)则极明显高于富氧灌注组(1.94±0.35nmol/mgpr.),P<0.01。预先给予丹参素,对以上变化有明显的改善作用,上述两项指标与富氧灌注组相比,无明显差别,P>0.05。另外,采用ESR自旋捕集技术发现丹参素对外源性O_2^-·有清除作用。因而推测,丹参素可能作为一种O_2^-·的清除剂保护心肌线粒体免受氧自由基引发的脂质过氧化损害。 展开更多
关键词 线粒体 心肌 过氧化脂质 丹参素
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缺血预适应对青年与老年大鼠缺血/再灌注心肌氧化应激及线粒体功能的影响 被引量：17
11
作者 柴囡楠 张昊 +2 位作者 王俊莹 李玲旭 赵雅君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1737-1743,共7页
目的:探讨缺血预适应(ischemic preconditioning,IPC)对青年与老年大鼠缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)心肌损伤的影响。方法:雄性3月龄(青年)与20月龄(老年)Wistar大鼠,应用离体心脏灌流方法复制心肌IR与IPC模型。实验分为青年缺... 目的:探讨缺血预适应(ischemic preconditioning,IPC)对青年与老年大鼠缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)心肌损伤的影响。方法:雄性3月龄(青年)与20月龄(老年)Wistar大鼠,应用离体心脏灌流方法复制心肌IR与IPC模型。实验分为青年缺血/再灌注(YIR)组、青年缺血预适应(YPC)组、老年缺血再灌注(OIR)组与老年缺血预适应(OPC)组。透射电镜观察心肌及心肌线粒体超微结构变化;TTC染色测定心肌梗死面积;比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附法测定心肌组织硝基化与羰基化蛋白质含量,TUNEL方法检测心肌细胞凋亡;氧电极法测定线粒体呼吸功能及钙诱导的线粒体渗透性转运孔开放情况。结果:与YIR组比较,YPC组心肌梗死面积明显减少,冠脉流出液中LDH活性降低,心肌组织的SOD活性增加,MDA含量降低,心肌硝基化与羰基化蛋白含量降低。电镜下可见YPC组心肌及分离的心肌线粒体膜结构完整、基质致密。YIR组心肌线粒体呼吸控制率与Ⅲ态耗氧量及P/O比值均明显增加,质子漏出减少,钙诱导的线粒体肿胀明显减轻,心肌细胞凋亡率下降。而与OIR组比较,OPC组上述指标均无显著统计学差异。与YPC组比较,OPC组心肌超微结构损伤明显增加,心肌氧化应激水平增加,线粒体呼吸功能下降,心肌细胞凋亡与坏死增多。结论:缺血预适应能够保护青年大鼠心肌缺血/再灌注损伤;而老年大鼠心脏对预适应刺激减敏,导致缺血预适应心肌保护作用钝化,这可能与老龄IPC心脏氧化应激水平增加导致线粒体损伤、细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 缺血/再灌注 缺血预适应 氧化应激 线粒体功能 心肌
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大鼠心肌缺血再灌线粒体跨膜电位及ATPase合成活性的变化 被引量：15
12
作者 苏晓华 王孝铭 +2 位作者 朱世军 焦选茂 刘树森 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期190-193,共4页
用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ无做功非循环式离休心脏灌注模型，琥珀酸为呼吸链底物，分别以Ｒｈ１２３荧光染料流动透析法和荧光素一荧光素酶系统发光法来检测缺血／再灌注对心肌线粒体和内膜体跨膜电位及ＡＴＰａｓｅ合成活力的影响，并... 用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ无做功非循环式离休心脏灌注模型，琥珀酸为呼吸链底物，分别以Ｒｈ１２３荧光染料流动透析法和荧光素一荧光素酶系统发光法来检测缺血／再灌注对心肌线粒体和内膜体跨膜电位及ＡＴＰａｓｅ合成活力的影响，并观察了丹参素的保护作用。结果发现：缺血２０ｍｉｎ，心肌线粒体能化前跨膜电位升高，能化态跨膜电位不变，再灌注２０ｍｉｎ后，线粒体能化前跨膜电位不变，能化态跨膜电位降低。去除线粒体外膜的内膜体，缺血时能化前跨膜电位升高的现象消失，其它各多数变化趋势与线粒体相同，说明缺血／再灌早期线粒体跨膜电位的变化与其外膜有关。内膜体ＡＴＰａｓｅ合成活力缺血时无变化，再灌时降低，与内膜体能化态跨膜电位变化相同。缺血组能化前内膜体体积缩小；丹参素对线粒体跨膜电位、内膜体跨膜电位和ＡＴＰ合成反应活性有明显的保护与恢复作用。 展开更多
关键词 心肌缺血 线粒体 跨膜电位 腺苷三磷酸酶
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钙敏感受体在缺氧-复氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡中的作用 被引量：10
13
作者 吴博 张伟华 +7 位作者 李全凤 高秀香 张力 杨金霞 王秀丽 张明爽 张卓然 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1249-1253,共5页
目的:观察大鼠心肌钙敏感受体(CaSR)在心肌缺氧/再灌注损伤时的表达情况及其介导的细胞内钙变化,以及其参与细胞凋亡的相关信号转导途径。方法:Lagendorff离体灌流方法复制心脏缺氧-复氧(anoxia-reoxygenation,A/R)模型;观察缺氧/再灌... 目的:观察大鼠心肌钙敏感受体(CaSR)在心肌缺氧/再灌注损伤时的表达情况及其介导的细胞内钙变化,以及其参与细胞凋亡的相关信号转导途径。方法:Lagendorff离体灌流方法复制心脏缺氧-复氧(anoxia-reoxygenation,A/R)模型;观察缺氧/再灌注及加入CaSR激动剂时CaSR的表达;应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察大鼠心肌细胞正常、缺氧、缺氧/再灌注时[Ca2+]i变化;HE染色观察细胞形态学改变;TUNEL染色观察细胞凋亡;Western blotting检测心肌组织胞浆中caspase3、caspase9的表达。结果:心肌A/R组及加入CaSR激动剂时CaSR的表达明显增高,细胞内钙明显升高。HE染色发现A/R组和激动剂组损伤明显,TUNEL显示2组凋亡细胞大量存在。同时,A/R组和激动剂组胞浆中caspase3和caspase9的表达增加。结论:CaSR参与大鼠心肌A/R损伤时细胞内钙超载的形成,并促进A/R损伤时心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 受体 钙敏感 钙 细胞凋亡 缺氧
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人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl^-转运过程中作用的研究 被引量：6
14
作者 刘利梅 傅国辉 +3 位作者 王天英 姜晓姝 郭卓维 史从宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期245-250,共6页
采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利... 采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利用PCR方法 ,以 pFAST Bac mdb3为模板扩增出带 3蛋白膜段结构域的 4种截断突变体 ,分别去除带 3蛋白C端域后 4个 (Ala90 8～Val911)、 16个 (Asp896～Val911)、 2 0个 (Lys892～Val911)、 32个(Asn880～Val911)氨基酸序列 ,测序后将其克隆至表达载体 pYD1上 ,构建酵母表达质粒 pYD1 Trunc4、pYD1 Trunc16、pYD1 Trunc2 0和 pYD1 Trunc32 ,诱导 4组突变体的蛋白质表达 .然后测定Cl-的转运活性 ,结果发现去除后 2 0个 (Lys892～Val911)氨基酸残基后 ,离子转运活性明显下降 ,而去除后 32个 (Asn880～Val911)后 ,离子转运没有进一步下降 ,说明Lys892～Phe895 4个氨基酸残基在带 展开更多
关键词 人类红细脑膜 带3蛋白 C端域Lys892-Phe895 Cl-转运过程 截断突变体 酵母表面展示系统
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局部肾素血管紧张素系统在心肌细胞氧反常中的作用 被引量：14
15
作者 朱甫祥 马丽英 +2 位作者 王孝铭 赵铁强 李晓哲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期126-128,共3页
利用成年大鼠分离的心肌细胞氧反常模型,用新一代钙荧光探针(Fluo-3)检测细胞内游离钙浓度。对比观察了血管紧张素Ⅱ及转换酶抑制剂(巯甲丙脯酸)对钙超载的影响。结果表明前者促成钙超载的形成,而后者可以防止钙超载。从而证明心肌细胞... 利用成年大鼠分离的心肌细胞氧反常模型,用新一代钙荧光探针(Fluo-3)检测细胞内游离钙浓度。对比观察了血管紧张素Ⅱ及转换酶抑制剂(巯甲丙脯酸)对钙超载的影响。结果表明前者促成钙超载的形成,而后者可以防止钙超载。从而证明心肌细胞的肾素血管紧张素系统在氧反常时细胞钙超载中具有重要作用。 展开更多
关键词 心肌缺血 血管紧张素 卡托普利
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血管紧张素Ⅱ对离体心肌线粒体呼吸功能和膜电位的影响 被引量：10
16
作者 苏晓华 王孝铭 +3 位作者 朱世军 焦选茂 朱丽萍 刘树森 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期313-315,共3页
本实验用血管紧张素Ⅱ灌流离体大鼠心脏，观察其对离体心肌线粒体能量转换功能诸参数，如Ｓｔａｔｅ３、Ｓｔａｔｅ４耗氧量、ＲＣＲ、ＡＴＰａｓｅ合成活性和水解活性，跨膜电位的变化，探讨血管紧张素Ⅱ对心肌线粒体能量代谢的影响及... 本实验用血管紧张素Ⅱ灌流离体大鼠心脏，观察其对离体心肌线粒体能量转换功能诸参数，如Ｓｔａｔｅ３、Ｓｔａｔｅ４耗氧量、ＲＣＲ、ＡＴＰａｓｅ合成活性和水解活性，跨膜电位的变化，探讨血管紧张素Ⅱ对心肌线粒体能量代谢的影响及其作用机制。结果表明，血管紧张素Ⅱ对心肌线粒体的作用具有明显的时相性。在第一相线粒体呼吸功能明显抑制。ＡＴＰａｓｅ合成活性降低，这势必造成ＡＴＰ的严重不足或耗竭。己糖激酶（ＨＫ）和ＡＴＰａｓｅ水解活性也相应降低，在第二相中线粒体呼吸功能，ＨＫ和ＡＴＰａｓｅ合成活性表现出恢复趋势。ＡＴＰａｓｅ水解活性和Ｓｔａｔｅ４在灌流６０ｍｉｎ内未见明显的第二相出现，它们的功能恢复可能较晚或血管紧张素Ⅱ对其具有不同的调解机制。 展开更多
关键词 血管紧张素 线粒体 心肌 呼吸功能 膜电位
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钙敏感受体在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 被引量：14
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作者 李光伟 邢文婧 +4 位作者 郝静辉 白淑芝 李宏霞 林岩 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2433-2437,共5页
目的:观察钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描技... 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素对细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,应用MTT法分析不同处理因素对细胞存活率的影响。结果:大鼠肺动脉平滑肌细胞有CaSR蛋白表达。缺氧能够增加CaSR和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、细胞存活率及[Ca2+]i(与对照组比较,P<0.05)。GdCl3(CaSR激动剂)能够增强缺氧的上述作用,NPS2390(CaSR抑制剂)则能够减弱缺氧的作用。结论:缺氧诱导的CaSR表达增加参与了缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖。 展开更多
关键词 受体 钙敏感 肺动脉平滑肌细胞 缺氧 细胞增殖
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多胺在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及意义 被引量：10
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作者 林岩 徐长庆 +4 位作者 赵雅君 王丽娜 席玉慧 李鸿珠 李光伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期417-421,共5页
目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结... 目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测ISO作用不同时点大鼠心肌组织多胺含量、ODC和SSAT mRNA和蛋白的表达。结果:与对照组比较,心脏重量参数在ISO注射后7d时显著增加,ISO注射后1d时腐胺含量增加(P<0.05),5d、7d时显著增加(P<0.01);精脒含量在ISO注射后3d时开始增加,ISO注射后7d时增加显著(P<0.01),精胺含量略有增多(P<0.05),总多胺池显著增加。心肌组织ODC和SSAT的mRNA表达在ISO注射后1d时升高(P<0.05或P<0.01),并持续在较高水平。心肌组织ODC和SSAT的蛋白表达分别在ISO注射后1d和ISO注射后5d时升高,ISO注射后7d时显著升高(P<0.01)。结论:大鼠心肌组织多胺含量增加和ODC、SSAT的表达增强可能参与ISO所致心肌肥厚的病理过程。 展开更多
关键词 多胺 鸟氨酸脱羧酶 精脒/精胺乙酰基转移酶 心肌肥厚 异丙肾上腺素
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钙敏感受体表达增加诱发内质网应激在缺氧复氧性心肌损伤中的作用 被引量：6
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作者 孙智睿 王艳丽 +4 位作者 杜丽娟 赵雅君 王丽娜 徐长庆 张伟华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1249-1253,共5页
目的:观察钙敏感受体表达增加诱发内质网应激在缺氧复氧性心肌损伤中的作用。方法:乳鼠原代心肌细胞培养4-5d后,随机分为5组:正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/Re组)、阻断剂(NiCl2,CdCl2)组、激动剂(GdCl3,NiCl2,CdCl2)组和caffeine组... 目的:观察钙敏感受体表达增加诱发内质网应激在缺氧复氧性心肌损伤中的作用。方法:乳鼠原代心肌细胞培养4-5d后,随机分为5组:正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/Re组)、阻断剂(NiCl2,CdCl2)组、激动剂(GdCl3,NiCl2,CdCl2)组和caffeine组。采用饱和氮气pH6.8的D-Hands液培养细胞3h,再用含20%新生牛血清的DMEM液培养细胞9h,复制心肌缺氧/复氧模型。检测血清LDH活力,MTT检测细胞存活率,心肌细胞caspase-12和CaSR蛋白表达水平Western blotting检测,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)测定心肌细胞内游离钙的变化。结果:缺氧/复氧组和激动剂组LDH活力、细胞内游离钙浓度均高于对照组;同时,caspase-12和CaSR的表达也明显高于对照组。反之,细胞存活率低于对照组。结论:心肌缺氧/复氧过程中,钙敏感受体表达增多,从而破坏了细胞内钙稳态诱发过度的内质网应激,通过caspase-12等凋亡蛋白表达的增多等途径引起心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 缺氧 受体 钙敏感 内质网 应激 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12 心肌细胞
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大鼠心肌缺血再灌注线粒体内膜体电子质子偶联和氧化磷酸化变化及丹参素的作用 被引量：25
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作者 苏晓华 王孝铭 +1 位作者 焦选茂 刘树森 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 1996年第2期186-189,共4页
非循环式Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ模型灌注大鼠心脏，测定线粒体内膜体的呼吸功能、质子电子传递速度及膜流动性变化，并观察了丹参素的保护作用。结果表明：缺血时态Ⅳ呼吸不变，态Ⅲ呼吸、ＡＤＰ／Ｏ、ＲＣＲ（呼吸控制率）均降低，Ｈ... 非循环式Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ模型灌注大鼠心脏，测定线粒体内膜体的呼吸功能、质子电子传递速度及膜流动性变化，并观察了丹参素的保护作用。结果表明：缺血时态Ⅳ呼吸不变，态Ⅲ呼吸、ＡＤＰ／Ｏ、ＲＣＲ（呼吸控制率）均降低，Ｈ￣＋传递速度、ｅ￣－传递速度、Ｈ￣＋／ｅ￣－亦降低，但膜流动性不变。再灌注时除ＡＤＰ／ｏ进一步降低外，其余各参数均部分恢复，但未达到对照组水平，且膜流动性降低。用丹参素保护的缺血组和再灌组Ｈ￣＋／ｅ￣－显著高于对照组，其它各参数与对照组间无显著差异。结果提示：缺血早期线粒体内膜体呼吸链功能处于抑制状态，氧化磷酸化部分解偶联，但无膜脂结构损伤。再灌解除了这种抑制，呼吸链功能有部分恢复，但达不到对照水平。丹参素对线粒体呼吸链功能有明显保护作用。 展开更多
关键词 线粒体 心肌缺血 膜流动性 氧化磷酸化 丹参素
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