目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单...目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例,半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA(RORγt mRNA)和IL-17mRNA的表达变化,ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγt mRNA的表达,TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义(0.30%±0.14%vs 0.51%±0.11%,P<0.01),RORγt mRNA的表达差异具有统计学意义(0.217±0.038 vs 0.458±0.127,P<0.01)。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA表达强度差异无统计学意义(0.868±0.222 vs 0.799±0.205,P>0.05),IL-17蛋白浓度差异无统计学意义(90.04±22.56pg/ml vs125.38±27.58pg/ml,P>0.05),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义(1.396±0.359 vs 2.415±0.604,P<0.01),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义(973.32±217.33pg/ml vs 1498.46±317.27pg/ml,P<0.01)。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β组(P<0.01)。结论 TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌,IL-23能明显增强这种作用。展开更多
文摘目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例,半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA(RORγt mRNA)和IL-17mRNA的表达变化,ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγt mRNA的表达,TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义(0.30%±0.14%vs 0.51%±0.11%,P<0.01),RORγt mRNA的表达差异具有统计学意义(0.217±0.038 vs 0.458±0.127,P<0.01)。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA表达强度差异无统计学意义(0.868±0.222 vs 0.799±0.205,P>0.05),IL-17蛋白浓度差异无统计学意义(90.04±22.56pg/ml vs125.38±27.58pg/ml,P>0.05),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义(1.396±0.359 vs 2.415±0.604,P<0.01),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义(973.32±217.33pg/ml vs 1498.46±317.27pg/ml,P<0.01)。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β组(P<0.01)。结论 TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌,IL-23能明显增强这种作用。
