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快速等浓度洗脱高效液相色谱法测定心肌组织中的能量物质 被引量:15
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作者 马丽英 张乃忠 +4 位作者 邢虹 王孝铭 娄延平 李晖 梁殿权 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期140-143,共4页
本文利用快速等浓度洗脱高效液相色谱技术,测定心肌组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(PCr)、次黄嘌呤(Hypo)、尼克酰胺腺嘌呤二核营酸(NAD),腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸(ADP)、腺苷三磷酸(ATP)和环一磷酸腺苷(cAMP),同时检测与能量代谢有关的... 本文利用快速等浓度洗脱高效液相色谱技术,测定心肌组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(PCr)、次黄嘌呤(Hypo)、尼克酰胺腺嘌呤二核营酸(NAD),腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸(ADP)、腺苷三磷酸(ATP)和环一磷酸腺苷(cAMP),同时检测与能量代谢有关的标准物质色谱。检测结果表明,等浓度洗脱高效液相色谱技术,可测定与能量代谢有关的18种物质,其中八种物质可同时测定,此八种标准物质的重复性(CV%在0.97-3.78%)和回收率(88.1-117.6%),均符合方法学要求。因此,该技术是测定心肌等生物组织中能量物质的较理想方法。 展开更多
关键词 心肌 能量代谢 色谱法 高压液相
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MES23.5细胞酪氨酸羟化酶的种属来源及其重组酶的活性测定 被引量:12
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作者 于泓 李尧华 +3 位作者 冯秀丽 吴燕川 周虹 陈彪 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期95-100,共6页
MES 2 3 5细胞作为研究神经变性疾病的工具 ,是一种杂交瘤性多巴胺能神经元细胞系 ,由大鼠胚胎中脑细胞与小鼠神经母细胞瘤 胶质瘤细胞系N18TG2杂交而成 .其酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase ,TH)的动物种属来源不清楚 .应用反转录... MES 2 3 5细胞作为研究神经变性疾病的工具 ,是一种杂交瘤性多巴胺能神经元细胞系 ,由大鼠胚胎中脑细胞与小鼠神经母细胞瘤 胶质瘤细胞系N18TG2杂交而成 .其酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase ,TH)的动物种属来源不清楚 .应用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)法从MES 2 3 5细胞系中克隆了编码TH的cDNA ;结构分析表明 ,其cDNA编码区由 14 97碱基构成 ,共编码 4 98个氨基酸 ,与大鼠和小鼠TH的同源程度分别为 93%和 10 0 % .该杂交瘤细胞系表达小鼠TH .将该cDNA亚克隆至原核表达载体pGEX 4T 1,经原核细胞表达、亲和层析得到了电泳纯的基因重组小鼠TH(recombinantmousetyrosinehydroxylase ,rmTH) .改良和建立了一种体外分析TH活性的新方法 .活性分析证明 ,纯化的rmTH能催化L 酪氨酸发生加单氧反应生成L 3,4 二羟基苯丙氨酸 (L 多巴 ) .rmTH的表观分子量为 5 6kD ;其酶促加单氧反应的最适pH值为 7 0 .乙二胺四乙酸能显著抑制此酶的活性 ,而亚铁离子能明显增强其活性 . 展开更多
关键词 MES23.5细胞 酪氨酸羟化酶 种属来源 重组酶 活性
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抗坏血酸对酵母蔗糖酶的激活动力学研究 被引量:6
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作者 范业鹏 杜鹏 +3 位作者 吴衍昌 姜玉梅 杨歌德 王淑娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期98-101,共4页
采用甲苯自溶法从鲜酵母中提取了蔗糖酶,并用乙醇分级及DEAE-纤维素柱层析进行了纯化,用PAG凝胶电泳作了纯度鉴定,在pH5.0,30℃条件下进行了酶反应,用双倒数作图法测出其Km=2.1×10-2mol/L,V... 采用甲苯自溶法从鲜酵母中提取了蔗糖酶,并用乙醇分级及DEAE-纤维素柱层析进行了纯化,用PAG凝胶电泳作了纯度鉴定,在pH5.0,30℃条件下进行了酶反应,用双倒数作图法测出其Km=2.1×10-2mol/L,Vmax=0.26(每分钟的光密度值).在此系统中,加入不同浓度的抗坏血酸(Vit.C),发现其具有激活作用并存在量效关系.双倒数作图显示:酶的表观Vmax(Vp)随抗坏血酸浓度的增加而增大,但其表观Km(Kp)不变(Kp=Km).经实验结果分析,推论出抗坏血酸激活作用的酶促反应方程式。 展开更多
关键词 蔗糖酶 抗坏血酸 激活剂 激活动力学 酵母
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钙敏感受体在大鼠心肌缺血/再灌注损伤的表达变化及与心肌损伤关系 被引量:8
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作者 姜春明 韩丽萍 +3 位作者 李鸿珠 徐长庆 孙轶华 赵炜明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1084-1087,共4页
目的:观察钙敏感受体(CaSR)在大鼠心肌缺血/再灌注时的表达变化,揭示其与心肌缺血/再灌注损伤的关系。方法:Wistar大鼠随机分为5组:假手术组(sham组)、缺血再灌注1、2、4和6h组(I/R1h、2h、4h、6h组)。采用冠状动脉结扎和松结的方法,复... 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在大鼠心肌缺血/再灌注时的表达变化,揭示其与心肌缺血/再灌注损伤的关系。方法:Wistar大鼠随机分为5组:假手术组(sham组)、缺血再灌注1、2、4和6h组(I/R1h、2h、4h、6h组)。采用冠状动脉结扎和松结的方法,复制大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤模型,记录左室收缩压(LVSP)和左室内压最大变化速率(±dp/dtmax),测定血清LDH、SOD活性和MDA含量,透射电镜观察心肌超微结构变化,RT-PCR法检测心肌组织中CaSR mRNA的表达变化。结果:LVSP、左室内压±dp/dtmax及SOD活性随再灌注时间延长而减低,LDH活性和MDA含量在再灌注2h时最高;心肌超微结构损伤在再灌注1h、2h较重,随再灌注时间延长而减轻;大鼠心肌缺血/再灌注1h、2h心肌组织CaSR的mRNA表达升高,再灌注4h、6h后降低。结论:CaSR mRNA表达多时心肌损伤较重,CaSR可能参与了心肌缺血/再灌注损伤。 展开更多
关键词 心肌再灌注损伤 受体 钙敏感 自由基
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P38信号通路在人脐静脉内皮细胞表达P-选择素中的作用 被引量:5
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作者 李艳波 邓华聪 +2 位作者 郑丹 李呼伦 周宏博 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期291-293,共3页
目的 :研究P38信号通路 (P38mitogen activatedproteinki nase ,P38MAPK)在人脐静脉内皮细胞表达P 选择素以及糖尿病动脉粥样硬化中的作用。方法 :分别以高葡萄糖、糖基化终产物 (AGE)、高胰岛素和过氧化氢刺激人脐静脉内皮细胞系ECV 30... 目的 :研究P38信号通路 (P38mitogen activatedproteinki nase ,P38MAPK)在人脐静脉内皮细胞表达P 选择素以及糖尿病动脉粥样硬化中的作用。方法 :分别以高葡萄糖、糖基化终产物 (AGE)、高胰岛素和过氧化氢刺激人脐静脉内皮细胞系ECV 30 4 ,再以P38MAPK特异性抑制剂SB2 0 35 80预处理 ,观察ECV 30 4细胞系中磷酸化P38MAPK和P 选择素的表达。结果 :4种刺激因素均可单独激活P38MAPK ,使磷酸化P38MAPK表达量明显增加 ,P 选择素表达量也明显增加 ;以SB2 0 35 80预处理后 ,P 选择素的表达被明显抑制。结论 :P38MAPK是P 选择素的上游信号分子 。 展开更多
关键词 P38信号通路 P-选择素 糖尿病 动脉粥样硬化
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L_(7811)鼠腹水肿瘤细胞^(31)P核磁共振的研究 被引量:1
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作者 张乃忠 王凤茹 +5 位作者 马丽英 韩庆宏 王均衡 刘秀萍 吴家振 周淑华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第3期210-213,共4页
用^(31)P核磁共振技术(^(31)P-NMR)研究了L_(7811)鼠腹水肿瘤细胞和615系鼠胸腺细胞(正常对照细胞)。结果发现在肿瘤晚期阶段,L_(7811)腹水肿瘤细胞的含磷化合物未进入完全不活跃状态。此外,腹水肿瘤细胞的磷脂组成与含量亦有明显改变... 用^(31)P核磁共振技术(^(31)P-NMR)研究了L_(7811)鼠腹水肿瘤细胞和615系鼠胸腺细胞(正常对照细胞)。结果发现在肿瘤晚期阶段,L_(7811)腹水肿瘤细胞的含磷化合物未进入完全不活跃状态。此外,腹水肿瘤细胞的磷脂组成与含量亦有明显改变。因此,^(31)P-NMR谱可做为观察肿瘤细胞内能量生成和某些磷脂合成宏观动态过程的一项参考指标。 展开更多
关键词 腹水肿瘤细胞 核磁共振 能量物质
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