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外源基因在耻垢分枝杆菌中表达效率的研究 被引量:5
1
作者 程继忠 皇甫永穆 海涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期249-253,共5页
将外源基因———日本血吸虫 2 6K抗原 (Schistosomajaponicum 2 6Kantigen ,Sj2 6GST)基因克隆到大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒 pBCG 2 0 0 0中 ,构建四个不同的表达载体 ,研究了它们在耻垢分枝杆菌中的表达效率 .首先将含人结核杆菌热休... 将外源基因———日本血吸虫 2 6K抗原 (Schistosomajaponicum 2 6Kantigen ,Sj2 6GST)基因克隆到大肠杆菌 分枝杆菌穿梭质粒 pBCG 2 0 0 0中 ,构建四个不同的表达载体 ,研究了它们在耻垢分枝杆菌中的表达效率 .首先将含人结核杆菌热休克蛋白 70 (heatshockprotein ,hsp70 )启动子的质粒pMT 70用NcoⅠ切 ,进行两种不同的修饰 ,得到不同的SD序列 ,将Sj2 6GST基因克隆进去 ;再将含hsp70启动子和Sj2 6GST的基因片段克隆到 pBCG 2 0 0 0中 ,筛选出不同SD序列、不同方向和不同拷贝数的分枝杆菌表达载体四个 .所表达的天然重组Sj2 6GST在SDS PAGE上分子质量为 2 6ku处可见明显的表达蛋白带 .通过薄层扫描分析 ,发现表达质粒中 ,双拷贝启动子 外源基因组合表达效率最高 ,是单拷贝组合的 1 6倍 .而不同的克隆方向和不同的SD序列 (两者相差 3个碱基 )对表达效率的影响不明显 . 展开更多
关键词 分枝杆菌 表达效率 外源基因 疫苗
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综合三球温作为热环境评价指标的研究 被引量:1
2
作者 贺涵贞 秦东日 +4 位作者 张伟 张国高 胡万芬 梁军 熊伟 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期11-14,共4页
本文报告了用综合三球温度对高温强辐射作业(如轧钢)和高温高湿作业(漂染)环境进行评价。并对钢厂257名(1030人次)和印染厂24各(180人次)作业工人劳动前、后,测定了口温、脉率、出汗状况,询问热感和不适感。对8名健康男性,在人工气候室... 本文报告了用综合三球温度对高温强辐射作业(如轧钢)和高温高湿作业(漂染)环境进行评价。并对钢厂257名(1030人次)和印染厂24各(180人次)作业工人劳动前、后,测定了口温、脉率、出汗状况,询问热感和不适感。对8名健康男性,在人工气候室(相对湿度80%、气温26~31℃条件下)从事中等强度劳动进行了验证。结果:在上述三种环境中,各项生理指标均随干球温度的升高而变化,与综合三球温呈非常显著正相关(P<0.001)。热环境工作地点综合温度的上限值:夏季室外通风计算温度低于30℃的地区为28~31℃,超过30℃的地区为29~31℃。 展开更多
关键词 热辐射 湿度 上限值
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免疫印迹法检测高温作业工人血清中热应激蛋白70ku抗原和抗体方法的研究 被引量:2
3
作者 邬堂春 吴扬 +2 位作者 张伟 贺涵贞 张国高 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第5期351-354,共4页
热应激蛋白70ku(heatstressprotein,HSP70)是主要的热应激蛋白。用已纯化的HSP70抗原和已制备好的HSP70抗体,采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性相结合的免疫印迹法(westernblot)检测17名高... 热应激蛋白70ku(heatstressprotein,HSP70)是主要的热应激蛋白。用已纯化的HSP70抗原和已制备好的HSP70抗体,采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性相结合的免疫印迹法(westernblot)检测17名高温作业工人和17名对照组人群血清中HSP70抗原和抗体。结果,与对照组相比,高温作业工人血清中HSP70含量增加,HSP70抗体阳性率为23.5%。结果表明westernblot法用于检测工人血清中HSP70抗原和抗体是可行的。 展开更多
关键词 高温作业 热应激蛋白 HSP70 抗原 免疫印迹
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原发性食管腺癌癌基因、抗癌基因的扩增与其蛋白产物的对比研究 被引量:1
4
作者 张永幸 蔡婷 +5 位作者 乔思杰 沈琼 正冈昭 小山浩 张国高 贺涵贞 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期200-202,共3页
采用免疫组化和原位分子杂交技术观察p53、H-ras、c-erbB-2、c-myc癌基因和抗癌基因及其蛋白产物在原发性食管腺癌(PEA)中的联合表达情况,以探讨PEA的发生发展机制。结果表明,PEA中的p53表达较食... 采用免疫组化和原位分子杂交技术观察p53、H-ras、c-erbB-2、c-myc癌基因和抗癌基因及其蛋白产物在原发性食管腺癌(PEA)中的联合表达情况,以探讨PEA的发生发展机制。结果表明,PEA中的p53表达较食管鳞癌高;c-erbB-2变化可能是PEA癌变的重要分子学改变;PEA中H-ras与c-myc都有基因扩增蛋白产物的过表达,显示两者在PEA的癌变过程中有协同作用;p53、c-erbB-2的表达与PEA的分化程度呈负相关,即分化程度越差,阳性率越高;PEA中癌基因和抗癌基因在基因水平及其蛋白产物表达上的改变基本一致。 展开更多
关键词 食管肿瘤 腺癌 癌基因 抗癌基因 免疫组织化学
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二羟基乙二肟致畸作用的实验研究
5
作者 蒋芸 陈国元 +1 位作者 王光祖 彭德慧 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期31-33,86,共4页
本文报道了二羟基乙二肟(DHG)的致畸作用,并初步探讨了致畸作用机理。结果表明,DHG1250mg/kg对母体和胚胎有毒作用,可引起孕鼠体重减轻、流产、胚胎死亡及活胎生长发育迟缓。畸胎率417mg/kg组为13.64%,1250mg/kg组为43.75%,引起下颌... 本文报道了二羟基乙二肟(DHG)的致畸作用,并初步探讨了致畸作用机理。结果表明,DHG1250mg/kg对母体和胚胎有毒作用,可引起孕鼠体重减轻、流产、胚胎死亡及活胎生长发育迟缓。畸胎率417mg/kg组为13.64%,1250mg/kg组为43.75%,引起下颌短缺、腭裂等,其致畸指数为12,属弱致畸物。 展开更多
关键词 二羟基乙二肟 致畸胎物 胚胎 细胞分裂抑制
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三氟化硼三乙醇胺对家兔肾损害的研究
6
作者 杨克敌 张招弟 +1 位作者 杨明学 蒋芸 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期37-40,共4页
3个实验组家兔按等比级数为2的不同剂量喂饲三氟化硼三乙醇胺(TFA),隔日1次,共3个月,可引起血清尿素氮和Mg^++含量增高,肾小管上皮细胞浊肿,水变性,细胞内酸性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶及琥珀酸脱氢酶活性明显降低。肾小管上皮细胞基... 3个实验组家兔按等比级数为2的不同剂量喂饲三氟化硼三乙醇胺(TFA),隔日1次,共3个月,可引起血清尿素氮和Mg^++含量增高,肾小管上皮细胞浊肿,水变性,细胞内酸性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶及琥珀酸脱氢酶活性明显降低。肾小管上皮细胞基底膜增厚,其皱褶间隙扩张,细胞内粗面内质网扩张,线粒体肿胀,次级溶酶体增加。结果提示TFA对肾小管上皮细胞的代谢有干扰作用。 展开更多
关键词 三氟化硼三乙醇胺 肾小管 氟化物中毒
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硼抗氟损伤的临床实验研究
7
作者 黄安斌 陈荣安 +7 位作者 李健学 李惠珍 章孟本 唐圣智 李明健 晏慧芳 黄维勋 鲁远先 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期81-81,共1页
我们在湖北省英山县“水型”和长阳县“煤烟污染型”地氟病区分别选择了40例不同程度的地氟病人作为研究对象(实验组),将其随机分为甲组(服硼砂片组,每日服硼砂0.3g,连服25d后停5d为一疗程)和乙组(服淀粉片组,其形状、颜色、大小... 我们在湖北省英山县“水型”和长阳县“煤烟污染型”地氟病区分别选择了40例不同程度的地氟病人作为研究对象(实验组),将其随机分为甲组(服硼砂片组,每日服硼砂0.3g,连服25d后停5d为一疗程)和乙组(服淀粉片组,其形状、颜色、大小与硼砂片相同),用“双盲法”进行为期6个月的观察和实验研究,分别于服药前和服药3、6个月后测定尿氟(F<sup>-</sup>)、氟硼酸根(BF<sup>-</sup><sub>4</sub>)、总羟脯氨酸(HOP)、肌酐(Cr)含量和γ-谷氨酸转肽酶(γ-GT)活性。 展开更多
关键词 地氟病
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端羟基聚丁二烯皮肤毒性研究
8
作者 杨磊 段仁勤 +1 位作者 蒋芸 王光祖 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期55-55,共1页
端羟基聚丁二烯(Hydroxyl TerminatedPolybutadience,简称丁羟胶)是一种工业原料。据美国报告其毒性低,无需任何特殊防护措施。我们综合研究了其对皮肤毒性。 一、原发刺激试验 体重2.1±0.5kg健康雄性大白兔6只,随机分为两组。背... 端羟基聚丁二烯(Hydroxyl TerminatedPolybutadience,简称丁羟胶)是一种工业原料。据美国报告其毒性低,无需任何特殊防护措施。我们综合研究了其对皮肤毒性。 一、原发刺激试验 体重2.1±0.5kg健康雄性大白兔6只,随机分为两组。背部两侧准备3 cm×4 cm脱毛区,实验组一侧用2 ml丁羟胶原液斑贴,另一侧擦破皮肤再用等量受试物斑贴。对照组用小麻油斑贴。 展开更多
关键词 丁羟胶 皮肤
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四种不同职业人群免疫功能的变化
9
作者 毛福英 沈凌汛 +1 位作者 段仁勤 彭旺初 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期49-51,共3页
本文报道了4种职业人群的免疫状况。结果表明,接触汞、二硫化碳、煤矽尘作业工人外周血淋巴细胞ANAE阳性率分别为53.7%、54.3%、45.3%;接触汞及煤矽尘工人OKT^+_3、OKT^+_4、OKT^+_4/OKT^+_8比值分别为59.6%、59.6%,36.8%、38.7%... 本文报道了4种职业人群的免疫状况。结果表明,接触汞、二硫化碳、煤矽尘作业工人外周血淋巴细胞ANAE阳性率分别为53.7%、54.3%、45.3%;接触汞及煤矽尘工人OKT^+_3、OKT^+_4、OKT^+_4/OKT^+_8比值分别为59.6%、59.6%,36.8%、38.7%,1.2:1.2均明显低于对照组,提示细胞免疫功能降低。血清中IgG、IgA、IgM的含量随着接触毒物种类不同亦有变化。并发现二硫化碳作业工人免疫复合物含量增高,但补体C3和溶菌酶的含量未见明显改变。 展开更多
关键词 二硫化碳 煤矽尘 免疫
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服装作业工人劳动生理负荷的研究
10
作者 蔡荣泰 杨磊 鲍世汉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期41-43,共3页
本文从人类工效学的观点来研究服装流水作业工人生理负荷影响,对162名缝纫女工进行了检查,并作人体测量与询问调查。结果表明,11.4%的工人在工作后体温有所增高(37.5℃以上),而腿与脚皮温则较工作前降低2.9℃和2.8℃(P<0.01)。所使... 本文从人类工效学的观点来研究服装流水作业工人生理负荷影响,对162名缝纫女工进行了检查,并作人体测量与询问调查。结果表明,11.4%的工人在工作后体温有所增高(37.5℃以上),而腿与脚皮温则较工作前降低2.9℃和2.8℃(P<0.01)。所使用的工作台、椅均高于我国女工人体尺寸所需。通过生物力学计算表明,工作椅、台高度,工作精细程度,照度,工人视力等都会影响腰骶部所承受的压力与张力。 展开更多
关键词 生理负荷 人体测量术 人体工效学
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异佛尔酮二异氰酸酯免疫毒性的实验研究 被引量:3
11
作者 段仁勤 章旭杰 +1 位作者 陈炎磐 毛福英 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期34-36,共3页
本文选用小鼠溶血空斑形成试验研究了异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)对Bal/C小鼠脾细胞的作用,选用ANAE染色法观察了IPDI对SD大鼠外周血T细胞的影响,并采用体外培养方法研究了IPDI对人外周血T细胞在PHA刺激下增殖转化的影响。结果表明,IPDI... 本文选用小鼠溶血空斑形成试验研究了异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)对Bal/C小鼠脾细胞的作用,选用ANAE染色法观察了IPDI对SD大鼠外周血T细胞的影响,并采用体外培养方法研究了IPDI对人外周血T细胞在PHA刺激下增殖转化的影响。结果表明,IPDI对小鼠脾脏抗体生成细胞的数量和功能均有抑制作用,并呈现出剂量-反应关系;而对细胞免疫反应在大鼠和人均表现为双向作用。 展开更多
关键词 异佛尔酮二异氰酸醋 免疫性 脾细胞 T-淋巴细胞
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视觉显示终端数据输入作业对机体影响的研究
12
作者 高传思 蔡荣泰 +3 位作者 杨磊 张国高 范志群 万学文 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期46-49,共4页
选择29名受试者,随机分成简单数据组及复杂数据组,在实验室模拟视觉显示终端(VDT)数据输入作业,持续150min。结果表明,作业效率随时间延长而变动,50min后作业效率明显下降,并存在反弹和终末激发现象。作业后的生理指标变化表明机体出现... 选择29名受试者,随机分成简单数据组及复杂数据组,在实验室模拟视觉显示终端(VDT)数据输入作业,持续150min。结果表明,作业效率随时间延长而变动,50min后作业效率明显下降,并存在反弹和终末激发现象。作业后的生理指标变化表明机体出现不同程度的疲劳。简单数据组尿中肾上腺素有增加的趋势,复杂数据组尿中去甲肾上腺素有降低的趋势,表明复杂数据输入作业负荷比简单数据作业大。 展开更多
关键词 视觉显示终端 人体工效学 应激
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热适应与热耐受机理的探讨 被引量:4
13
作者 张国高 贺涵贞 +1 位作者 吴扬 吕裕强 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期1-4,85,共5页
本研究通过体内外实验,探讨了热适应、热耐受的形成,急性和亚慢性应激过程中蛋白质组分的变化和热应激蛋白的合成。结果表明,7d实验室受热可使大鼠获得热适应,并出现相应的蛋白质组分的变化;预热处理可使整体动物和人淋巴细胞均产生热耐... 本研究通过体内外实验,探讨了热适应、热耐受的形成,急性和亚慢性应激过程中蛋白质组分的变化和热应激蛋白的合成。结果表明,7d实验室受热可使大鼠获得热适应,并出现相应的蛋白质组分的变化;预热处理可使整体动物和人淋巴细胞均产生热耐力,表现为2次受热后生存率提高;热耐力形成的同时有一组新的蛋白质(70kd为主)合成增强;亚慢性应激更强地引起蛋白质组分的变化。 展开更多
关键词 热适应 热耐受 热休克蛋白类
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高温诱导淋巴细胞多肽合成与热耐受关系的探讨 被引量:3
14
作者 龚晓亮 张国高 贺涵贞 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期8-10,86,共4页
将健康人外周血淋巴细胞于体外培养,观察在不同强度和方式的高温条件下,淋巴细胞热应激蛋白(Heat Shock Proteins,HSP)合成和细胞热损伤情况。结果表明,高温可诱导淋巴细胞迅速合成HSP;预热(39℃)可增强淋巴细胞HSP合成反应、提高细胞... 将健康人外周血淋巴细胞于体外培养,观察在不同强度和方式的高温条件下,淋巴细胞热应激蛋白(Heat Shock Proteins,HSP)合成和细胞热损伤情况。结果表明,高温可诱导淋巴细胞迅速合成HSP;预热(39℃)可增强淋巴细胞HSP合成反应、提高细胞膜过氧化脂质和胞内K^+、Na^+、Ca^(2+)含量的稳定性、减轻高温对细胞亚微结构的损伤、提高淋巴细胞在高温下的存活率。 展开更多
关键词 淋巴细胞 热休克蛋白类 热耐受
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人结核杆菌热休克蛋白70和卡介苗α抗原基因启动子序列测定 被引量:5
15
作者 程继忠 梁驹卿 +2 位作者 肖红 海涛 皇甫永穆 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第5期331-335,共5页
用T7DNA聚合酶测序系统测定了人结核杆菌热休克蛋白70(hsp70)基因的启动子序列和卡介苗(BCG)α基因的启动子和信号肽序列,并比较了它们与大肠杆菌(E.coli)和其它分枝杆菌启动子之间的异同。结果所测的hsp70启动子序列为人结核杆... 用T7DNA聚合酶测序系统测定了人结核杆菌热休克蛋白70(hsp70)基因的启动子序列和卡介苗(BCG)α基因的启动子和信号肽序列,并比较了它们与大肠杆菌(E.coli)和其它分枝杆菌启动子之间的异同。结果所测的hsp70启动子序列为人结核杆菌hsp70编码基因起始密码(ATG)上游150个脱氧核苷酸,其中在ATG上游—12~—8核苷酸处有核糖体结合位点(SD序列)GGAGG,在RNA聚合酶的结合位点(RNApolymerase-bindingsite,RBS)区含有与E.coli相同的三核苷酸高度保守序列TTG。这些序列与E.coli5'端调控区同源。在hsp70基因调控序列-10区两侧有反向重复序列TGCAGT,构成5'端的茎环结构。其它分枝杆菌hsp基因启动子调控区均有类似的结构。对BCGα基因启动子和信号肽序列的测定,发现其启动子序列与hsp基因的SD、-10和-35序列有一定的区别,其序列分别为AAAGG、TATGTT、TCGACA。在ATG后的120个核苷酸序列所编码肽链具有信号肽的特征,在碱性氨基酸后紧跟一段疏水区,含有能被信号肽酶识别的Ala-X-Ala结构。 展开更多
关键词 结核杆菌 卡介苗 启动子 热休克蛋白
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卵磷脂与脑磷脂对染尘肺泡巨噬细胞的影响 被引量:3
16
作者 刘保连 张国高 +2 位作者 宋忠发 郭鼎 邓延春 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期19-21,共3页
体外实验观察肺表面活性物质主要成分卵、脑磷脂对石英毒作用下肺泡巨噬细胞的影响。结果表明:卵磷脂可以保护肺泡巨噬细胞,减轻石英的毒作用,脑磷脂则无此作用,进一步分析其机理,发现卵磷脂可以抑制肺泡巨噬细胞在石英毒作用下活性氧... 体外实验观察肺表面活性物质主要成分卵、脑磷脂对石英毒作用下肺泡巨噬细胞的影响。结果表明:卵磷脂可以保护肺泡巨噬细胞,减轻石英的毒作用,脑磷脂则无此作用,进一步分析其机理,发现卵磷脂可以抑制肺泡巨噬细胞在石英毒作用下活性氧的产生,而脑磷脂则否。 展开更多
关键词 卵磷脂 脑磷脂 石英 巨噬细胞
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热应激蛋白70kd家族的纯化及鉴定
17
作者 吴扬 邬堂春 +1 位作者 贺涵贞 张国高 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期5-7,共3页
人白血病胸腔渗出细胞(K_(652))经热应激后诱导产生的热应激蛋白经DEAE-52阴离子交换层析,ATP-琼脂糖亲和层析,纯化出73kd、72kd和65kd的成分。用免疫印迹技术证明所纯化的蛋白质能与热应激蛋白70kd家族单克隆抗体发生特异性识别反应。... 人白血病胸腔渗出细胞(K_(652))经热应激后诱导产生的热应激蛋白经DEAE-52阴离子交换层析,ATP-琼脂糖亲和层析,纯化出73kd、72kd和65kd的成分。用免疫印迹技术证明所纯化的蛋白质能与热应激蛋白70kd家族单克隆抗体发生特异性识别反应。此法所纯化的蛋白共有3种,其分子量分别为73kd、72kd和65kd。 展开更多
关键词 热休克蛋白类 热应激反应 色谱法 免疫印迹
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呼气中甲苯的气相色谱法测定
18
作者 王光祖 金锡鹏 +2 位作者 刘静波 潘志擎 张如午 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期74-76,共3页
本文研究了肺泡气中甲苯的测定方法(包括采样和分析),线性范围2.5~320.0mg/m^3,精密度良好(变异系数在各点均小于2.0%),方法的最低检测下限0.5mg/m^3(1.0ng),其平均绝对和相对加标回收率分别为98.6%和97.8%,采样后4h时,甲苯浓度相... 本文研究了肺泡气中甲苯的测定方法(包括采样和分析),线性范围2.5~320.0mg/m^3,精密度良好(变异系数在各点均小于2.0%),方法的最低检测下限0.5mg/m^3(1.0ng),其平均绝对和相对加标回收率分别为98.6%和97.8%,采样后4h时,甲苯浓度相当于初始浓度80.6%~90.0%,应用提出的两回归方程,可对不同浓度放置不同时间浓度下降进行估计,提高数据的准确性。 展开更多
关键词 色谱法 气相 甲苯 肺泡气
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应用SOS显色法检测五种化学物质的遗传毒性
19
作者 彭德慧 蒋芸 王光祖 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期77-78,共2页
SOS显色反应检测法是一种新的遗传毒物细菌检测系统,选用它对杀鼠剂除鼠磷(206),二羟基乙二肟(DHG),异氟尔酮二异氰酸酯(IPDI)、铁矿尘及农药双效灵进行检测。206、DHG、IPDI、铁矿尘诱导比率(R)为0.90~1.67,<2,未达到阳性标准,说... SOS显色反应检测法是一种新的遗传毒物细菌检测系统,选用它对杀鼠剂除鼠磷(206),二羟基乙二肟(DHG),异氟尔酮二异氰酸酯(IPDI)、铁矿尘及农药双效灵进行检测。206、DHG、IPDI、铁矿尘诱导比率(R)为0.90~1.67,<2,未达到阳性标准,说明它们在本实验条件下没有明显诱变活性,而双效灵R值为4.35(剂量为0.26~26mg/ml),提示其具有诱导TA1535/PSK1002菌株的致突变活性。 展开更多
关键词 诱变性试验 SOS显色反应 致变物
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氟与酪氨酸酚羟基成氢键作用的量子力学计算
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作者 李健学 张艳明 张国高 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期80-80,共1页
本所曾通过实验研究发现氟可与酪氨酸酚羟基以氢键的形式发生专一性结合,改变了蛋白质分子的构象,影响了酪氨酸分子的某些生物学性质。现用量子力学计算方法从理论上对上述实验结果加以验证。
关键词 氟化物 酪氨酸 氢键
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