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酶化学发光法测定何首乌中四羟基二苯乙烯葡萄糖甙的含量 被引量:13
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作者 李光道 孙雅量 过健俐 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第4期289-291,共3页
报道一种新的何首乌中二苯乙烯甙含量的测定方法──酶化学发光法。该方法对二苯乙烯甙的检测限量为2.5×10-7mol/L标准偏差小于2%,标准回收率在96%~104%之间,线性范围为5.0×10-7~1.0×... 报道一种新的何首乌中二苯乙烯甙含量的测定方法──酶化学发光法。该方法对二苯乙烯甙的检测限量为2.5×10-7mol/L标准偏差小于2%,标准回收率在96%~104%之间,线性范围为5.0×10-7~1.0×10-4mol/L。测定结果与紫外分光光度法基本一致。本法灵敏度较高,稳定性好,可用于中草药何首乌中二苯乙烯甙含量的测定。 展开更多
关键词 何首乌 二苯乙烯甙 中药化学成分 酶化学发光法
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寡核苷酸的卟啉化学修饰及其产物纯化的研究 被引量:1
2
作者 吴蒙 夏淑贞 +1 位作者 杨渝珍 韩玲 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第3期177-180,共4页
为探索寡核苷酸的修饰方法,合成了一种卟啉修饰的反义寡核苷酸并对其抑制c-myc靶基因表达的效果进行了初步探索。利用卟啉的1-羟基苯并三氮唑活性酯可将卟啉基团直接修饰在商品化的寡核苷酸片断上。用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合红外、紫外... 为探索寡核苷酸的修饰方法,合成了一种卟啉修饰的反义寡核苷酸并对其抑制c-myc靶基因表达的效果进行了初步探索。利用卟啉的1-羟基苯并三氮唑活性酯可将卟啉基团直接修饰在商品化的寡核苷酸片断上。用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合红外、紫外测定完成寡核苷酸偶合物的鉴定。与其他类似研究相比,此法简便易行,具有较宽的应用范围。 展开更多
关键词 寡核苷酸 反义技术 卟啉类 C-MYC基因 化学修饰
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两步超速离心法快速分离大量血浆极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白 被引量:92
3
作者 王淳本 宗义强 +3 位作者 吴万生 冯友梅 邓耀祖 冯宗忱 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第3期169-171,共3页
本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩,再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大的长处,又具有密度梯度法离心时间短的优点。使用BECKMANL8-80M型超速离心机,Type70Ti转头,分离280ml血浆... 本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩,再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大的长处,又具有密度梯度法离心时间短的优点。使用BECKMANL8-80M型超速离心机,Type70Ti转头,分离280ml血浆只需超速离心5h。所得极低密度脂蛋白(VLDL)及低密度脂蛋白(LDL)经琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳(PAGE)及载脂蛋白SDS-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)鉴定纯度良好。本文为超速离心分离制备大量血浆VLDL、LDL提供了一种快速、经济的新方法。 展开更多
关键词 超速离心法 脂蛋白类 低密度脂蛋白
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藕节中3-表白桦脂酸的分离与鉴定 被引量:12
4
作者 周军平 王爱兰 潘仁满 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第1期52-53,57,共3页
从藕节碎粉的乙醇提取物的苯样品中分离得到两个三萜类化合物,其中一个经波谱分析(IR、MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR)及化学方法鉴定为3-表白桦脂酸(3-epibetulinicacid)。另一个三萜类化合物... 从藕节碎粉的乙醇提取物的苯样品中分离得到两个三萜类化合物,其中一个经波谱分析(IR、MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR)及化学方法鉴定为3-表白桦脂酸(3-epibetulinicacid)。另一个三萜类化合物因得量较少,待进一步鉴定。 展开更多
关键词 藕节 中药 化学成分 萜类 表白桦脂酸 分离 鉴定
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HPLC测定脑组织和脑脊液中4种氨基酸类神经递质含量的方法改良研究 被引量:26
5
作者 王炜 刘朝 +2 位作者 江卫国 王式平 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第2期92-93,共2页
谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)等神经递质的代谢异常是诱发多种神经系统疾病的因素之一。由于神经递质在脑内的含量很低,改良建立了一种用HPLC荧光检测Glu、GABA等4种神经递质的方法,以高丝氨酸为内标,流... 谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)等神经递质的代谢异常是诱发多种神经系统疾病的因素之一。由于神经递质在脑内的含量很低,改良建立了一种用HPLC荧光检测Glu、GABA等4种神经递质的方法,以高丝氨酸为内标,流动相为磷酸缓冲液和甲醇,梯度洗脱20min,荧光检测。分离效果及线性关系良好,Glu、GABA的相关系数分别为0.9969、0.9996;精密度CV批内3.4%,批间5.6%;其最小检测限分别为3.3pmol、1. 展开更多
关键词 高效液相色谱 神经递质 脑脊液 脑组织 氨基酸
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卟啉胆固醇酯对癌细胞膜流动性的影响及其代谢热谱的研究 被引量:3
6
作者 王军 夏淑贞 +3 位作者 杨渝珍 柯汉忠 刘义 黄素秋 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第6期419-422,共4页
用荧光偏振技术研究了卟啉胆固醇酯对人何杰金淋巴瘤细胞(Daudi 细胞)和人早幼粒细胞性白血病细胞(HL-60 细胞)膜流动性的影响;用微量量热法测定了 HL-60 细胞与卟啉胆固醇酯作用后的代谢热谱。结果表明:卟啉胆固醇酯能明显降低癌细胞... 用荧光偏振技术研究了卟啉胆固醇酯对人何杰金淋巴瘤细胞(Daudi 细胞)和人早幼粒细胞性白血病细胞(HL-60 细胞)膜流动性的影响;用微量量热法测定了 HL-60 细胞与卟啉胆固醇酯作用后的代谢热谱。结果表明:卟啉胆固醇酯能明显降低癌细胞膜的流动性;对癌细胞的生长有强抑制作用,不同的酯其抑制方式不同。 展开更多
关键词 卟啉胆固醇酯 肿瘤细胞 膜流动性
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TTHB双核铜配合物的合成及其清除氧自由基的作用 被引量:5
7
作者 冯清 河永言 +1 位作者 石巨恩 郑启芳 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第6期411-414,共4页
合成了N,N,N′,N′,N″,N″-六(苯并咪唑基甲基)三乙基四胺(TTHB)双核铜配合物,对配合物的红外光谱(IR)、电子光谱、电子自旋共振谱(ESR)、元素分析和电导性质进行了研究。并用核黄素-蛋氨酸光照法对配... 合成了N,N,N′,N′,N″,N″-六(苯并咪唑基甲基)三乙基四胺(TTHB)双核铜配合物,对配合物的红外光谱(IR)、电子光谱、电子自旋共振谱(ESR)、元素分析和电导性质进行了研究。并用核黄素-蛋氨酸光照法对配合物的超氧化物歧化酶(SOD)活性进行了研究。结果表明:配合物在10(-6)~10(-7)mol/L浓度范围内对有清除作用,是优良的仿SOD催化剂。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 TTHB 铜配合物 氧自由基
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pBLacZ真核表达载体的构建及其在体内外的表达 被引量:5
8
作者 屈伸 杨仕林 +2 位作者 尤颖健 刘绍春 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第1期5-8,共4页
构建了一种编码β-半乳糖苷酶的真核基因表达载体pBLacZ。用它对体外培养的NIH/3T3、COS-1、CHO细胞株、原代培养的小鼠皮肤成纤维细胞,以及小鼠活体皮下和大鼠活体骨骼肌中进行了基因转移。经X-gal组织化... 构建了一种编码β-半乳糖苷酶的真核基因表达载体pBLacZ。用它对体外培养的NIH/3T3、COS-1、CHO细胞株、原代培养的小鼠皮肤成纤维细胞,以及小鼠活体皮下和大鼠活体骨骼肌中进行了基因转移。经X-gal组织化学染色后的结果证实:此基因载体可在这些组织细胞中有效地表达产生β-半乳糖苷酶活性。pBLacZ作为一种新的标志基因载体,可能具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 基因载体 基因表达 β-半乳糖苷酸
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Co-TPPS_4清除氧自由基和过氧化氢的双功能作用 被引量:4
9
作者 冯清 刘莉 +3 位作者 郑启芳 何永言 王海龙 梅付明 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第5期344-347,共4页
以四-(对-磺酸基苯基)钴卟啉[Co-TPPS4]作为超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)双功能模拟酶,研究其仿SOD和CAT活性及抗脂质过氧化活性。结果应用核黄素-蛋氨酸光照法证实其在10-5~10-6mol/L浓度范围内有清除超氧阴离子... 以四-(对-磺酸基苯基)钴卟啉[Co-TPPS4]作为超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)双功能模拟酶,研究其仿SOD和CAT活性及抗脂质过氧化活性。结果应用核黄素-蛋氨酸光照法证实其在10-5~10-6mol/L浓度范围内有清除超氧阴离子自由基的作用;分光光度法证实其能催化过氧化氢的分解,当其浓度由5μmol/L增至30μmol/L时,分解率由11.9%增至62.4%;小鼠肝匀浆法测定Co-TPPS4、SOD、CAT,均表明具有较好的抗脂质过氧化的作用。 展开更多
关键词 钴卟啉 Co-TPPS4 氧自由基 过氧化氢 SOD LPO
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用紫外与可见光分光分析仪测定PASMC增殖的MTT比色法 被引量:14
10
作者 廖国宁 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期304-305,共2页
为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .987... 为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .9872 )。与酶标仪直接测定比较 ,具有灵敏度高、数据准确、检测范围广 ,值得推广应用。 展开更多
关键词 MTT比色法 细胞增殖 肝动脉平滑肌细胞
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在体测定神经递质的针型组织传感器 被引量:4
11
作者 林志红 邹立君 任恕 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第1期28-31,共4页
研制了一种不锈钢针型组织传感器。以菠菜植物组织作为敏感材料,识别神经递质多巴胺。对传感器的最适温度、pH值、选择性等进行了讨论,其线性范围为8.0×10(-7)~1.6×10(-3)mol/L,检出下限为4.... 研制了一种不锈钢针型组织传感器。以菠菜植物组织作为敏感材料,识别神经递质多巴胺。对传感器的最适温度、pH值、选择性等进行了讨论,其线性范围为8.0×10(-7)~1.6×10(-3)mol/L,检出下限为4.6×10(-7)mol/L,线性回归方程为Y=-6.33±0.305X,相关系数,r=0.998,响应时间小于38,寿命约为20~30d,在体实验结果较为满意。 展开更多
关键词 神经递质 在体测定 生物传感器 传感器
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荧光微量检测细胞内DNA与蛋白质含量 被引量:5
12
作者 王炜 廖国宁 +2 位作者 季金林 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第3期267-268,272,共3页
应用荧光试剂(33258Hoechst)微量测定细胞内DNA含量,应用荧光胺(Fluorescamine)微量测定细胞内蛋白质含量。结果:荧光试剂与DNA的A-T碱基形成复合物后,其激发波长(EX)由320nm移至3... 应用荧光试剂(33258Hoechst)微量测定细胞内DNA含量,应用荧光胺(Fluorescamine)微量测定细胞内蛋白质含量。结果:荧光试剂与DNA的A-T碱基形成复合物后,其激发波长(EX)由320nm移至350nm,发射波长(EM)由480nm移至460nm,且荧光强度大为增强。荧光胺与蛋白质反应生成强荧光化合物,在EX390nm,EM475nm条件下最低检测限为0.5μg/μl。该法操作简便,微量快速,重复性好。可用于荧光微量测定DNA与蛋白质含量,还可用于观察细胞的增殖。 展开更多
关键词 荧光光度测定法 DNA微量测定 蛋白质 细胞增殖
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谷氨酸脱羧酶放射测量法的改良及应用 被引量:3
13
作者 胡元元 何善述 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期118-120,共3页
用NaOH代替苯乙胺作为14 CO2 的吸附剂 ,改进谷氨酸脱羧酶 (GAD)活性的放射测定方法 ,结果发现NaOH为吸附剂组内变异系数为 9 6 % ,以苯乙胺为吸附剂组内变异系数为 31 9% ;以NaOH为吸附剂 72h后测量其放射活性仍稳定不变 ,以苯乙胺为... 用NaOH代替苯乙胺作为14 CO2 的吸附剂 ,改进谷氨酸脱羧酶 (GAD)活性的放射测定方法 ,结果发现NaOH为吸附剂组内变异系数为 9 6 % ,以苯乙胺为吸附剂组内变异系数为 31 9% ;以NaOH为吸附剂 72h后测量其放射活性仍稳定不变 ,以苯乙胺为吸附剂者 1h后放射性活性即下降 47% ,6h后已降低至本底水平 ;14 CO2 重吸收实验亦证明以苯乙胺为吸附剂吸附的14 CO2 6h内已有 80 %以上重新被NaOH吸附 ;以NaOH作为吸附剂测定GAD的活性 ,在 0 39~ 17 8mg脑组织样品范围内GAD量与14 CO2 生成量之间有线性关系 .NaOH代替苯乙胺作为14 CO2 的吸附剂测定GAD的活性其灵敏度提高 1 6 6倍 .用此方法测定组织和细胞内GAD活性证明其具有良好的重复性和稳定性 ,值得推广应用 . 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 放射测定法 苯乙胺 NAOH 改良
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生物发光法测定氯霉素和金霉素含量 被引量:6
14
作者 孙雅量 李光道 袁津玮 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第2期156-157,共2页
关键词 发光细菌 氯霉素 金霉素 生物发光分析
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DDPH抑制HECCM促PASMC增殖时第二信使变化的研究 被引量:4
15
作者 段秋红 廖国宁 +1 位作者 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第5期388-390,共3页
采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的... 采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的影响。结果显示 :1HECCM促进 PASMC增殖 ,而 DDPH可抑制之 ,抑制率为 77.46 %。 2HECCM升高 PASMCs内 [Ca2 +]i,而 DDPH可对抗此作用。 3HECCM组 PASMCs内 c AMP含量明显低于对照组(NECCM组 ) ,而 HECCM+DDPH组 PASMCs内 c AMP与 展开更多
关键词 慢性低氧性肺动脉高压 丙烷盐酸盐 DDPH HECCM
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甲基莲心碱抑制氧化极低密度脂蛋白的形成及其生物学效应 被引量:3
16
作者 冯友梅 吴捷莉 +3 位作者 从容 宗义强 王淳本 冯宗忱 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第2期89-91,共3页
采用Cu2+在体外氧化极低密度脂蛋白(VLDL),用甲基莲心碱(Nef)作抗氧化剂。将脂蛋白分为正常、氧化和Nef抗氧化三组,测定脂蛋白的硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)。结果分别为(0.61±0.03)、(6... 采用Cu2+在体外氧化极低密度脂蛋白(VLDL),用甲基莲心碱(Nef)作抗氧化剂。将脂蛋白分为正常、氧化和Nef抗氧化三组,测定脂蛋白的硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)。结果分别为(0.61±0.03)、(6.08±0.25)和(2.33±0.91)μmol/g蛋白,每二组间的差异均有显著性(P<0.01)。氧化和Nef抗氧化的VLDL与巨噬细胞(MΦ)在37℃温育48h后,MΦ内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量显示前者比后者有更强的促进MΦ内脂质堆积的作用(P<0.05)。研究结果表明。 展开更多
关键词 甲基莲心碱 极低密度脂蛋白 氧化 生物学效应
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癫痫发作与脑脊液中氨基酸类神经递质含量变化的关系 被引量:5
17
作者 王炜 胡元元 +1 位作者 汪银洲 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第6期482-483,共2页
采用高效液相色谱仪荧光法测定癫痫全面性大发作及复杂部分性发作患者脑脊液中谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。全面性大发作患者的Glu、Gly含量显著高于对照组(P<0.05),而GABA较对照组无显著差异;复... 采用高效液相色谱仪荧光法测定癫痫全面性大发作及复杂部分性发作患者脑脊液中谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。全面性大发作患者的Glu、Gly含量显著高于对照组(P<0.05),而GABA较对照组无显著差异;复杂部分性发作患者的Glu、Gly、GABA含量较对照组显著增加(P<0.05)。从而说明Glu是诱发癫痫发作的主要兴奋性神经递质,而GABA有阻仰中枢神经元异常放电的作用,减缓癫痫的发作。 展开更多
关键词 癫痫 神经递质 脑脊液 高效液相色谱
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人CD80基因的cDNA克隆及其在肿瘤细胞中的表达 被引量:2
18
作者 熊宇芳 李清芬 +2 位作者 章洁 屈伸 邓耀祖 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第3期169-173,共5页
采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因... 采用巢式PCR(nested PCR)的方法从Raji细胞中扩增出人CD80 cDNA,并将这一cDNA克隆入载体pUC19中。经PCR扩增和限制性酶切分析,进行初步鉴定后,再将人CD80 cDNA克隆到pcD-NA表达载体上,构建成为pCD-CD80重组质粒。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入小鼠黑色素瘤B16细胞后,用SABC法进行瞬时表达的检测。结果表明,转染后48h就具有明显人CD80基因的表达产物。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 CD80基因 表达 分子克隆 基因治疗
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PDGF在低氧内皮细胞条件培养基促猪肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 被引量:2
19
作者 廖国宁 陈蓓蓓 +1 位作者 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第2期105-107,共3页
为了探索低氧条件下猪肺动脉内皮细胞 (PAEC)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖调控关系 ,应用MTT比色法 ,DNA荧光测定法观察了外源性 PDGF促 PASMC增殖作用 ,以及 Suram in抑制 PDGF促增殖作用的效应 ,并在此基础上研究了猪肺动脉内皮... 为了探索低氧条件下猪肺动脉内皮细胞 (PAEC)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖调控关系 ,应用MTT比色法 ,DNA荧光测定法观察了外源性 PDGF促 PASMC增殖作用 ,以及 Suram in抑制 PDGF促增殖作用的效应 ,并在此基础上研究了猪肺动脉内皮细胞条件培养基 (HECCM)中 PDGF促 PASMC增殖的作用。结果表明 ,HECCM促 PASMC增殖作用的效应可被 Suramin部分抑制 ,由此证明 ,PDGF是低氧刺激 PAEC产生的一种促 PASMC增殖的重要因子。 展开更多
关键词 低氧 肺动脉高压 PDGF 细胞增殖 PAEC
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鱼油制剂中过氧化值的降低方法 被引量:1
20
作者 陈东红 潘仁满 李桂玲 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期385-385,共1页
二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)是一些鱼油制剂中的有效成分,临床上用于降血脂和其他一些疾病治疗,有关其新的药用价值,国内外也屡有报道。但由于EPA及DHA的高度不饱和性,在制剂和存放过程中,与空气接触后易被氧化形成过氧化物... 二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)是一些鱼油制剂中的有效成分,临床上用于降血脂和其他一些疾病治疗,有关其新的药用价值,国内外也屡有报道。但由于EPA及DHA的高度不饱和性,在制剂和存放过程中,与空气接触后易被氧化形成过氧化物,使油脂的过氧化值(POV)超过指标而不能使用。目前,一般采用加入抗氧剂的方法抑制过氧化物的形成。 展开更多
关键词 鱼油 EPA乙酯 DHA乙酯 过氧化值
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