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HL-60细胞产生的肿瘤免疫抑制因子对T细胞的作用及其生物学特性
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作者 杨业金 皇甫永穆 陈兆聪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期89-92,共4页
白血病细胞培养上清液和白血病人血清能抑制PHA—P诱导的人外周血T淋巴细胞的增殖;抑制白细胞介素2(IL—2)的产生和反应性。以正常2BS人胚肺细胞培养上清液和正常人血清作对照则无抑制作用。白血病细胞培养上清液无细胞毒作用。聚丙烯... 白血病细胞培养上清液和白血病人血清能抑制PHA—P诱导的人外周血T淋巴细胞的增殖;抑制白细胞介素2(IL—2)的产生和反应性。以正常2BS人胚肺细胞培养上清液和正常人血清作对照则无抑制作用。白血病细胞培养上清液无细胞毒作用。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)结果表明,来源HL—60人早幼粒白血病细胞的肿瘤免疫抑制因子(tumor-derived immunosuppressive factor,TDSF)的分子量约为87KD,其化学本质为蛋白质。抗急非淋白血病药物对这种TDSF的分泌有部分抑制作用。 展开更多
关键词 肿瘤 免疫抑制因子 白细胞介素2
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CH50多肽体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用研究 被引量:10
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作者 冯作化 张桂梅 +1 位作者 李东 张慧 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第1期28-31,共4页
目的:研究重组FN多肽CH50在体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用的特点。方法:体内注射CH50和/或转染IFN-γ基因,检测巨噬细胞产生的各种因子,测定荷瘤鼠体内肿瘤生长速度。结果:CH50单独作用可促进巨噬细胞产生N... 目的:研究重组FN多肽CH50在体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用的特点。方法:体内注射CH50和/或转染IFN-γ基因,检测巨噬细胞产生的各种因子,测定荷瘤鼠体内肿瘤生长速度。结果:CH50单独作用可促进巨噬细胞产生NO,TNF,IL-1等因子,但激活作用较慢。注射CH50和转染IFN-γ基因不分先后,均可在体内协同作用,迅速激活巨噬细胞。单独注射CH50能够抑制肿瘤结节的形成,其抑制作用呈剂量依赖关系;低剂量CH60对<1mm的肿瘤结节已有很强的抑制作用,较大剂量时对>1mm的肿瘤结节也有很强的抑制作用。CH50与IFN-了在体内的协同作用使其抑制体内肿瘤生长的作用更强。结论:CH50与IFN-γ作为体内巨噬细胞激活的双信号因子在肿瘤治疗中具有极大的应用潜力。 展开更多
关键词 纤维结合素 巨噬细胞 肿瘤 基因治疗 CH50多肽
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体内IFN-γ基因转染小鼠腹腔巨噬细胞抗肿瘤作用的研究 被引量:7
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作者 周滨 姜志尧 +1 位作者 张桂梅 冯作化 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期22-26,共5页
采用磷酸钙-DNA共沉淀法,将pREP-8-IFN-表达质粒直接注射至小鼠腹腔,可成功地转染腹腔巨噬细胞(MΦ),并表达其基因产物,能有效地抑制肿瘤生长;再次基因转染,可获得增强的抗肿瘤效应。还发现转基因MΦ所分泌... 采用磷酸钙-DNA共沉淀法,将pREP-8-IFN-表达质粒直接注射至小鼠腹腔,可成功地转染腹腔巨噬细胞(MΦ),并表达其基因产物,能有效地抑制肿瘤生长;再次基因转染,可获得增强的抗肿瘤效应。还发现转基因MΦ所分泌的激活因子能激活未转基因的MΦ;增加腹腔MΦ的数量;增强MΦ的杀瘤活性;并使MΦ分泌一定水平的NO、IL-1和TNF等,进一步增强抗肿瘤作用。转基因MΦ及其表达产物可使脾细胞NK活性和内源性LAK活性增强,提高机体抗肿瘤功能,为肿瘤的细胞因子基因治疗提供了一种简便而有效的抗肿瘤新途径。 展开更多
关键词 IFN-Γ基因 基因转染 巨噬细胞 抗肿瘤
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纤维结合素分子中Asp1961~Glu1978序列对三结构域多肽在大肠杆菌中表达的影响
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作者 冯作化 李东 +2 位作者 张桂梅 张慧 范曲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期122-127,共6页
构建了人纤维结合素(FN)的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒,分别编码两个重组多肽:CH62(FN的Pro1239~Ser1515经Met和Ala1690~Va12049相连)和CH63(从CH62中删除了Ile1... 构建了人纤维结合素(FN)的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒,分别编码两个重组多肽:CH62(FN的Pro1239~Ser1515经Met和Ala1690~Va12049相连)和CH63(从CH62中删除了Ile1850~Glu1978).CH62在大肠杆菌中的表达效率很低,而CH63的表达效率则很高,结果提示FN分子中的Asp1961~Glu1978序列是影响三结构域多肽在大肠杆菌中表达的关键结构.CH63经过溶解和复性后,可通过肝素-琼脂糖亲和层析得到纯品,所得纯品具有结合肝素和结合细胞的功能,且结合细胞的能力比双结构域FN多肽更强,表明两个结合细胞的功能结构域均有活性.CH63的制备为进一步研究具有更强的抑制肿瘤转移作用的基因工程制品奠定了基础. 展开更多
关键词 纤维结合素 重组 多肽 大肠杆菌 表达
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结核分支杆菌镜检、培养和PCR技术诊断结核病的临床评估 被引量:18
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作者 肖爱清 侯双翼 +2 位作者 李国明 钱辉 皇甫永穆 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2003年第2期68-70,共3页
目的 评估结核分支杆菌PCR、培养、镜检对结核病诊断的临床效果。方法 对 1 2 1 7例临床可疑结核病人用PCR、培养和镜检三种方法的阳性检出率进行比较。结果 不同临床标本用PCR技术诊断结核病 ,其敏感性高于培养和涂片镜检 ,阳性检... 目的 评估结核分支杆菌PCR、培养、镜检对结核病诊断的临床效果。方法 对 1 2 1 7例临床可疑结核病人用PCR、培养和镜检三种方法的阳性检出率进行比较。结果 不同临床标本用PCR技术诊断结核病 ,其敏感性高于培养和涂片镜检 ,阳性检出率分别为 :88.7% ,43 .4% ,2 6.5 %。结论 通过三种方法比较分析 ,说明PCR技术是一种速度快、检出率高的检测结核分支杆菌的重要方法 。 展开更多
关键词 肺结核 诊断 聚合酶链反应 培养 镜检
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重组FN多肽CH50对巨噬细胞抗肿瘤功能的促进作用 被引量:17
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作者 冯作化 张桂梅 +1 位作者 张慧 范曲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期268-269,共2页
重组FN多肽CH50可以显著促进巨噬细胞产生NO的能力、增强其细胞毒作用。CH50多肽可与IFNγ协同作用,进一步促进巨噬细胞产生NO的能力。体内实验亦表明,CH50多肽可以抑制肿瘤细胞在体内生长。
关键词 纤维结合素 重组多肽 巨噬细胞 细胞毒作用
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一种新的平滑肌调控蛋白Calponin 被引量:5
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作者 唐大椿 向继洲 鲁文彤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期325-329,共5页
Calponin为一种平滑肌特有的调控蛋白,分子克隆的证据表明,它具有两种亚型,α型和β型分别由292和252个氨基酸组成它能与肌动蛋白结合,抑制肌球蛋白ATP酶活性和平滑肌收缩其与肌动蛋白结合域有38个氨基酸残基(... Calponin为一种平滑肌特有的调控蛋白,分子克隆的证据表明,它具有两种亚型,α型和β型分别由292和252个氨基酸组成它能与肌动蛋白结合,抑制肌球蛋白ATP酶活性和平滑肌收缩其与肌动蛋白结合域有38个氨基酸残基(第145~182位),丝氨酸175在调宁蛋白与肌动蛋白的相互作用中起重要作用,它还能与钙调蛋白结合,呈钙依赖性。 展开更多
关键词 调控蛋白 调宁蛋白 平滑肌
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白细胞介素1诱导激素对免疫应答的调节 被引量:7
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作者 冯作化 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期224-227,共4页
在免疫应答中,由巨噬细胞产生的白细胞介素1(IL-1),不仅是介导免疫应答的一种重要因子,同时也是诱导激素对免疫应答进行反馈调节的一种重要媒介。胰岛素对免疫应答有促进作用,糖皮质激素对免疫应答有抑制作用;IL-1在低浓度时促进胰岛素... 在免疫应答中,由巨噬细胞产生的白细胞介素1(IL-1),不仅是介导免疫应答的一种重要因子,同时也是诱导激素对免疫应答进行反馈调节的一种重要媒介。胰岛素对免疫应答有促进作用,糖皮质激素对免疫应答有抑制作用;IL-1在低浓度时促进胰岛素分泌,在高浓度时则抑制胰岛素分泌,并诱导糖皮质激素产生。因此,不同浓度的IL-1可分别诱导激素对免疫应答的正负反馈调节,这种双向调节作用是维持免疫应答动态平衡的重要机制之一。 展开更多
关键词 白细胞介素1 诱导激素 免疫应答
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CH50真核表达载体pCH503的构建及小鼠体内表达的趋化与抗肿瘤活性
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作者 黄波 冯作化 +2 位作者 李东 张桂梅 张慧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期769-773,共5页
构建重组 FN多肽 CH50真核表达载体并在小鼠体内表达 ,研究其趋化与抗肿瘤作用 .采用重组 DNA技术构建表达质粒 ;体内进行基因转染 ,采用 RT- PCR鉴定导入基因的表达 ;通过肝素亲和层析、SDS- PAGE和 Western blot鉴定表达产物 ;腹腔细... 构建重组 FN多肽 CH50真核表达载体并在小鼠体内表达 ,研究其趋化与抗肿瘤作用 .采用重组 DNA技术构建表达质粒 ;体内进行基因转染 ,采用 RT- PCR鉴定导入基因的表达 ;通过肝素亲和层析、SDS- PAGE和 Western blot鉴定表达产物 ;腹腔细胞计数、Giemsa染色分析以及肌肉组织切片与染色观察体内基因转染后的趋化作用 ;小鼠黑色素瘤模型研究基因转染抑制肿瘤的作用 .从 CH50原核表达载体获得重组多肽的 c DNA,5′端加上小鼠 IFN- 5′端非编码区和信号肽编码区的 c DNA,3′端加上人 FN c DNA的 3′端非编码区 ;将重组 c DNA插入 p REP8质粒 ,即构建出p CH50 3质粒 .巨噬细胞在体内经 p CH50 3转染 ,然后在体外培养 ,能够产生 CH50多肽 .以p CH50 3分别进行腹腔基因转染和肌肉内基因转染 ,均可对免疫细胞产生趋化作用 ;p CH50 3体内转染可以使小鼠腹腔内黑色素肿瘤结节数降低 50 %~ 60 % . CH50真核表达载体 p CH50 3可在小鼠体内表达 ,体内基因转染可趋化免疫细胞和抑制肿瘤结节形成 ,在肿瘤综合治疗中有重要意义 . 展开更多
关键词 纤维粘连蛋白 重组多肽 趋化 抗肿瘤活性
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